分泌物检查之宫颈脱落细胞学标本取材

妇科细胞学检查技术操作规范将阴道或宫颈的脱落细胞制成细胞涂片，经过染色及相应处理，观察细胞形态特征，也可用于外阴、阴道、宫颈、子宫内膜及输卵管等部位肿瘤的检测，也是炎症、内分泌状况诊断的一种检查方法。

【适应证】1.可疑外阴、阴道、宫颈、子宫内膜等部位肿瘤或炎症。

2.阴道排液、可疑输卵管肿瘤。

3.明确机体雌激素水平。

4.宫颈、阴道病毒感染。

5.有性生活女性体检必查项目。

【操作方法及程序】1．阴道脱落细胞检查患者取膀胱截石位，窥器打开阴道后，用刮板在阴道上1∕3侧壁处轻轻刮取黏液及分泌物，均匀涂抹于载玻片上，玻片上放置95％乙醇或置于10％福尔马林液中固定；巴氏染色、阅片。

2．宫颈脱落细胞检查患者取膀胱截石位，窥器打开阴道后，用刮板轻轻刮取宫颈黏液及分泌物，均匀涂抹于载玻片上，固定、染色、阅片方法同上。

3．吸片法用吸管吸取后穹隆积液，将其均匀涂抹于载玻片上并固定。

可用于阴道、宫颈、子宫内膜及输卵管病变的诊断，子宫内膜病变者尚可用专门制备的纤维宫腔吸管，伸入宫腔，吸取宫腔内液体、细胞涂片，固定、染色、阅片方法同上。

4．薄层液基细胞涂片技术（TCT）应用特殊毛刷传统的操作方法伸入宫颈管内，旋转一周取样，将所取样本放入特制装有液体的小瓶中，经离心制片，固定、染色、阅片方法同上。

该技术使薄片上细胞均匀分布、形态伸展、去除黏液及红细胞的干扰，细胞利于阅片者辨认。

5．计算机辅助宫颈细胞学诊断技术（CCT）将细胞学诊断标准和计算机图形处理技术相结合，制成计算机细胞学诊断程序，利用计算机阅读细胞涂片，进行诊断。

6．薄层液基细胞涂片技术及计算机辅助宫颈细胞学诊断技术（LCT）将薄层液基细胞涂片技术与计算机辅助宫颈细胞学诊断技术结合，更加方便、快捷，但因价格昂贵，使用不多。

【注意事项】1．标本采集前3d应避免性交、阴道检查、阴道冲洗及上药。

2．宫颈黏液较多时应使用干棉签将其轻轻拭去。

3．阴道出血时应避免采集标本。

4．可将细胞固定储存于液态储存液中，使用时制备成细胞涂片，特定的固定液可将红细胞及黏液溶解，使细胞形态更加清晰，易于观察。

宫颈细胞学检查的详细步骤及注意要点Cervical CVtological Examination一、目的宫颈细胞学检查是通过对官颈及官颈管脱落细胞的检查，进行官颈癌前病变和官颈癌的筛查、诊断。

