血性脑脊液校正

脑脊液常规检查标准操作手册1。

目的：建立脑脊液常规检查的标准化操作;2.范围：适用于脑脊液的常规检查(物理检查、蛋白定性、细胞检查）;3。

标本采集：3。

1 标本种类：脑脊液，由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得.3.2 标本要求:将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查.每管收集1-2毫升。

3。

3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。

4.标本储存:立即送检。

5。

标本运输：室温运输。

5.标本拒收标准:污染，久置标本。

6。

器材试剂：5％苯酚溶液：取纯苯酚25ml，加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37℃温箱内1—2天,待完全溶解后，置棕色瓶内保存.细胞计数板;显微镜。

7.物理检查：7。

1 目测脑脊液颜色与透明度：（1)观察颜色。

(2）观察透明度。

（3）观察凝块或薄膜：收集脑脊液于试管内,静置12-24小时,正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。

7.2 结果判断与分析：7。

2.1颜色：正常脑脊液是无色透明的液体。

在病理情况下，脑脊液可呈不同颜色改变：(1）红色：常由于各种出血引起。

脑脊液中出现多量的红细胞,主要由于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血引起。

前者在留取三管标本时，第一管为血性，以后两管颜色逐渐变淡，红细胞计数结果也依次减少，经离心后上清液呈无色透明.当蛛网膜下腔或脑室出血时,三管呈均匀红色,离心后上清液显淡红色或黄色。

红细胞在某些脑脊液中5分钟后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。

(2)黄色:可因出血、梗阻、郁滞、黄疸等引起。

陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血，由于红细胞缺乏蛋白质和脂类对膜稳定性的保护，很易破坏、溶解，出血4-8小时即可出现黄色.停止出血后,这种黄色仍可持续3周左右。

椎管梗阻如髓外肿瘤，格林—巴利综合征，当脑脊液蛋白质量超过1。

5g/L时，颜色变黄，其黄色程度与蛋白质含量呈正比。

脑脊液检验考点总结考纲●标本采集与处理●理学检查●显微镜检查●化学与免疫学检查●病原生物学检查●质量控制与临床应用一、标本采集与处理（一）脑脊液检验的适应证和禁忌证适应证禁忌证有脑膜刺激征者颅内高压者可疑颅内出血者、脑膜白血病和肿瘤颅内转移者颅后窝占位性病变者原因不明的剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪者处于休克、全身衰竭状态者脱髓鞘疾病者穿刺局部有化脓性感染者中枢神经系统疾病椎管内给药治疗、麻醉和椎管造影者（二）标本采集与处理留取脑脊液标本于3个无菌试管中，每个试管1～2ml。

第一管做病原生物学检验；第二管做化学和免疫学检验；第三管做理学和细胞学检验。

标本采集后应立即送检，并于1h内检验完毕。

标本放置过久，可造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等，影响检验结果。

二、理学检查（一）颜色肉眼观察脑脊液颜色变化，分别以无色、乳白色、红色、棕色或黑色、绿色等描述。

正常脑脊液无色透明，新生儿胆红素较多可呈黄色。

如表：脑脊液常见的颜色变化及临床意义颜色原因临床意义无色正常脑脊液、病毒性脑炎、轻型结核性脑膜炎、脊髓灰质炎、神经梅毒红色出血穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血黄色黄变症陈旧性出血、黄疸、淤滞和梗阻、黄色素、胡萝卜色素、黑色素、脂色素增高如表：脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血的鉴别（二）透明度正常人CSF清晰透明。

病理状态，透明度改变：细胞数量和细菌。

病毒性脑膜炎：清晰透明或微浑。

结核性脑膜炎：毛玻璃样浑浊。

化脓性脑膜炎：脓性、块样浑浊。

当脑脊液白细胞超过300×106-/L时，可呈浑浊。

报告方式：清晰透明、微浑、浑浊三级报告。

（三）凝固性正常人CSF12～24小时以后不形成薄膜。

病理状态，蛋白质＞10g/L，薄膜或凝块。

化脓性脑膜炎静置1～2h即可出现凝块或沉淀物。

结核性脑膜炎静置12～24h内可见有薄膜或纤细的凝块形成。

蛛网膜下腔阻塞黄色胶样状Frion-Nonne（脑脊液同时存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离）。

