高效液相色谱法测定降脂宁颗粒中药材荷叶中荷叶碱的含量
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荷叶提取物的质量标准研究
黄媛;高广慧
【期刊名称】《山东化工》
【年(卷),期】2016(45)9
【摘要】对荷叶提取物进行定性定量实验研究,建立荷叶提取物的质量标准.采用薄层色谱法对荷叶提取物中荷叶碱进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定荷叶碱的含量,色谱柱为泰克美C18(4.6 ×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%三乙胺(50∶50,冰醋酸调pH值=8.5 ~9.5),检测波长270nm,流速为1.0 mL/min.荷叶提取物中荷叶碱的薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;荷叶碱在浓度为0.053~104.98μg/mL范围内,线性关系均良好,相关系数为0.9999,平均回收率95.2%(RSD=4.1%);测定了9批荷叶提取物中荷叶碱的含量,并根据荷叶碱含量对荷叶提取物进行质量评估.所建立的薄层色谱法和含量测定方法简便、可靠,专属性强,可用于荷叶提取物的质量控制.
【总页数】4页(P66-69)
【作者】黄媛;高广慧
【作者单位】辽宁省食品检验检测院,辽宁沈阳 110015;辽宁省食品检验检测院,辽宁沈阳 110015
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7+2
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含量:不同地区荷叶中的荷叶碱含量不一,在0.275%-1.37%左右,一般含量在0.683%。
理化性质:荷叶生物碱碱性较弱,不能直接溶于水,但能与酸作用生成盐溶于水。
荷叶中生物碱类化合物种类繁多,根据母核结构的不同可将其分为三类:(1)阿朴啡类:包括荷叶碱(Nuciferine,N-去甲荷叶碱(N.nomuciferine),O-去甲荷叶碱(O.nornuciferine),莲碱(Roemerine),番荔枝碱(Anonaine),鹅掌楸碱(Lirioderine),N-去甲基亚美罂粟碱(N.norarmepavine)。
(2)单苄基异喹啉类:包括亚美罂粟碱(Armepavine)、衡州乌药碱(Coclaurine)、N-甲基异衡州乌药碱(N—Methylisococlaurine)、N一甲基衡州乌药碱(N-methycolaurine)、O一去甲基衡州乌药碱(O-Norcoclaurine)。
(3)去氢阿朴啡类:去氢荷叶碱(Dehydronuciferine),去氢莲碱(Dehydroroemerine)荷叶中主要的5种生物碱结构提取方法:(1)酸水提取法:a)称取荷叶粉10g,加入200mL pH2.5盐酸溶液,在80℃水浴恒温提取2.5h,过滤,滤渣再用100mL盐酸溶液提取1.5h,过滤,合并两次滤液,用旋转蒸发仪真空浓缩至50mL,过滤,滤液调pH值至2~3,用氯仿60mL分三次萃取,弃去氯仿层,以除去脂类和树脂。
取上层液体,加入2%NaOH调节pH至7左右,静置片刻,待肉眼可见沉淀,过滤,除去鞣质。
滤液再加2%NaOH调节pH至10.5,再用氯仿90 mL分3次萃取,合并氯仿液,在旋转蒸发仪中蒸发干燥后,用少量pH2.5 HCl溶液在超声波清洗机上洗脱生物碱,转移至100毫升容量瓶,定容,摇匀得荷叶总生物碱提取液,备用。
b) 称取荷叶粉末1g放入圆底烧瓶中,加入35ml蒸馏水,用0.5%盐酸调节pH2~3,圆底烧瓶上接40cm冷凝管,85℃冷凝回流提取2h,提取结束后,提取液用滤纸过滤,用30ml氯仿分两次萃取酸水液,弃去氯仿层。