二、适应证1.-般人群的官颈癌筛查：凡有性生活的女性，应每1—2年进行一次宫颈癌筛查。

2.有接触性出血、不规则阴道流血或有阴道排液者、临床检查宫颈异常的妇女。

3.因妇科良性疾患拟行子宫切除手术前。

4.高危人群的复查：曾有过细胞学异常、官颈病变或官颈癌治疗后的随诊。

三、操作前准备1.器械准备1）-般材料同妇科检查所用材料。

2）宫颈涂片所需特殊物品：干燥棉球、长弯钳、特殊形状的刮板（图40-1）、毛刷、玻片（一侧为毛玻璃、95qo酒精、含检查介质-的小瓶。

注意：注意根据需要选择所用形状刮板。

2.患者准备：同盆腔检查。

3.操作者准备：同盆腔检查四、操作步骤患者取膀胱截石位，臀部紧邻检查床缘，头部稍高，双手臂自然放置床两侧，腹部放松，检查者而向患者，站立在其两腿之间。

如患者病情危重，不能搬动时也可在病床上检查，检查者站立在病床的右侧。

根据需要选择所用器具。

放置窥阴器方法见盆腔检查。

1,涂片法(pap smear):1）将一张干燥的玻片取出，用铅笔在有毛玻璃的一侧写好患者姓名（不要贴不干胶等，以免染色时将患者姓名消掉。

注意：做好标记非常重要，以免标本搞混。

2）正确放置窥阴器暴露官颈后用干棉球轻轻擦拭宫颈表面黏液样分泌物后进行涂片做细胞学检查。

注意：擦拭力度要轻柔以免官颈脱落细胞丢失。

3）用特制的小刮板的一头伸入宫颈管，另一头贴覆在官颈表面，以官颈外口为圆心沿一个方向轻轻旋转一周（图40-2），将其沿一个方向涂在已准备好的玻片上。

图432宫颈刮片4）95%酒精固定标本后待巴氏染色后显微镜下观察细胞形态。

5）如果没有特制刮板，可分别进行官颈表面和官颈管涂片：即用普通刮板贴覆于官颈表面轻轻刮取分泌物后涂片；再用较细的刮板伸入至宫颈管内，沿一个方向旋转后再将所取细胞涂在玻片上送检。

遗传学常见名词及解释A埃姆斯测验法Ames test Bruce Ames 于1970年人用鼠伤寒沙门氏菌（大鼠）肝微粒体法来检测某些物质是否有诱变作用。

氨基酸amino acids是构成蛋白质的基本单位，自然界中存在20种不同的氨基酸。

氨酰基- tRNA aminoacyl-tRNA tRNA的氨基臂上结合有相应的氨基酸，并将氨基酸运转到核糖体上合成蛋白质。

氨酰基- tRNA 合成酶aminoacyl-tRNAsynthetase催化一个特定的tRNA结合到相应的tRNA分子上。

因有20种氨基酸，故有20种氨基酰-tRNA合成酶。

AP位点AP site 即脱嘧啶脱嘌呤的位点，由DNA上碱基糖苷链的断裂形成，在修复时可供脱嘧啶嘌呤内切酶识别。

癌cancer 一种恶性肿瘤，细胞正常分裂失去控制，异常分裂且可在生物体内扩散。

暗修复dark repair 即切除修复(excision repair)。

B白化albino一种常染色体隐性遗传突变。

动物或人的皮肤及毛发呈白色，主要因为在黑色素合成过程中，控制合成酪氨酸酶的基因发生突变所致。

并联X染色体attached X果蝇的一对X染色体端端相连，作为一个单位进行遗传。

巴氏小体Barr body在正常雌性哺乳动物的核中有一个高度凝聚的染色质团，它是一个失活的X染色体。

编码序列coding sequence mRNA分子的部分，在翻译时它对应于多肽的氨基酸序列。

并发系数coefficient of coincidence用来衡量干涉的程度，即实际双交换的值除以同一区域预期的双交换的值(s=v/ ), 当0<s<1为正干涉；s=0为完全干涉;s> 1为负干涉;s=1为无干涉。

保守序列，共有序列consensus sequence普遍存在的共同序列，在不同的基因中具有相同的功能，如启动子、操纵子和剪切位点等。

保守复制conservative replication已被否定的一种DNA复制模型，认为一半子代DNA分子具有新合成的两条互补链。

脱落细胞检查标本采集和涂片制作方法一、标本采集正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一，故要准确地选择部位，尽可能在病变区直接采集细胞。

采集的标本必须保持新鲜，尽快制得，以免细胞自溶或腐败。

尽可能避免血液、粘液等混入标本内，采集方法应简便，操作轻柔，避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散，下面介绐几种常用的标本采集方法。

（一）直视采集法外阴、阴道、阴道穹窿、宫颈、口腔、肛管、鼻腔、鼻咽部、眼结膜及皮肤等部位，可以直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗、食管、胃、直肠、气管和肺内支气管则使用纤维内镜在病灶处直接刷取细胞制片。

