贯叶连翘提取物中金丝桃素(Hypericins)含量测定方法(UV)

贯叶连翘中金丝桃素的薄层色谱检测作者：刘永红魏新力高有桂来源：《科技视界》 2014年第17期刘永红魏新力高有桂（兰州市西固区医院儿科，甘肃兰州 730060）【摘要】目的：建立贯叶连翘中金丝桃素含量的测定方法。

方法：以硅胶GF254为固定相，以石油醚－乙酸乙酯－甲醇（2：4：1）为展开剂，在588nm波长的条件下进行单波长薄层色谱扫描来测定贯叶连翘中金丝桃素含量。

结果：金丝桃素在0.15-7.5μg范围内呈线性关系，（R =0.99987）,平均回收率97.92%，RSD=1.82(n=5)。

结论：该方法操作简便、分离效果好、价廉，可用于贯叶连翘中金丝桃素的含量测定及质量控制。

【关键词】贯叶连翘；金丝桃素；薄层色谱扫描【Abstract】Aim To determination of the content of hypercin in Hypericum Perforatum L by TLC-scanning. Metheds Silica GF254 thin layer plate was adopted in the determination with Petroleum ether-Ethyl acetate-methanol（2：4：1）asdeveloper by TLC-scanning, the detection wavelength was 588nm. Results Good linear correlation was within 0.15-7.5μg（R=0.99987）, the average recovery was 97.92%，RSD=1.82%(n=5). Conclusion This method is convenient in operation ,easy in separation and economical at cost .And TLC scanning can be used for the content determination and the quality control of Hypericum Perforatum L.【Key words】Hypericum Perforatum L; Hypercin; TLC-scannin金丝桃素是贯叶连翘中最具有生物活性的物质，研究表明金丝桃素在抗抑郁、镇静、抗菌消炎及抗肿瘤中具有显著的效果，尤其是在抗病毒活性方面作用突出。

高效液相色谱法测定贯叶连翘提取物中4种成分的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定贯叶连翘提取物中金丝桃素、金丝桃苷、芦丁和槲皮素含量的方法。

方法色谱柱为C18柱( 250 mm×4.6 mm，5 μm)；测定金丝桃苷、芦丁和槲皮素时，流动相为甲醇-乙睛-0.3%磷酸溶液，梯度洗脱，检测波长360 nm；测定金丝桃素时，流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液，检测波长580 nm。

结果金丝桃苷，槲皮素，芦丁、金丝桃素线性范围分别为1.97～20.3 μg・ml-1 (r=0.999 2)，2.47～24.7 μg・ml-1(r=0.999 1)，2.25～22.5 μg・ml-1(r=0.999 1) ， 0. 08～0.4 μg・ml-1(r=0.999 5)，方法回收率均不低于98%。

结论该方法简便、准确、重复性好，可用作贯叶连翘提取物中此4种成分的含量测定。

【关键词】贯叶连翘提取物金丝桃素金丝桃苷高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo develop a rapid high-performance liquid chromatography method for determination of hypericin， hyperoside，rutin and quercetin in Hypericum perforatum L. extracts.MethodsHPLC method was employed on C18 column (250 mm×4.6 mm， 5 μm). The hyperoside， rutin and quercetin were detected at 360 nm， eluted with gradient three mobile phase (methanol-acetonitrile-0.3% phosophoric acid). The Hypericin was detected at 580 nm and the mobile phase consisted of methanol and 0.02 mol·L-1 KH2PO4.Results The HPLC method showed a good linear relationship in the range of 1.97～20.3 μg/ml(r=0.999 2) for hyperoside， 2.47～24.7 μg/ml (r=0.999 1) for quercetin， 2.25～22.5 μg・ml-1 (r=0.999 1) for rutin and 0.08～0.4μg/ml(r=0.999 5) for hyperin. Recoveries for the four components were all above 98%.CondusionThis HPLC method is simple， accurate and repeatable and can be used for determination of the four components in Hypericum perforatum L. exatracts.Key words：Hypericum perforatum L. extracts; Hyperin; Hyperoside; HPLC贯叶连翘Hypericum performatum L.为藤黄科金丝桃属多年生草本植物，其味苦、辛，性平，可清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎［1］，国外在抗抑郁症方面也有广泛应用［2］。