HPLC测定荷叶中碱盐的含量阎娜;王炜华;李俶;刘成梅;王一铭【摘要】以荷叶为原料,建立一种荷叶碱盐含量的测定方法.运用高效液相色谱法测定,色谱柱为Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸盐缓冲溶液(0.05%磷酸-0.2%三乙胺-水)(25:75,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm.结果显示,荷叶碱盐在0.053~0.159 mg/mL(R2=0.999 2)范围内具有良好的线性关系,平均回收率为96.4%,RSD为0.05%.该方法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于荷叶碱盐成分的含量测定.%To establish an HPIC method for the determination of nuciferine salt on lotus leaf. Methods: Analyses were carried out on Hypersil ODS2(4.6 mm× 250 mm, 5 μm)column with acetonitrile:0.05% phosphoric acid-0.2% triethylamine-water (25 : 75,V/V)as the mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and the UV detection wavelength was 270 nm. Results indicated, Linearities of nuciferine salt was good in the ranges of 0. 053~0. 159 mg/mL (R2 =0.999 2). The average recovery was 96. 4%, and RSD was 0.05% (n = 6). The method was simple, accurate, sensitivity and reproducible. The method can be used to the determination of nuciferine salt.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2011(027)003【总页数】3页(P71-72,87)【关键词】荷叶碱盐;含量测定;高效液相色谱【作者】阎娜;王炜华;李俶;刘成梅;王一铭【作者单位】南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌济顺制药有限公司,江西南昌330008【正文语种】中文荷叶为睡莲植物莲(nelumbo nucifera gaertn)盛产于江西、福建、湖南和浙江等省。
荷叶中生物碱提取及纯化工艺研究作者:薛岩来源:《科学与财富》2017年第25期摘要:目的:通过分析整理近年来国内外关于荷叶的研究成果,对荷叶中生物碱类、黄酮类成分的提取纯化工艺做以研究。
方法:从化学成分、提取分离、质量评价方法和药理活性等多个方面对荷叶的研究现状进行了论述。
结果:荷叶中有效成分的提取纯化研究、质量控制方法的研究和基于主要药理活性的相关作用靶点确定等方面的研究都有待于加强,以期对荷叶植物资源进行深入研究和合理开发利用。
关键词:荷叶;生物碱;提取;纯化荷叶为睡莲科多年生水生植物莲(Nelumbo nucifera)的新鲜或干燥叶片,夏、秋二季采收,是一种常见的药食两用药材。
荷叶广泛分布于长江、黄河和珠江三大流域,在我国有着悠久的种植和应用历史。
我国历史上有很多文人雅士写下了关于莲的诗词,可见中国人对莲的喜爱。
在《神农本草经》当中也有关于荷叶、莲子、藕节、莲子心、莲须的记载,其中荷叶的主要活性成分为黄酮类和生物碱类物质。
随着现代社会的发展,对中药材荷叶的研究也在逐渐深入,荷叶中黄酮类成分多为槲皮素、异槲皮素、山柰酚以及其他苷元的单糖或多糖苷类化合物[1]。
荷叶的药理作用广泛且毒副作用小,具有较大的研究潜力。
现代研究表明荷叶具有降脂减肥、抗氧化、抗癌和治疗心血管疾病等多种生物活性,具有较好的药用价值[2]。
本文作者通过分析整理近年来国内外关于荷叶中生物碱的提取及纯化工艺的研究成果,对荷叶中生物碱类、黄酮类成分的相关研究做以下总结。
