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山楂PCR－SSCP反应体系与反应条件的优化撒云俐;那冬晨【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2016(044)033【摘要】[目的]优化山楂PCR－SSCP反应体系与反应条件。
[方法]以山楂为材料，采用改良的 CTAB 法分步提取叶绿体DNA和核DNA，对PCR－SSCP引物进行筛选，同时进行PCR－SSCP反应体系和反应条件的优化，琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测变性后的PCR扩增产物。
[结果] ropB、ropL、rpoC1、ITS2、psbA－trnH 5对引物适用于山楂PCR－SSCP分析。
电泳时，采用6％聚丙烯酰胺凝胶（交联度29∶1），4℃恒温，200 V恒压，上样缓冲液（不含甘油）与PCR产物等量混合，98℃碱（1％NaOH）变性15 min，电泳缓冲液为0．5×TBE，电泳3～4 h可得到较好的山楂PCR－SSCP电泳图谱。
[结论]建立了山楂PCR－SSCP最优反应体系与反应条件，为山楂SSCP分析奠定基础。
【总页数】4页(P137-139,142)【作者】撒云俐;那冬晨【作者单位】山西师范大学生命科学学院，山西临汾041000;山西师范大学生命科学学院，山西临汾041000【正文语种】中文【中图分类】S188【相关文献】1.大豆花芽mRNA差异显示技术体系反应条件的优化 [J], 王楠;尹俊奇;周莹;姚丹;马建;曲静;王丕武2.马齿苋ISSR-PCR反应体系与反应条件的优化 [J], 王昭云;那冬晨3.放线菌快速检测方法的反应体系及反应条件的优化 [J], 张洪伟;张利平;张秀敏4.山楂PCR-SSCP反应体系与反应条件的优化 [J], 撒云俐;那冬晨5.顶空固相微萃取法萃取Maillard反应体系中吡嗪类化合物的条件优化 [J], 周永妍;李亚;余爱农因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
新疆野苹果SSR-PCR反应体系的优化刘遵春;苗卫东;刘大亮;陈学森【摘要】以4个新疆野苹果株系为试材,利用CTAB法提取DNA,对影响SSR-PCR 扩增结果的主要因子设计了多梯度的优化试验.结果表明:新疆野苹果SSR-PCR反应体系(25 μL)中含Taq DNA聚合酶0.5 U、模板DNA 5.0 ng、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.2 μmol/L、Mg2+1.0 mmol/L、退火温度为60℃时效果最佳.最佳扩增程序为:94℃预变性2min,94℃变性30 s,65C退火1 min,72℃延伸1 min,4个循环;94℃变性30 s,60℃退火1 min,72℃延伸1 min,30个循环;72C延伸5 min,4℃保存.利川此反应体系对30份新疆野苹果进行SSR-PCR扩增和电泳检测,扩增谱带清晰且多态性较好,表明该体系适用于新疆野苹果的基因连锁图谱构建和QTL定位.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2012(039)004【总页数】4页(P97-100)【关键词】新疆野苹果;SSR-PCR;优化【作者】刘遵春;苗卫东;刘大亮;陈学森【作者单位】山东农业大学同艺科学与工程学院/作物生物学国家重点实验室,山东泰安271018;河南科技学院园艺园林学院,河南新乡 453003;河南科技学院园艺园林学院,河南新乡 453003;山东农业大学同艺科学与工程学院/作物生物学国家重点实验室,山东泰安271018;山东农业大学同艺科学与工程学院/作物生物学国家重点实验室,山东泰安271018【正文语种】中文【中图分类】Q78简单重复序列(simple sequence repeat，SSR)是指以 1～6个核苷酸为单位多次串联重复的DNA序列。
与其他分子标记技术相比，SSR标记具有操作简便、覆盖整个基因组、多态性强、呈共显性遗传、对DNA质量要求不高而且重复性好等特点。
近年来被广泛应用于遗传连锁图谱构建[1-2]、功能基因定位[3-4]、分子标记辅助选择及亲缘关系鉴定等研究中[5-6]。
杧果SC-SSR分子标记反应体系的建立与优化作者：覃昱茗张宇黄国弟莫永龙罗世杏荣涛来源：《农业研究与应用》2021年第03期摘要：采用正交设计方法，对影响PCR反应体系的5个因素（Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTPs、引物和模板DNA）进行了优化，建立了适用于杧果的SC-SSR-PCR反应体系。
结果表明，总反应体系25 μL中，包含模板DNA用量100 ng·mL-1、Mg2+浓度2.00 mmol·L-1、引物浓度0.40 μmol·L-1、Taq DNA 聚合酶浓度1.00 U、dNTPs浓度0.15 mmol·L-1。
