药理学的研究方法

丁香酚的药理学研究进展

作者：彭宅彪，张琼光，代虹健，丁英平 【关键词】 丁香酚；，，药理学

摘要：综述了近年来国内外有关丁香酚的药理作用研究概况，表明丁香酚 有抑菌、麻醉、解热、抗氧化、抗肿瘤、促进透皮吸收、祛蚊等多种药理活性。

提示丁香酚具有很好的研究与开发前景。

关键词：丁香酚；药理学

丁香酷(eugenol)是丁香 Flos caryophylli 及丁香罗勒油(Oleum ocimi gratissimi)的主要成分。近年来的研究表明其有抑菌、麻醉、解热、抗氧化、

抗肿瘤、促进透皮吸收、祛蚊等多种药理活性。综述如下。

1药理作用研究

1.1抑菌作用

0. 1. 1对细菌的抑制作用章明美等[1]对15种具有抗菌抗炎作用的生药

醇提物及其有效成分进行体外抑菌活性比较发现：丁香酚对痤疮致病菌高度敏 感，油镜下观察发现抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及痤疮短棒菌苗后较

抑制前单位面积细菌数量明显减少，大部分细菌溶解死亡，失去正常形态，提 示细菌的致病性可能相应降低。丁香酚抑痤疮短棒菌、金黄色葡萄球菌的最低

抑菌浓度（MIC)分别为17, 106 M g/mlo实验还发现丁香酚与红霉素有协同 抑菌作用。夏明静等[2]的研究表明丁香酚对金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌

(P. acne, Propionibacterium acne)都有很强的抑制作用；进一步实验表明， 丁香酚与桉叶精具有协同抗P. acne的作用；丁香酚与桉叶精抑制P. acne油

镜下观察发现，细菌数量/单位面积较抑制前明显减少，且大部分细菌溶解死亡, 失去正常形态。金黄色葡萄球菌、痤疮短棒菌（P. acne, Propionibacterium

acne)、表皮葡萄球菌与痤疮的脓疱及炎性丘疹的发病机理有着密切关系[3]， 丁香酚可通过对痤疮致病菌的抑制来减少痤疮的发生。周建新等[4]的研究表

明丁香的抑菌成分富集于丁香油中。丁香油对食品中常见的细菌（枯草芽孢杆 菌、金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌）的生长均 有不同程度的抑制作用，了香油的抑菌成分为了香酿。研究表明丁香油具有天 然食品防腐作用，它不但是调味料，对需要辛辣味的食品，不失为良好的天然

２０１４年１月　第２８卷第１期总９５期　北京联合大学学报　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｕｎｉｏｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｊａｎ．２０１４　Ｖｏ１．２８　Ｎｏ．１　Ｓｕｍ　Ｎｏ．９５　

中药血清药理学方法的研究进展　

陈　宁　。，宋冬雪　，凌娜　，徐昶儒　

（１．哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心，哈尔滨１５００７６；　２．国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心，哈尔滨　１５００７６；　３．黑龙江省农业科学院信息中心，哈尔滨　１５００８６）　

［摘　要］　目的：阐述中药血清药理学在中医药基础研究中的进展，探讨如何确立最佳实验方　案，为中药复方药理作用研究提供科学可靠的实验方法。方法：通过查阅文献，主要从血清药理　

学方法中的实验动物、给药途径、剂量、方案、采血时间、血清灭活与保存、血清添加量和对照组的　设立等方面进行阐述。结果：随着血清药理学研究方法的不断细化和完善，使中药及其复方这种　复杂药物的研究具备更强的可信性和科学性。但是该方法实验技术的操作方法尚待规范，同时，　

