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1 概述 (3)2目的 (3)3范围 (3)4职责 (3)5参考依据 (3)6 性能确认执行前检查 (3)7.性能确认 (4)7.1输液泵性能确认 (4)7.1.1流量准确度确认 (4)7.1.2流量精密度确认 (7)7.1.3梯度准确度确认 (8)7.2柱温箱性能确认 (10)7.2.1控温速率确认 (10)7.3自动进样器性能确认 (11)7.3.1进样重复性确认 (11)7.4紫外检测器性能确认 (11)7.4.1灯能量测试确认 (11)7.4.2基线漂移与基线噪声测试确认 (12)7.5蒸发光散射检测器性能确认 (13)7.5.1基线漂移与基线噪声测试确认 (13)7.6确认偏差记录 (13)7.7验证周期 (13)8修订记录 (14)9相关附件 (14)1概述高效液相色谱仪作为现代制药企业最常用的分析仪器，在我公司主要用来分析药品的含量和有关物质，为保证药品的分析质量，我们特制定本文件来对高效液相色谱仪可能影响分析结果准确性的因素进行全面的确认。
本次验证的Agilent 1200高效液相色谱仪55012007010100是由在线脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、蒸发光散射检测器以及相关管路等组成，该仪器为2007年购买，主要用于小儿清热止咳口服液盐酸麻黄碱含量测定及中药材及原辅料含量测定。
该仪器前一次性能确认为2012 年7月26日完成，验证周期内为正常使用状态，并按照经批准预防性维护计划执行日常维护和备品备件的跟换；除日常使用中出现的微小故障及时排除外，无明显影响仪器性能的故障维修记录和部件更换记录, 此次性能确认为正常周期确认。
2目的此确认方案的目的是对国药控股深圳中药有限公司安装在检验室仪器室IV的Agilent 1200型高效液相色谱仪55012007010100进行性能再确认并文件记录。
3范围本方案适用于国药控股深圳中药有限公司检验室使用的Agilent 1200型高效液相色谱仪55012007010100的性能确认。
Agilent 1200液相色谱仪确认方案目录1 目的： 22 范围： 23 职责 24 法规和指南 35 缩略语 36 系统介绍 37 确认的历史沿革 48 风险分析 49 验证前检查 610 安装确认： 611 运行及性能确认： 612 确认总结论与评价12 14 附件列表：121 目的：通过对Agilent 1200液相色谱仪的IQ、O/PQ的确认，确保该项仪器的已经正确安装；各项性能标均能达到设计要求，满足检验需要；能够保证在检验过程中得到准确可靠的检验数据，特制定本仪器的验证方案。
对本仪器进行验证。
验证过程应严格按照本方案规定的内容进行。
2 范围：本IQ、O/PQ方案适用于XXXX药业有限公司质量控制部的Agilent 1200液相色谱仪的确认。
3 职责3.1 验证部：3.1.1 验证部负责提供技术指导和支持以Agilent 1200液相色谱仪以适宜和持续的方式进行验证。
3.1.2 撰写、审核和批准IQ和O/PQ方案和报告。
3.1.3 依据验证原则确保验证工作符合行业和法规要求。
3.1.4 确定接受标准。
3.1.5 实施批准后的验证方案3.1.6 验证数据的收集3.1.7 验证报告的起草3.2 质量控制部3.2.1 审核和批准IQ和O/PQ方案和报告3.2.2 协助实施批准后的验证方案3.2.3 如有必要，根据验证结果修订SOP3.2.4 确定接受标准3.2.5 制定Agilent 1200液相色谱仪的操作、维护SOP3.2.6 按照方案检测样本，报告数据3.2.7 质量保证部：3.2.8 依据质量原则确保验证工作符合行业和法规要求3.2.9 审核和批准IQ\O/PQ方案和报告3.2.10 审核和批准变更控制文件3.2.11 确定接受限度4 法规和指南4.1 中国药典2010版4.2 现行版GMP4.3 Agilent 1200液相色谱仪操作手册4.4 JJG705-2002 液相色谱仪检定规程5 缩略语5.1 IQ：安装确认风险控制等距及相关处理措施：Ac=S*O*DAc：1-8为低风险区域，不需要主动采取措施Ac：9-36为中风险区域，考虑接受风险的受益和进一步降低的可能性，然后对风险与受益进行比较，如果受益超过风险，则风险是可接受的；如果受益没有超过风险，则风险是不可接受的。
