API 3000 LCMSMS操作培训手册
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UPLC/MS/MS操作流程一、开机1)分别打开液相色谱、质谱和电脑电源,此时质谱内置的CPU会通过网线与电脑主机建立通讯联系,这个时间大约需要2min;2)双击桌面上的“MassLynxV4.1”图标进入质谱软件。
此时,如果进入软件时出现提示“The embeded system is not responding. The system will run in standalone mode”, 则说明质谱内置的CPU与电脑主机的通讯联系还未建立,请稍等后再进入软件;3)点击主界面左侧的“MS Tune”图标,进入质谱调谐窗口,在“Options”下拉菜单里点击“Pump”此时机械泵将开始工作,同时分子涡轮泵会开始抽真空;4)点击真空状态图标,检查真空规的状态,确认真空达到要求(左面真空规的示数显示1.00e-4);5)确认氮气气源已打开,输出压力为90-200psi之间;经常使用的情况下,质谱处于开机状态,使用之前只需要打开氮气总阀和增压阀,调节输出压力即可。
二、创建项目Project为了便于进行数据管理,个人可以创建不同的项目(Project),项目的后缀为.pro,每个项目都有对应的子目录进行相应文件的管理:1)从主菜单中选择“File>Project Wizard”,会引导你去创建一个新的项目;2)输入项目名称及描述,点击Next进入下一步;3)选择“Current project as template”,将会把所使用的项目里的方法拷贝到你新建的项目中去,点击Finish;通过“Existing project as template”选择目标模板,“001.pro”中质谱调谐窗口参数为常规参数,可作为第一次建立项目时的模板;4)新的项目会被创建,而且软件会自动切换到新的项目中,每次做实验前,把属于自己的项目名称调出来使用即可。
三、质谱调谐“MS Tune”方法的建立对目标分析物首先需要用标准物质进行质谱调谐参数设定,一般采用蠕动泵进样方式,先通过“MS Scan”方式寻找母离子的最佳调谐参数,再通过“Daughter Scan”方式来寻找子离子及子离子对应的质谱调谐参数:1)蠕动泵进样方式:用三通阀连接质谱进样口,流动相及蠕动泵进样口一端,将Hamiton250μL进样针抽满样品标液(浓度在1ppm左右)并安装在质谱下方的蠕动泵上;2)母离子质谱调谐参数设定与优化:在质谱调谐窗口“MS Tune”选择要使用的离子模式,本仪器有电喷雾电离(ESI)与大气压化学电离(APCI)两种电离模式可供选择,其中每种电离模式都有正、负离子模式之分。
1_LC3000系列高效液相色谱仪标准操作规程(初稿)LC3000系列高效液相色谱仪标准操作规程一目的规范LC系列高效液相色谱仪的操作和维护。
二适用范围该操作规程仅适用于皖仪LC3000系列高效液相色谱仪的使用及维护操作。
三仪器组成LC3000高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、柱温箱、色谱柱、检测器、色谱工作站及相关组件构成,实际配置以用户现场为准。
四操作环境电压:220V±10% 频率:50~60Hz 温度:20℃~30℃相对湿度:≤75% 远离电磁干扰和高振动设备;防止仪器放置在阳光直射和空调设备直吹位置;保持实验室良好通风。
五操作程序1.准备流动相:液相用水必须是超纯水;所用液体试剂为HPLC级;固体试剂最好为优级纯;配制好的流动相需经0.45μm的微孔滤膜过滤,并超声脱气15min以上。
清洗液:系统配置自动进样器,测试前需要补充清洗瓶中的清洗液,清洗液也需要过滤并超声脱气。
制备测试用对照品和供试品,注入系统前需用0.45μm的滤膜过滤。
根据测试方法查看流动相是否与高压泵输液管对应,二元高压梯度注意识别A泵和B泵,四元低压梯度系统注意识别A、B、C、D四个通道。
