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2020-2021《基因工程》课程考试试卷A一、名词解释 (共5题,每题4分,共20分)1、克隆(clone)2、质粒3、基因工程4、基因（gene）5、回文结构二、简答题(共4题,每题10分,共40分)1、基因工程研究的基本步骤2、载体的功能3、重组DNA技术4、T4-DNA酶的基本特性三、论述题（每题20分，共40分）1、论述PCR原理及引物设计的基本原则2、大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化操作过程2020-2021《基因工程》课程考试试卷A答案一.名词解释(共5题,每题4分,共20分)1、克隆(clone): 作名词时指含有某目的DNA片段的重组DNA分子或含有该重组分子的无性繁殖系，作动词时是指基因的分离与重组过程。
2、质粒——质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。
现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。
在基因工程中质粒常被用做基因的载体。
3、基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。
上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA 技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
4.基因（gene）—产生一条多肽链或功能RNA所必须的全部核苷酸序列。
5、回文结构限制性内切酶识别双链DNA分子中4 - 8对碱基的特定序列大部分酶的切割位点在识别序列内部或两侧识别切割序列呈典型的旋转对称型二.简答题(共4题,每题10分,共40分)1、基因工程研究的基本步骤1、从生物体中分离得到目的基因（或DNA片段）2、在体外，将目的基因插入能自我复制的载体中得到重组DNA分子。
3、将重组DNA分子导入受体细胞中，并进行繁殖。
4、选择得到含有重组DNA分子的细胞克隆，并进行大量繁殖，从而使得目的基因得到扩增。
5、进一步对获得的目的基因进行研究和利用。
基因工程试卷B名词解释（每个2分，共20分）1、转化：2、质粒转移性：3、DNA文库：4、RACE:5、选择标记基因:6、降落PCR7、载体：8、感受态细胞：9CaMV35s:10、ORF:二、选择题（每题1分，共15分）2(）限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A修复自身的遗传缺陷C强化自身的核酸代谢）生物工程的下游技术是基因工程及分离工程促进自身的基因重组提局自身的防御能力蛋白质工程及发酵工程D分离工程及蛋白质工程1(3）基因工程操作常用的酶是:（1内切酶II连接酶III末端转移酶IV聚合酶A.I + IIB. I + III + IVC. II + III + IVD. I +11 + IV + III4 ()限制性内切核酸酶的星活性是指：A在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性。
B活性大大提高C切割速度大大加快D识别序列与原来的完全不同5()下列五个DNA片段中含有回文结构的是A.GAAACTGCTTTGACB. GAAACTGGAAACTGC. GAAACTGGTCAAAGD. GAAACTGCAGTTTC6 ()关于cDNA的不正确的提法是：A同mRNA互补的单链RNAB同mRNA互补的含有内含子的DNAC以mRNA为模板合成的双链RNAD以上都不正确7()下列有关连接反应的叙述，错误的是A,连接反应的最佳温度为37 °CB,连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C,连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于ImMD,连接酶通常应过量2-5倍8( )T4 -DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是A. 2' -OH 和5' —PB. 2' -OH 和3'-PC. 3'-OH 和5' —PD. 5'-OH 和3' -P9()载体的功能是A.外源基因进入受体的搭载工具B.不能为外源基因提供整合能力C.不能提供复制能力D.不能为外源基因提供表达能力10()黏性末端连接法，不仅操作方便，而且A产生新切点B易于回收外源片段C载体不易环化D影响外源基因的表达11()下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？A质粒B黏粒C酵母人工染色体(YAC)D X噬菌体12()考斯质粒(cosmid)是一种A.容量最大一种载体B,由X-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C.是一种单链DNA环状载体D,不能在受体细胞内复制，但可以表达13()某一重组DNA 的载体部分有两个BamHI酶切位点。
基因工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。
2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。
5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。
6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。
7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。
8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。