脑脊液白细胞计数及分类标准操作程序【目的】用于脑脊液白细胞计数操作。

【该SOP文件变动程序】本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，请专业组长及科主任签字后生效。

【器材及试剂】1、细胞计数板。

2、白细胞稀释液。

【操作步骤】1、非血性标本：小试管内放入冰乙酸1-2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液3-4滴，数分钟后混匀充入计数池内，计数10个大方格内白细胞即为每微升内的白细胞数，如用升”表示，则乘以10人6.2、血性标本：对混浊或血性脑脊液则可用白细胞稀释液稀释数倍后，再滴入计数室计数。

用吸管吸取脑脊液20ul,加白细胞稀释液0.38ml，混匀后滴入计数室内，用低倍镜计数4大方格白细胞数，结果乘以50等于每微升内的白细胞数，如用升”表示，则乘以106.3、直接分类法白细胞计数后，将低倍镜换为高倍镜，直接在高倍镜下要据细胞核的形态分别计数单个核细胞（包括淋巴细胞及单核细胞）和多核细胞，应数1个白细胞，并以百分率表示。

若白细胞少于1个应直接写出单核、多核细胞的具体数字。

4、染色分类法如直接分类不易区分细胞时，可将脑脊液离心、沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清1滴，推片制成均匀薄膜，置室温或37° （温箱内待干，进行瑞氏染色后用油镜分尖。

如见有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤细胞等。

【参考区间】1、正常人脑脊液中无红细胞，仅有少量白细胞。

成人：（08）x 16/L儿童：（045）X16/L；新生儿：（0-30） x 16/L多为淋巴细胞及大单核细胞，两者之比约为7:3,偶见内皮细胞。

2、脑脊液白细胞分类计数中，淋巴细胞成人40%-80%，新生儿5%-35% ；单核细胞成人15%-45%，新生儿50%-90% ；中性粒细胞成人0-6%，新生儿0-8%。

【注意事项】1、计数应及时进行，以免脑脊液凝固使结果不准确。

2、细胞计数时，应注意新型隐球菌与白细胞的区别。

·144·脑脊液常规检查主要是对中枢神经系统疾病开展诊断及预后判断的重要检验项目，包括一般形状检查、细胞计数与分类、蛋白定性与定量、葡萄糖定量测定、微生物学检查、细胞学检查等检查内容，脑脊液由于采集难度较高，操作繁琐，检查结果易受到主观因素影响。

