微量元素对银杏愈伤组织诱导及生长的影响

锌元素的功能与作物补锌作者：来源：《农业知识·乡村季风》2012年第11期农作物在生产过程中离不开锌元素的供给，锌元素对促进农作物优质、高产有重要作用。

因缺锌造成的生理病害的发生与预防越来越受到人们的重视。

一、锌对农作物的营养功能锌是农作物必需的微量元素，它直接参与农作物的新陈代谢，营养功能主要有以下几点：①锌关系到氮的代谢，缺锌时会造成小叶病和簇叶病。

②锌关系到叶绿素的合成和稳定，缺锌时叶片会黄化。

③锌存在于茎尖、嫩叶、根尖、种子和输导组织中，它关系到形成层的活力，可促进愈伤组织发展及花粉生长、花粉管的伸长、授粉受精，并增加单果重。

④锌可以提高作物抗旱力。

⑤适量的锌可使抗坏血酸含量增加。

二、缺锌症状近年来，由于在农业生产中农民施肥重无机轻有机现象相当突出，农作物在生产过程中易发生缺锌现象，其主要症状是：植株生长缓慢，叶小畸形、叶脉间黄化卷曲、节间缩短及簇生小叶，缺锌严重时易出现以下生理性病害：1.小麦缺锌：小麦生长期缺锌时节间缩短，叶小簇生，叶缘呈皱缩状，脉间失绿发白，呈黄白绿三色相间的条纹带，出现成片的白苗、黄化苗，严重时会出现僵苗、死苗现象，且推迟抽穗，常导致小麦开花不齐，有效穗明显减少，千粒重下降，一般影响小麦产量20%左右。

2.玉米缺锌：玉米出苗后1～2星期左右就有叶片失绿现象，即白芽病。

3～6片叶时更为明显，新生幼叶叶脉间失绿，呈淡黄色或黄白色，叶片基部发白，俗称白苗病。

之后表现为植株矮小、生长受阻，节间变短，结实少，秃尖缺粒，严重者，叶肉坏死，变成半透明薄膜状，植株死亡绝收。

3.其他作物缺锌：水稻缺锌会导致僵苗病，大豆、花生缺锌会导致黄叶病，棉花缺锌易出现早衰，果树缺锌导致小叶病。

三、作物补锌措施1.土壤补充锌肥。

常用的锌肥是硫酸锌，可作基肥或追肥。

硫酸锌的建议用量为每667平方米（1亩）1～2千克，可与酸性氮肥、有机肥、复合肥等混合施用。

如果用来浸种，硫酸锌浓度为0.1%～0.2%。

班级：植物092 姓名：徐炜佳学号：0901080223愈伤组织的诱导和培养一、实验目的及意义植物愈伤组织的诱导和培养在植物科学的基础研究和应用研究中都有重要的意义。

通过本次实验，可以初步掌握植物外植体材料消毒、接种的无菌操作技术，愈伤组织的诱导方法和愈伤组织继代培养的方法。

二、实验原理植物组织与细胞培养是应用无菌操作的方法培养离体的植物器官、组织或细胞的过程。

如果组织培养使用的植物材料是带菌的，在接种前就必须选择适当的消毒剂对植物外植体进行表面消毒，获得无菌材料进行组织培养，这是取得植物组织培养，成功的基本前提和重要保证。

由于植物细胞具有全能性，外植体在合适的培养基上通过脱分化，形成一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团——愈伤组织（callus）。

植物生长调节剂如2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）等是诱导外植体形成遇上组织的重要因素。

三、实验仪器与药品超净工作台，酒精灯，镊子，剪刀，解剖刀，75%乙醇，酒精消毒棉材料：烟草无菌苗，甘薯无菌苗四、实验步骤1.按下表分别配制培养基将配置的四种培养基分别分装入20个培养瓶，高温灭菌后水平放置凝固2.接种前，将实验所需器具放入超净工作台，打开紫外灯灭菌20~30min，关闭紫外灯，开启通风开关。

洗手后用酒精喷洒消毒手、手臂、实验材料及培养基外部等进入超净工作台的部分。

进入超净工作台，用酒精棉擦拭台面（手勿伸出工作台），台面完全风干后点燃酒精灯。

3.接种开始时，将镊子及手术刀在酒精中浸泡，并在酒精灯外焰上烧炽片刻，充分冷却。

取幼嫩的烟草（甘薯）叶片，用手术刀切割成小片，再用镊子将其接种至相应的培养基上，每瓶接种3~5片，封口后取出超净工作台，标注姓名、日期、培养基和接种材料。

4.将上述培养材料常温暗培养，每隔7天观察一次，并记录培养情况五、实验结果组织长芽，而当生长素含量大于细胞分裂素含量时，二者共同作用在室温下可诱导外植体生成不定根，也可形成愈伤组织，细胞色素沉淀情况严重；NAA为植物生长素，6-BA为细胞分裂素，促进扦插生根，而当细胞分裂素含量大于生长素含量时，二者共同作用在室温下可诱导外植体生成不定芽，此次实验由于温度非形成愈伤组织的最适温度，所以未形成完整的愈伤组织细胞团。

