《血培养》PPT课件
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血培养
将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上,在一定温度、湿度等条件下,使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别,从而确定病原菌的一种人工培养法。用于菌血症、败血症及脓毒败血症的病因学诊断。一般需要5-7天,才能出报告。
怎样得到准确的血培养结果
血流感染是临床上常见的重症患者最主要的死亡原因之一。据统计,全球约有1800万名败血症患者,仅美国败血症患者在10年间就增加了139%。尽管医学水平在不断发展,但诊断血流感染最好的方式仍是进行血培养,而要想得到准确的血培养结果以指导临床治疗,并不像看起来那样简单,其中几个关键步骤需要格外注意。根据美国CLSI标准,采血次数、采血量、采血时间以及培养瓶被称为是确保血培养最佳检出率的4把“密匙”。正确的采血次数、充足的采血量、适当的采血时间和含树脂的培养瓶对于血培养检测结果都至关重要。
首先是采血时机。为尽量获得阳性血培养结果,应在患者寒战或者体温刚刚开始升高时操作。一旦体温达到高峰,往往大部分细菌在血中已被清除了,培养阳性率自然就不高了。
其次是送检标本的量要足。临床上有些医生尽管为患者进行了血培养,但通常仅送检1次。在多数情况下,正确的操作应该是几乎同时在不同部位采血培养2套,约 40毫升血,这样,血液培养的阳性率可以高达80%左右。在此基础上,每增加1毫升血液,则阳性率大约有1.3%的增加。而送检1次5~10毫升血培养的做法,其病原菌阳性检出率仅为7%~10%。某些感染性疾病,如心内膜炎患者血液中的病原菌间歇出现,很难捕获,此时也需要提供3套或更多的血液标本,间隔1个小时左右,以提高阳性检出率。
再次,应尽量在患者使用抗菌药之前抽取标本进行血培养,否则可能会影响血培养的准确性。如果患者在就诊之前已经使用了抗菌药,则应选择含树脂培养瓶进行操作,借以中和、吸附抗菌药物,提高病原菌的阳性检出率。
尿培养
为了检查尿液中有无细菌,是什么细菌,对哪些药物最敏感要进行尿细菌培养。但尿道口周围平常有细菌存在,必须把尿道口洗干净,否则培养出来的细菌就不是尿中感染之病原菌,是污染的细菌。
血液标本检验程序
1.概述:正常人的血液及骨髓是无菌的,当细菌侵入血液时,则可引起菌血症,败血症或毒血症,侵入骨髓可引起严重的骨髓炎。因此细菌学检验对其诊断和治疗具有重要的意义。
检验目的:检出血液及骨髓标本中的病原微生物并进行体外药物敏感性试验,为临床抗生素使用提供依据。
2.目的:规范微生物血液标本检验程序,以保证微生物检验工作和检验质量的正确进行。
3.范围:适用于血液和骨髓标本。
4.程序原理:根据培养阳性细菌的形态特点、菌落特征及生化反应特点,鉴定细菌种类,后根据CLSI推荐选择抗生素试验方法。
5.血液培养报告要严格遵守三级报告制度和危急值报告制度。
6.所用设备:Versa-TREK血培养仪、VITEK2全自动细菌鉴定/药敏分析系统、YQS-II厌氧培养箱、II级生物安全柜、显微镜、恒温培养箱、红外线高温灭菌灯、接种环。
7.试剂:成人需氧和厌氧血培养瓶、革兰染色液、各种培养基、Vitek 2鉴定卡、K-B药敏和MIC药敏试验试剂、厌氧指示剂 、无菌盐水、接种槽、反应板、触酶试剂、氧化酶试剂、凝固酶试剂、药敏纸片等等。
8.标本采集:见微生物标本采集和送检程序(YLJY-WSW-PF-6-8)。
9.检验程序:
9.1本实验室所有血液和骨髓标本均同时进行需氧和厌氧培养(厌氧培养瓶内含85%的N2、1O%CO2、5%H2的厌氧气体)。接到血培养标本后,根据采样时间,在室温放置20-30分钟。
9.2将病人信息输入,在仪器上扫描培养瓶条型码。具体操作按Versa-TREK血培养仪标准操作规程进行。
9.3培养瓶进入Versa-TREK血培养仪系统后,当被注入样本的培养瓶中有微生物存在时,它们就会在培养液中进行新陈代谢,释放处二氧化碳,CO2 + H2O=H2CO3,解离后成H+和HCO3—,在酸性环境下使培养瓶底部灰绿色变成不可褪色的黄色,仪器每10分钟读取数据,一旦计算机系统对检测到的原始数据采用一定的计算法判断被检测样本是否有微生物的存在,此时仪器会自动以声音和屏幕变黄报警,提示有阳性瓶出现。
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. . . w 针对特定的患者,临床医生应掌握采血指征、采血时机和采血套次。同时,应严格执行指南要求,以诊断或鉴别诊断CRBSI。
血培养的意义
菌血症高危人群
国内血培养的现状
阳性检出率<10%(国外约为15%)
原因何在?
1. 血流中含菌量低
2. 血液中含抗菌物质
3. 抗生素的应用
4. 血培养的临床实践欠规范(时机、套数、量)
5. 只做需氧培养,不做厌氧培养
完整的血培养过程
1. 医生开出医嘱
2. 护理人员收集送检样本
3. 实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的微生物
4. 三级报告:为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果
采血指征
▪ 发热(≥38℃)或低温(≤36℃)
▪ 寒战
▪ 白细胞计数增多(>10.0×109/L,特别是有“核左移”时)或减少(<3.0×109/L)
▪ 皮肤黏膜出血
▪ 昏迷
▪ 多器官衰竭
▪ 血压降低 .
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. . . w ▪ CRP升高
▪ PCT升高
▪ G试验升高
▪ 突发的急性呼吸、体温和生命体征改变
采血时间
▪ 宜在寒战或高热高峰前采集
▪ 尽可能在使用(或下一次使用)抗菌药物之前采集
取血培养时的注意事项
武裕婕
1.应在抗生素使用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。
2.防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键:
A.注意手卫生和手消毒
B.穿刺部位皮肤消毒:消毒直径8cm,消毒2次,最好作用一分钟。
C.培养瓶的消毒:用安尔碘消毒血培养瓶橡皮塞2遍待干
D.血抽完后要将原有瓶盖用贴膜贴好,尽量保持无菌状态
3.同时做需氧和厌氧培养时,现将标本接种到厌氧瓶,再注入需氧瓶。
4.注入血标本后轻轻颠倒混匀5次以上。
5.对于间歇性寒战或发热的患者,应在寒战或体温高峰到来之前0.5-1h采血,或寒战发热1h后采血,因为发热时血液中可能没有细菌。
6.采血量:8-10ml。因为溶质较多,所以在采血前,应在培养瓶上做好标记。
7.采集后应立即送检,如不能及时送检,应将其放在室温,一般不超过2h,切忌冰箱存放。因为某些厌氧菌会在冰箱温度中死亡。
8.如果血液标本错误,不能直接按照垃圾废物处理,要送回检验科细菌检查室进行统一处理。