利用优化的杧果SC-SSR-PCR反应体系对10对SC-SSR引物进行验证，均能扩增出清晰、明亮、特异的电泳条带。
因此，优化的杧果SC-SSR-PCR反应体系适用于杧果种质鉴定和亲缘关系分析。
关键词：杧果 SC-SSR 正交设计体系优化中图分类号：S667.7 文献标识码：A杧果（Mangifera indica L.）为漆树科重要常绿经济果树，原产印度，其果实风味极佳[1]。
国内海南、广东、广西、福建、云南、贵州、四川均有栽培[2-3]。
起始密码子-微卫星扩增多态性（start codon simple sequence repeat，SC-SSR）标记是郭大龙等结合SCoT和ISSR分子标记技术开发出来的一种既能将标记位点与表达序列紧密联系，又具有相对较高多态性的新型分子标记[4]。
目前，SC-SSR标记已应用于猕猴桃遗传多态性分析及其指纹图谱构建，但在其他物种中的应用研究在国内并不多[5]。
由于杧果高度异花授粉，种子高度杂合，且生产交易中往往存在同物异名和异物同名等问题，给杧果育种工作带来了诸多阻碍[6-8]。
SC-SSR分子标记在种质鉴定方面具有独特的优势，但在杧果中尚未有报道。
基于这些问題，本研究较全面地建立并优化杧果的SC-SSR反应体系，为其在杧果种质资源评价、遗传多样性分析等领域的应用提供技术参考。
研究报告生物技术通报BI OTEC HNOLOG Y BULLETI N2009年第12期观赏桃ISS R PCR 反应体系的优化林玲汤浩茹 刘燕候艳霞(四川农业大学园艺学院,雅安625014)摘 要: 采用改良CTA B 法从观赏桃满天红叶片中提取基因组DNA,通过单因素实验探讨了模板DNA 、M g 2+、dNTP s 和T aq DNA 酶等条件对观赏桃ISS R PCR 扩增结果的影响,建立了ISSR PCR 扩增的最佳体系:25 l 反应体系中包含10 Buffe r 2 5 ,l 模板DNA 40ng ,M g 2+浓度2 5mm o l/L,引物浓度0 4 mo l/L,dNTP s 浓度0 4mm o l/L,T aq DNA 酶0 5U 。
利用所建立的体系对红叶桃、菊花桃和春艳等13份材料进行检验,其结果表明优化后的体系适合观赏桃的ISSR PCR 反应。
关键词: 观赏桃DNA 提取ISSR体系优化Opti m izati on for ISSR PCR Reaction Conditions ofOrna m ental PeachL i n L i ngT ang H aor uL iu Y anHou Y anxia(H or tic ult uralCo lle ge ,S ic huan Agric ultural Universit y,Ya !an 625014)Abstrac:t T he i m proved m ethod CTAB w as used to extrac t DNA from leaves of ornam enta l peach m anti anhong .The research discussed different co m ponen ts effect to the DNA a m plifi cation ,i nc l udi ng prog ram te m plate ,pri m er ,d NTP s ,Taq poly m erase and M g 2+,through l adder exper i m ents .T he reac ti on cond iti ons we re opti m i zed and then the opti m a l PCR system for ISS R analysis was establi shed as fo ll ows ,tota l vo l um e 25 ,l 2 5 l 10Bu ffer ,40ng te m plate DNA,2 5mm o l/L M g 2+,0 4mo l/L Pr i m er ,0 4mm o l/L d NTP s ,and 0 5U Taq DNA po l yme rase .The opti m al PCR syste m was tested by 13sa m ples ,show i ng tha t it pe rf o r m ed satisfacto ril y on ornamenta l peach .K ey words : O rnam enta l peach DNA extraction ISSRO pti m a l PCR system收稿日期:2009 09 07基金项目:国家大学生创新性实验资助项目(081062613)作者简介:林玲(1986 ),女,在读硕士研究生,主要从事园艺植物种质资源与生物技术的研究;E ma i :l hdnea @yahoo .co 通讯作者:汤浩茹,男,教授,博士生导师;E m ai:l h t ang @s icau 观赏桃(P runus persica Batsh)是原产我国的古老观赏植物之一,其花、叶、果都有很高的观赏价值[1]。