因此，在开展脑脊液常规检查时，需要严格做好质量控制，使实验的准确性、精确性、可靠性有效提高。

本文对脑脊液常规检查的内容及检查过程中相关注意事项进行总结，论述如下。

1标本收集与处理流程开展脑脊液检查时，需要抽取脑脊液3管，收集时应选择带盖的无菌管，以避免外界细菌感染脑脊液。

第一管脑脊液开展细菌培养，第二管脑脊液开展化学检查、免疫学检查，第3管开始一般性状检查、细胞学检查。

脑脊液标本采集后要立即送检，采集至送检时间应控制在1小时以内，避免标本采集后放置过久，脑脊液的性质发生改变，对检验结果准确性造成不良影响。

2一般形状检查标本为血性时主要是由于穿刺损伤出现的新鲜出血，蛛网膜下腔出血的陈旧性出血产生。

想要对出血性状进行检查时，可根据三管试验观察，若前后三管红色逐渐变浅则为新鲜出血，而红色均匀一致则为陈旧性出血。

离心处理后，上清液颜色透明无色者为新鲜出血，而呈现黄色或淡红色时为陈旧性出血。

穿刺损伤出现的新鲜血液，经上清液隐血实验为阴性，而观察红细胞形态与白细胞数时均无改变。

蛛网膜下腔出血开展隐血试验时为阳性，红细胞形态呈现锯齿状、皱缩，白细胞计数可出现反应性增加。

蛛网膜下腔梗阻会因脑脊液长期滞留，检查时，蛋白含量＞1.5g/L，颜色变黄，且蛋白含量越高颜色越黄，达到30~50g/L时，脑脊液可自凝，出现黄色胶冻状。

脑脊液胆红素＞8.5μmol/L时，可被黄染。

穿刺出血后脑脊液可检出红细胞，出现液体微微浑浊，而白细胞数＞300×106/ L时可见明显浑浊。

3细胞计数与分类血性脑脊液发生后应校正白细胞计数，主要是以白细胞与红细胞1：700比例，根据红细胞数量对白细胞进行估算。

脑脊液检验一、脑脊液常规检验(一)外观检验脑脊液颜色检验1．英文或缩写：Color of Cerebrospinal-Fluid，CSF。

2．标本采集：临床医师取脑脊液2-3 ml，立即送检。

3．正常参考值：正常脑脊液为无色。

4．临床意义：红色：排除穿刺性损伤如标本为血性，为蛛网膜下隙(下腔)出血，应注意区别：(1)将血性脑脊液离心(1500r/min)沉淀后，如上层液体呈黄色，隐血试验阳性，多为蛛网膜下腔出血，且出血时间已超过4 小时。

如上层液体澄清无色，红细胞均沉淀管底，多为穿刺性损伤或病变所致的新鲜出血。

(2)红细胞皱缩：多见于陈旧性出血，但不能排除穿刺性损伤引起的出血。

黄色：见欲陈旧性出血，也可见于脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留和黄疸患者。

米泔样：由于白(脓)细胞增多的缘故，见于各种化脓性细菌感染引起的脑膜炎。

绿色：见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌感染引起的脑膜炎。

褐或黑色：见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。

5．注意事项：标本送检必须及时，收到标本应立即检验，久置可使细胞破坏、葡萄糖分解、病原菌破坏或溶解。

为了避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用EDTA 盐抗凝。

脑脊液透明度检验1．英文或缩写：Diaphaneity of CSF。

2．标本采集：临床医师取脑脊液2-3 ml，立即送检。

3．正常参考值：正常脑脊液应清晰透明。

4．临床意义：化脓性脑膜炎时，可呈乳白色浑浊；结核性脑膜炎时呈毛玻璃样浑浊。

5．注意事项：标本送检必须及时，收到标本应立即检验；为了避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用EDTA 盐抗凝。

凝块和薄膜检验1．英文或缩写：略。

2．标本采集：临床医师取脑脊液2-3 ml，立即送检。

3．正常参考值：正常脑脊液无凝块或薄膜。

4．临床意义：化脓性脑膜炎的脑脊液静置12-24 h，可见倒置漏斗状的薄膜形式。

脑梅毒、脊髓灰质炎时，可有絮状凝块形式。

5．注意事项：标本送检必须及时，收到标本应立即检验，不宜使用抗凝剂。

脑脊液常规白细胞计数简易估算技巧【关键词】脑脊液；白细胞计数脑脊液常规白细胞计数方法是：（1）直接计数[1]：小试管内放入冰醋酸1~2滴，转动试管，使内壁沾有冰醋酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液3~4滴，数分钟后，混匀充入计数池，按白细胞计数法计数。