金丝桃素是贯叶连翘中最具有生物活性的物质,研究表明金丝桃素在抗抑郁、镇静、抗菌消炎及抗肿瘤中具有显著的效果,尤其是在抗病毒活性方面作用突出。

由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所从贯叶连翘中分离提取的金丝桃素在抗禽流感病毒[1]、口蹄疫病毒[2]等病毒中显示出了良好效果。

我国有着丰富的贯叶连翘植物资源,利用这些资源优势对其有效成分及活性进行系统的研究,为新药的开发、应用以及一些疑难症的治疗提供坚实的科学依据,为进一步开发具有我国特有优势的中药新药产生极大的推动作用。

因此,本实验以金丝桃素为指标,首次采用薄层色谱扫描法对甘肃产药材贯叶连翘中金丝桃素的含量进行了研究,为贯叶连翘的资源开发提供依据。

薄层色谱法是在20世纪50年代从经典柱色谱法及纸色谱法的基础上发展起来的一种色谱技术。

近年来,薄层色谱采用更细、更均匀的吸附剂作为固定相,发展成现代薄层色谱法,其灵敏度已可与高效液相色谱法媲美,而且已经在天然药化含量测定中广泛应用,其特点是快速、方便、操作简单、试验成本低、分离条件易掌握且结果直观。

本实验尝试采用薄层扫描色谱法对贯叶连翘中所提取的金丝桃素进行分离和定量测定,得到了较为满意的结果。

现报道如下:1仪器与试药KH-2100薄层扫描色谱仪,(上海科哲生化科技有限公司);薄层硅胶板GF254(10cm×20cm),(青岛海洋化工);25μL 平头微量进样器,(宁波市镇海玻璃仪器厂)。

金丝桃素标准品,(Sigma 公司);贯叶连翘产于甘肃陇南,经鉴定为Hypericum Perforatum L 的全草;所用其他试剂均为分析纯。

2实验方法与结果2.1对照品溶液的制备精密称取金丝桃素对照品适量,加甲醇制成0.1mg/ml 的溶液,作为对照品溶液,冷藏,备用。

2.2供试品溶液的制备取适量贯叶连翘粗粉,无水乙醚反复浸渍,除去其中叶绿素,再用无水乙醇于60℃下多次浸提,直至TLC 检测无金丝桃素提出,合并无水乙醇浸提物,50℃内旋转蒸发仪浓缩,得到金丝桃素浸膏。

贯叶连翘金丝桃素贯叶连翘为藤黄科金丝桃属植物贯叶连翘Hypericum perforatum L的全草，它主要用于抗菌消炎、收敛止血、止痛，治疗吐血、外伤出血、肿毒等病症。

贯叶连翘中具有生物活性的成分主要为金丝桃素。

金丝桃素具有愈伤、利尿、治疗神经痛和解除精神痛苦等作用，备受关注的还有其抗艾滋病免疫缺陷病毒( HIV)的作用和抗抑郁作用以及作为癌症的光化学治疗中的一种有前途的内源性光敏剂。

超声波提取介绍：河南中冠健业生物科技有限公司从2010年购进CTG型超声波中药提取罐，通过不断实践，改进了多个中药提取工艺。

超声波是一种高频率的机械波，超声场主要通过超声空化向体系提供能量。

频率范围在15～60kHz的超声波，常被用于过程强化和引发化学反应。

超声波在中药有效成分提取等方面已有了一定的应用。

其原理主要是利用超声的空化作用对细胞膜的破坏，有助于有效成分的溶出与释放，超声波使提取液不断震荡，有助于溶质扩散，同时超声波的热效应使水温基本在57℃，对原料有水浴作用。

河南中冠健业生物陈工介绍说“超声波提取与传统的回流提取、索氏提取法等比较，，具有提取速度快、时间短、收率高、无需加热等优点，已被许多中药分析过程选为供试样处理的手段”。