澳洲坚果SSR-PCR反应体系优化及其应用唐莹莹;杨祥燕;蔡元保;李穆;曾黎明;郑文武;邱文武;李季东;叶维雁【摘要】以澳洲坚果DNA为模板,通过单因素设计方法对影响SSR-PCR反应体系的5个主要因素进行了优化.结果表明,澳洲坚果SSR-PCR反应体系的最适条件为:20μL的反应体系中,包含30 mg·L-1模板DNA,1.0U Taq聚合酶,2.5 mmol·L-1 Mg2+,0.6tμmol·L-1引物和0.3 mmol·L-1dNTPs.采用该反应体系对不同引物和15份澳洲坚果种质进行验证,扩增条带的可靠性和稳定性良好,且分辨率较高.因此,该SSR-PCR反应体系可用于澳洲坚果种质源鉴定及遗传多样性分析研究.%Five major factors of the SSR-PCR reaction system were optimized for genomic DNA of macadamia (Macadamia spp.) by a single factor design.The volume of opt imum reaction system was 20 μL that consisted of 30 mg · L-1 template DNA,1.0 U Taq polymerase,2.5 mmol · L-1 Mg2+,0.6 μmol · L-1 primer and 0.3 mmol · L-1 dNTPs.On 15 germplasms of macadamia using different SSR primers,the system proved to be reliable and stable in the amplification bands with high resolution.Consequently,it seemed adequate for the identification and genetic diversity analysis of macadamia germplasms.【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2018(033)002【总页数】5页(P154-158)【关键词】澳洲坚果;SSR-PCR;体系优化;单因素设计【作者】唐莹莹;杨祥燕;蔡元保;李穆;曾黎明;郑文武;邱文武;李季东;叶维雁【作者单位】广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西南宁530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西南宁530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西南宁530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西南宁530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西南宁530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西南宁530001;广西壮族自治区农业科学院园艺研究所,广西南宁530007;广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西南宁530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西南宁530001【正文语种】中文【中图分类】S184澳洲坚果Macadamia spp.是山龙眼科Proteaceae澳洲坚果属Macadamia常绿乔木，原产于澳大利亚昆士兰与新南威尔的亚热带雨林，是中国南方发展起来的新兴果树，在云南、广西、广东、贵州、福建等地均有种植。
桃SSR反应体系的优化
李银霞;李天红
【期刊名称】《中国农业大学学报》
【年(卷),期】2005(010)006
【摘要】以‘新大久保’桃为试材,利用正交设计直观分析法和2因素完全随机试验优化了桃SSR技术中PCR反应体系.试验结果表明,适宜桃遗传分析的SSR技术体系为:在25 μL反应体系中Taq DNA聚合酶和DNA最适用量分别为1 U和50～100 ng;Mg2+ 、dNTP和引物最适终浓度分别为1.5～2.0 mmol/L、0.20～0.28 mmol/L和0.2～0.6 μmol/L.利用30个桃品种验证此反应体系,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物在100～300 bp,多态性高,且反应体系的稳定性和可重复性好.
