双特异性抗体与抗体融合蛋白[优质ppt]

杂交瘤技术
通过将不同免疫细胞系融合，获得同时产生两种不同抗体的杂交瘤细胞，进 而筛选出能够产生所需双特异性抗体的细胞系。
基因工程方法
通过基因工程技术改造抗体基因，使一个抗体分子具备两种不同抗原结合的 能力。
双特异性抗体的应用前景
肿瘤治疗
自身免疫性疾病治疗
利用双特异性抗体靶向肿瘤细胞，同时激活 免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，提高治疗 效果。
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感染性疾病
自身免疫性疾病
双特异性抗体与抗体融合蛋白也可 以应用于自身免疫性疾病的治疗。 通过调节免疫应答，抑制炎症反应 ，有望为自身免疫性疾病患者带来 更好的治疗选择。
在感染性疾病治疗中，双特异性 抗体与抗体融合蛋白可以作为中 和抗体使用，抑制病毒或细菌的 感染和传播。同时，也可以通过 调节免疫应答，减轻感染引起的 炎症反应。
优化治疗效果
双特异性抗体与抗体融合蛋白的联合应用可以 提高肿瘤治疗的整体治疗效果，减少不良反应 和副作用。
双特异性抗体与抗体融合蛋白在自身免疫性疾病治疗中的 联合应用
调节免疫反应
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双特异性抗体与抗体融合蛋Байду номын сангаас可以调节自身免疫性疾病患者的
免疫反应，抑制炎症和自身免疫反应，缓解病情。
创新药物研发
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双特异性抗体与抗体融合蛋白的联合应用为自身免疫性疾病的
单链抗体融合蛋白、多链抗体融合蛋白
按功能分类
双特异性抗体、单克隆抗体
抗体融合蛋白的制备方法
直接免疫球蛋白融合
将两个不同抗体的重链和轻链进行直接融合
基因工程抗体融合蛋白
通过基因工程技术将两个不同抗体的重链和轻链进行融合
抗体融合蛋白的应用前景
肿瘤免疫治疗

目前研究发现， β-半乳糖苷酶-半 乳糖脱氢酶融合蛋白在一定条件下， 其偶联反应产生 NADH 的速度是 同时加入这两种酶的反应速度的两 倍以上。同时过渡态时间缩短近四 倍。
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融合蛋白
定向药物一般由两部分组成：一部 分是药物；另一部分是可以与病灶 特异性结合的配基。通过融合蛋白 技术将这两部分融合在一起， 即 可构成一个具有独特构象与功能的 蛋白质。
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融合蛋白
目前已有人构建了抗菌肽B和人 溶菌酶的融合蛋白表达载体。并 成功表达出了具有抗菌和抗病毒 双重活性的重组蛋白。
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融合蛋白
（一）免疫球蛋白（Ig）融合 蛋白
（二）甲状旁腺激素（PTH） 融合蛋白
（三）细胞因子重组融合蛋白
融合蛋白
Ig融合蛋白是指在基因水平将目的 基因同Ig部分片段基因相连，并在 真核或原核细胞中表达出的具有上 述两部分结构域的重组蛋白。据目 的蛋白与Ig不同片断相连，可将其 分为二大类 ：一类为Fab(Fv)融合 蛋白； 另一类为 Fc融合蛋白。
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融合蛋白
3.将重组表达载体转染宿主细胞 并利用选择标志进行筛选及测 序。
4.融合基因的诱导表达及表达蛋 白的纯化 。
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融合蛋白
在构建融合蛋白中，一个关键的问题 是两蛋白间的接头序列( Linker )，即 连接肽。它的长度对蛋白质的折叠和 稳定性非常重要。如果接头序列太短， 可能影响两蛋白高级结构的折叠，从 而相互干扰；如果接头序列太长，又 涉及免疫原性的问题，因为接头序列 本身就是新的抗原。
融合蛋白
07生物技术
融合蛋白
融合蛋白的概念 融合蛋白技术概况 融合蛋白技术的临床应用 常见的几种融合蛋白
融合蛋白
在基因工程迅速发展的基础上， 有目的地把两段或多段编码功能蛋白 的基因连接在一起，进而表达所需蛋 白，这种通过在人工条件下将两个或 多个基因的编码区首尾连接，由同一 调控序列控制构成的基因表达后所得 的蛋白质产物称为融合蛋白(fusion protein，FP)。