其在注重研究药效的基础上也应该对血清中的有效成分进行分析。结论：中药血清药理学在抗　

肿瘤、心血管、免疫、消化系统等方面都得到充分应用，如对其缺陷加以改进，定能为中药研究的　

发展探索出一系列新的科学方法。　［关键词］　血清；体外实验；中药复方；实验方法　

［中图分类号］　Ｒ　２８５　［文献标志码］　Ａ　［文章编号］　１００５—０３１０（２０１４）Ｏ１－００４０—０４　

Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｓｅｒｕｍ　

ＣＨＥＮ　Ｎｉｎｇ　一，ＳＯＮＧ　Ｄｏｎｇ—ｘｕｅ　一，ＬＩＮＧ　Ｎａ　一，Ｘｕ　Ｃｈａｎｇ—ｒｕ‘’　

（１．Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｎ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｒｂｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｏｍｍｅｒｃｅ，Ｈａｒｂｉｎ　１　５００７６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｎａｔｕｒａｌ　Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　Ｄｒｕｇｓ，　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｈａｒｂｉｎ　１５００７６，Ｃｈｉｎａ；３．Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｒｂｉｎ　１　５００８６，Ｃｈｉｎａ）　

表１　Ａ１组与Ａ２组高血压患者临床疗效比较　［ｎ　）】　２．２不良反应　两组高血压患者在治疗过程中均未表现出严重不良反应的　情况。在Ａ１组高血压患者中，共３例患者表现出轻微头昏症状，２　例患者表现出口干症状；在Ａ２组高血压患者中，共４例患者表现　出轻微头昏症状，３例患者表现出口干症状；在临床不良反应表现　方面，Ａｌ组与Ａ２组未表现出显著差异（Ｐ＞０．０５）。　３讨论　硝苯地平缓释片针对血管表现出较高的选择性作用，其可以　对患者的血管平滑肌直接进行扩张，最终有效降低患者的血管扩　张血压。坎地沙坦能够有效将患者血管紧张素Ⅱ针对血管表现出　的收缩作用降低，将患者的血儿茶酚胺有效升高，表现出显著的　中医药探索２０１４年第１ＩＦ　降压作用，与此同时可以有效对患者的心’肾等器官进行保护，最　终将糖代谢作用有效改善。　在本次研究过程中，Ａ１组高血压治疗总有效率为９８．２１％，Ａ２　组治疗总有效率为８０．３６％，Ａ１组高于Ａ２组高血压患者极为显著　（Ｐ＜０．０５）。在临床不良反应表现方面，Ａｌ组与Ａ２组未表现出显著　差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。有效证明将上述两种药物联用的临床价值。　总而言之，针对高血压病患者，选择硝苯地平缓释片＋坎地沙　坦胶囊给予临床治疗，能够显著将高血压患者生活质量提高，凸　显硝苯地平缓释片与坎地沙坦胶囊两种药物联用治疗高血压疾　病的临床价值。　参考文献：　ｆ１１江世亭，汤仁礼，余赛英等．硝苯地平缓释片治疗高血压合并糖　尿病疗效观察卟山东医药，２０１３，５（２１）：６７—６８．　『２］２江世亭，汤仁礼，熊天健等．硝苯地平缓释片治疗慢性肾功能不　全合并高血压疗效评价【丌．山东医药，２０１３，５（９）：５４－５５．　『３］朱海龙，肖静，陈小玲等．硝苯地平缓释片与非洛地平缓释片治　疗不同高血压患者疗效观察Ⅱ］．海南医学，２０１２，２１（４）：２０—２２．　中药血清药理学研究方法的概述　吴晋　（福建省药品检验所，福建福州３５０００３）　【关键词】中药；血清药理学；概述　中药血清药理学起源于日本，由著名日本学者带真一川在　１９８４年在第一届汉医学会上提出并命名的，后来传人我国，并形　成了一种医药学的研究热点。所谓的中药血清药理学是指先将中　药、中药复方以及不明成分的药物给动物灌服，待到设定的时间　后，采取动物的血清并分离，然后利用采集的血清来进行药学实　验的方法。本文通过对搜集近年来的实验成果以及经验，为今后　的发展提供借鉴。　