.高效液相色谱仪验证方案（安装IQ、运行OQ、性能PQ）设备名称：高效液相色谱仪设备型号：1200型验证文件编码：起草起草部门签名日期技术发展部年月日审核审核部门签名日期质量部年月日聚合部年月日技术发展部年月日批准批准人签名日期质量负责人年月日验证目录1、设备概述2、验证目的3、验证小组人员及职责4、验证相关文件及依据5、仪器仪表有效性确认6、验证内容6.1人员培训确认6.2文件确认6.3安装确认6.4运行确认6.5性能确认7、偏差处理8、变更管理9、验证周期10、结论安捷伦1260高效液相色谱仪验证方案1、仪器概述本仪器由安捷伦科技有限公司生产，主要由工作站、G1311C 高效液相色谱仪四元泵（内置脱气机）、标准自动进样器（G1329B ）、柱温箱（G1316A ）、可变波长紫外检测器（G1314F ）等部件组成。
为确认该设备的各项技术参数及性能是否能满足要求，确保化验室检测质量，现对该仪器进行验证。
2、验证目的对该仪器进行运行确认及性能确认，以确定仪器是否具有良好的检测性能，是否能满足日常分析测试工作的需要。
3、验证小组人员及职责 4、验证相关文件及依据 4.1《中国药典》2015年版4.2中国药品检验标准操作规程（2015年版） 4.3 安捷伦1200高效液相色谱仪标准操作规程 4.4 安捷伦1200高效液相色谱仪使用说明书分工 姓 名 部 门 职责组长毛江成化验室验证执行操作人，负责起草验证方案，执行验证方案，收集整理数据，完成验证方案。
成员童丽霞质量部1、负责协助实施验证方案；2、协助验证方案的起草；3、参与审核验证方案和方案。
徐云，罗丽琴化验室 1、负责实验的现场操作； 2、负责基本数据的收集与记录；批准李洁莲质量负责人 负责验证方案的批准实施、验证方案的批准5、使用的仪器仪表有效性确认6、验证内容6.1人员培训确认6.1.1 确认方法：在执行之前，所有人员都需要仔细阅读和理解各自的职责并进行相应的培训，按人员确认表中内容进行确认。
Agilent1200操作规程一、1200/化学工作站开机顺序(LAN卡联接)1 打开计算机；2 打开主机各模块电源（自上而下打开色谱仪组件电源），双击INSTRUMENT 1 ONLINE 图标,进入化学工作站；3 调出一个分析方法，检查各参数的设置；4 旋开泵上的排气阀，将工作站中的泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%；5 在工作站中打开泵，排出管线中的气体数分钟；6 依此切换到B、C、D溶剂分别排气；7 将工作站中的泵流量设到1ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；8 关闭排气阀，检查柱前压力；9 待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况；二、数据采集方法编辑1 由运行控制进入样品信息…设定操作者姓名，样品数据文件名等。
2 泵参数设定：（以二元泵为例）1）在流量处输入流量,如1ml/min，在溶剂B处输入70.0,(A=100-B) ,也可插入一行时间列表,编辑梯度。
在最大压力极限处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
2）单击确定进入下一画面。
3 柱温箱参数设定:1）在柱温下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击更多>>键,选中与左侧一致，使柱温箱的温度左右一致。
2）点击确定进入下一画面。
4 VWD检测器参数设定:1）在波长下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在峰宽(响应时间)下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。
2）在时间列表中可以插入一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。
3）点击确定进入下一画面。
5 单击方法菜单，选中保存方法，输入一方法名，如“test”，单击确定。
6 等仪器就绪，基线平稳，从方法菜单中选择运行方法，进样。
三、数据处理操作步骤1 由主菜单上的视图进入数据分析，到数据处理界面；2 由主菜单上的文件进入调用信号，调出要分析的数据文件色谱图；3 由主菜单上的图形进入信号选项，调整谱图坐标:1)点自定义量程，在时间范围中输入横坐标(时间）(例如0到10)；2)在响应范围:中输入纵坐标(响应值）(例如-50到800)；3)在量程框中，调到全部使用相同量程；4)点击确定退出。