计数两个计数池内四角大格和中央大格共10大方格内白细胞总数即为1 μl 脑脊液中白细胞总数。

如细胞太多，可用白细胞稀释液稀释后按上述方法计数，再换算成每升白细胞数。

（2）临床上，我们常常遇到因穿刺损伤血管而致血性脑脊液，此时细胞总数已经无意义。

白细胞计数需校正后才有意义，校正公式如下：脑脊液白细胞数/L=血性脑脊液白细胞数/L脑脊液红细胞数/L×（外周血中白细胞数/L÷外周血中红细胞数/L）[2]。

我院脑外科是兰州军区神经外科中心，每天脑脊液标本有20~30份之间，其中大部分为无色透明的脑脊液，且大部分为正常脑脊液。

对大部分澄清透明的正常标本，我们现在用两种方法计数白细胞。

第一种是常规方法，即直接在计数池里面计数。

另一种方法是将脑脊液吸取后，快速调整视野计数，如果10个视野白细胞总数量比较多，超过10个，则要在计数池中计数较为准确。

如果加起来白细胞很少，<5个或更少，则可以认为此份脑脊液白细胞数目正常，直接估报为正常结果。

我们用这两种方法对500份澄清透明的脑脊液白细胞计数比较，结果只有17份标本白细胞数量比较多，超过10个，需在计数池中计数才能准确。

剩余483份标本每份直接在玻片上计数，10个视野白细胞总数小于5个，我们用两种方法计数，设定在玻片上计数和在计数池里面计数之差为d，二者对比结果如表1。

表1 483份标本用两种计数结果比（略）假设H0：两种方法测定脑脊液中的白细胞数无差异。

H1：两种方法测定脑脊液中的白细胞数有差异。

设定α=0.05，1β=0.90。

计算的t值等于Zα=0.997 2，Zβ=2.667 5。

查正态分布表，双侧Z0.05=1.960 0，Z0.90=1.644 9。

第十二章脑脊液检验一、标本采集与处理（一）脑脊液检验的适应证和禁忌证（二）标本采集与处理留取脑脊液标本于3个无菌试管中，每个试管1～2ml。

第一管做病原生物学检验；第二管做化学和免疫学检验；第三管做理学和细胞学检验。

标本采集后应立即送检，并于1h内检验完毕。

标本放置过久，可造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等，影响检验结果。

二、理学检查（一）颜色肉眼观察脑脊液颜色变化，分别以无色、乳白色、红色、棕色或黑色、绿色等描述。

正常脑脊液无色透明，新生儿胆红素较多可呈黄色。

如表：脑脊液常见的颜色变化及临床意义如表：脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血的鉴别（二）透明度正常人CSF清晰透明。

病理状态，透明度改变：细胞数量和细菌。

病毒性脑膜炎：清晰透明或微浑。

结核性脑膜炎：毛玻璃样浑浊。

化脓性脑膜炎：脓性、块样浑浊。

当脑脊液白细胞超过300×106-/L时，可呈浑浊。

报告方式：清晰透明、微浑、浑浊三级报告。

（三）凝固性正常人CSF12～24小时以后不形成薄膜。

病理状态，蛋白质＞10g/L，薄膜或凝块。

化脓性脑膜炎静置1～2h即可出现凝块或沉淀物。

结核性脑膜炎静置12～24h内可见有薄膜或纤细的凝块形成。

蛛网膜下腔阻塞黄色胶样状Frion-Nonne（脑脊液同时存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离）。

神经梅毒有小絮状凝块。

（四）比密脑脊液比密为：腰椎穿刺1.006～1.008；脑室穿刺1.002～1.004；小脑延髓池穿刺1.004～1.008。

凡是脑脊液中的细胞数量增加和蛋白质含量增高的疾病，其比密均增高。

常见于中枢神经系统感染、神经系统寄生虫病、脑血管病、脑肿瘤、脑出血、脑退行性变和神经梅毒等。

三、显微镜检查1.检测原理（1）清亮或微浑的脑脊液标本，可以直接计数细胞总数，或稀释后再直接计数，将结果乘以稀释倍数。

（2）可采用直接计数法计数白细胞，或稀释后再直接计数，将结果乘以稀释倍数。

（3）白细胞直接计数后，在高倍镜下根据白细胞形态特征进行分类计数。

脑脊液检验正常值及临床意义脑脊液检验正常值及临床意义一、常规检验：1、（CSF）颜色检查［正常参考值］无色水样液体。

［临床意义］1 .红色：常见于蛛网膜下腔出血、脑出血、硬膜下血肿等。

如腰椎穿刺时观察到流出的脑脊液先红后转无色，为穿刺损伤性出血。

2 .黄色：见于陈旧性蛛网膜下腔出血及脑出血、包囊性硬膜下血肿、化脓性脑膜炎、脑膜粘连、脑栓塞；椎管梗阻；脑、脊髓肿瘤及严重的结核性脑膜炎；各种原因引起的重症黄疽；心功能不全、含铁血黄素沉着症、胡萝卜素血症、早产儿等。