（二）自然分泌液的采集法1．痰液涂片检查：痰兴高采烈为支气管等呼吸的分泌物，对支气管肺癌和其它呼吸道疾病细胞学诊断具有重要价值。

2．尿液涂片检查：收集尿液中脱落的泌尿道细胞成分，作泌尿道肿瘤和某些疾病的细胞学诊断。

3．乳头溢涂片检查：用于导管内乳头状瘤和乳腺癌细胞学检查。

4．前列腺液涂片检查：采用前列腺按摩法取得分泌物，作前列腺细胞学诊断。

（三）灌洗洗向空腔器官或腹腔、盆腔（剖腹探查时）灌注一定量生理盐水冲洗，使其细胞成分脱落于液体中，收集灌洗液离心制片，作细胞学检查。

（四）磨擦法利用磨擦工具在病变部位磨擦，将擦取物直接涂片。

常用磨擦工具有海棉磨擦器、线网套、气囊等。

可分别用于鼻咽部、食管和胃部病灶的取材。

（五）针穿抽吸法当有胸腔、腹腔、心包腔及关节腔积液时，可用针穿抽吸部分积液作细胞学检查。

此外某些深部组织器官，如淋巴结、甲状腺、软组织、肝等亦可作细针穿刺吸取部分细胞进行涂片诊断。

二、涂片制作方法（一）涂片前准备工作及涂片方法1．涂片前准备工作（1）保证标本新鲜，取材后尽快制片。

（2）涂操作要轻巧，避免挤压以防止损伤细胞。

涂片要均匀，厚薄要适度，太厚细胞堆叠，太薄细胞过少，均影响诊断。

（3）玻片要清洁无油渍，先用硫酸洗涤液浸泡冲洗，再用75%乙酸浸泡。

（4）含蛋白质的标本可直接涂片，缺乏蛋白质的标本，涂片前先在玻片上涂薄层粘附剂，以防止染色时细胞脱落，常用粘附剂为蛋白甘油，由等量生鸡蛋白和甘油混合而成。

检验科常见细胞学检测方法解析细胞学检测是一项重要的临床辅助检查手段，通过对细胞的形态、结构和功能进行观察和分析，有助于对病理变化的了解和诊断。

在检验科中，常见的细胞学检测方法有涂片法、细针穿刺法和脱落细胞法等。

下面将对这些方法进行解析。

一、涂片法涂片法是一种常用的细胞学检测方法，适用于各种体液和组织的细胞学检查。

具体操作流程如下：1. 采集标本：根据需要，采集相应的体液或组织标本。

2. 制备涂片：将采集到的标本涂抹在载玻片上，并利用刮刀或刷子等工具均匀涂开。

3. 固定：将涂片迅速放入乙醇或甲醛等适当的固定液中，固定细胞。

4. 染色：进行合适的染色方法，如吉姆萨染色、Papanicolaou染色等。

5. 镜检：将涂片放在显微镜下观察，检测细胞形态、结构及异常变化。

涂片法可用于细胞学检测的各个领域，如妇科细胞学、尿液细胞学、胸腔积液细胞学等。

其操作简便、结果可靠，被广泛应用于临床。

二、细针穿刺法细针穿刺法是一种通过直接穿刺采集组织细胞的方法，适用于部分实质性或囊性病变的细胞学检查。

具体操作流程如下：1. 准备针具：选择合适的针具，并准备好穿刺部位。

2. 采集标本：在穿刺部位进行穿刺，将组织标本吸入针芯。

3. 制备涂片：将针芯中的组织标本滴在载玻片上，并利用刮刀或刷子等工具均匀涂开。

4. 固定和染色：操作同涂片法。

5. 镜检：将涂片放在显微镜下观察，检测组织细胞的形态、结构及异常变化。

细针穿刺法常用于肿块、结节等病变的细胞学鉴定，对于干细胞移植、乳腺穿刺细胞学等领域也有广泛应用。

三、脱落细胞法脱落细胞法是通过采集脱落细胞进行细胞学检测的一种方法，适用于许多细胞学诊断。

具体操作流程如下：1. 采集标本：采集需要检测的脱落细胞样本，如宫颈刮片、尿液等。

2. 制备涂片：将采集到的标本涂抹于载玻片上。

3. 固定和染色：操作同涂片法。

4. 镜检：将涂片放在显微镜下观察，检测脱落细胞的形态、结构及异常变化。

脱落细胞法常用于妇科细胞学检查，如宫颈癌筛查。

遗传学常见名词及解释A埃姆斯测验法Ames test Bruce Ames 于1970年人用鼠伤寒沙门氏菌（大鼠）肝微粒体法来检测某些物质是否有诱变作用。