选择合适的色谱柱,并按照色谱柱上标注的方向正确安装。
检查仪器各个模块的电源及管路是否安装正确2.开机分别开启仪器各个部分的电源开关,并打开计算机。
仪器自检结束后,运行Cactus色谱工作站。
打开“采集”界面中的仪器控制,查看仪器各个模块是否联机正常。
3.更换流动相、排气取小烧杯倒入适量的流动相,将对应管路的滤头浸入烧杯中的流动相中,轻轻搅拌洗去滤头原来残留的溶剂;将清洗好的滤头放入流动相瓶中,逆时针拧开高压泵上的放空阀,点击仪器控制面板中的排空按钮,排空3-5分钟。
二元高压梯度系统点击“启动purge”按钮,四元低压梯度系统点击“purge”按钮后需要选择通道,然后点击“开始”按钮才能启动排空操作。
注意:对于首次安装或者管道内有大量气泡的情况,需要使用注射器辅助排空。
LC-MSMS操作流程启动液质联用装置:接通电源:确保质谱主机、液相色谱各单元和电脑已经接通电源(请务必确定电源的稳定和不会出现突然断电的情况!!),依次打开质谱主机、液相色谱各单元和电脑的电源开关(质谱主机电源键位于仪器背后的红色按钮,液相色谱各单元的电源开关位于各单元正面的左下方),此时可观察到各单元的绿色指示灯依次亮起【注:若有某个单元的红色指示灯亮起,请及时联系岛津工程师进行处理】。
检查氮气与氩气的使用情况,氮气正常压力水平为0.69MPa-0.8MPa,氩气正常压力水平为0.5MPa-0.8Mpa,打开氩气钢瓶和液氮罐的阀门。
一、质谱主机的开启:电脑开机完毕后,请确认电脑右下方的相关图标为绿色。
【注:如果该图标为黄色,说明系统正在启动,请稍等片刻。
如果该图标为红色,表示有错误产生,请重启电脑。
】二、启动真空系统:注:抽真空时只需打开CID气(氩气),调谐时氩气与氮气均需打开。
1. 双击电脑桌面上的图标,等待,直到出现下面的界面,用户名为默认设置,密码为空,点击“确定”启动分析程序;2. 打开质谱右后方的开关,打开CID(氩气);3. 在新出现的窗口中点击左侧的“仪器”,再双击右侧的“MSMS”,在新出现的窗口中点击左侧的“主项目”,再点击“主项目”最下方的“系统控制”,然后在弹出的小窗口中点击“手动操作”按钮;将CID GAS 右侧的“打开”按钮按下,以便打开碰撞气。
之后点击“自动启动”进行抽真空,等待小窗口中绿色进度条走完之后,真空检测的进度条恢复成原始的灰色(此过程大约需要30min),关闭CID气总阀门(使用前打开),再抽24h方可进样分析。
三、调谐:(在“LC-MS操作流程及维护说明”下“LCMS-8040的维护说明视频6”)。
1. 打开氩气与氮气;2. 去掉DL管上的堵针器,将调谐液与离子源上的进样口连接;3. 在桌面上点击“仪器”图标,再双击右侧的“MSMS”,在新出现的窗口中点击左侧的“主项目”,再点击“主项目”最下方的“系统控制”,然后在弹出的小窗口中点击“手动操作”按钮,将CID GAS 右侧的“打开”按钮按下,以便打开碰撞气。
Labsolutions (LCMSMS)简单操作流程bsolution 联机设置(CBM-20A/Alite PC IP地址设定):1.1进入PC的网络“本地连接”“属性”。
1.2按如下设定局域网IP地址。
bSolution 软件设置:Lab solutions 状态确认:电脑开机完毕后,确认电脑右下方的相关图标为绿色。
【注:如果该图标为黄色,说明系统正在启动,请稍等片刻。
如果该图标为红色,表示有错误产生,请重启电脑。
