培养基筛选的利器试验设计DesignofExperimentDOE-Sartorius

山葡萄酒MLF乳杆菌最佳培养基的筛选刘东旭;高鹏飞;丁玉萍;薛秀珍【摘要】以OD600值作为评价指标,对MRS和改良M17培养基进行比较选择出基础培养基,在基础培养基中添加不同的果汁探究不同果汁对MLF乳杆菌的影响;采用单因素和正交试验对果汁加量、碳源、总氮源和盐液A进行优化,得出最佳组合为:大豆蛋白胨为5.4g/L,胰蛋白胨为5.4g/L,牛肉蛋白胨为3.6g/L,酵母浸粉为3.6g/L,K2 HPO4为0.7g/L,抗坏血酸为0.5g/L,盐液A为2g/L,甘油为8g/L,乳糖为8g/L,葡萄汁为130g/L.此培养基培养MLF乳杆菌,其培养液的OD600值比改良M17培养基高大约32.2%.【期刊名称】《佳木斯大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(035)006【总页数】5页(P996-1000)【关键词】山葡萄酒;苹果酸-乳酸发酵菌;培养基;筛选【作者】刘东旭;高鹏飞;丁玉萍;薛秀珍【作者单位】佳木斯大学生命科学学院,应用微生物研究所,黑龙江佳木斯 154007;佳木斯大学生命科学学院,应用微生物研究所,黑龙江佳木斯 154007;佳木斯大学生命科学学院,应用微生物研究所,黑龙江佳木斯 154007;佳木斯大学生命科学学院,应用微生物研究所,黑龙江佳木斯 154007【正文语种】中文【中图分类】Q93-3;TS261.4葡萄酒的酿造过程包括主发酵和后发酵两个阶段，主发酵主要由酵母菌将糖转化为酒精，完成酒精发酵(Alcoholic Fermentation AF)，后发酵主要由乳酸菌将苹果酸转化为乳酸，完成苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation, MLF)[1]。

苹果酸-乳酸发酵是酒精发酵结束后，乳酸菌以L-苹果酸(二元酸)为底物，在苹果酸-乳酸酶催化下转变成L-乳酸(一元酸)和CO2的过程[2]。

二元酸向一元酸的转化不光可以使果酒的总酸下降，酸涩感降低，同时也因乳酸在感官上更加柔和圆润，使得葡萄酒的口感得到明显的改善[3]。

应用正交设计筛选小叶章诱导培养基的配方张玉;冷海楠;徐明怡;倪红伟;王丽媛【摘要】Young stem from Calamagrostisangustifolia was used as explants. The effects of three kinds of hormones including 6-BA, TDZ, and NAA on Calamagrostisangustifolia were studied. The proper induction medium isselected out by orthogonal design, moreover, the kind and suitable level of hormone were ascertained.The results show that 6-BA is the critical factor for induction, the optimummedium forinitiation is: 1/2MS +6 -BA 0.5 mg·L-1+TDZ0.1mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1.%以小叶章的茎段作外植体，采用正交设计法，考察6-BA、TDZ、NAA三种激素对小叶章初代培养产生的影响，确定适宜的激素种类及水平，优化筛选出适宜小叶章的诱导培养基．研究表明，激素6-BA是茎段诱导的关键因素；适宜小叶章初代培养的培养基配方为：1/2MS+6-BA0.5 mg·L-1+ TDZ0.1mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1。

【期刊名称】《国土与自然资源研究》【年(卷),期】2016(000)002【总页数】3页(P87-89)【关键词】小叶章;正交设计;诱导培养基【作者】张玉;冷海楠;徐明怡;倪红伟;王丽媛【作者单位】黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室，哈尔滨150040;黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室，哈尔滨150040;黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室，哈尔滨150040;黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室，哈尔滨150040;黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室，哈尔滨150040【正文语种】中文【中图分类】S188小叶章（CalamagrostisangustifoliaKom.）又名苫房草，是禾本科拂子茅属多年生根茎型草本植物，在我国主要分布于东北、华北、内蒙古等地区的平原低洼湿地，是三江平原典型草甸、沼泽化草甸的建群植物和优势植物［1-4］。