9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。
10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分）1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。
基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。
其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。
PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。
DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
2. 什么是转基因生物？请举例说明。
转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。
例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。
3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。
基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。
例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。
另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。
《基因工程原理与应用》期末考试试卷附答案一、名词解释(共5小题，每小题4分，共20分)1、基因工程：2、星活性：3、插入型载体：4、反转录PCR：5、感受态：二、填空题(共10空，每空2分，共20分)1、用酚—氯仿抽提DNA 时，通常要在氯仿或酚—氯仿中加少许异戊醇，这是因为异戊醇可以；分离DNA 时要使用金属离子螯合剂，如EDTA 和柠檬酸钠等，其目的是。
2、按照质粒拷贝数的多少，质粒可以分为和。
3、λ 噬菌体在感染大肠杆菌以后，可以进入Lytic growth 也可以进入Lysogenic state 。
如果其基因组DNA 通过专一性重组整合到宿主染色体中，则其进入。
；它也可以选择进入，大量复制并组装子代噬菌体颗粒。
4、ddNTP 与普通的dNTP 的不同之处在于ddNTP ，它们可以在DNA 聚合酶的作用下，通过其掺入到正在增长的DNA 链中，导致链延伸反应终止。
5、Klenow DNA 聚合酶是经蛋白酶裂解而从全酶中除去活性的多肽大片断，而其他活性保持不变。
三、选择题(共10题，每小题2分，共20分)1、限制性内切核酸酶可以特异性地识别（）。
A、特定的三联密码；B、双链DNA 的特定碱基对；C、双链DNA 的特定碱基序列；D、单链DNA 的特定碱基序列。
2、在切口平移方法标记DNA 探针时只能使用（）。
A、Klenow 酶；B、DNA 聚合酶Ⅰ；C、DNA聚合酶Ⅱ；D、DNA聚合酶Ⅲ。
3、在下列进行DNA 部分酶切的条件中，控制哪一项最好（）。
A、反应体积；B、酶反应温度；C、反应时间；D、酶量。
4、PCR 扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（）。
A、退火温度过低；B、退火温度过高；C、dNTP 浓度过高；D、循环次数过多。
5、以下不属于PCR 的应用的为（）。
A、随机扩增多态性DNA（RAPD）；B、扩增片段长度多态性（AFLP）；C、RACE；D、S1 酶作图。
6、pUC18 与pUC19 的区别在于（）。
基因工程期末考试试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然突变B. 基因的人工重组C. 基因的自然选择D. 基因的自然淘汰答案：B2. 下列哪项不是基因工程常用的工具酶？A. 限制性内切酶B. DNA连接酶C. 反转录酶D. 聚合酶链反应酶答案：C3. 基因枪技术主要用于：A. 植物基因转化B. 动物基因转化C. 微生物基因转化D. 病毒基因转化答案：A二、填空题1. 基因工程中，常用的载体有________、________和________。
答案：质粒、病毒、人工染色体2. 基因工程中，________是基因表达的调控元件。
答案：启动子三、简答题1. 请简述基因工程的基本步骤。
答案：基因工程的基本步骤包括：目标基因的获取、目标基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有重组DNA的宿主细胞、目的基因的表达和检测。
2. 基因工程在医学领域的应用有哪些？答案：基因工程在医学领域的应用包括：生产重组蛋白质药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
四、论述题1. 论述基因工程对农业生产的影响。
答案：基因工程对农业生产的影响主要体现在以下几个方面：提高作物的抗病虫能力、增强作物的抗逆性、改善作物的营养价值、提高作物的产量和质量、促进农业可持续发展。
2. 基因工程在环境保护中的应用。
答案：基因工程在环境保护中的应用主要包括：开发生物修复技术，用于污染土壤和水体的净化；利用基因工程改造微生物，用于处理工业废水和废气；通过基因工程改良植物，用于重金属污染土壤的修复等。
五、案例分析题1. 某公司利用基因工程技术成功开发了一种抗虫棉，该抗虫棉能够减少农药的使用，降低农业生产成本。
请分析该技术可能带来的社会、经济和环境效益。
答案：该技术可能带来的社会效益包括提高农民的生活质量，减少因农药使用带来的健康风险。
经济效益包括降低农药成本，提高作物产量，增加农民收入。
环境效益包括减少农药对环境的污染，保护生态平衡，促进农业的可持续发展。
