茶多酚抗氧化作用的研究与应用

—：＝＝４４　２０１５年９月　第３６卷第１７期　食品研究与开发　Ｆｏｏｄ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　基础研究　

ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１５．１７．０１１　

茶多酚与类胡萝卜素的协同抗氧化作用　

王绪英，王婉婷　

（六盘水师范学院生命科学系，贵州六盘水５５３００４）　

摘要：采用ＤＰＰＨ和羟自由基（・ＯＨ）体系的清除试验，比较茶多酚与类胡萝卜素单独和复配后的抗氧化活性。结果　显示：在羟自由基（・ＯＨ）体系中两者的协同抗氧化能力更为显著，当茶多酚浓度稀释一倍或两倍时，随类胡萝卜素浓　度的升高，两者的混合物对羟自由基（・ＯＨ）的清除率也逐渐升高。在ＤＰＰＨ自由基体系中，当茶多酚浓度稀释一倍或　两倍时，随类胡萝卜紊浓度的升高，两者的混合物对ＤＰＰＨ自由基的清除率先升高后降低。　

关键词：茶多酚；类胡萝卜素：协同抗氧化作用　

Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｅａ　Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ　ａｎｄ　Ｃａｒｏｔｅｎｉｏｄｓ　

ＷＡＮＧ　Ｘｕ—ｙｉｎｇ，ＷＡＮＧ　Ｗａｎ—ｔｉｎｇ　

（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｌｉｕｐａｎｓｈｕｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｌｉｕｐａｎｓｈｕｉ　５５３００４，Ｇｕｉｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｅ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｔｈａｔ　ｗｅｒｅ　ｍａｄｅ　ｕｐ　ｏｆ　ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ　

（－ＯＨ）ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ　ａｎｄ　ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　

ｏｆ　ｔｈｅｍ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ：ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ（・ＯＨ），ｔｈｅ　ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｃａｐａｃｉｔｙ　

国里困匡蟊目　；｝　刚惟　乩　药物研究　

茶多酚西洋参抗氧化活性比较及协同增效作用研究　

王岳飞’　李磊’　谢争珍　杨贤强’　

（１．浙江大学茶学系浙江杭州３１００２９；２．浙江大学管理学院０６级浙江杭州３１００５８）　

【摘要】茶ｆ￣（Ｔｅａ—ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ，ＴＰ）是茶叶中最主要活性物质，国内外大量研究表明茶多酚具有抗氧化、防止肿瘤，预防心血管疾　病等生物学活性。茶多酚的低氧化还原电位和酚鲞的供氢能力，使其成为一类出色的天然抗氧化剂。　。　【关键词】茶多酚试验　【中图分类号】ＴＳ２　７　２　【文献标识码ｌ　Ａ　．【文章编号】１６７４—０７４２（２００８）１　０（ｂ）一００６８一Ｏｌ　

由于天然抗氧化剂之间往往存在协同增效作用，不同抗氧化　

剂之间的配备已成为目前研究的热点。西洋参（Ｐ　ａ　ｎ　ａ　ｘ　

ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ　Ｌ．）是名贵的益气养阴药之一，具有滋补强壮、养　血生津等功能，其提高免疫和缓解疲劳的功能已被大量研究所证　

明。因此，我们以ＦＲＡＰ法比较研究茶多酚和西洋参的抗氧化活　

性，以及相互间的协同增效作用。　

１材料与方法　１．１材料、试剂　

茶多￣￣／（ＴＰ９８％，ＥＧＣＧ４５％），无锡明欣生物工程有限公司提供Ｉ　

西洋参提取物（含总皂甙４５％），浙江大学茶学系提供；　

分光光度计，ＫＹＣｌ００Ｂ型摇床，ＬＣ－２０１０高效液相色谱仪　

（Ｓｈｉｍａｄａｚｕ公司）。　

三吡啶三吖嗪（ＴＰＴＺ）购自上海ｓｉｇｍａ公司，试剂号Ｔ１２５３；　

色谱纯乙腈（美国ＴＥＤＩＡ公司）；　醋酸一醋酸钠缓冲液（ｐＨ３．６），实验室自己配制；　

其他试剂均为分析纯。　

１．２抗氧化试验方法　１．２．１　３００ｍｍｏｌ／Ｌ醋酸一醋酸钠缓冲液（ｐＨ３．６）的配制准　确称取１．８７ｇ无水醋酸纳，溶于１６ｍＬ无水醋酸中，加水至１Ｌ，混　

匀。　

１．２．２　ｌＯｍｍｏｌ／Ｌ　ＴＰＴＺ溶液的配制准确称取０．１５９４ｇＴＰＴＺ，　溶解在５０ｍＬ，４０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ溶液中。　１．２．３　ＦＲＡＰ工作液的配制将２５ｍＬ　３００ｍｍｏｌ／Ｌ醋酸一醋　

第 1 页 茶叶多酚类及其氧化产物的抗氧化作用

*导读：多酚类及其氧化产物的抗氧化作用多指其清除自由基的作用。自由基指含有未成对电子的原子、原子团或分子。生物体内自由基的生成途……

多酚类及其氧化产物的抗氧化作用多指其清除自由基的作用。自由基指含有未成对电子的原子、原子团或分子。生物体内自由基的生成途径主要有三条：①分子氧的单电子还原途径。这一过程产生102、.OH和H202。②酶促催化产生自由基。机体细胞液中的一些可溶性酶，如黄嘌呤氧化酶、醛氧化、脂氧化酶等都是常见的可产生自由基的酶。③某些生物物质的自动氧化生成自由基。一些蛋白质、脂类、低分子化合物的自动氧化，过氧化物与某些金属离子的氧化还原均可产生自由基。生物体内自由基处于生物生成体系与生物防护体系的平衡之中。一旦平衡被破坏，就会危害机体，发生疾病。需要外源的抗氧化剂清除自由基，保护机体正常运转。