】2.1 Labsolutions 软件启动:双击电脑桌面上的图标,等待,直到出现下面的界面:2.2LCMSMS系统配置设置:2.2.1 点击“Adminitration”进入管理员界面:2.2.2点击“Instrument administration”进入仪器管理界面:2.2.3点击“add”添加仪器名称:2.2.4在如下界面中输入“仪器名称”选择“仪器类型”:3.联机设置:3.1 LC 联机设置:3.1.1双击需要运行的“仪器名称”3.1.2点击快捷菜单栏的“main”主快捷菜单栏:3.1.3 点击“system configuration”进入系统配置窗口:3.1.4双击右侧窗口的“Instrument(communication settings)进入系统连接设置界面:3.1.5在LC项中选择相应的“CBM”类型,进入settings中刷新CBM的IP地址:3.1.6 选择链接类型为“Ethernet”,点击“list”进入IP地址刷新:3.1.7确认如下界面中能够刷新出链接状态条:3.2MS链接设置:3.2.1选择相应的MS类型后点击“Setting”3.2.2 选择链接类型为“USB”,然后点击”List“:3.3.3 确认如下界面中能够刷新出相应的仪器类型和系统设备号:3.2.4点击“OK”退出系统联机设置:3.2.5点击如下界面中的:“Auto Confiuration”进行系统自动配置:4.1真空系统启动:4.1.1 Labsolution 主窗口中点击“instrument“双击需要进入的仪器系统:点击“OK”,启动实时分析程序。
高效液相色谱仪LC3000培训教程LC3000现场培训教程——基础部分一、培训目的A、了解LC3000高效液相色谱仪结构和基本操作。
B、掌握CXTH-3000色谱工作站的打开、设备连接、数据采集、数据处理,打印报告。
C、常见故障排除二、培训设备CXTH LC3000色谱仪P3000高压输液泵UV3000紫外检测器7725i手动进样阀T2000柱温箱(可选)C18色谱柱250×4.6 5u (可选)其它色谱基本条件(流动相准备、电脑和实验台等)三、溶剂准备1、条件:色谱级纯或者优级纯甲醇或者乙腈(ACN)、二次蒸馏水、流动相的过滤和超声 23、样品的前处理和过滤四、 LC3000色谱仪组成1、 P3000泵和UV3000检测器一元(等度)系统两元(梯度)系统1P3000泵界面和基本操作高压输液泵泵头压力传感器+排空泵壳体结构图2泵头以及传动结构图单向阀单向阀内部结构基本操作:泵的基本操作可以通过CXTH-3000工作站(推荐使用)或者泵仪器面板控制。
工作站的控制在下面色谱工作站基本控制内容中讲到,以下是泵面板的基本控制按钮:3PUMP/STOP 键:按一下该按键可以运行泵,再按一下停止泵运行。
START/HOLD键:按一下该键运行预先设定的程序链(PROGRAM)。
再按一下保持此时的程序运行。
PURGE键:冲洗键。
按一次泵按照(SYSTEM SETING)系统设定中设定冲洗流量运行冲洗。
再按一次泵停止冲洗。
作用:冲洗泵头气泡和快速更换流动相。
DEL键:退出键或者删除键。
进入子菜单下通过此键退回上一菜单。
ENTER键:进入键或者确认键。
按该键进入子菜单。
方向键:光标的上下左右移动。
2、UV3000检测器UV3000紫外检测器流通池基本操作:检测器基本操作可以通过CXTH-3000工作站(推荐使用)或者检测器仪器面板控制。
波长的设定:按下λ 按键进入波长设定界面,通过数字键设定预设波长TIME CONSTANT(时间常数):在MAIN MENU主菜单下,按ENTER键进入第一项DETECTOR PARAMETERS,将光标移动到TIME CONTANT下修改合适的TC值。
高效液相色谱仪LC3000培训教程LC3000现场培训教程——基础部分一、培训目的A、了解LC3000高效液相色谱仪结构和基本操作。
B、掌握CXTH-3000色谱工作站的打开、设备连接、数据采集、数据处理,打印报告。