雨生红球藻培养基筛选及诱导条件优化作者：张勇李林品吴秋瑾来源：《科技风》2022年第01期摘要：目的：本文通过筛选有利于雨生红球藻营养生长的培养基，优化雨生红球藻内虾青素的积累条件。

方法：选用7种培养基对4株雨生红球藻分别进行培养，同时筛选出最适于4种藻株营养生长的培养基。

探究雨生红球藻在光胁迫、缺氧、高盐3种条件下诱导虾青素积累情况。

结果：4个不同雨生红球藻藻株在配方A培养基中的生物量比其他6种试验培养基的生物量高1.54-6.29倍;在优势培养基配方A中，HP3的生物量最大，可达到6.03×106个/mL;HP3在缺氮的胁迫条件下，虾青素产量最高，可达到20.96mg/L，比光诱导获得的最佳虾青素产量高0.96倍，比高盐获得的最佳虾青素产量高1.53倍。

结论：该研究中最适于试验藻株营养生长的培养基是配方A，当胁迫条件为缺氮9%时虾青素积累量最大。

关键词：雨生红球藻;虾青素;培养基筛选;诱导条件优化近年来，随着我国经济的发展和人民生活水平的提高，人们对健康的意识也在不断提高。

水是水生生物中最重要的组成部分之一。

雨生红藻具有良好的生物学特性，营养价值高及无毒等优点，是一种很有前景的生物可以利用资源。

雨生红藻是自然界中广泛存在的绿藻，属于团藻目红藻科。

雨生红藻又被称为湖生红藻或湖生雪球藻，被公认为自然界中生产天然虾青素的最好生物，因此利用该藻菌提取虾青素具有很大的应用前景已经成为当前国际研究的热点。

虾青素是一种天然的水溶性高分子化合物，具有生物活性。

主要存在于藻类、细菌以及各种植物中。

在自然界中，有许多氨基酸被发现并应用到生产生活与食品领域上;虾类可以作为营养添加剂和保健品等;同时也可利用其自身所具备的酶特性来调节细胞内pH值以增强对微生物生长发育影响而发挥作用。

目前在我国研究较多的是虾类中提取出来鱼粉和甲壳素两种物质作为提取虾青素原料，但这种方法对环境要求较高，且易受菌种的影响。

而雨生红球藻作为提取虾青素的一种重要来源，在很多领域有着巨大价值。

酵母菌选育、最适培养基筛选及菌种发酵培养[摘要]在无菌条件下，用紫外线对酵母菌(yeast)进行不同时长的照射诱变处理，选出合适的诱变菌种进行振荡培养。

经振荡培养后的诱变菌种运用正交试验设计的方法采用四个因素三个水平选出最适的菌种培养基，进行进一步的发酵培养。

在发酵罐中加入最适培养基成分和合适的酵母菌诱变菌种进行发酵扩培，最终获得大量的菌种和发酵产物。

[关键词]酵母菌，紫外线，最适培养基，正交试验设计，发酵培养面包酵母(Saccharomyces cerevisiae)是一种单细胞微生物，是酵母菌的一种,它含蛋白质50％左右，氨基酸含量高，富含B族维生素，还有丰富的酶系和多种经济价值很高的生理活性物质。

几千年前人类就用面包酵母发酵面包和酒类，在现代食品工业方面，广泛用作人类主食面包、馒头、包子、饼干糕点等食品的优良发酵剂和营养剂。

本实验选用的物理诱变因子为紫外线，DNA能强烈吸收紫外线，尤其是碱基中的胸腺嘧啶，从而在形成二聚体，改变DNA结构，引起基因突变。

本实验的面包酵母菌经不同时长的紫外线诱变处理，培养出的适合的诱变菌种进行最适的菌种培养基的筛选和发酵培养。

最适菌种培养基的筛选是通过正交实验设计进行的。

正交试验设计(Orthogonal experimental design)是研究多因素多水平的又一种设计方法，它是根据正交性从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验，这些有代表性的点具备了“均匀分散，齐整可比”的特点，正交试验设计是分式析因设计的主要方法,是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。