【总页数】5页(P57-61)
【作者】李银霞;李天红
【作者单位】中国农业大学,农学与生物技术学院,北京,100094;中国农业大学,农学与生物技术学院,北京,100094
【正文语种】中文
【中图分类】S662.1;S603.6
【相关文献】
1.半矮生桃基因组DNA的提取及SSR-PCR反应体系的优化 [J], 韩世明;王志强;牛良;鲁振华;刘淑娥;宋银花;李春奇
2.观赏桃ISSR-PCR反应体系的优化 [J], 林玲;汤浩茹;刘燕;候艳霞
3.正交设计对'红阳'猕猴桃ISSR反应体系的优化研究 [J], 邱利娜;廖明安;李明章;王丽华;郑晓琴
4.贯叶金丝桃ISSR反应体系的建立与优化 [J], 杨春霞;朱培林;林小凡
5.长柱金丝桃ISSR-P CR反应体系的建立与优化 [J], 王丽俊;王霞
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芦笋SSR-PCR反应体系的优化及验证作者：白扬仪泽会来源：《中国瓜菜》2024年第07期摘要：以蘆笋幼叶为材料，采用单因素与L16（43）正交试验相结合的方法，对影响芦笋SSR-PCR反应的3个因素（2×Taq Master Mix，模板DNA，引物）进行优化，并以此为基础通过退火温度和循环次数试验筛选引物最佳退火温度和循环次数。
结果表明，芦笋基因组DNA 的SSR-PCR最优反应体系为：10 µL反应体系中，50 ng·µL-1 DNA模板0.125 µL，10 µmol·L-1 上下游引物各0.5 µL，2×Taq PCR Mix 3 µL，灭菌ddH2O 5.875 µL。
PCR扩增程序为：94 ℃预变性4 min；94 ℃变性30 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸35 s，循环25次；72 ℃延伸10 min，4 ℃保存。
经5对引物组合和5个不同芦笋品种DNA扩增验证，该体系稳定可靠，可用于芦笋遗传多样性分析、种子纯度鉴定、分子标记辅助育种及重要农艺性状的图位克隆等工作。
关键词：芦笋；SSR-PCR反应体系；正交设计中图分类号：S644.6 文献标志码：A 文章编号：1673-2871（2024）07-100-07Optimization and validation of SSR-PCR reaction system for Asparagus officinalis L.BAI Yang， YI Zehui（College of Horticulture， Shanxi Agricultual University， Taiyuan 030031， Shanxi，China）Abstract： Based on DNA of asparagus young leaves， a single factor screening test combined with a L16（43） orthogonal design method was employed to optimize the factors of 2×Taq Master Mix， template DNA， and primer combination applied for SSR-PCR and followed by gradient annealing temperature test and gradient cycle times test to screening the optimum annealing temperature and cycle numbers. The results showed that the optimal SSR-PCR system for asparagus included 50 ng·µL-1 DNA template 0.125 µL， 10 µmol·L-1 primers 0.5 µL， 2×Taq PCR Mix 3 µL， sterilized ddH2O 5.875 µL，with a total reaction volume of 10 μL. The PCR amplification procedure for asparagus was： 94 ℃ pre-denaturation for 4 min， 94 ℃ denaturation for 30 s，60 ℃ annealing 30 s， 72 ℃ renaturation for 35 s， 25 cycles， 72 ℃ extension for 10 min， 4 ℃for storage. This reaction system was proved to be stable and reliable by PCR amplification with 5 pairs of primer combinations and DNA templates of five different asparagus cultivars. The optimized SSR-PCR reaction system could be satisfactorily used for genetic diversity analysis， seed purity identification， marker-assisted breeding and map-based cloning of important agronomic traits of asparagus.Key words： Asparagus officinalis; SSR-PCR reaction system; Orthogonal design芦笋又名石刁柏，为天门冬科天门冬属多年生草本植物，富含矿物质、多糖、皂苷、氨基酸、维生素和芦丁等多种营养成分，具有抗氧化、降血糖、降血脂、提高免疫力等多种药理功能，深受国内外关注，被誉为“蔬菜之王”[1-4]。