3 .乳白色：见于化脓性脑膜炎。

4 .微绿色：见于绿脓假单胞菌性脑膜炎、甲型链球菌性脑膜炎。

5 .褐色或黑色：见于中枢神经系统的黑色素瘤、黑色素肉瘤等。

2、透明度检查［正常参考值］清晰透明。

［临床意义］1 .微混：常见于乙型脑炎、脊髓灰质炎、脑脓肿（未破裂者）。

2 .混浊：常见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎等。

3 .毛玻璃状：常见于结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎等。

4 .凝块：见于化脓性脑膜炎、脑梅毒、脊髓灰质炎等。

5 .薄膜：常见于结核性脑膜炎等。

3、细胞计数［正常参考值］成人：（0-8）X106/L;儿童：（0-15）X106/L;新生儿：（0-30）X106/L。

［临床意义］1 .细胞数明显增高（＞200X106/L）:常见于化脓性脑膜炎、流行性脑脊髓膜炎。

2 .中度增高（＜200X106/L）:常见于结核性脑膜炎。

3 .正常或轻度增高：常见于浆液性脑膜炎、流行性脑炎(病毒性脑炎)、脑水肿等。

4、蛋白定性试验［正常参考值］阴性。

［临床意义］1 .脑脊液蛋白明显增高(++以上)：常见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、脊髓腔等中枢神经系统恶性肿瘤及其转移癌、脑出血、蛛网膜下腔出血及梗阻等。

2 .脑脊液蛋白轻度增高(+--++):常见于病毒性脑膜炎、霉菌性脑膜性、乙型脑炎、脊髓灰质炎、脑膜血管梅毒、麻痹性痴呆、脑血栓形成等。

5、葡萄糖半定量试验［正常参考值］1-5管或2-5管阳性。

脑脊液常规检查标准操作手册1.目的：建立脑脊液常规检查的标准化操作；2.范围：适用于脑脊液的常规检查(物理检查、蛋白定性、细胞检查)；3.标本采集：3.1 标本种类：脑脊液，由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。

3.2 标本要求：将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。

每管收集1-2毫升。

3.3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。

4.标本储存：立即送检。

5.标本运输：室温运输。

5.标本拒收标准：污染，久置标本。

6.器材试剂：5%苯酚溶液：取纯苯酚25ml,加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37℃温箱内1-2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。

细胞计数板；显微镜。

7.物理检查：7.1 目测脑脊液颜色与透明度: (1)观察颜色。

(2)观察透明度。

(3)观察凝块或薄膜：收集脑脊液于试管内，静置12-24小时，正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。

7.2 结果判断与分析：7.2.1颜色：正常脑脊液是无色透明的液体。

在病理情况下，脑脊液可呈不同颜色改变: (1)红色：常由于各种出血引起。

脑脊液中出现多量的红细胞，主要由于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血引起。

前者在留取三管标本时，第一管为血性，以后两管颜色逐渐变淡，红细胞计数结果也依次减少，经离心后上清液呈无色透明。

当蛛网膜下腔或脑室出血时，三管呈均匀红色，离心后上清液显淡红色或黄色。

红细胞在某些脑脊液中5分钟后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。

(2)黄色：可因出血、梗阻、郁滞、黄疸等引起。

陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血，由于红细胞缺乏蛋白质和脂类对膜稳定性的保护，很易破坏、溶解，出血4-8小时即可出现黄色。

停止出血后，这种黄色仍可持续3周左右。

椎管梗阻如髓外肿瘤，格林-巴利综合征，当脑脊液蛋白质量超过1.5g/L时，颜色变黄，其黄色程度与蛋白质含量呈正比。