氨基酸amino acids是构成蛋白质的基本单位，自然界中存在20种不同的氨基酸。

氨酰基- tRNA aminoacyl-tRNA tRNA的氨基臂上结合有相应的氨基酸，并将氨基酸运转到核糖体上合成蛋白质。

氨酰基- tRNA 合成酶aminoacyl-tRNAsynthetase催化一个特定的tRNA结合到相应的tRNA分子上。

因有20种氨基酸，故有20种氨基酰-tRNA合成酶。

AP位点AP site 即脱嘧啶脱嘌呤的位点，由DNA上碱基糖苷链的断裂形成，在修复时可供脱嘧啶嘌呤内切酶识别。

癌cancer 一种恶性肿瘤，细胞正常分裂失去控制，异常分裂且可在生物体内扩散。

暗修复dark repair 即切除修复(excision repair)。

B白化albino一种常染色体隐性遗传突变。

动物或人的皮肤及毛发呈白色，主要因为在黑色素合成过程中，控制合成酪氨酸酶的基因发生突变所致。

并联X染色体attached X果蝇的一对X染色体端端相连，作为一个单位进行遗传。

巴氏小体Barr body在正常雌性哺乳动物的核中有一个高度凝聚的染色质团，它是一个失活的X染色体。

编码序列coding sequence mRNA分子的部分，在翻译时它对应于多肽的氨基酸序列。

并发系数coefficient of coincidence用来衡量干涉的程度，即实际双交换的值除以同一区域预期的双交换的值(s=v/ ), 当0<s<1为正干涉；s=0为完全干涉;s> 1为负干涉;s=1为无干涉。

保守序列，共有序列consensus sequence普遍存在的共同序列，在不同的基因中具有相同的功能，如启动子、操纵子和剪切位点等。

保守复制conservative replication已被否定的一种DNA复制模型，认为一半子代DNA分子具有新合成的两条互补链。

病理标本的采集、运送、接受、取材、保存制度一、病理标本的采集1、组织标本的收集：在活检或手术过程中，对病变部分应尽量保存完好，完整切除，避免挤压变形，活检组织应取肿瘤的部分，而不要取肿瘤周围、表面或坏死部分。

2、组织标本的固定：手术标本切除后应马上用10%的中性福尔马林固定，以免细胞自溶影响诊断，大标本应间隔3CM用平行切口切开，以利固定液渗透。

3、细胞学标本的收集：脱落细胞学检查标本，包括痰、胸腹水、脑脊液等取材后马上送病理科；咽、喉、宫颈、阴道拭子涂片等，及时涂片固定；穿刺细胞学标本，穿刺后置于载玻片，用另一张载玻片轻柔地推片，将穿刺物均匀地涂在载玻片上（不能太厚），马上固定于95%的乙醇（或乙醚酒精）。

4、标本容器上写上或贴上有病人姓名的标签，涂片应有编号及病人姓名。

二、病理标本的运送1、临床各科室及门诊应安排人员负责标本的清点、查对、登记、运送（不允许让病人或其家属送标本），并与病理科值班人员交接核对，并在专设的标本登记本上签收。

2、手术室标本（含门诊小手术室）：由手术室工作人员根据医师开出的病理会诊单负责清点、查对登记、运送；病理科值班人员签收。

3、病理科验收各种标本，对标本不符合要求及申请单填写不规范、不整洁，单与标本不符合者，应及时退还，待纠正后重新核对、签收。

4、标本的送检及交接时间(1)细胞学标本：痰上午8:00～9:00刮片及穿刺涂片：上午9:00～11:30，下午2:30～5:00胸腹水、尿液等随到随收(2)组织活检标本：每天16：00点前。

(3)冰冻切片诊断，冰冻切片提前一天填写冰检查申请单和知青同意书送至病理科，周一至五上午8:00-下午5:00随送随检，其余时间应预先通知；应专人运送标本，并做好登记交接。