安捷伦1200高效液相操作规程一目的规范检测仪器、设备的管理，确保仪器、设备的正常使用。
二范围适用于安捷伦1200高效液相色谱仪（自动进样）的使用和维护管理。
三职责研究所分析人员。
四内容1 仪器组成及开机1.1 本仪器由G1322A在线脱气机、G1312A泵、G1329A自动进样器、G1316A柱温箱、G1315D 检测器、和Chem32工作站组成。
1.2 将电源插头分别插入插座后，依次打开脱气机、泵、柱温箱、自动进样器、检测器（从上到下）的电源开关。
开始自检后双击打开仪器1 联机图标，进入化学工作站。
1.3 旋开泵上的排气阀，将工作站中溶剂A设到100%，泵流量设到5ml/min，在工作站中打开泵，排出管线中的气体几分钟（不低于5min）。
切换到B溶剂排气。
1.4 将工作站中的泵流量设到1ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=10%，B=90%1.5 关闭排气阀，检查柱前压力1.6 配制90%水+10%异丙醇，每20分钟冲洗0.5分钟进行seal-wash，每三天更换一次溶剂。
1.7 用90%有机溶剂冲洗柱子和系统0.5小时，再用90%水冲0.5-1小时，待换成流动相且柱前压力基本稳定后，打开检测器，观察基线情况。
2 方法编辑2.1 进样器设置单击进样器图标，选择设置进样器，设置进样量。
2.2 二元泵设置单击二元泵图标，选择设置泵，设置流速、溶剂比例、泵停止时间（即采集时间），也可插入一行时间列表，编辑梯度；选择控制，设置定期清洗泵。
单击溶剂瓶图标，选择溶剂瓶填充量，设置溶剂瓶中溶液体积。
2.3 柱温箱设置单击柱温箱图标，选择设置柱温箱，设置柱温。
2.4 VWD检测器设置单击检测器图标，选择设置DAD信号，设置检测波长。
系统更换为流动相后，单击图标，选择控制，打开紫外灯。
2.5 方法保存在联机页面右下角LC参数窗口检查各参数设置正确后，在方法菜单下拉选项下单击方法另存为，设置方法名和保存路径。
1 目的：建立一个安捷伦1200高效液相色谱仪标准操作程序。
2 范围：本规程适用于安捷伦1200高效液相色谱仪的操作。
3 责任：相关操作人员。
4 程序：4.1 原则与定义4.1.1高效液相色谱法是将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液为流动相，用高压泵将流动相压入装有填充剂的色谱柱，注入供试品，经流动相带入柱内，在填充剂上分离后，各组分先后进入检测器，用记录仪记录色谱图，各供试品谱图与标准或对照品谱图比对，经一定的数据处理进行化合物的定性和定量分析。
4.1.2 除另有规定者外，都应按现行版《中国药典》附录（高效液相色谱法）的要求测定。
4.2 仪器及用具4.2.1 安捷伦1200高效液相色谱仪系统4.2.2 DAD紫外检测器4.2.3 色谱柱4.2.4 色谱工作站4.2.5 溶剂过滤系统4.2.6 样品过滤系统4.2.7 其他用具和试剂应符合现行版《中国药典》规定或仪器说明书上指明的要求。
4.3 准备工作4.3.1流动相临用前过滤并脱气。
4.3.2供试品溶液和标准品(或对照品)溶液应按药品标准中有关规定配制过滤。
4.4 操作方法4.4.1 开机准备好流动相并安装色谱柱。
依次打开仪器各部件电源开关（在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器等），约15min 后，仪器进入待机状态，此时仪器各部件指示灯应无色或呈黄色。
计算机进入工作站的操作页面。
色谱条件的设定,当色谱参数设置完成后，单击工作站流程图右下角的【on】，仪器开始运行。
4.4.2 样品测定4.4.3 分析报告的打印4.4.4 关机，分析结束后，按规定程序彻底冲洗色谱柱及所用的仪器流路。
4.4.5 实验结束工作4.4.6 全部分析工作结束后，依次关闭电脑、检测器、电源开关。
4.4.7 泵流量调到零，关闭泵电源。
4.4.8 仪器参数设定及操作方法同药典仪器操作规程安捷伦1100。
4.5.1反相高效液相色谱，如所用流动相含有缓冲溶液，实验前需要用重蒸馏水冲洗管路和色谱柱，实验结束时也要用水冲洗约半小时, 然后再用甲醇平衡柱子约30min后关闭仪器，以保护柱子。