中草药成分大多为细胞内产物，提取时往往需要将细胞破碎，而现有的机械或学破碎方法有时难以取得理想的效果，所以，超声破碎在中药的提取中已显示出明显的优势。

超声提取避免了高温加热对有效成分的破坏。

利用超声波技术提取贯叶连翘金丝桃素实例（河南中冠健业生物）名称：金丝桃素( hypericin)分子式：C30 H16 O8相对分子质量：504熔点／℃：320～321河南中冠健业生物科技有限公司用CTG型超声波中药提取罐提取工艺：1、贯叶连翘粗粉加水45℃浸泡2h，加75%醇超声强化20min；80℃回流提取3h后过滤。

得到滤液2、滤渣-加75%醇超声强化20min，2次80℃回流提取3h后过滤。

一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法在中药中，贯叶连翘是一种常见的草本植物，被广泛用于治疗感冒、咽喉炎、支气管炎、肺炎等呼吸系统疾病。

贯叶连翘中含有丰富的有效成分，其中的金丝桃素就是一种非常重要的成分，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用。

寻找一种高效的提取金丝桃素的方法，对于充分发挥贯叶连翘的药用价值至关重要。

有关如何从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法，我们需要考虑以下几个方面：1. 提取方法：目前，从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法有多种，包括经典的溶剂提取法、超声波提取法、微波提取法、超临界流体提取法等。

这些方法各有优缺点，需要根据实际情况选择合适的提取方法。

2. 提取条件：在选择提取方法的提取条件也是至关重要的。

包括提取温度、提取时间、搅拌速度、溶剂浓度等因素都会对金丝桃素的提取效率产生影响。

3. 提取设备：不同的提取方法需要不同的提取设备，例如溶剂提取法需要提取仪、蒸馏器等设备，而超声波提取法需要超声波提取仪等设备。

在选择提取方法时，还需要考虑提取设备的可用性和成本。

在实际应用中，我们需要综合考虑以上几个方面，选择合适的提取方法，找到最适合的提取条件，使用最合适的提取设备，从而实现高效、低成本的金丝桃素提取过程。

个人观点和理解：从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法是一个复杂而又关键的过程。

在这个过程中，我们需要不断尝试各种方法，总结经验，找到最适合的提取方法。

科学技术的发展也给我们带来了更多的可能性，例如超声波、微波等新型提取方法，可以极大地提高金丝桃素的提取效率。

总结回顾：提取金丝桃素是一个具有挑战性的任务，需要我们不断钻研、摸索，才能找到最适合的方法。

未来，随着科技的发展，相信会有更多先进的提取方法出现，为金丝桃素的提取提供更多可能性和便利。

参考资料：1. 陈玉泉. 溶剂提取法和超临界CO2 提取法提取金丝桃苷的比较研究[J]. 化工与环境, 2014.2. 高海若, 赵培昌, 等. 超声波辅助萃取金丝桃苷的工艺研究[J]. 中成药, 2019.以上是我根据你提供的主题撰写的文章，希望对你有所帮助。

贯叶连翘提取物1 范围本标准规定了贯叶连翘提取物的技术要求、检验方法、检验规则和标签、包装、运输、贮存要求。

本标准适用于以贯叶连翘为原料经提取而成的规格为总金丝桃素0.30%、贯叶金丝桃素3.0%的提取物。

2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T5009.146-2003 植物性食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留的测定SN/0339-95 出口茶叶中黄曲霉毒素B1的检验方法《中华人民共和国药典》2000年版一部3 结构式总金丝桃素（Hypericin）、贯叶金丝桃素（Hyperforin）结构式如下：4 技术要求4.1 工艺要求4.1.1 植物基源为藤黄科植物贯叶连翘(Hypericum perforatum L. )的干燥地上上半部分。