果梅SSR 反应体系的优化高志红1,2,章镇2,韩振海13,沈志军2(11中国农业大学园艺植物研究所,北京100094;21南京农业大学园艺学院,江苏南京210095)摘要:以果梅品种小叶猪肝为试材,研究了果梅SSR 技术中PCR 反应体系的主要成分对SSR 扩增结果的影响,并比较了采用聚丙稀酰胺凝胶及琼脂糖电泳检测扩增产物多态性的差异。
结果表明:在PCR 反应体系中,Mg 2+的最适浓度范围为1189～2183mm ol ・L -1;dNTP 最适浓度为0124mm ol ・L -1;引物的最适浓度为0138μm ol ・L -1;Taq 聚合酶在2615μL 反应体系中宜加入1U 。
利用此反应体系,对24个果梅代表品种进行了SSR 反应,用8%的非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳检测,扩增产物在100～200bp 之间,不同品种间DNA 谱带多态性丰富。
琼脂糖电泳检测的DNA 多态性不如聚丙稀酰胺凝胶丰富。
关键词:果梅;简单重复序列;反应体系;优化中图分类号:S662101 文献标识码:A 文章编号:10002030(2002)04001904Optimization on SSR analysis system of Japaneseapricot (Prunus mume Sieb.et Zucc.)G AO Zhi 2hong 1,2,ZH ANG Zhen 2,H AN Zhen 2hai 13,SHE N Zhi 2jun 2(1.Institute for H orticultural Plant ,China Agric Univ ,Beijing 100094,China ;2.C ollege of H orticulture ,Nanjing Agric Univ ,Nanjing 210095,China )Abstract :The factors which affected on the SSR results of Japanese apricot and comparative analysis of polym orphism of SSR detected ontw o gel electrophoresis systems were studied.The results showed that the optimized content of Mg 2+is 1189Ο2183mm ol ・L -1;the opti 2mized content of dNTP is 0124mm ol ・L -1;the optimized content of primer is 0138μm ol ・L -1;the optimized content of Taq polymerase is 1U ・2615μL -1in the PCR system.Through above PCR system ,SSR fragments of 24cultivars of Japanese apricot were obtained and de 2tected.There were significantly different between tw o gel systems.P olyacrylamide gel (8%)had higher ability than agarose gel (3%)in discriminating amplified fragments.P olym orphism between different cultivars was abundant detected by P olyacrylamide gel.K ey w ords :Japanese apricot ;simple sequence repeat (SSR );analysis system ;optimization梅(Prunus mume Sieb.et Zucc.)原产于中国,是我国重要的花果兼用型树种,特别是果梅,更是我国南方的重要创汇树种。
果梅种质资源丰富,由于长期天然杂交,现有的栽培品种和重要的种质资源遗传背景复杂,兼有其近缘种的基因渗透[1]。
而且在生产中同名异物、同物异名现象严重。
为了构建果梅的核心种质与育种的需要,有必要弄清果梅的遗传多样性。
SSR (sim ple sequence repeat )即DNA 简单重复序列,由于其操作简便、多态性强、遗传信息量大、共显性遗传等特点,近年来迅速应用于许多动植物种质资源研究中。
在果树中主要应用在葡萄[2～4]、猕猴桃[5,6]、柑桔[7]、桃[8]等树种的种质资源研究和遗传图谱的构建,在果梅上的应用未见报道。
本文拟优化果梅SSR 反应体系,为应用该技术进行果梅种质资源的研究及构建果梅核心种质打下基础。
1 材料与方法111 材料试材取自南京农业大学果梅种质资源圃。
取健康植株一年生枝条上的嫩叶,立即放入冰壶中带回实 收稿日期:20020304 基金项目:国家自然科学基金资助项目(30070530);IFS 项目(D/32321) 作者简介:高志红(1971),讲师,在读博士,主要从事果树种质资源和分子生物学研究。