Agilent1200液相色谱仪A验证方案文件编码：REC-JYYQ-F001-00目录1．概述2．验证目的3．验证依据及验证范围4．验证工作小组5．验证方案审批5.1验证方案起草5.2验证方案会签5.3验证方案批准5.4验证方案实施6.验证内容6.1安装确认6.1.1 文件资料6.1.2售后服务6.1.3 消耗性备品备件6.1.4安装检查6.1.5安装确认结论及批准6.2 运行确认6.2.1 灵敏度及稳定性测试6.2.2运行确认结论及批准6.3性能确认6.3.1 系统适用性试验：6.3.2定量重复性试验6.3.3性能确认结论及批准7.验证结论8.验证进度计划1.概述液相色谱仪为安捷伦科技有限公司生产（检测器为紫外检测器，色谱柱有C18柱，可以进行含量、有关物质和聚合物的定量或定性分析。
我司在购买前对该产品的性能、价格、外观和售后服务进行了广泛地调查研究，在同类产品中价格适中、性能稳定、美观且售后服务好。
2、验证目的为了确保使用该仪器检测数据真实可靠，也为了确认该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标，对该仪器进行验证。
2.验证依据及适用范围参照国家技术监督局“实验室液相色谱仪检定规程”及中国药典2008版附录V D液相色谱法起草本验证方案。
本验证方案适用于实验室液相色谱仪的验证。
4.验证工作小组成立由组成的验证工作小组，担任验证工作小组组长。
5.验证方案审批6.验证内容6.1安装确认6.1.1 文件资料检查人日期检查人日期检查人日期6.1.4安装检查对照使用说明书要求安装，确认环境、电源等符合要求。
检查人日期6.1.5安装确认结论及批准6.2 运行确认(见计量局计量证书)证书号：运行确认结论及批准：6.3性能确认6.3.1 系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；取2.75g四丁基溴化铵置320ml乙腈中，加入PH7.0缓冲液（取磷酸二氢钾1.36g，磷酸氢二钾0.4g,置100ml 水中溶解后，用80%磷酸溶液或10M氢氧化钾溶液调PH至7.0），加水稀释至1000ml，过滤，脱气后为流动相；检测波长为270nm；柱温为40℃；取7-ACT对照品20mg加水溶解并稀释至100ml，取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，分离度应不小于2.0。
Agilent 1200型高效液相色谱仪操作规程1 开机1.1 从上至下依次打开 1200 LC 各模块电源，打开电脑主机。
1.2 待各模块自检完成后双击桌面上的“仪器1（联机）”图标，化学工作站自动与1200LC工作站连接。
1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 单击“视图”菜单中的“系统视图”、“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
2 脱气2.1 把流动相放入溶剂瓶中2.2 打开冲洗阀2.3 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
2.4 设“流量”为 5mL/min ，单击“确定”。
2.5 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“启动”，单击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止, 切换通道继续冲洗直到所有要用通道无气泡为止。
2.6 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“关闭”，单击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
2.7 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“设置泵”选项，进入参数编辑画面，设流速为1.0mL/min。
2.8 单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，也可输入停泵的体积，单击确定。
3 数据采集方法编辑3.1 从”方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，点击除“数据分析”外的三项，单击“确定”。
3.2 样品信息从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，在对话框中输入“操作者名称”。