１　中药血清药理学的起源　传统在做中药药理实验的时候大多都是将利用中药的粗提　物来进行的，这样做的缺点很多，往往造成实验结果的不准确性，　其缺点大致分为三点：第一，中药粗提物中的杂质太多，对实验的　结果会产生干扰；第二，由于一些无法吸收的物质会对鉴定结果　产生误导；第三，粗提物中缺少所需要的有效物质。在１９８４年日本　召开的第一届和汉医药学会上提出中药“血清药理学”这一新概　念。　２中药血清药理学方法概述　２．１实验动物的选择和模型的建立　在选取实验体时要尽量选取与人类生理学相近的小鼠、大　鼠、豚鼠和兔，制备含药血清的人或动物尽量与获取离体器官的　组织或细胞的来源相一致，缩小由于种属不同所带来生理方面的　差异，减小人体对药物的免疫反应，这样会让实验的结果更加可　靠，个别的还有健康的志愿者提供血清。在选取合适的血清提供　者的同时还要考虑到血清的有效成分的含量，考虑到幼鼠对血清　提供量无法满足，所以一般都是选取大鼠作为血清提供体，且大　鼠也不能太大，添加多余的动物之外的因素，一般在实验时都选　取体重在２５０～３００ｇ的成年大鼠，与此同时为了减少动物个体的　差异性，需要将数只大鼠的血清混合起来用。中药血清药理学多　用于复方中药制剂的研究，且可以验证制剂的药效学。健康动物　模型的建立可以观察含药血清对机体各系统的药理作用，但由于　健康动物体和病理动物体存在生理机能上的差异及药物吸收的　特异性等不同，因此建立合适的病理动物模型在研究复方制剂的　药效学研究上有更实际的意义。如建立炎症动物模型研究含药血　清的抗炎活性、建立肿瘤动物模型研究含药血清的抗肿瘤作用　等。　２．２给药剂量与浓度　给药剂量一直是中药药理学方法中的一道难题，在现有的研　究中也不是统一的。在进行体外实验时，所用的含药血清都是要　被稀释的，但是这样有可能造成的结果是结论不准确，呈现假阳　性或隐形，这种的结果还可能是含药血清的浓度过低所造成的。　为了解决这种情况，学者们提出了两种解决方案：第一，增加所用　药物剂量；第二，利用公式，给药剂量＝临床常用量×动物等效剂　量系数Ｘ培养基内的稀释度；这两种方法优势为，能够提高含药　浓度并且能够更好的保存血清。所谓有利有弊，这样做并不能把　含药血清的浓度等倍增加，当遇到比较复杂的复方时就会面临难　灌服的缺点，只能将含药的血清经过处理形成干粉，以便达到所　需要的浓度。利用后者来提高血清中的药物，来满足实验的需要，　并容易保存。在临床进行治疗时，并不是剂量越大效果越好，必须　要考虑到剂量大所带来的后果，因此最好是根据预实验的结果来　确定所用的剂量。一般的含药血清的浓度不超过２０％，而１０％是比　较合理的，稀释浓度比例为１：４时比较合适，如果浓度过高培基　中的物质会产生毒性作用。　２．３采血时间　采血的时间是根据具体的动物种类来定的，为了能够有效的　避免结果是假阴性的，采药的时段要最好控制在给药浓度的高　峰。但是这个时间很难把握，主要是因为不同的药物特别是中药　复方制剂的达峰时间和半衰期是不同的。一部分学者认为一般的　药物在药后１～２ｈ达到峰值，因此他们认为采血应该在给药后２ｈ时　进行，或者是末次给药时连续给２次，中间间隔ｌｈ，在最后一次给　药后１ｈ收取血。而李仪奎则持不同意见，他认为要连续３天给药，　每天２次，在最后一次给药后１ｈ取血。为了攻克这一难题，部分学　者通过选取５一ＨＴ和阻滞内皮细胞钙通道作用为指标来开展时效　研究，实验结果表明：采取的血中的血清在给药以后０．５ｈ效果是　最好的，几乎达到了近似稳态血药浓度时所制备的血清。但是最　合理的方法还是先对动物进行预实验，根据所得出的结果来制定　合适的采血时间。　２．４含药血清的处理与保存　处理血清的方法有很多，其中最常用的就是水浴灭活的方　法，其他的方法还有丙酮法和乙醇法。进行灭活的主要目的是为　了减少血清中的其他物质对实验造成的干扰。如果是进行体外抗　病毒实验时则要选取合适的灭活方法，因为适当的灭活方法能够　降低血清及含药血清对病毒细胞病变的抑制作用，最常用的方法　是灭活血清，用含有桂枝兔血清在５６＂１２的条件下灭活０．５ｈ。影响　实验的还有其他因素，比如实验的对象的不同或者检验的目标不　一样就会造成灭活血清对实验的不同影响。　２．５血清添加量　血清的添加量是进行药理学实验时要注意的问题之一，尤其　是在向体外反应系统时加入血清时要注意到血清的含药浓度会　降低，因此在进行实验时可以适当的添加血清的量，最好是选取　Ｉ

