电泳技术和电泳仪
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全自动电泳仪在测定血清蛋白质方面的应用
年级:2012级医学检验
学号:112523031
姓名:辛丽君 设计方案
i探讨用全自动血红蛋白电泳仪诊断地中海贫血的临床价值。
方法:对2013年3月〜2014年3月期间 在我院经地贫基因诊断确诊为地贫的375例患者的临床资料进行回顾性研究。我院用全自动血红蛋白电泳仪对这375例患者 进行了血生化指标检测,同时进行了 H b F碱变性试验以及地贫基因分析,检测其血红蛋白F的水平,比较用不同的方式诊断a、 卩 型地中海贫血以及复合型地贫的符合情况。在此基础上,评定用电泳仪诊断地贫的临床价值。
结果:血红蛋白电泳仪的检测结果与地贫基因分析结果的符合率比较无显著性差异(P>0.05)。与地贫基因分析结果比较,用电泳仪诊断a、0型地中海贫血与a 卩
复合型地贫的符合率分别为71.54%、78.31%与100%。与 H b F碱变性试验结果比较,用电泳仪检测时患者H b F > 2.0%的符合率为89.02%。
结论:用全自动血红蛋白电泳仪诊断地中海贫血具有较高的有效性、准确性与精确性。该方法值得在临 床上推广使用。
工作原理
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。
物质分子在正常情况下一般不带电,即所带正负电荷量相等,故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分子会成为带电的离子(或粒子),不同的物质,由于其带电性质、颗粒形状和大小不同,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,因此可使它们分离。若溶液里一个电量为Q的带电粒子 ,在场强为E 的电场中以速度υ 移动,则它所受到的电场力F 应为:
F =QE
根据斯托克司定律,在液体中泳动的球状粒子所受到的阻力F’ 为 :
1 六章
电泳技术和常用电泳仪
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习
题
习题参考答案
习 题 名词解释 选择题 简答题
一、名词解释
1.电泳
2.毛细管电泳的电场强度
3.蛋白质的等电点
4.电泳速度
5.迁移率
6.毛细管电泳技术
7.电泳淌度
8.迁移时间
9.毛细管电泳电渗流
10.焦耳热
11.电渗
12. 吸附作用
二、选择题
【A型题】 在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。
1.瑞典科学家A.Tiselius首先利用U形管建立移界电泳法的时间是( )
A.1920年
B.1930年
C.1937年
D.1940年
E.1948年
2.大多数蛋白质电泳用巴比妥或硼酸缓冲液的pH值是( )
A.7.2~7.4
B.7.4~7.6
C.7.6~8.0 2 D.8.2~8.8
E.8.8~9.2
3.下列有关电泳时溶液的离子强度的描述中,错误的是( )
A.溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响
B.离子强度越高、电泳速度越快
C.离子强度太低,缓冲液的电流下降
D.离子强度太低,扩散现象严重,使分辨力明显降低
E.离子强度太高,严重时可使琼脂板断裂而导致电泳中断
4.电泳时pH值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系,下列描述中正确的是( )
A.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越慢
B.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快
C.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快
D.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快
E.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快
5.一般来说,颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是( )
A.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快
B.颗粒带净电荷量越小或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快
C.颗粒带净电荷量越大或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快
第六章电泳技术和常用电泳仪习题参考答案
一、名词解释
1.电泳:指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。
2.毛细管电泳的电场强度:在给定长度的毛细管两端施加一个电压后所形成的电效应强度。
3.蛋白质的等电点:当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷(即净电荷为零),致使蛋白质分子在电场中不会移动,称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。
4.电泳速度:在单位时间内,带电粒子在毛细管中定向移动的距离。
5.迁移率:带电粒子在单位电场强度下的移动速度,常用μ来表示。
6.毛细管电泳技术:是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分之间迁移速度(淌度)和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
7.电泳淌度:带电粒子在毛细管中定向移动的速度与所在电场强度之比。
8.迁移时间:毛细管中,带电粒子在电场作用下作定向移动的时间。
9.毛细管电泳电渗流:在高电压下,溶液中的正电荷与毛细管壁表面的负电荷之间作用,引起流体朝负极方向运动的现象。
10.焦耳热:在高电场下,毛细管中的电解质会产生自热现象,称该热量为焦耳热。
11.电渗:电场中液体对于固体支持物的相对移动。
12.吸附作用:介质对样品的滞留作用。
二、选择题
【A型题】
1.C2.D3.B4.E5.A
6.B7.C8.E9.D10.A
11.E12.E13.D14.C15.E
16.A17.D18.C19.E20.B
21.C22.D23.E24.B25.D
26.E27.D28.B29.C30.A 31.B32.D33.C34.D35.B
36.C37.D38D
【X型题】
1.ABCE2.ABCD3.ABCDE4.ABCE5.ABCD
6.ABCE7.ABE8.ACE9.ABC10.ACDE
11.ABCD12.ABCDE13.ABCE14.ABCD15.BCDE
16.ABCDE17.BCDE18.ABCE19.ABDE20.ABCDE
电泳仪的工作原理
电泳仪的工作原理是利用电场的作用力将带电粒子分离的一种实验技术。整个电泳实验系统主要包括电泳槽、电源、电极、试样和检测系统等。
首先,将待测样品溶解在电泳缓冲液中,并将其注入电泳槽中。电泳缓冲液中含有离子,可提供电导率,维持电流稳定。
然后,将电源连接到电极上,创建一个直流电场。电极通常位于电泳槽两端,其中一个为阴极,另一个为阳极。在电场的作用下,电荷呈现一个由阴极向阳极的迁移方向。
接着,在初始状态下,待测样品中的带电粒子均匀分布。当开启电源后,带电粒子会受到电场的力作用,向着相反电荷的移动。正电荷粒子向阴极移动,负电荷粒子向阳极移动。
最后,在一定时间内,带电粒子根据电场力的大小和其自身特性,分别移动不同的距离。通过调节电场强度和电泳时间,可以实现粒子的分离和定量分析。
整个电泳过程中,通过检测系统可以实时监测带电粒子的分离情况,并将结果以各种方式输出,如电流曲线、色谱图等。
总结来说,电泳仪的工作原理是基于电场力和粒子电荷的相互作用。通过控制电场强度和时间,可以实现带电粒子的分离和测定。