细胞培养技术精品PPT课件

The polymerization and
depolymerization of F-actin
are essential for cell motility.
To assess whether the
observed arrangements of
the actin cytoskeleton could
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（2）上皮型细胞
扁平不规则多角形， 中有圆形核，细胞紧 密相连成单层膜。其 生长特点为细胞紧密 相连，呈“铺路石” 状
消化管外皮细胞、肝 、胰、肺泡上皮、血 管内皮等
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（3）其他贴附型细胞
①游走型细胞
在支持物上散在生 长，一般不连接成 片。细胞质经常伸 出伪足或突起，呈 活跃的游走或变形 运动，速度快而且 不规则
affect the migration of
shETS2- or lenti-
196b-treated AGS cells, we
examined cellular actin
structure with phalloidine
staining. The F-actin源自positive membrane
2.培养瓶、培养板、吸管、加样器等。
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五、细胞生长条件
（一）营养物质 细胞生长所需的营养物质包括氨基酸、维生素、碳水
化合物、无机离子以及各种促生长因子等。血清中含有多 种细胞生长所需的营养物质。
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四、细胞培养所需仪器设备及用品
（一）无菌操作环境 1.无菌操作区：只限于细胞培养，独立的区域或与外界隔离，
备有紫外杀菌条件（主要用于培养室空气、操作台、塑料 培养皿和培养板等表面消毒 ）； 2.个人：无菌服、无菌室专用鞋，并且带上口罩和帽子；
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（二）设备
1.超净工作台：为细胞操作提供无菌环境 2.显微镜：倒置显微镜、荧光显微镜等； 3.CO2培养箱； 4.干烤箱 5.高压锅 6.纯水器、离心机、液氮罐、天平等；
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（三）用品
1.滤器：细胞培养用的培养基、消化液中含有多种生物活性 物质，这些物质在高温和射线的照射下易失去功能，必须 用滤器除菌；
容易大量繁殖
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（二）生长特性
1、接触抑制：细胞进行体外培养时，分散贴壁生长的细胞一旦相互汇 合接触，即停止移动和生长的现象。细胞增殖到一定程度,也就是互 相挨在一起的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖, 这种现象就叫做接触抑制。（肿瘤细胞不受影响）
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细胞培养技术
➢细胞培养基础知识 ※ ➢相关实验仪器使用 △ ➢细胞学相关实验
➢细胞培养教学视频
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细胞培养基础知识
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一、概念：细胞培养是指从器官、组织中分离出 细胞并在体外模拟体内生理环境在无菌、适当的 温度和一定的营养条件下使之生长生存，维持结 构和功能的培养方法。（培养物是单个细胞或细 胞群）
protrusions
were
significantly increased in
addition to the F-actin
organization enhancement
in the shETS2- or lenti-
196b-treated AGS cells
Liao Y L, Hu L Y, Tsai K W, et al. Transcriptional regulation of miR-196b by ETS2 in gastric cancer cells[J]. Carcinogenesis, 2012: bgs031. IF=5.266
是指细胞附着于支持物表面生长。贴壁生长的细 胞从形态学上大体分为上皮细胞型和成纤维细胞型两 种
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（1）成纤维型细胞
细胞体呈梭形或不规则三角形或者是扇形，中央 有卵圆形核，胞质突起，其生长特点为不紧密相 连，多呈放射状，漩涡状或栏栅状。
成纤维细胞 、心肌、平滑肌、成骨细胞、骨髓 基质干细胞等
神经胶质细胞
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②多形型细胞
难以确定其规律和 稳定的形态
神经组织细胞
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2.悬浮生长 不需要支持物，而悬浮于培养基中生长，多呈
圆形。一般多来自于血液、脾或骨髓细胞。
悬浮型
见于各种造血系统 肿瘤细胞和血液细 胞
胞体圆形，不贴于 支持物上，呈悬浮 生长
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局限性：
组织和细胞离体以后，独立生存在人工培养环境中，与 体内环境相比，仍有很大差异。故实验结果不能推至体内 ，轻易做出与体内等同的结论。
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三、细胞培养特性 （一）生长方式
根据是否附于支持物上生长的特性，分为贴附生 长和悬浮生长。 1.贴附生长
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二、细胞培养的优点及局限性
优点： 能长时间直接观察活细胞的形态结构和生命活动，应用 领域广。 便于观察、记录、摄影，直接观察细胞变化。 可供研究的细胞种类广泛，从低等生物到高等动物，以 及人类；从胚胎到成体；从正常组织到肿瘤细胞皆可。 便于使用不同方法研究细胞。 培养细胞携带有与体内细胞同等的基因组，是分子生物 学和基因工程学的研究对象和组成部分。 可同时提供大量生物性状相似的实验对象，耗资少。 易于施加物理、化学和生物因素进行实验。 生物制品、基因工程制品、单克隆抗体生产必要手段。
2、密度抑制：细胞接触汇合成片后，虽发生接触抑制，只要营养充分， 细胞仍然能够进行增殖分裂，因此细胞数量仍在增多。但当细胞密度 进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养 的枯竭和代谢物的影响，则发生密度抑制（Density Inhibition）， 导致细胞分裂停止。（肿瘤细胞受影响）