基因工程试题及答案【篇一：基因工程题库以及答案】因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2．基因工程的两个基本特点是： (1)____________，(2)___________。
3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。
4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。
5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。
6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8．限制性内切核酸酶bsuri和haeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。
9．dna聚合酶i的klenow大片段是用_____________切割dna聚合酶i得到的分子量为76kda的大片段，具有两种酶活性：(1)____________； (2)________________的活性。
10．为了防止dna的自身环化，可用_____________去双链dna__________________。
11．egta是____________离子螯合剂。
12．测序酶是修饰了的t7 dna聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。
13．切口移位(nick translation)法标记dna的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
基因工程试卷及答案(1)(总4页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--一、名词解释1、基因治疗：是将目的基因放进特定载体中导入靶细胞或组织，通过替换或补偿引起疾病的基因，或者关闭或抑制异常表达的基因来克服疾病的治疗方法。
2、反义核酸：是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。
3、反义DNA：也称反义寡核苷酸或反义脱氧寡核苷酸，是一种人工合成的、能与mRNA互补的、用于抑制翻译的短小反义核酸分子。
4、同尾酶：指切割DNA可产生相同的黏性末端的限制酶5、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。
6、ａ-互补：指半乳糖苷酶的两个无活性片段组合而成为功能完整的酶的过程。
7、转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。
8、基因克隆：通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量子代分子的过程。
9、核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，具有核苷酸水解活性，可特异性剪切RNA分子，相当于RNA酶。
10、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一识别序列表现出不同的切割效率，这种现象称作为位点偏爱。
二、选择1.在( B )诱导下，目的蛋白与lacZ就会以融合蛋白的形式表达出来。
A. dNTP C. DMSO2.（ A ）可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解，或使表达的蛋白正确折叠，从而达到维护目的蛋白的目的。
A.分泌表达载体融合表达载体 C.组氨酸标签表达载体 D.内含肽表达载体的琼脂糖凝胶电泳方向为（ B ）A. 正极向负极B. 负极向正极C浓度高向浓度低. D. 浓度低向浓度高4.影响脉冲场凝胶电泳电泳分辨率的最关键因素是（D ）A.电场强度B. 缓冲液浓度C. 温度D.脉冲时间5.控制潜在RNA酶活性最重要的是（C）A.使用RNA酶抑制剂B.实验用具C.细致谨慎的操作D.温度控制6.酵母基因表达系统的宿主不具有以下哪一条件(B )A.安全无毒B.载体DNA转化频率低C. 发酵周期短D.蛋白质分泌能力好7. 酿酒酵母的附加体形表达载体有（D）的缺点A.蛋白分泌能力差B.无终止子C.不能独立复制D.无选择压力时不稳定8.（C）不能用大肠杆菌表达系统来生产。
基因工程期末考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程中常用的工具酶是：A. 纤维素酶B. 限制性内切酶C. 淀粉酶D. 过氧化氢酶答案：B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因的表达C. 基因的克隆D. 基因的测序答案：D3. 基因枪法是一种：A. 植物转基因方法B. 动物转基因方法C. 微生物转基因方法D. 所有生物的转基因方法答案：A4. 重组DNA技术中，通常使用哪种质粒作为载体？A. 质粒DNAB. 线粒体DNAC. 核糖体RNAD. 染色体DNA答案：A5. 基因工程中，目的基因的表达通常需要：A. 启动子B. 终止子C. 增强子D. 所有选项答案：D二、填空题（每空2分，共20分）1. 基因工程是指按照人们的意愿，将不同来源的基因在体外构建杂合DNA分子，然后导入到活细胞和生物体内，以改变生物的遗传特性并取得新品种或新产品。
2. 基因工程中常用的宿主细胞有大肠杆菌、酵母菌和________。
答案：哺乳动物细胞3. 基因工程中，________是连接目的基因和载体DNA的关键酶。
答案：DNA连接酶4. 目的基因的表达需要________和________的协同作用。
答案：启动子；终止子5. 基因工程产品在医学领域的应用包括生产________、________和基因治疗等。
答案：重组蛋白；单克隆抗体三、简答题（每题10分，共30分）1. 请简述基因工程在农业中的应用。
答案：基因工程在农业中的应用主要包括提高作物的抗病性、抗虫性、抗旱性和提高作物的产量和品质。
