磷酸钾缓冲液(1molL,pH5.8-8.0)

资料]常用pH缓冲溶液的配制和pH值•常用pH缓冲溶液的配制和pH值常用pH缓冲溶液的配制和pH值一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事项1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical reagent，A．R．）化学纯（Chemical pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory reagent，L．R．）等等。

工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2．药品称量要精确。

3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。

（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。

2．1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。

3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。

•（三）0.15Mol/L PB 液Na 2HPO 4·2H 2O 分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含26.7g/L 。

Na 2HPO 4·12H 2O 分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含53.7g/L 。

NaH 2PO 4·H 2O 分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含20.7g/L 。

几种磷酸缓冲液的配制方法介绍本篇文章由专业生化试剂供应商岚兴为您提供。

磷酸缓冲液也叫做磷酸盐缓冲液，英文名为Phosphate Buffer，是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，磷酸缓冲液的配制我们一起来了解一下。

首先，按照下表所给定的体积，混合1 mol/L 的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L 磷酸氢二钠(双碱)贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。

配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。

1mol/L 磷酸二氢钠(ml) lmol/L 磷酸氢二钠(ml) 最终pH值877 133 6.0850 150 6.1815 185 6.2775 225 6.3735 265 6.4685 315 6.5625 375 6.6565 435 6.7510 490 6.8450 550 6.9390 610 7.0330 670 7.1280 720 7.20.1mol/L是在1L水中含有的磷酸盐物质的总摩尔。

用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲液其浓度为：磷酸氢二钠20.7472g/L; 磷酸二氢钠3.1167g/L。

即若配制100mL，则在100ml水中加入2.0747g磷酸氢二钠和0.3117g磷酸二氢钠。

通常使用的磷酸钠缓冲液有磷酸钠缓冲液(NaH2PO4&Na2HPO4)和磷酸钾缓冲液(K2HPO4&KH2PO4)，由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广。

那么，各种PH值的磷酸盐缓冲液如何配置?各种PH值的磷酸盐缓冲液的配制磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.0)甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。

乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。

磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g,与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得;磷酸盐缓冲液pH2.0甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,摇匀;乙液：取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml;取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合,摇匀,即得;磷酸盐缓冲液pH2.5取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml;磷酸盐缓冲液pH5.0取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0,即得;磷酸盐缓冲液pH5.8取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml,即得;磷酸盐缓冲液pH6.5取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用水稀释至100ml,即得;磷酸盐缓冲液pH6.6取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml,即得;磷酸盐缓冲液含胰酶pH6.8取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得; 磷酸盐缓冲液pH6.8取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得;磷酸盐缓冲液pH7.0取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释至100ml,即得;磷酸盐缓冲液pH7.2取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得;磷酸盐缓冲液pH7.3取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节pH值至7.3,即得;磷酸盐缓冲液pH7.4取磷酸二氢钾1.36g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml,即得; 磷酸盐缓冲液pH7.6取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释至200ml,即得;磷酸盐缓冲液pH7.8甲液：取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml;乙液：取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解,并稀释至100ml;取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合,摇匀,即得;磷酸盐缓冲液pH7.8～8.0取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g,加水使溶解成1000ml,即得;。

常见缓冲液的缓冲范围缓冲液名称及常用浓度缓冲pH范围主要物质分子量MES (2吗啉代乙磺酸) 5.5-6.7 195.2Bis-Tris 5.8-7.2 209.2HEPES 6.8-8.2 238.3PIPES 6.1-7.5 302.4MOPS 6.5-7.9 209.3Tricine 7.4-8.8 179.2TEA (三乙醇胺) 7.4-8.3 149.2甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2.2-5.0 甘氨酸Mr=75.07邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2.2-3.8 邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 2.2-8.0 磷酸氢二钠Mr=141.98柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 2.2-6.5 柠檬酸Mr=192.06柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L） 3.0-6.6 柠檬酸Mr=192.06 柠檬酸钠Mr=257.96乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2mol/L） 3.6-5.8 乙酸钠Mr=81.76 乙酸Mr=60.05邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液 4.1-5.9 邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L） 5.8-8.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15 molL） 4.92-8.18磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L） 5.8-8.0巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃) 6.8-9.6 巴比妥钠Mr=206.18 Tris-盐酸缓冲液(0.05mol/L 25℃) 7.10-9.00 三羟甲基氨基甲烷（Tris）Mr=121.14甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 8.6-10.6 甘氨酸Mr=75.07硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 9.3-10.1 硼砂Na2B4O7?10H2O Mr=381.43碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1mol/L) 9.16-10.83 碳酸钠Mr=286.2 碳酸氢钠Mr=84.0碳酸钠-氢氧化钠缓冲液(0.025mol/L) 9.6-11.0磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液 10.9-12.0氯化钾-盐酸缓冲液（0.2mol/L） 1.0-2.2 氯化钾Mr=74.55氯化钾-氢氧化钠缓冲液（0.2mol/L）12.0-13.0 氯化钾Mr=74.55。