1 化学成分研究荷叶中的生物碱研究始于公元十九世纪,日本科学家自福田真雄[3]等从荷叶中分离出荷叶碱,O-去甲基荷叶碱以及莲碱 3个成分以来,荷叶生物碱的提取分离受到越来越多人的关注。
国内外学者先后从荷叶中分离得到二十多种生物碱类成分[4],主要分为以下几种:单苄基异喹啉类生物碱 6 种;阿朴啡类生物碱 6 种;氧化阿朴啡类 2 种;去氢阿朴啡类生物碱 4 种;原阿朴啡类生物碱以及双苄基异喹啉类生物碱3种。
高效液相色谱法同时测定荷叶中6种黄酮类成分梁佳文;刘艾洁;马冰馨;王有为【摘要】为了探索同时测定荷叶茶及饮片中6种黄酮类成分(芦丁、金丝桃苷、紫云英苷、槲皮素、山奈素和异鼠李素)含量的方法,本研究以8种不同的荷叶样本为材料,采用高效液相色谱分析法对6种黄酮类成分进行了同时测定.样品经过前处理,以0 5%甲酸-水(A)和0 1%甲酸-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,流速为1mL/min,柱温为25℃,进样量为20 uL,经Agilent TC-C18(2)(150 mm×4.6 mm,5 um)色谱柱分离,于360 nm波长处检测,结果显示,芦丁、金丝桃苷、紫云英苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素6种黄酮类成分分别在1.6 ~ 160、1.8 ~ 180、2.16 ~ 216、1.4~140、2.12~212、1.6~160 μg/mL浓度范围内有良好的线性关系(R2> 0.9992),其检测稳定性、重复性、日内精密度、日间精密度以及加样回收率的RSD均小于2%.进一步用该方法对不同来源的8个荷叶样本进行检测,结果显示荷叶样本中6种黄酮类成分含量以槲皮素最高,并且以样本G荷叶茶(购自G 公司,批号为130802)的槲皮素含量最高.本研究建立的同时测定6种荷叶黄酮类成分含量的方法快速、准确,可为荷叶有效成分的检测和质量控制提供技术支撑.【期刊名称】《植物科学学报》【年(卷),期】2015(033)006【总页数】6页(P861-866)【关键词】高效液相色谱;同时测定;荷叶;黄酮【作者】梁佳文;刘艾洁;马冰馨;王有为【作者单位】武汉大学药学院中药与天然药物研究所,武汉430071;武汉大学药学院中药与天然药物研究所,武汉430071;武汉大学药学院中药与天然药物研究所,武汉430071;武汉大学药学院中药与天然药物研究所,武汉430071【正文语种】中文【中图分类】Q946.8荷叶为莲科植物莲(NelumbonuciferaGaertn)的干燥叶,夏、秋季采收,晒至七、八成干时,除去叶柄,折成半圆形或折扇形,干燥即得。
HPLC法测定荷叶与莲房中荷叶碱的含量杨鹏【摘要】目的建立高效液相色谱法测定荷叶与莲房中荷叶碱含量的方法.方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水-三乙胺-冰醋酸(27∶70.6∶1.6∶0.8)为流动相;流速∶1.0 mL·min-1;柱温:25℃;检测波长:270 nm.结果荷叶碱在3.01 ~48.16 μg·mL-1范围内线性良好(r=0.999 0),平均回收率为96.97%,RSD=0.99% (n=6).结论该方法准确、简便、灵敏度高、重现性好,可用于荷叶与莲房中荷叶碱含量的测定.【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2014(033)004【总页数】2页(P208-209)【关键词】荷叶;莲房;荷叶碱;高效液相色谱法;含量测定【作者】杨鹏【作者单位】福建中医药大学药学院,福建福州350122【正文语种】中文【中图分类】R927.2荷叶是睡莲科植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)的叶片,在中国大部分地区均有分布。
传统医学认为,荷叶具有清暑利湿、升发清阳、清心去热、止血利水的作用[1]。