“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”（区别: “手动”每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。
“前缀/计数器”在“前缀”框中输入前缀,在“计数器”框中输入计数器的起始位,仪器会自动命名。
3.3 方法信息在方法菜单中选择“方法信息”选项，在“方法注释”中加入方法的信息（如测试方法等），单击“确定”。
3.4 泵参数设定在桌面上点击泵图标，从选项菜单中点击“泵设置”，在对话框中“流速”处输入流量,如1mL/min ，在各通道“溶剂”处输入需要的比例 ,也可“插入”一行“时间表”，编辑梯度,在“压力限”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子 ,单击“确定”。
Agilent 1200液相色谱仪操作规程一、准备工作：1、开启计算机系统电源进入Windows XP界面。
1、依次开启在线脱气机、泵、检测器电源开关，等待自检完毕。
2、待网络连接成功后，双击桌面上仪器1（联机） ,启动化学工作站，显示主机各单元图标画面。
3、单击泵图标→Setup Pump（1）设置泵参数：5ml/min（2）打开Purge阀（逆时针2—3圈）排气泡，平时常用此仪器需2—3分钟，不常用时需时间稍长些。
（3）开泵：单击泵图标，在图标上选Control→Pump→On，击OK，观察无气泡止。
（4）降流量=1ml/min（5）关闭Purge阀（顺时针）二、方法编辑：1、在Method and Run Control界面下，单击Method→Edit Entire Method,在该界面下四项都选中，击OK。
（1）在Method Comments下面方框中输入方法描述（如：This Method is for trainning）,击OK。
（2）在泵参数设置（Setup Pump）界面输入泵参数，单击OK。
（3）在检测器参数设置（VWD Signal）界面输入波长及响应时间。
2、在Signal Details: Instrument 1编辑界面击OK。
3、在积分参数设置（Edit Integration Events）界面击OK。
4、在Specify Report界面击OK。
5、在Instrument Curves界面击OK。
6、在Run Time Checklist 编辑界面选Data Acquisition和Standard Data Analysis 击OK。
7、方法保存：击Method→Save Method As 输入存盘方法文件名（扩展名为“ .m”）→确定→OK。
三、运行样品：1、打开Purge阀。
2、运行Instrument菜单下的System On。
3、待废液管中无气泡流出，关闭Purge阀。
Agilent 1200液相色谱仪确认方案目录1 目的： 22 范围： 23 职责 24 法规和指南 35 缩略语 36 系统介绍 37 确认的历史沿革 48 风险分析 49 验证前检查 610 安装确认： 611 运行及性能确认： 612 确认总结论与评价12 14 附件列表：121 目的：通过对Agilent 1200液相色谱仪的IQ、O/PQ的确认，确保该项仪器的已经正确安装；各项性能标均能达到设计要求，满足检验需要；能够保证在检验过程中得到准确可靠的检验数据，特制定本仪器的验证方案。
对本仪器进行验证。
验证过程应严格按照本方案规定的内容进行。
2 范围：本IQ、O/PQ方案适用于XXXX药业有限公司质量控制部的Agilent 1200液相色谱仪的确认。
3 职责3.1 验证部：3.1.1 验证部负责提供技术指导和支持以Agilent 1200液相色谱仪以适宜和持续的方式进行验证。
3.1.2 撰写、审核和批准IQ和O/PQ方案和报告。
3.1.3 依据验证原则确保验证工作符合行业和法规要求。
3.1.4 确定接受标准。