5、病理报告的发出和回送门诊的病理报告及细胞学报告由病理科专人至门诊导诊台并签收；住院病人的病理报告及细胞学报告，每天下午（5:00前）送回各送检科室，由当班医师或护士在专设的报告单登记本上签收。

脱落细胞检验取材
1.自然管腔器官内表面粘膜：
人体器官粘膜上皮细胞经常有脱落更新，( )有病变的粘膜上皮细胞更易脱落，如阴道上皮，支气管粘膜上皮、肾盂膀胱移行上皮、和乳腺导管上皮等都是自然脱落的上皮细胞。

鼻咽部、口腔、食管和胃粘膜的标本除自然脱落细胞外，部分是人工获取所得。

2.体腔抽出液：
有胸膜腔、腹膜腔、心包腔积液和脑脊髓膜腔积液等。

3.针吸细胞：
利用细针穿刺病变或肿物( )，抽吸出少许病变组织细胞作涂片检验，称针吸细胞学。

吸出的细胞完全是人为的脱落细胞，由于对其诊断的方法和价值与自然脱落细胞相似，故归属脱落细胞，也可以说是本门学科的一个发展。

常用于乳腺肿块和皮下组织肿物的穿刺;肿大淋巴结、甲状腺和涎腺的穿刺;在超声波像定位下对肝、胰等器官肿物的穿刺。

细胞病理学(cytopathology)是检验医学的一个分支，是通过检查细胞的形态结构，进行健康和疾病的筛查、诊断和研究，即对无症状个体进行癌前病变的筛检，对有症状或有体征患者进行诊断和鉴别诊断。

根据标本采集方法不同，分为脱落细胞学（exfoliative cytology）和细针吸取细胞学(fine-needle aspiration cytology)。

基本检验技术一、标本采集1、原则：①正确地选择采集部位：这是细胞学诊断的基础和关键。

故要求准确地选择采集部位，应在病变区直接采集细胞。

②标本须新鲜：尽快制片，防止细胞腐败或自溶。

③避免干扰物混入，如粘液、血液等。

④采集方法应简便易行，操作应轻柔，减轻病人痛苦，避免引起严重并发症和肿瘤扩散。

2、采集方法：①直接采集法，②自然分泌液采集法，③灌洗法，④摩擦法，⑤针穿抽吸法直接采集法：皮肤、外阴、阴道、阴道穹窿、宫颈、肛管、口腔、鼻腔、鼻咽部及眼结膜等部位可直接用刮片刮取、刷洗、吸管吸取。