1991年11月中华人民共和国卫生部卫监发(1991)第45号文件中,荷叶被列入第二批“既是食品又是药品”的名单[2]。
据文献记载,荷叶中主要生理活性物质为生物碱和黄酮类物质[3],其生物碱具有抑制高胆固醇血症和动脉粥样硬化作用,其中荷叶碱被证实为荷叶中具有降脂减肥作用的活性成分[4],因此越来越受到重视。
为了控制荷叶的质量,往往把荷叶碱作为荷叶的指标性成分,对其进行含量测定。
查找文献[5]可知,主要采用高效液相色谱法测定含量,本文也建立了高效液相色谱法测定荷叶和莲房中荷叶碱含量的方法。
实验结果表明,该法准确度高,重现性好。
1.1 仪器 Agilent 1100液相色谱仪:Agilent E-clipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;分析天平(Sartorius AGCP225D);KQ-500B超声清洗仪(昆山市超声仪器有限公司);紫外分析仪(UV-1750)。
高效液相色谱法测定荷丹颗粒中荷叶碱的含量
朱良辉;汪军;尧享华
【期刊名称】《江西中医学院学报》
【年(卷),期】2005(17)6
【摘要】荷丹颗粒是由国家食品药品监督管理局国家标准的新药转正标准第28册中的荷丹片经改剂型而成的品种,全方由荷叶、丹参、山楂、番泻叶、补骨脂(盐炒)等五味药材组成,具有化痰降浊、活血化瘀之功效,用于高血脂症属痰浊夹瘀证候者等。
方中荷叶为君药,并且用量最大,加上本制剂的提取工艺为水提醇沉工艺,所以可以采用高效液相色谱法测定荷丹颗粒中荷叶碱的含量以控制该产品的质量。
【总页数】1页(P38)
【作者】朱良辉;汪军;尧享华
【作者单位】江西省药物研究所,南昌,330029;江西省药物研究所,南昌,330029;江西省药物研究所,南昌,330029
【正文语种】中文
【中图分类】TQ460.7+2
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绝大多数生物碱是利用溶剂提取法进行提取,而溶剂提取方法主要包括酸水提取法、醇类溶剂提取法、亲脂性有机溶剂提取法。
当然按具体操作可分为浸渍法、渗漉法、煎煮法、热回流法和连续回流法(索氏提取法)。
浸渍法是将处理过的药材用适当的溶剂在常温或温热的情况下浸渍以溶出其中成分。
该法一般是在常温下进行,对热敏性的物质的提取很有利,但所需时间长,效率低,尤其是水作溶剂时易发霉变质。
渗漉法是往药材粗粉中不断添加溶剂使其渗过粗粉,从渗漉筒下端流出浸提液的方法。
此方法浸出效果优于浸渍法,适用于有效成分含量低或贵重药材的提取。
但是费时较长,所用溶剂量比较大。
操作麻烦。
煎煮法是将中药粗粉加水加热煮沸,将中药成份提取出来的方法。
·此法简便.药中大部分成分可被不同程度的提出,但含挥发性及有效成分遇热易破坏的中药不宜用此法。
热回流法最大的特点在于通过溶剂的蒸发与回流,使得每次与原料接触的溶剂都是纯溶剂,从而大大提高了萃取动力,达到提高萃取速度和效果的目的.但提取效率不高,受热易破坏的成分不宜使用此方法。
连续回流法此法是利用索氏提取器,多次提取生物碱,可以反复利用溶剂,提取效率高,且操作方便。
连续提取法提取液受热时间长,因此对受热易分解的成分也不适用。
新技术酶法应用纤维素酶、果胶酶等作用于植物药材,使细胞壁及细胞质中的纤维素、果胶等物质降解,减小有效成分从细胞内向提取介质扩散的传质阻力,促进有效成分的提取。
这种方法的实质是通过酶解反应强化传质过程。
微波辅助提取法微波辅助提取法是使用合适的溶剂在微波反应器中从天然药用植物、矿物、动物组织中提取各种化学成分的技术和方法。
在提取过程中,一方面微波辐射过程使高频电磁波穿透溶剂到达物料内部。
由于吸收微波能细胞内部温度迅速上升,使其细胞内部压力超过细胞壁的膨胀承受能力,导致细胞破裂,胞内有效成分自由流出,在较低的温度条件下被溶剂捕获并溶解。
另一方面,微波所产生的电磁场加速了被提组分趋向溶剂界面的扩散速率,缩短了有效成分的分子由物料内部扩散到溶剂界面的时间,从而使浸提速率提高数倍,同时还降低了浸提温度,最大限度地保证浸提的质量超声波辅助提取技术根据超声波具有空化、粉碎、搅拌等特殊作用,在超声场中,物料吸收声能温度升高,有效成分的溶解加速。