C、常见故障排除二、培训设备CXTH LC3000色谱仪P3000高压输液泵UV3000紫外检测器7725i手动进样阀T2000柱温箱(可选)C18色谱柱250×4.6 5u (可选)其它色谱基本条件(流动相准备、电脑和实验台等)三、溶剂准备1、条件:色谱级纯或者优级纯甲醇或者乙腈(ACN)、二次蒸馏水、流动相的过滤和超声 23、样品的前处理和过滤四、 LC3000色谱仪组成1、 P3000泵和UV3000检测器一元(等度)系统两元(梯度)系统1P3000泵界面和基本操作高压输液泵泵头压力传感器+排空泵壳体结构图2泵头以及传动结构图单向阀单向阀内部结构基本操作:泵的基本操作可以通过CXTH-3000工作站(推荐使用)或者泵仪器面板控制。
工作站的控制在下面色谱工作站基本控制内容中讲到,以下是泵面板的基本控制按钮:3PUMP/STOP 键:按一下该按键可以运行泵,再按一下停止泵运行。
START/HOLD键:按一下该键运行预先设定的程序链(PROGRAM)。
再按一下保持此时的程序运行。
PURGE键:冲洗键。
按一次泵按照(SYSTEM SETING)系统设定中设定冲洗流量运行冲洗。
再按一次泵停止冲洗。
作用:冲洗泵头气泡和快速更换流动相。
DEL键:退出键或者删除键。
进入子菜单下通过此键退回上一菜单。
ENTER键:进入键或者确认键。
按该键进入子菜单。
方向键:光标的上下左右移动。
2、UV3000检测器UV3000紫外检测器流通池基本操作:检测器基本操作可以通过CXTH-3000工作站(推荐使用)或者检测器仪器面板控制。
波长的设定:按下λ 按键进入波长设定界面,通过数字键设定预设波长TIME CONSTANT(时间常数):在MAIN MENU主菜单下,按ENTER键进入第一项DETECTOR PARAMETERS,将光标移动到TIME CONTANT下修改合适的TC值。
LC-MSMS法测定啤酒中的微量甲醛和乙醛刘建强【摘要】啤酒中的微量甲醛和乙醛经2,4-二硝基苯肼衍生后直接用LC-MS/MS 检测,标准曲线定量.给出了LC-MS/MS法的液相操作条件、质谱分析测定参数、仪器最低检测限值、重复性、定量分析曲线等.该方法简单快速,灵敏度高,每个样的分析时间短,分析样品数量大.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2008(000)006【总页数】4页(P87-90)【关键词】液相色谱质谱联用;啤酒;甲醛;乙醛;2,4-二硝基苯肼;测定【作者】刘建强【作者单位】邵阳学院生物与化学工程系,湖南,邵阳,422000【正文语种】中文【中图分类】工业技术分析与检测中国酿造2008年第 11 期总第 188 期. 87 . LC-MS/MS 法测定啤酒中的微量甲醛和乙醛刘建强(邵阳学院生物与化学工程系,湖南邵阳 422000 )摘要:啤酒中的微量甲醛和乙醛经2,4--硝基苯肼衍生后直接用LC-MS/MS 检测,标准曲线定量。
给出了LC-MSfMS法的液相操作条件、质谱分析测定参数、仪器最低检测限值、重复性、定量分析曲线等。
该方法简单快速,灵敏度高,每个样的分析时间短,分析样品数量大。
关键词:液相色谱质谱联用;啤酒;甲醛;乙醛;2 ,4-- 硝基苯肼;测定中图分类号:0657.63文献标识码:A文章编号:0254-5071(2008)11-0087-03 Determinationoftraceformaldehydeand acetaldehydeinbeer by LC-MS/MS LIUJianqiang (DepartmentofBiologyandChemicalEngineering,ShaoyangCollege, Shaoyang422000, China) Abstract:Quantityof traceformaldehydeandacetaldehydeinbeer could be directlydeterminedby LC-MS/MSbasedonstandardcurveafierderivedby 2,4- DNPH.Someimportant parametersof the methodwereprovidedin thisstudy, including the operation