1 桂花的有效成分

1.1 挥发性成分

通过对桂花化学成分的研究表明[2-5] ，目前发现的挥发性成分主要包括十六碳酸、 二十碳三烯酸甲酯、 3- (3- 羟基丁基)-2,2,4-三甲基-2-环己烯-1- 酮、 γ-葵酸内酯、 α- 紫罗兰酮、 β-紫罗兰酮、 芳樟醇、 二氢-β-紫罗兰酮、 牛儿醇、 橙花醇、 月桂酸、 棕榈酸、 硬脂酸、 辛酸乙酯、 十氢萘、 对羟基苯乙醇、 黄樟油素、 异薄荷酮、 榄香树脂等。

1.2 不挥发性成分

文献研究显示[6-7]主要非挥发性成分有尼克酰胺、 D- 阿洛醇、 5- 羟甲基-2-呋喃甲醛、 乙酰氧基齐墩果酸、 苯甲酸、 麦角甾-7，22-二烯-3- 酮、 β-谷 甾 醇 、

borreriagenin、 麦角甾-7，22-二烯-3β，5α，6β-三醇、 C-veratroylglycol、 甲基-2-O-β- 吡喃葡糖基苯甲酸、 3'，7- 二羟基-4'-甲氧基异黄酮、 7-羟基香豆素、 咖啡酸甲酯、齐墩果酸、 (-)-襄五脂素、 莳萝油脑、 3β，5α，9α- 三羟基-麦角甾-7，22- 二烯 -6- 酮、 2α- 羟基齐墩果酸、 桦木酸、 白桦脂醇、 3，3'-Bisdemethylpinoresinol、羽扇豆醇、 Boschniakinic acid 、 Ursolaldehyde、 Augusticacid、 2α，3β，23- 三羟基齐墩果-12-烯-28 酸、 5- 羟甲基 -2- 呋喃甲醛、 异高山黄芩、 6，7- 二羟基香豆素、 槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、 5，4'-二羟基-7-甲氧基黄酮-3-O-β-D-葡萄糖苷、5，7- 二羟基色原酮、 柚皮素、 乙酰氧基齐墩果酸、 绿原酸、 山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、 山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷、 3'，7-二羟基-4'-甲氧基异黄酮、 麦角甾-4，6，8(14)，22-四烯-3-酮、 对羟基桂皮酸、 丁香脂素、 3，4-二羟基苯乙酮、 对羟基苯乙酸乙酯、 咖啡酸、 贝母兰宁、 对羟基苯乙酸、 对羟基苯乙酮、 对羟基苯乙酸甲酯.