例如，通过基因工程培育的抗虫棉可以减少农药的使用，提高棉花的产量和质量。
2. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、单克隆抗体、基因治疗和疫苗开发等。
例如，利用基因工程技术生产的胰岛素可以治疗糖尿病，单克隆抗体用于治疗癌症和自身免疫性疾病。
3. 请解释什么是转基因生物，并简述其潜在的风险。
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
20202021大学基因工程期末课程考试试卷含答案2020-2021大学基因工程期末课程考试试卷（含答案）一、选择题（共40题，每题2分，共80分）1. 以下哪项不是基因工程的主要应用领域？A. 转基因植物的培育B. 基因治疗的研究C. 疾病的基因诊断D. 遗传算法的应用2. 哪个细胞器是负责蛋白质合成的？A. 叶绿体B. 中心体C. 核糖体D. 质体3. 基因工程研究中的DNA重组技术是指：A. DNA的合成B. DNA的裂解C. DNA的修复D. DNA的重排4. 下面哪种技术是基因工程研究中经常用到的？A. 西方印迹B. 南方印迹C. 北方印迹D. 东方印迹5. PCR反应中，以下哪项是PCR的三个温度阶段？A. 解链、退火、延伸B. 解链、延伸、退火C. 退火、解链、延伸D. 延伸、退火、解链... （省略部分内容）二、判断题（共10题，每题2分，共20分）请判断以下各题，正确的在括号内打“√”，错误的在括号内打“×”。
1. （√）基因工程是应用与微生物的生物技术，对生物技术的发展起到了巨大推动作用。
2. （×）扩增子是一段有相同序列的DNA重复片段。
3. （√）逆转录聚合酶是将RNA的信息转录为DNA的酶类。
4. （√）转基因技术被广泛应用于农作物的改良。
5. （×）CRISPR/Cas9是一种RNA干扰技术。
三、简答题（共5题，每题10分，共50分）1. 请简述基因工程的概念及其应用领域。
解答示例：基因工程是利用生物技术对生物体中的基因进行操作与改变的一门学科。
其应用领域涵盖农业、医学、工业等多个领域。
例如，基因工程可以通过转基因技术，将具有特定性状的基因导入植物，提高作物的产量和抗逆能力；在医学领域，基因工程可以用于基因诊断、基因治疗等，旨在改善人类健康状况；在工业领域，基因工程可以生产各种重要蛋白质和化合物，应用于药物生产、环境污染治理等方面。
2. 请简述PCR反应的原理及其在基因工程中的应用。
2020-2021《基因工程》期末课程考试试卷
（考试时间：考试对象：；
考试方式：闭卷；总分：100分）
一、名词解释（共10小题,每小题2分，共20分）
1.基因工程：
2.限制性核酸内切酶：
3.酶星活性（star activity）：
4.载体：
5.cosmid：
6.TA克隆：
7.重组率：
8.噬菌体展示技术：
9.基因组文库：
10.蓝白斑筛选：
二、单项选择题（选出最合适的答案，共5小题，每题2分，共10分）
1.基因工程操作的三大基本元件是（）
I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体
ＡI + II + III ＢI + III + IV
ＣII + III + IV ＤII + IV + V
2.基因工程的单元操作顺序是（）Ａ增，转，检，切，接Ｂ切，接，转，增，检
Ｃ接，转，增，检，切Ｄ检，切，接，增，转3. 天然PstI 限制性内切酶的来源是（）ＡBacillus amyloliquefaciens ＢEscherichia coli
ＣHaemophilus influenzae ＤProvidencia stuartii
4. 下列五个DNA 片段，最可能含有SstI 酶切位点的是（）ＡGGAGAGCTCT ＢGAGCACATCT
ＣCCCTGTGGGA ＤATCCTACATG
5. T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是（）Ａ5' -OH 和3' -P Ｂ2' -OH 和3' -P
Ｃ3' -OH 和2' -P Ｄ3' -OH 和5' -P
三、简答题（共7小题，每题5分，共35分）
1、如何提高重组效率？
2、什么是限制性酶切图谱？有什么应用？
3、简述PBR322质粒载体的结构，该质粒载体有什么应用？
4、外源基因转化有哪些方法？
5、什么是Ti质粒？说明其应用。
6、载体的必备条件是什么？
7、受体细胞的必备条件是什么？
四、问答题（共3小题，每题7分，共21分）
1、cDNA文库有什么特点？其制备的流程如何？
2、PCR原理是什么？其基本步骤如何？解释各步骤的目的。
3、外源基因异源高效表达的策略有哪些？
五、论述题（共1小题，每小题14分，共14分）
基因工程的主要研究内容有哪些？论述该学科在生物学研究中的意义。
2020-2021《基因工程》期末课程考试试卷答案
（考试时间：考试对象：
考试方式：闭卷；总分：100分）
一、名词解释（共10小题,每小题2分，共20分）
1.基因工程：狭义的基因工程仅指用体外重组DNA技术去获得新的重组基因；广义的基因工程则指按人们意愿设计，通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性。
2.限制性核酸内切酶：是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。
3.酶星活性（star activity）：在非标准酶切条件下，限制性核酸内切酶表现出的非特异性酶切现象，能在其类似的识别位点或其周围造成酶切。
4.载体：基因工程操作中用于运输外源DNA进入宿主细胞，并能够自主复制或者发生染色体整合的DNA分子。
5.cosmid：柯斯质粒是人工建造的的含有λDNA的cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。