资料]常用pH缓冲溶液的配制和pH值•常用pH缓冲溶液的配制和pH值常用pH缓冲溶液的配制和pH值一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事项1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical reagent，A．R．）化学纯（Chemical pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory reagent，L．R．）等等。

工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2．药品称量要精确。

3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。

（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。

2．1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。

3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。

•（三）0.15Mol/L PB 液Na 2HPO 4·2H 2O 分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含26.7g/L 。

Na 2HPO 4·12H 2O 分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含53.7g/L 。

NaH 2PO 4·H 2O 分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含20.7g/L 。

资料]常用pH缓冲溶液的配制和pH值常用pH缓冲溶液的配制和pH值一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事项1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical reagent，A．R．）化学纯（Chemical pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory reagent，L．R．）等等。

工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2．药品称量要精确。

3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。

（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。

2．1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。

3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。

（三）0.15Mol/L PB液Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。

Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含53.7g/L。

NaH2PO4·H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。

NaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23.4g/L。

常用缓冲液的配制当缓冲液被稀释或浓缩时，pH也应不变。

其pH值应近似恒定不变，或当其中的离解的阳离子（K+、Na+）或阴离子（Cl-、Br-）被其它种类的离子替换时。

表1—4中给出了响应的配制方法，平衡阳离子为Na+，缓冲液的最终浓度为0.1mol/l，对于其它浓度的缓冲溶液或阳离子种类（通常K+）更好，表中的数据也可供参考。

较稀的或较浓的缓冲溶液，及包含有不同阳离子的溶液，其pH值会与表中的数据稍有出入。

在方法建立过程中，精确的流动相pH值往往并不重要，重要的是每次新配制的流动相的pH值与第一次基本相同（最好控制在±0.02范围内）。

注意，只有当缓冲溶液的pH在缓冲试剂解离常数pKIa±1范围内时，缓冲溶液才具有有效的缓冲容量（如乙酸盐的pKa=4.6，其适宜的pH范围为3.6—5.6）。

表1 低pH值（25℃）磷酸盐缓冲溶液的配制方法溶液A1：0.1M磷酸。

配制精确pH值缓冲液时，所用磷酸需滴定H3PO4的含量。

溶液A2：0.1M磷酸二氢钠溶液，称量13.8g NaH2PO4•H2O溶解于水中，定容于1L容量瓶中。

pH A1体积（ml）A2体积（ml）pH A1体积（ml）A2体积（ml）2.0 565 435 2.8 175 8252.2 455 5453.0 110 8902.4 345 6553.2 55 9452.6 250 750表2 不同pH值（25℃）醋酸缓冲溶液的配制方法溶液A1：0.1M醋酸溶液。

6.0g（5.8ml）冰醋酸溶于水中，定容到1L容量瓶中。

溶液A2：0.1M醋酸钠溶液。

8.2g C2H3O2Na（或13.6g C2H3O2Na•3H2O）溶解于水中定容到1L容量瓶中。

pH A1体积（ml）A2体积（ml）pH A1体积（ml）A2体积（ml）3.6 926 744.8 400 6003.8 880 120 5.0 296 7044.0 820 1805.2 210 7904.2 736 2645.4 176 8244.4 610 3905.6 96 9044.6 510 490表3 不同pH值（25℃）柠檬酸缓冲溶液的配制方法溶液A1：0.1M柠檬酸溶液。

常见缓冲液的缓冲范围参考下图：常见缓冲液的缓冲范围常用缓冲液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L 3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/L Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L C6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液节，冰箱保存。

5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1M）C6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 0.1M溶液含29.41g/L6.乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2M）NaAc分子量＝136.09 0.2M溶液为27.22g/L7.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2M）Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22 0.2M溶液含71.64g/L NaH2PO4·H2O分子量＝138.01 0.2M溶液含27.6g/L NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03 0.2M溶液含31.21g/L(2) 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15M）KH2PO4分子量＝136.09 1/15M溶液含9.078g/L 8.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05M）9.巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）10.Tris-盐酸缓冲液三羟甲基氨基甲烷(Tris)分子量＝121.14 0.1M溶液为12.114g/LTris溶液可以从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严11.硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）硼砂Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43 0.05M(=0.2M硼酸根)溶液为19.07g/L 硼酸H3BO3分子量＝61.84 0.2M溶液为12.37g/L硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存12.甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05M）13.硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）硼砂Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43 0.05M(=0.2M硼酸根)溶液为19.07g/L 14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）Na2CO3·10H2O分子量＝286.2 0.1M溶液为28.62g/LNaHCO3分子量＝84.0 0.1M溶液为8.40g/L。

各种PH值的磷酸盐缓冲液配制磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.0)甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。

乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。

取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.5)取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。

磷酸盐缓冲液(pH5.0)取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

磷酸盐缓冲液(pH5.8)取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.5)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.6)取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。

磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.0)取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.2)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.3)取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。

磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.0)甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。

乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。

取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.5)取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。

磷酸盐缓冲液(pH5.0)取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

磷酸盐缓冲液(pH5.8)取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.5)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.6)取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。

磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.0)取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.2)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.3)取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.4)取磷酸二氢钾1.36g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。