4.1.2 植物原料秋末采收，除去泥沙，阴干。

4.1.3 工艺过程用乙醇提取后，浓缩，干燥即得。

4.2 感官要求应符合表1的要求。

表14.3应符合表2的要求。

4.4卫生要求应符合表3的要求。

表 35检验方法5.1感官检验启开试样后，立即嗅其气味和品其滋味；另取试样适量置于白色瓷盘中观察其色泽、外观，并检查有无异物。

5.2理化要求5.2.1粒度按附录A中规定的试验方法进行测定。

5.2.2堆密度堆密度分为松密度和紧密度，按附录B中规定的试验方法进行测定。

5.2.3干燥失重按《中华人民共和国药典》2000年版一部中附录ⅠⅩ G 规定的方法进行测定。

5.2.4炽灼残渣按《中华人民共和国药典》2000年版一部附录中ⅠⅩ J 规定的方法进行测定。

5.2.5重金属按《中华人民共和国药典》2000年版一部中附录ⅠⅩ E 的第二法进行测定。

贯叶连翘提取物中金丝桃素的含量测定作者：王建舫崔德凤穆祥来源：《湖北畜牧兽医》2014年第05期摘要：本试验旨在建立一种高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）测定贯叶连翘提取物中金丝桃素含量的方法。

采用YMC-Pack ODS-A色谱柱（5 μm，150 mm×4.6 mm），以乙腈-0.02M磷酸二氢钠（85∶15）为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长588 nm，柱温25 ℃。

结果表明，金丝桃素在6～36 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 6），平均加样回收率为98.86%（n=6），峰面积的相对标准偏差（RSD）为3.15%。

此方法专属性强、重复性好，可用于贯叶连翘提取物中金丝桃素的含量测定。

关键词：贯叶连翘；金丝桃素；高效液相色谱；含量测定中图分类号：S853.7文献标志码：A文章编号：1007-273X（2014）05-0013-02贯叶连翘（Hypericum performatum L.）为藤黄科金丝桃属多年生草本植物，其味苦、辛，性平，可清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎[1]。

其主要活性成分金丝桃素具有光敏活性和光动力作用，有较好的抗病毒、抗肿瘤功效，同时也是贯叶连翘抗抑郁的主要活性成分之一[2]。

本试验采用高效液相色谱法对贯叶连翘提取物中金丝桃素进行了含量测定，建立了一种专一性强、重复性好的测定方法，为贯叶连翘提取物的质量控制提供依据。

1仪器与试药1.1仪器Waters Alliance e2695高效液相色谱仪；美国Millipore水纯化系统；针筒式微孔滤膜过滤器（上海兴亚净化材料厂产品，孔径0.22 μm）。

1.2药品与试剂金丝桃素（批号MUST-13121505，购自成都曼思特生物科技有限公司）；贯叶连翘提取物，购自北京经日今典科技有限公司；乙腈（色谱纯，天津市光复精细化工研究所）。

2方法与结果2.1色谱条件YMC-Pack ODS-A色谱柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流动相：乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钠（85∶15）；流速1.0 mL/min；检测波长588 nm；柱温25 ℃。

贯叶连翘中金丝桃素的提取与含量测定方法概述
刘卫东
【期刊名称】《药学研究》
【年(卷),期】2004(023)003
【摘要】贯叶连翘作为传统中药材入药,其活性成分在治疗抑郁症、肝炎、爱滋病及抗肿瘤方面具有重要的药用价值而被广泛关注.本文收集贯叶连翘近年来国内研究开发动态,介绍了有关金丝桃素的提取与含量测定方法的研究进展.
【总页数】2页(P40-41)
【作者】刘卫东
【作者单位】临沂市人民医院,临沂,276003
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.贯叶连翘中金丝桃素提取方法的研究进展 [J], 李双;王东强;李志军
2.贯叶连翘中金丝桃素的超声提取工艺研究 [J], 成晓迅;贾燕姿;王海涛;张会民;任风芝;张雪霞
3.微波提取贯叶连翘中金丝桃素的工艺研究 [J], 杨郭;李玉芝;李莉;梁晓峰;冯长林
4.超声提取贯叶连翘中总黄酮和金丝桃素的工艺研究 [J], 宋宏新;邢红香;李楠
5.贯叶连翘提取物中金丝桃素的含量测定 [J], 王建舫;崔德凤;穆祥
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