培养基母液的配制模板.ppt
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实验1、培养基母液的配制一、实验目的1、了解植物组织与细胞培养基的基本类型和组成。
2、掌握植物组织与细胞培养基各种母液的配制方法。
二、实验原理离体植物组织和细胞的生长、分化所需要的营养物质都是由培养基供给。
基本培养基通常包括大量元素、微量元素、有机物以及糖和水,完全培养基是在基本培养基的基础上,附加植物生长调节剂、椰乳、香蕉汁、番茄汁等天然提取物。
迄今为止,基本培养基的配方已有几百种,但较常用的有一二十种,如MS、White、N6、B5等。
实验用的培养基一般是先配成10-100倍的母液,用时再按配方配制培养基。
二、实验用品1、实验器材:冰箱、电炉、电子天平、移液管、量筒、烧杯(1000mL、500mL、50mL)、容量瓶、玻璃棒、试剂瓶(1000mL)、标签纸等。
2、实验试剂:MS培养基配方中的19种试剂,2,4-D,KT,NaOH,HCl,95%乙醇,HgCl2,次氯酸钠,蒸馏水等。
三、实验方法1、大量元素母液的配制按表1-1计算并称取各试剂,用蒸馏水依次溶解,最后定容到1000mL,即为10倍的大量元素母液,倒入试剂瓶,贴好标签,保存于4℃冰箱里。
表1-1 MS培养基大量元素母液试的配制注意1: ①称取量的值(mg)=规定量(mg/L)×扩大倍数×母液体积(L)②每称量一种试剂,都要在备注栏中相应的部分做好标记,比如写上日期和划出“√”。
注意2:①为避免沉淀现象发生,应将Ca 2+、SO42-、Mg 2+和H 2PO 4一等离子错开混合,速度宜慢,边搅拌边混合;②CaCl 2·2H 2O 要在最后单独加入,在溶解CaCl 2·2H 2O 时,蒸馏水需加热沸腾,除去水中的CO 2,以防沉淀。
另外,CaCl 2·2H 2O 放入沸水中易沸腾,操作时要防止其溢出。
③如遇沉淀,缓慢加入(注意搅拌)1mol/L 的Hcl 将其溶解。
2、微量元素母液的配制按表1-2计算并用分析天平称取各试剂,用蒸馏水依次溶解,最后定容到1000mL ,即为100倍的微量元素母液,倒入试剂瓶,贴好标签,保存于4℃冰箱里。