6.TA克隆：TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与一个具有3‘-T突出的载体DNA连接起来的方法。
因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3'加上A。
7.重组率：连接反应结束后，含有外源DNA片段的重组分子数与加入的载体分子数之比。
较为理想的重组率为25-75%
8.噬菌体展示技术：是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随外壳蛋白的表达而表达，同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。
9.基因组文库：某种生物全部基因组DNA序列的随机片段重组DNA克隆的群体。
10.蓝白斑筛选：当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，不可避免地导致无α-互补现象出现（即表现为lacz-），接受重组质粒的细菌形成白色菌落。
这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。
二、单项选择题（选出最合适的答案，共5小题，每题2分，共10分）
1.基因工程操作的三大基本元件是（A）
I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体
ＡI + II + III ＢI + III + IV
ＣII + III + IV ＤII + IV + V
2.基因工程的单元操作顺序是（B）Ａ增，转，检，切，接Ｂ切，接，转，增，检
Ｃ接，转，增，检，切Ｄ检，切，接，增，转
3. 天然PstI 限制性内切酶的来源是（D）ＡBacillus amyloliquefaciens ＢEscherichia coli
ＣHaemophilus influenzae ＤProvidencia stuartii
4. 下列五个DNA 片段，最可能含有SstI 酶切位点的是（A）ＡGGAGAGCTCT ＢGAGCACATCT
ＣCCCTGTGGGA ＤATCCTACATG
5. T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是（D）Ａ5' -OH 和3' -P Ｂ2' -OH 和3' -P
Ｃ3' -OH 和2' -P Ｄ3' -OH 和5' -P
三、简答题（共7小题，每题5分，共35分）
1、如何提高重组效率？
答：1）提高外源基因与载体的比例（10:1）
2）对载体进行去磷酸化处理，TdT在3’端增加人工粘性末端，防止载体自我环化；
3）设计合理的限制性酶切位点，防止反向连接；
4）提高连接酶用量等
2、什么是限制性酶切图谱？有什么应用？
答：限制性酶切图谱是酸经限制性内切酶消化成片段，用电泳等方法分离，不同的核酸形成的各自独特的条带图谱。
包含的是该DNA分子上的限制性内切酶识别位点数及其位置等信息。
可用作分子标记或者用于目的DNA的鉴定、目的DNA酶切是R.E.的选择等
3、简述PBR322质粒载体的结构，该质粒载体有什么应用？
答：含有标记基因amp r、tet r；E.coli质粒复制起点ori；各类限制性核酸内切酶单酶切位点等。
主要应用：用作载体；用与构建新的质粒载体。
4、外源基因转化有哪些方法？
答：电转化法、CaCl2诱导法、三亲株杂交法、噬菌体转染等（针对微生物的）；
针对动物植物的（略）
5、什么是Ti质粒？说明其应用。
答：Ti是在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种染色体外自主复制的环形双链DNA分子。
它控制根瘤的形成,可作为基因工程的载体，主要应用于植物基因工程操作。
6、载体的必备条件是什么？
答：①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制；
②有多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个，可适于多种限制酶切割的DNA插入；
③有一定的标记基因，便于进行筛选。
7、受体细胞的必备条件是什么？
答：①安全，例如不是病原菌、是营养缺陷型细胞等；
②易于接受外源基因、易培养等
四、问答题（共3小题，每题7分，共21分）
1、cDNA文库有什么特点？其制备的流程如何？
答：某种生物基因组转录的全部mRNA经反转录产生的cDNA片段分别与克隆载体重组，并将其引入到相应的宿主细胞中（一般为 E.coli.）繁殖和扩增，理论上此群体就包含有该物种的全部mRNA信息，称该生物基因组的cDNA文库。
特点：可得到表达序列信息；可直接用于外源基因的表达；可用于表达产物的分析；但是由于只能克隆表达性基因，其信息不全，不能得到全部基因的信息；同时由于真核生物基因表达经过加工，cDNA文库不能提供内含子信息等。
基本步骤有4步：
第一，细胞总RNA 的提取和mRNA 分离；
第二，第一链cDNA 合成；
第三，第二链cDNA 合成；
第四，双链cDNA 克隆进质粒或噬菌体载体并导入宿主中繁殖。
2、PCR原理是什么？其基本步骤如何？解释各步骤的目的。
答：类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR 由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时
间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链；重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”。
3、外源基因异源高效表达的策略有哪些？
答：包涵体法；融合蛋白表达法；外源蛋白的分泌表达；串联表达法等（具体略）
五、论述题（共1小题，每小题14分，共14分）
基因工程的主要研究内容有哪些？论述该学科在生物学研究中的意义。
提示：主要涉及载体研究、工具酶研究、目的基因的研究等。