食管、气管和肺支气管、胃及直肠则可用纤维内镜在病灶处直接刷取细胞制片。

（一）自然脱落细胞标本脱落自上皮表面，包括：①咳出：如痰液。

②排泄或导尿：如尿液。

③挤压：如乳头分泌物等。

【主要特点】：①易从病变器官获取标本。

②标本内常含大量各种不同来源、不同类型的细胞，亦可含有炎性细胞、巨噬细胞、微生物和外源性污染物。

③细胞成分保存较差。

④能进行多次标本采集。

（二）非自然脱落细胞指通过物理刮擦作用取得的细胞，采集方法包括：①刷取：如气管、子宫颈。

②刮取：如乳头、皮肤、子宫颈。

③灌洗：用生理盐水溶液冲洗所得液体，如支气管。

【主要特点】：①能直接从病变器官表面采样，如子宫颈和支气管。

②使用纤维镜能直接从器官内部获取。

③能获得上皮细胞下的病变标本。

④细胞成分保存良好，但在结果解释时，不能采用与脱落细胞相同的标准。

（三）细针穿刺细胞标本通过穿刺吸取或非吸取法，从充满液体的器官或实体性器官中获得细胞标本，如肿瘤、心包膜腔积液、胸膜腔积液、腹膜腔积液和脑脊液等。

遗传学常见名词及解释A埃姆斯测验法Ames test Bruce Ames 于1970年人用鼠伤寒沙门氏菌（大鼠）肝微粒体法来检测某些物质是否有诱变作用。

氨基酸amino acids是构成蛋白质的基本单位，自然界中存在20种不同的氨基酸。

氨酰基- tRNA aminoacyl-tRNA tRNA的氨基臂上结合有相应的氨基酸，并将氨基酸运转到核糖体上合成蛋白质。

氨酰基- tRNA 合成酶aminoacyl-tRNAsynthetase催化一个特定的tRNA结合到相应的tRNA分子上。

因有20种氨基酸，故有20种氨基酰-tRNA合成酶。

AP位点AP site 即脱嘧啶脱嘌呤的位点，由DNA上碱基糖苷链的断裂形成，在修复时可供脱嘧啶嘌呤内切酶识别。

癌cancer 一种恶性肿瘤，细胞正常分裂失去控制，异常分裂且可在生物体内扩散。

暗修复dark repair 即切除修复(excision repair)。

B白化albino一种常染色体隐性遗传突变。

动物或人的皮肤及毛发呈白色，主要因为在黑色素合成过程中，控制合成酪氨酸酶的基因发生突变所致。

并联X染色体attached X果蝇的一对X染色体端端相连，作为一个单位进行遗传。

巴氏小体Barr body在正常雌性哺乳动物的核中有一个高度凝聚的染色质团，它是一个失活的X染色体。

编码序列coding sequence mRNA分子的部分，在翻译时它对应于多肽的氨基酸序列。

并发系数coefficient of coincidence用来衡量干涉的程度，即实际双交换的值除以同一区域预期的双交换的值(s=v/ ), 当0<s<1为正干涉；s=0为完全干涉;s> 1为负干涉;s=1为无干涉。

保守序列，共有序列consensus sequence普遍存在的共同序列，在不同的基因中具有相同的功能，如启动子、操纵子和剪切位点等。

保守复制conservative replication已被否定的一种DNA复制模型，认为一半子代DNA分子具有新合成的两条互补链。

tct液基薄层脱落细胞标本制备脱落细胞标本制备是一项非常重要的技术，它能够通过收集和准确的处理细胞脱落物样本来为医生们提供诊断和治疗疾病的关键信息。

本文将详细介绍TCT液基薄层脱落细胞标本的制备过程，并为技术操作提供一些建议和注意事项，以确保获得高质量的标本。

首先，我们需要明确TCT液基薄层脱落细胞标本制备的目的。

该制备方法旨在将宫颈或其他部位的脱落细胞收集并固定在载玻片上，使细胞保持形态完整，并能够通过显微镜进行准确的细胞学分析。

制备TCT液基薄层脱落细胞标本的第一步是采集样本。

采集样本时，医生需要使用专用的刷子或刮片轻轻擦拭宫颈或其他感兴趣部位以收集脱落细胞。

在采集过程中，应注意避免采集到过多的血液或分泌物，以免影响样本的质量。

接下来，我们需要将收集到的细胞样本转移至TCT液基试剂中。

TCT液基试剂通常含有细胞固定剂和保存液，可保持细胞的形态和结构。

在转移样本时，应注意将刷子或刮片浸入试剂中，并在其中来回旋转，以确保将细胞充分溶解在试剂中，防止细胞团聚导致标本不均。

完成样本转移后，我们需要进行样本的预处理。

这一步骤包括使用离心机对样本进行离心，以去除冗余的细胞和杂质。

离心的速度和时间应根据制备试剂的使用说明进行调整。

在离心后，应将上清液轻轻倾倒，留下细胞沉淀。

接下来，我们需要使用专用的涂片制备装置，将细胞沉淀均匀地涂抹在载玻片上。

涂片时，应注意使用均匀的涂片速度和力度，以避免细胞沉淀的聚集或不均匀。

完成涂片后，我们需要对样本进行染色。

染色有助于突出细胞的核染色体和细胞器等结构，使细胞更易于识别和分析。

目前常用的染色方法有校正底物染色和抗体染色等。

具体的染色方法应根据实验室的需求和研究目的来确定。

最后，我们需要使用显微镜对标本进行观察和分析。

在观察过程中，应注意调整显微镜的倍率和焦距，以获得清晰的细胞图像。

在分析过程中，应注意仔细观察细胞的形态、核质比和细胞器的特征，并记录和识别任何异常细胞的存在。