正交表是一整套规则的设计表格，用L为正交表的代号，n为试验的次数，t为水平数，c为列数，也就是可能安排最多的因素个数，本实验采用了四因素三水平进行最适培养基的筛选。

选出合适的诱变菌种和适合诱变的酵母菌生长的培养基后，便可以能过发酵罐进行发酵培养，分时段观察记录发酵过程中的PH，溶氧，菌种数。

绘制出面包酵母的生长曲线１材料与方法1.1实验材料菌种：面包酵母菌仪器：高压蒸汽灭菌锅，超净工作台，光学显微镜，恒温培养摇床，分析天平，小型发酵罐用品：枪头及1mL和0.5mL移液器，三角瓶，试管，玻璃涂棒，平皿，血球计数板，酒精灯，棉塞，试管架，盖玻片，记号笔试剂：酵母膏，蛋白胨，(NH4)SO4，葡萄糖PDA培养基，PDA液体培养基（不加琼脂）：去皮马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克、自来水1000毫升、自然PH [其做法是称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，再加10～20g葡萄糖和17～20g琼脂，，高压蒸气（121℃）灭菌20分钟，冷却后贮存备用。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010984799.8(22)申请日 2020.09.18(71)申请人 中国药科大学地址 210009 江苏省南京市鼓楼区童家巷24号(72)发明人 储卫华　衡星　(74)专利代理机构 南京经纬专利商标代理有限公司 32200代理人 唐循文(51)Int.Cl.C12Q 1/527(2006.01)C12Q 1/02(2006.01)C12R 1/22(2006.01)(54)发明名称一种利用微生物筛选三甲胺裂解酶抑制剂的方法(57)摘要本发明涉及微生物，具体涉及一种利用微生物筛选三甲胺裂解酶抑制剂的方法；一种微生物三甲胺裂解酶抑制剂筛选方法，其特征在于包括以下步骤：将指示菌肺炎克雷伯菌ATCC 13883接种于只含胆碱的特定培养基中；将待筛选物质以低于最低抑菌浓度加入到上述培养基中，37℃，厌氧培养12‑48小时；取培养液测定三甲胺的含量，以未加待检物的培养液为对照，三甲胺的含量低于对照组，说明该物质能够抑制微生物转化胆碱生成三甲胺，是一种三甲胺裂解酶抑制物；该方法不仅具有快速简便，容易操作，试剂需要量少，可进行高通量筛选、且结果准确的优点。

权利要求书1页 说明书3页 附图1页CN 112029818 A 2020.12.04C N 112029818A1.一种微生物三甲胺裂解酶抑制剂筛选方法，其特征在于包括以下步骤：（1）将指示菌肺炎克雷伯菌ATCC 13883接种于特定培养基中；（2）将待筛选物质以低于最低抑菌浓度加入到上述培养基中，37℃，厌氧培养12-48小时；（3）取培养液测定三甲胺的含量，以未加待检物的培养液为对照，三甲胺的含量低于对照组，说明该物质能够抑制微生物转化胆碱生成三甲胺，是一种三甲胺裂解酶抑制物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特点在于所述的特定培养基为每升培养液中含有：KH 2PO 4 1 g ,K 2HPO 4 2.5 g , (NH4)2SO4 2 g , MgSO40.1 g 以及2.0834g胆碱。