基金项目上海市科技兴农项目（沪农科推字〔2021〕第1-3号）；安徽省科技重大专项（201903a06020011）。

作者简介吴浩然（1997—），男，安徽肥东人，助理农艺师，从事水稻遗传转化工作。

*通信作者收稿日期2022-06-09水稻愈伤组织褐化的机理及影响因素研究进展吴浩然张从合*王慧陈思黄艳玲杨力管昌红（安徽荃银高科种业股份有限公司/农业农村部杂交稻新品种创制重点实验室，安徽合肥230088）摘要在水稻愈伤诱导、愈伤继代等过程中，影响愈伤褐化因素较多，包括水稻基因型、培养条件、培养基成分以及继代时间等，且不同因素对愈伤褐化的影响程度不同。

本文简要概述了引起外植体和愈伤组织褐化的机理、褐化类型及引起褐化的因素，同时对其研究方向进行了展望，以期为植物组织培养提供参考。

关键词水稻；愈伤组织；基因型；褐化机理；抗氧化剂；多酚氧化酶中图分类号S511文献标识码A文章编号1007-5739（2023）05-0021-05DOI ：10.3969/j.issn.1007-5739.2023.05.006开放科学（资源服务）标识码（OSID ）：Research Progress on Browning Mechanism of Rice Callus and Its Affecting FactorsWU HaoranZHANG Conghe *WANG HuiCHEN SiHUANG YanlingYANG LiGUAN Changhong(Anhui Win-all Hi-tech Seed Co.,Ltd./National Key Laboratory for New Variety Development of Hybrid Rice of Ministry of Agriculture and Rural Affairs ，Hefei Anhui 230088)AbstractIn the process of rice callus induction and callus subculture,there are many factors affecting callusbrowning,including rice genotype,culture conditions,medium composition and subculture time,and different factors have different influence degrees on callus browning.In this paper,the mechanism,types and affecting factors of browning of explants and calli were briefly summarized,and the research direction was prospected,in order to providereferences for plant tissue culture.Keywordsrice;callus;genotype;browning mechanism;antioxidant;polyphenol oxidase褐化现象常见于水稻愈伤诱导和愈伤继代培养过程中，在褐化初期，愈伤组织颜色变深，呈现出棕色或黑褐色，并且会逐步扩散到周边其他愈伤，最后直至愈伤死亡。

《植物愈伤组织的诱导[金线兰愈伤组织诱导的最佳激素配比]》摘要。

以金线兰根状茎、幼茎、叶片、离体胚为外植体，４种激素２，４－Ｄ、ＮＡＡ、６－ＢＡ、ＺＴ采用Ｌ９（３４）正交表处理，对愈伤组织诱导的条件进行研究。

结果表明，６－ＢＡ和２，４－Ｄ在诱导金线兰愈伤组织中作用极为显著，４种激素对愈伤组织的诱导作用大小依次为，６－ＢＡ＞２，４－Ｄ＞ＮＡＡ＞ＺＴ，初步断定金线兰愈伤组织诱导的最佳激素配比是０.２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０.９ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０.５０ｍｇ／ＬＺＴ；根状茎和幼茎作为外植体更易诱导愈伤组织形成；暗培养较光暗交替更易诱导愈伤组织生长。

关键词：金线兰；愈伤组织；诱导；条件中图分类号：Ｓ６８２.３１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）12－2568-03studyontheoptimumhormoneratioinducingcallusofanoectochilusrox burghiiＫｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｎｏｅｃｔｏｃｈｉｌｕｓｒｏｘｂｕｒｇｈｉｉ；ｃａｌｌｕｓ；inducement；ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ金线兰［Ａｎｏｅｃｔｏｃｈｉｌｕｓｒｏｘｂｕｒｇｈｉｉ（Ｗａｌｌ.）Ｌｉｎｄｌ.］，兰科开唇兰属植物，全草入药，味甘、性平，具有清热凉血、除湿解毒的功效，可治疗肺结核、糖尿病、肾炎、膀胱炎、重症肌无力、遗精、风湿性及类风湿性关节炎、小儿惊风、妇女白带以及毒蛇咬伤等症，是民间珍稀名贵的中草药［１］。

除药用外，由于株型矮小，叶型优美，叶面黑紫色，有金黄色带有绢丝光泽的美丽网脉，是观赏价值极高的室内观叶珍品，具有广阔的开发利用前景。

金线兰种子自然条件下萌发率很低，再加上过度采集，野生资源日益枯竭［２］。

在人工培养条件下诱导愈伤组织生长并使其增殖是实现快繁和分离其次生代谢产物获取金线兰药用成分的重要途径，但目前罕见金线兰愈伤组织诱导的研究报道。

采用正交试验研究了４种激素对诱导愈伤组织生长的影响，为金线兰愈伤组织诱导和细胞培养体系的建立提供依据。