抗氧化剂清除自由墓，依其作用的性质通常分为两大类：第一类为预防型抗氧化剂。这一类抗氧化剂可以清除链引发阶段的自由基，如SOD、CAT等酶以及金属离子络合剂等。第二类抗氧化剂是断链型抗氧化剂，可以捕捉自由基反应链中的过氧自由基，阻止或减缓自由基链反应的进行。 第 2 页 茶多酚及其氧化产物是一类含有多个酚性羟基的化合物，较易氧化而提供质子，具有酚类抗氧化剂的通性。尤其是B环上的邻位酚羟基或连位酚羟基较高的还原性，易发生氧化生成邻醌类物质，而提供的H+与自由基结合，使之还原为惰性化合物或较稳定的自由基，从而直接清除自由基，避免氧化损伤。另外，茶多酚及其氧化产物还可作用于产生自由基的相关酶类，络合金离子，可间接清除自由基，从而起到预防和断链双重作用。茶多酚及其氧化产物的抗氧化、清除自由基的作用已受到国内外学者的广泛关注，并对其作用效果和机理展开了广泛的研究。

松崎妙子等研究了4种儿茶素对猪油的抗氧化力，表明按等物质的量浓度的抗氧化活性顺序是：L-EGCG L-EGC L-ECG L-EC;按等重量的抗活性顺序是：L-EGC L-EC L-ECG L-EGCG。Oldreive，C研究指出，多酚可清除活性氮自由基引起的酪氨酸硝化作用和DNA碱基的脱氨基作用，从而可预防胃癌的发生。另有体外研究表明，茶多酚及L-EGCG对02-的清除能力强于维生素E和维生素C，并在一定浓度范围内随浓度增加而加强，至610-3mg/ml时清除率达到最高(97%)，对于Fenton反应产生的OH，在最适浓度(0.043-O.100mg/ml)内清除率可达99%。Lin JK对体外的60细胞研究表明，清除的0f能力呈如下顺序：EGCG TF2(茶黄素单没食子酸酯)TFi(茶黄素)GA(没食子酸)TF3(茶黄素双没食子酸酯PG(没食子酸丙酯)。对H2 02的清除能力则为TF2TF3TFi，EG(PG，GA。Vasyl M. Sava研究指出，茶色素不论是从茶叶中 第 3 页 直接提取而来，还是由茶多酚转化而来，都具有清除自由基的能力。茶儿茶索具有抗脂质过氧化作用，从而有益于延缓机体衰老。当机体内由于多种原因引起的自由基增多或维生素E和辅酶Q的保护不足时，生物膜中的磷脂发生过氧化作用，细胞坏而导致细胞的衰老。研究表明，茶儿茶素对脂质过氧化反应有抑制作用，其效果比现有服用的维生素E更为明显。

- 1 - 茶多酚热解特性及其反应机理研究

茶多酚是一种天然的多酚化合物，其存在于许多茶类中。它也被称为茶多酚水解物，是指从茶树叶中提取出的天然植物多酚类物质。茶多酚的热解反应是一个复杂的化学过程，是茶叶制备所得到的各种产物的形成的关键过程。茶多酚热解的温度和反应特性是一个重要的研究课题，解决茶多酚热解过程中反应机理及其影响因素也是一个重要的方向。

茶多酚的热解分为热裂解、热重整和热水解等，主要形成的物质是甲醇、乙醇、酮类、芳香烃等，是茶树叶具有芳香香味的重要成分。热裂解在室温和常温下，形成的物质主要是乙烯、丙烯，具有一定的挥发性；热重整，主要形成的成分是乙醇、丁醇，具有一定的芳香香味；热水解，形成的主要物质是酮类，用以调节香气和口感。

在茶多酚热解反应中，物理热解和化学热解相结合，其反应机理主要为：物理热解形成的小分子物质，如乙烯、丙烯、乙醇、丁醇，有利于化学反应的发生，与茶多酚中的乙醇单体和它们的缩合反应；化学热解中，乙醇单体与酮类缩合生成芳香烃类，形成香气和口感；化学热解中的挥发性挥发物，是形成活性成分等芳香物质，如芳构物，咖啡因，以及其他令人愉悦的气味和口感的重要成分。

另外，茶多酚的热解反应还受到茶叶的品质和茶多酚含量的影响。茶叶品质可以影响茶多酚热解反应的温度和反应时间，对于茶多酚含量较高的茶叶，热解反应速度要快于低茶多酚含量的茶叶。茶叶的叶片形态也会影响茶多酚热解反应。叶片越薄软，热解速度就越快；叶 - 2 - 片越厚硬，热解速度就越慢。

茶多酚热解反应受到多种因素的影响，其反应机理也受到许多因素的影响。还有，在热解反应中，茶多酚热解反应可以生成香气及口感，以及各种有活性成分的物质，这些物质具有保健功能。因此，要研究茶多酚热解反应特性及其反应机理，也是提升茶叶品质、开发新型茶叶产品的重要方向。

当前，研究茶多酚热解反应的研究仍然处于起步阶段，采用的方法主要是单因素实验和多因素实验，以研究茶叶中茶多酚热解反应的温度特性及其影响因素，但尚未研究其反应机理。