蒙特罗番茄腋芽组培培养基的筛选DOI：10.14088/jki.issn0439-8114.2014.20.062Screening Tissue Culture for Axillary Buds of Montero Tomato VarietyYANGBo1，YU Lian-hai2 ，GE Yan-nan2，LI Xin-jiang1 (1.Jilin Agricultural Science and TechnologyUniversity ，Jilin 132101 ，Jilin ，China;2. Jilin City Fengman District Agriculture andVegetable Technology Promotion Center ，Jilin 132013 ，Jilin ，China )：In order to improve the propagation speed of Montero tomato seedlings ，different mediumformulations were used to screen tissue culture of axillary buds. The results showed that axillary buds after disinfection were cut into 0.2 〜0.3 mm size and seeded into the induction medium of MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA +1.0 mg/L GA3 ，the rate of induction was 90%. The seedlings after germination were seeded into the proliferation medium of MS+0.5mg/L 6-BA +0.04 mg/L NAA and had higher proliferation index. Using 1/2 MS+ 0.8 mg/L IBA+3 g/L activated carbon as rooting medium，the effects of rooting was the best with therooting rate of 100%.蒙特罗番茄是一种早熟的杂交一代新品种，适合于早春及反季节温室栽培。

Mixture与响应面法结合开发BHK-21细胞无血清悬浮培养基汪梁;刘旭平;谭文松【摘要】This study is to optimize the suspended serum-free medium for BHK-21 cells by combining Mixture experiment design with response surface analysis(RSA). Based on 6 media A-F of known formulation in the laboratory, the optimal combination of the medium withA:B:C:D:E:F=0:0:11:0:9:0 was screened by the Mixture test. The contents of several key constituents in the medium were optimized by RSA, and the optimal concentrations of glutamine, tyrosine, bovine serumalbumin(BSA)and calcium ion were 3 mmol/L, 2.5 g/L, 0 g/L and 0 mmol/L respectively. The serum-free medium effectively supported the suspending growth of BHK cells. The maximum viable cell density of BHK cells in cell suspension culture reached 140.21×105 cells/ml, which was 1.95 times in basal medium. The suspended serum-free medium for BHK-21 cells was developed by combining Mixture experiment design with RSA, which lays a foundation for the industrial production of foot-and-mouthdisease(FMD)vaccine while using BHK-21 cells.%采用Mixture与响应面实验设计相结合的方法开发BHK-21细胞无血清悬浮培养基。

半夏愈伤组织诱导与分化最适培养基筛选林秋月;曾万勇;李天佩;李睿;陈平;李金华【摘要】以半夏[Pinellia ternata (Thunb.) Breit.]叶片为试验材料,研究不同培养基配方对半夏叶片的诱导脱分化、愈伤组织增殖及分化的影响.结果表明,适合半夏叶片诱导脱分化的培养基为MS+0.8 mg/L6-BA+1.8 mg/L NAA+0.1 mg/L 2,4-D;适合愈伤组织增殖的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L2,4-D;适合分化生长的培养基为MS+0.8 mg/L 6-BA +0.2 mg/L NAA+3.0 mg/L 2,4-D.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2014(053)013【总页数】4页(P3183-3186)【关键词】半夏[Pinellia ternata(Thunb.) Breit.];组织培养;激素;愈伤组织【作者】林秋月;曾万勇;李天佩;李睿;陈平;李金华【作者单位】武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023;武汉轻工大学生物与制药工程学院,武汉430023【正文语种】中文【中图分类】Q943.1半夏［Pinellia ternata （Thunb.）Breit.］别名旱半夏、三叶半夏、半月莲，为天南星科半夏属多年生草本植物，以块茎入药，能燥湿化痰、降逆止咳，生用消疖肿，主治咳嗽痰多、恶心呕吐等［1］。

半夏含半夏生物碱、半夏蛋白、β－谷甾醇、刺激性成分草酸钙、多种氨基酸等，还含有挥发油、游离有机酸、3，4－二羟基苯甲醛、淀粉、胆碱和葡萄糖苷等多种成分。

半夏生物碱有镇痛、抗血栓形成等作用；半夏蛋白、β－谷甾醇有抗肿瘤作用。

因此，备受国内外的关注，需求量较大［2］。