E 2mail :gaozhihong835@hotmail 1com 。
3通讯作者C orresponding author ,E 2mail :hzhh @mail 1cau 1edu 1cn 南京农业大学学报 2002,25(4):19～22Journal o f Nanjing Agricultural Univer sity验室。
洗净、吸水纸吸干后,称取013g 左右置于115m L 的E ppendorf 管中,于-70℃冰箱中保存备用。
所用试剂25mm ol ・L -1MgCl 2,10mm ol ・L -1dNTP ,5U ・μL -1Taq 聚合酶及电泳试剂,均购自上海生物工程公司。
引物序列参照桃基因组[8],由上海生物工程公司合成,序列为:5′GGG T AAAT ATG CC 2C ATTG TG C AATC 3′和5′GG ATC ATTG AACT ACG TC AATCCTC 3′。
112 方法11211 DNA 的提取 基因组DNA 提取与纯化参照文献[9]。
提取的DNA 质量和浓度采用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计测定。
样品稀释到60ng ・μL -1保存备用,常用的放在4℃冰箱,长期保存在-70℃冰箱。
11212 SSR 反应体系及PCR 反应 采用2615μL 反应体系进行SSR 扩增,25mm ol ・L -1MgCl 2215μL ,215mm ol ・L -1dNTP 215μL ,5U ・μL -1Taq 聚合酶012μL ,10μm ol ・L -1引物1μL ,用重蒸水调整体系终体积为2615μL 。
当一种成分进行浓度梯度实验时,其他成分浓度不变。
PCR 反应采用美国M J 公司生产的PTC 100基因扩增仪。
PCR 反应程序:94℃预变性2min ,61℃50s ,72℃50s ,1个循环;然后94℃40s ,61℃50s ,72℃50s ,20个循环;接着94℃45s ,61℃50s ,72℃50s ,20个循环;最后72℃延伸7min 。
11213 PCR 产物的检测 采用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR 扩增产物,250V ,电泳5h 。
电泳结束后取下凝胶,银染显色:固定液为5%的冰醋酸和10%的无水乙醇的混合液,固定2次,每次至少10min ;染色液为012%的AgNO 3,染色时间为15min ;水洗两次,每次不超过1min ,第2次水洗时加入10mg ・m L -1的Na 2S 2O 330μL ;显色液为115%的NaOH 和014%的甲醛溶液;最后保存在0175%的Na 2C O 3溶液中,照相,制备干胶,以长期保存。
电泳时DNA 分子量标准为50bp DNA ladder 。
同时用3%的琼脂糖检测同一扩增产物,DNA 分子量标准为λDNA/Eco R Ⅰ+Hin d Ⅲ。
在紫外透射仪上观察、拍照。
2 结果与分析211 果梅SSR 优化反应体系的建立 以果梅品种小叶猪肝为材料,研究了PCR反应体系中的Mg 2+、dNTP 、引物、Taq 聚合酶等成分对SSR 扩增结果的影响(图1)。
21111 Mg 2+浓度对SSR 扩增结果的影响 本试验设定的4个Mg 2+浓度(1142,1189,2136和2183mm ol ・L -1)均有扩增产物,Mg 2+浓度为1142mm ol ・L -1时,在120bp 左右有非特异性扩增产物(箭头所示);在其他3个浓度下可产生稳定一致的扩增带,且随着浓度的增加,扩增的特异性增加。
因此1189～2183mm ol ・L -1浓度范围均可以采用。
21112 dNTP 浓度对SSR 扩增结果的影响 本试验所采用的4个dNTP 浓度(0114,0119,0124和0128mm ol ・L -1)均有扩增产物。
dNTP浓度为0114和0128mm ol ・L -1时,有较淡的非特异性扩增产物,0119和0124mm ol ・L -1时,扩增效果较好,尤以0124mm ol ・L -1时扩增带最清晰稳定。
图1 果梅SSR 反应体系不同组分对扩增结果的影响Fig.1 The effects of different components on SSR amplification of Jap anese apricot N ote :lane 14,M g 2+1142,1189,2136and 2183mm ol ・L -1;lane 58,dNTP 0114,0119,0124and 0128mm ol ・L -1;lane 912,primer 0119,0138,0157and 0176μm ol ・L -1;lane 1316,Taq polymerase 015,110,115and 210U in 2615μL PCR system ,respectively 21113 引物浓度对SSR 扩增结果的影响 SSR 引物采用的4个浓度为0119,0138,0157和0176μm ol ・L -1,结果除引物浓度0138μm ol ・L -1扩增效果最好外,其他几种浓度均有非特异性扩增产物。
・02・ 南 京 农 业 大 学 学 报 第25卷21114 Taq 聚合酶浓度对SSR 扩增结果的影响 在2615μL 反应体系设的4个Taq 聚合酶浓度(015,110,115和210U )均有扩增产物且清晰。