conditions of LC-MS/MSliquidphase,the index of MSanalysis,the lowestinstrument detection limitvalue, repeatabilityand quantitative analysis curve.Itisprovedthat thismethodwassimple, fastand has higher amountsof sample. Keywords: LC-MS/MS;beer; formaldehyde;acetaldehyde; 2,4-DNPH;determination啤酒中微量的甲醛和乙醛主要来源于 2 个方面,一是过去传统工艺在生产过程中添加所致,为了加速絮状物的沉淀,甲醛作为食品加工助剂,使啤酒加快澄清。
质谱操作规程及维护LC/MS/MS操作规程及维护一、3Q 仪器开关机步骤(一)开机顺序:1.打开机械泵上的电源开关。
2.机械泵继续工作至少15分钟。
3.打开仪器电源主开关。
4.等系统真空到达1-2 x 10-5 Torr 后才可以正常操作仪器扫描。
API-150/165 2-4 x 10-5. Q-Trap 检查低/中/高设定在2/3/4 x 10-5。
5、打开电脑开关,进入Windows 桌面,双击Analyst ,进入Analyst分析界面。
(二)关机顺序1.关掉仪器电源主开关停止真空泵系统。
2.机械泵继续工作至少15分钟。
3.关掉机械泵上的电源开关。
4.等至少10分钟让仪器“自然”卸真空。
5.通过仪器后部真空管的接口卸掉全部真空。
API-2000/3200 & Q-Trap经放气口卸真空。
注意:以上操作程序适用于停机时间少于24-48小时的仪器或配置TW700分子泵的API4000在仪器安装或TW700分子泵更换后的首次开机操作。
对于API3000及配置TV801分子泵的API4000在仪器安装或TV801 或V550plus / V551分子泵更换后的首次开机操作,必须首先进行相应的分子泵软启动操作程序。
I. PPG质量校准1手动质量校准1-1 开软件,连机,进入手动调谐状态,调用己有的质量校准方法1-2 进质量校准溶液,调离子源喷雾针位置1-3 采集PPG标准品质谱数据1-4 质量校准数据计算1-5 手动调整分辨率1-6 质量校准2自动质量校准2-1 自动质量校准的设定2-2 自动优化结果II A.针泵进样ESI源MS-MS 方法手动优化1. 先确定母离子: Q1 单级质谱实验(Q1全扫描)2.Product Ion Scan(碎片离子扫描)3. 碎片离子扫描之CE单参数寻优4. Precursor Ion Scan(母离子扫描)5. Neutral Loss Experiment(中性丢失扫描)II B. 针泵进样ESI源MRM定量方法手动优化1.先确定母离子: Q1 单级质谱实验(Q1全扫描)2. 检查信号稳定性3确定子离子Product Ion Scan(碎片离子扫描)4优化MRM 定量分析质谱参数4-1 优化Q1参数使灵敏度最高及稳定性良好4-2 继续优化MRM离子对的CE 及CXPIII. 针泵进样ESI源MRM定量方法参数自动优化1.先确定母离子: Q1 单级质谱实验(Q1全扫描)2. 检查信号稳定性3. 定量参数自动优化3-1 MRM自动优化的设置3-2 MRM 参数自动优化的过程3-3 IIII. 带液相条件质谱采集方法和批文件的建立和使用1-1 调节离子源位置1-2.建立Acquisition Method采集方法1-3. 建立Acquisition Batch采集批文件V. 定量分析方法的建立和数据分析1A: 用Wizard导航器建立一个定量数据分析方法(手动方式)1B: 用已建立的定量数据分析方法分析数据2 查看和编辑定量结果表2-1查看和编辑结果列表中的各列,如何取消Audit trail(稽核跟踪)原因设定2-2查看校准曲线。