3.1.5 实施批准后的验证方案3.1.6 验证数据的收集3.1.7 验证报告的起草3.2 质量控制部3.2.1 审核和批准IQ和O/PQ方案和报告3.2.2 协助实施批准后的验证方案3.2.3 如有必要，根据验证结果修订SOP3.2.4 确定接受标准3.2.5 制定Agilent 1200液相色谱仪的操作、维护SOP3.2.6 按照方案检测样本，报告数据3.2.7 质量保证部：3.2.8 依据质量原则确保验证工作符合行业和法规要求3.2.9 审核和批准IQ\O/PQ方案和报告3.2.10 审核和批准变更控制文件3.2.11 确定接受限度4 法规和指南4.1 中国药典2010版4.2 现行版GMP4.3 Agilent 1200液相色谱仪操作手册4.4 JJG705-2002 液相色谱仪检定规程5 缩略语5.1 IQ：安装确认风险控制等距及相关处理措施：Ac=S*O*DAc：1-8为低风险区域，不需要主动采取措施Ac：9-36为中风险区域，考虑接受风险的受益和进一步降低的可能性，然后对风险与受益进行比较，如果受益超过风险，则风险是可接受的；如果受益没有超过风险，则风险是不可接受的。
任何风险都应降到可行的最低水平。
Ac：37-125为高风险区，该区域内，风险如果不能予以降低，判断为不能接受8.3 风险源及控制措施9 验证前检查9.1 验证培训：验证开始前，所有相关的验证人员应经过本方案的培训，并具有相关资质。
9.2 验证用仪器、仪表确认：所有的仪器仪表均通过检定或/和校准。
10 安装确认：10.1 目的：检查并确认Agilent 1200液相色谱仪的随机文件以及附件符合使用和管理要求同时Agilent 1200液相色谱仪的安装符合设计要求。
10.2 测试程序：10.2.1 资料/文件确认：10.2.1.1 接受标准：所有的文件和资料均为最终版本，是有效的、完整的并且都是可读的。
10.2.1.2 程序：检查文件是否为最终版、是否是有效的、完整的、可读的并填写Agilent 1200液相色谱仪的安装确认记录中的资料/文件检查部分。
10.2.2 安装位置检查：10.2.2.1 接受标准：安装环境应符合设备说明书的规定，应便于清洁与维护。
10.2.2.2 程序：核对设备的安装环境、电源、气路等等是否与说明书中要求的一致，是否便于维护与清洁。
10.2.3 部件检查：10.2.3.1 接受标准：部件的标签、型号与清单一致。
外观没有明显缺陷，安装牢固，具有相应的安全标识，便于维护。
10.2.3.2 程序：依据部件清单，逐一核对部件是否与清单一致。
采用目视法，确认仪器外观、材料及附属品。
测试每一部件已经正确安装。
10.2.4 软件检查：10.2.4.1 接受标准：软件型号，版本符合规定，并已经正确安装。
10.2.4.2 程序：记录软件的名称，版本，安装位置，并测试软件对仪器的控制是否正常。
10.2.5 操作规程：10.2.5.1 接受标准：操作规程已经得到批准。
10.2.5.2 程序：由设备使用部分负责起草操作规程，该规程已得到QA的批准。
10.3 I Q结论与评价：核对、分析数据，做出IQ结论与评价11 运行及性能确认：11.1 目的：确认设备运行正常。
11.2 在进行O/PQ前，确认IQ已经完成，没有未完成的偏差与变更。
操作SOP已经得到批准或草签。
11.3 测试项目于接受标准11.4.1.3 流动相准备在溶剂瓶中装入1L脱气的色谱级别的水，并标记为“100% 水A”在另一溶剂瓶中装入1L脱气的色谱级甲醇，并标记为“100%甲醇B”移取700ml高纯水和300ml色谱级甲醇置1l溶剂瓶中，标记为“70:30 水/甲醇泵头清洗液”11.4.2 开机准备将溶剂A的管路放入标记为A的溶剂瓶中将溶剂B的管路放入标记为B的溶剂瓶中将泵头清洗液的管路放入标记为“泵头清洗70:30 水/甲醇”的溶剂瓶中打开Agilent分离单元，使流动相流过待用的检测器。
执行干灌注，确保分离单元的所有管路中充满流动相。
执行泵头密封圈清洗，确保泵头密封圈清洗液能与甲醇和水混溶。
执行进样针清洗3到6次，确保进样针清洗液能与甲醇和水混溶；空气和流动相的混合物排出。
设置柱温为35℃。
对每一溶剂管路以5.0min的流速保持3钟进行一次湿灌注。
设置组分为50%的溶剂A和50%的溶剂B，然后以5ml/min湿灌注3分钟。
清洗进样其至少10倍定量环体积。
设置组分A为70%，组分B为30%，流速为1.0ml/min。
平衡色谱柱至少15倍柱体积。
11.4.3 柱温箱温度的准确度与稳定性测试：在该测试中柱温箱温度的准确度通过实测值与设定值的差的绝对值来评估。
温度的稳定性通过最大测量值与最小测量值的差的绝对值来评估。
11.4.3.1 设置流速为1.0ml/min11.4.3.2 设置柱温箱温度为25℃待温度稳定后，使用校验过的温度计测量并记录该温度11.4.3.3 设置柱温箱温度为25℃待温度稳定后，使用校验过的温度计测量并记录该温度11.4.3.4 每过至少4分钟测量并记录一次温度共5次11.4.3.5 接受标准：80℃的柱温时，测量值与设定值的差异必须 3.0℃。