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构建策略

双特异性抗体的构建方法

杂化杂交瘤技术
将具有某种特异性（如抗瘤细胞）的McAb 细胞株与具有抗第二抗原（如蓖麻毒蛋白） 的小鼠脾细胞进行融合，即产生出杂化杂交 瘤细胞株的二价瘤体。
Immunology
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杂化杂交瘤技术产生的双特异性抗体
Immunology
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杂化杂交瘤分泌的抗体形式
一个结合治疗靶标，另一个指向体 内效应细胞 吞噬细胞/APC FcγR、CR
Immunology
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构建策略

双特异性抗体的靶标
一个结合治疗靶标，另一个指向体 内效应细胞 NK细胞 FcγR、CD56
Immunology
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双特异性抗体的效应靶
效应细胞 T细胞
NK细胞
靶分子
TCR/CD3,CD2
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只有L1H1-H2L2才是所需的双特异性抗体
Immunology
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杂化杂交瘤方法的不足
产量低，仅占10% 产物需筛选，费时费力 瘤株不稳定
Immunology
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构建策略

双特异性抗体的构建方法

化学交联法
Nisonoff和Rivers最早开始研究 化学交联无需经过细胞融合，比较简便易行。 通常利用重链与轻链这间的二硫链经还原 和再氧化，将两种不同特异性抗体的半分子结 合在一起。或用双功能交联剂，如邻苯酸酯等， 把两个抗体半分子交联在一起。
双特异性抗体与抗体融合蛋 白
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双特异性抗体

概述 构建策略 应用
Immunology
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概述

双特异性抗体：

预期收益
系统地掌握双特异性抗体与抗体融合蛋白的专业 知识和技能，提高专业素养和研究能力
熟悉双特异性抗体与抗体融合蛋白在生物医药领 域的应用及研究进展，拓展知识面和视野
培养独立分析问题和解决问题的能力，为日后的 科研和工作打下坚实的基础。
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双特异性抗体的基本概念
双特异性抗体的定义与特性
双特异性抗体的定义
抗体融合蛋白的制备方法
采用基因工程技术，将两个不同抗体的轻链和重链可变区基 因进行融合，构建成嵌合基因，然后通过转录和翻译得到抗 体融合蛋白。
抗体融合蛋白的制备流程
确定抗体特异性、设计嵌合基因、构建表达载体、转染细胞 、抗体融合蛋白表达和纯化。
抗体融合蛋白的应用场景与优势
抗体融合蛋白的应用场景
可用于肿瘤免疫治疗、自身免疫性疾病治疗、感染性疾病治疗等领域。
抗体融合蛋白
抗体融合蛋白是指将抗体与其它蛋白质或 小分子融合，形成的具有特殊功能的新型 蛋白质药物。目前，抗体融合蛋白已经广 泛应用于肿瘤、自身免疫性疾病、神经系 统疾病等治疗领域。然而，抗体融合蛋白 在生产过程中存在的问题和挑战也需要重 视和解决。
发展趋势与未来展望
双特异性抗体
未来，双特异性抗体的研究方向将更加多元化，从治 疗肿瘤向治疗其它疾病拓展。同时，双特异性抗体的 生产工艺也将不断优化，提高产量和纯度，降低生产 成本，使得双特异性抗体药物更加普及和可及。
抗体融合蛋白
针对抗体融合蛋白的研究重点应放在以下几个方面：1）研究和优化抗体融合蛋白的生产工艺；2）研 究和解决抗体融合蛋白在临床应用中可能遇到的问题；3）探索新型的抗体融合蛋白设计和制备方法； 4）评估抗体融合蛋白的长期疗效和安全性。
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结语