25℃柱温时，测量值与设定值的差异必须 2.0℃且最大测量值与最小测量值的差的绝对值必须1.0℃。
11.4.4 样品室温度的准确度测试：在该测试中样品温度的准确度通过实测值与设定值的差来确定11.4.4.1 设置流速=1.0ml/min.11.4.4.2 设置样品室的温度为5.0℃。
待温度稳定。
11.4.4.3 使用数字温度计测量并记录4个不同位置的温度。
11.4.4.4 接受标准：4个不同位置的测量的所有测量数据都必须 2.0℃并且8.0℃11.4.5 系统精密度测试：系统精密度是通过运行6针同一浓度和进样体积的咖啡因溶液来确定的。
计算咖啡因保留时间和峰面积的RSD%，其应该在系统要求的最低限度内。
峰面积的RSD%给出进样的精密度，保留时间的RSD%给出系统的精密度。
11.4.5.1 色谱条件：流速1.0ml/min；柱温35.0℃；A:B=70：30；波长273nm；进样体积20μl11.4.5.2 序列：进74号位样品溶液6次11.4.5.3 接受标准：以咖啡因计算，保留时间和峰面积的RSD% 1.0%。
11.4.6 波长准确度测试：波长准确度是通过咖啡因的2个最大吸收波长来确定的。
咖啡因的最大吸收光谱为205nm和273nm11.4.6.1 色谱条件：流速1.0ml/min；柱温35.0℃；A:B=70：30；波长λ1=202nm λ2=203nmλ3=204nm λ4=205nm λ5=206nm λ6=207nm λ7=208nm λ8=270nm λ9=271nmλ10=272nmλ11=273nm λ12=274nm λ13=275nm λ14=276nm；进样体积20μl 11.4.6.2 序列：在每一波长下进一针74号位样品溶液11.4.6.3 接受标准：检测器的波长准确度必须在咖啡因的每个最大吸收波长(205nm 和273nm)的±2nm内。
11.4.7 残留测试：进2针空白溶液（流动相）开始残留测试，证明系统不存在未知峰或鬼峰，下来进三针0.01%的残留咖啡因标准溶液（0.4ug/ml的咖啡因）。
进4.0mg/ml 的咖啡因挑战性溶液。
接下来进三针空白溶液。
11.4.7.1 色谱条件：流速1.0ml/min；柱温35.0℃；A:B=70：30；波长273nm；进样体积20μl11.4.7.2 序列：11.4.7.3 接受标准：在后面的第一针空白图谱中的残留量0.01%，或未检出。
11.4.8 紫外-可见光检测器线性和灵敏度测试：检测器线性确定检测器在其吸收率范围内有11.4.9.3 接受标准：相关系数R2用来测量进样器的线性。
若R2进样器的线性符合规定。
进样器的准确度通过Y轴的截距与斜率的比值来确定。
若结果在规定的范围.内，进样器的准确度符合规定。
11.4.10 流速线性和准确度测试：流速的线性通过进尿嘧啶溶液（尿嘧啶在色谱柱上无保留）并改变流速来确定。
绘制死时间的倒数与流速的比值(死时间=尿嘧啶的保留时间) 11.4.10.1 色谱条件：柱温35.0℃；A:B=70：30；波长273nm；进样体积20μl11.4.10.2 序列：V：进样体积H：样品溶液的峰高AU11.4.12.4 接受标准：≤1×10-7g/ml11.4.13 梯度误差测试：11.4.13.1 色谱条件：流速1.0ml/ml；柱温35.0℃；波长254nm；色谱柱用双通或阻尼管代替；梯度表如下121314所有的附件部分的目录在此列出验证培训签到表附件一方案名称：方案编号：培训日期：培训人：Agilent1200液相色谱仪安装确认记录附件二1. 文件检查4. 偏差/变更清单：完成情况：□完成□未完成测试员/日期：审核人/日期：Agilent1200液相色谱仪运行/性能确认记录附件三1. 材料甲醇批号：_______生产厂家：___________级别：________有效期：__________ 丙酮批号：_______生产厂家：___________级别：________有效期：__________ 色谱柱：____________________________________________________________ 温度计编号：_______________校验有效期：_____________________2.3.4.测试员/日期：审核人/日期：5. 波长准确度测试6.7.测试员/日期：审核人/日期：8. 进样器线性和准确度测试9.10.11.12.13. 变更清单：完成情况：测试员/日期：审核人/日期：。
