巴马香猪肝硬化造模过程中肠道菌群的变化
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巴马香猪肝硬化造模过程中肠道菌群的变化摘要：目的：了解巴马香猪肝硬化过程中肠道菌群的变化。
方法：取肝硬化形成过程中巴马香猪的粪便，进行活菌计数。
结果：肠道菌群数量和种类增加到一定程度后保持稳定，拟杆菌和双歧杆菌等有益菌减少，而真菌等有害菌增加。
结论：肝硬化与肠道菌群变化密切相关
关键词：肠道菌群肝硬化活菌计数
生物肠道内有着非常丰富的微生物，他们和肠道内的环境形成一个稳定的微生态系统，从诸多方面影响着生物的健康，且在一定程度上能调节免疫系统发育。
肝硬化疾病患者经常会出现肠道菌群失调，有益微生物明显减少且定植抗力下降、儿肠道总细菌过度生长，引发较为严重的肠道菌群紊乱和多脏器的细菌易位，由肝硬化产生而导致的肠道菌群变化成为微生态研究的热点。
1.材料与方法
1.1实验动物及处理：10头生理状况和健康状况无明显差异的普通级巴马香猪，以低蛋白高碳水化合物的玉米面为食物，按
0.25ml/kg体重每4天腹腔注射40%的四氯化碳橄榄油溶液一次，10%的乙醇为唯一饮料，持续24周至造模成功。
1.2样品采集和处理：实验开始前采集每头巴马香猪的粪便，以后每2周取样一次用于活菌计数。
2.实验方法
活菌计数：在消毒灭菌过的超净台中称取0.5克粪样，加入高
压灭菌过的4.5ml的生理盐水，震荡摇匀，经一系列10倍稀释后取3个稀释度的菌液，每个稀释度做3个重复，分别取200μl放入无菌培养基上，用无菌涂棒涂布均匀，放入37℃的恒温培养箱中培养2天，取出对菌落计数统计，安公式计算原菌液的菌落数：每ml原菌液活菌数＝3个同一稀释度平皿菌落平均数×稀释倍数×5。
表1菌群数量变化（log cfu/ml）
3.实验结果
从实验及调查数据可知，从正常状态到肝硬化期间，巴马香猪肠道内有益菌呈减少趋势，如拟杆菌和双歧杆菌，拟杆菌总体呈减少趋势，在第10周降至最少，双歧杆菌从第6周开始明显减少；有害菌呈增加趋势，如真菌在第6周明显增加，以后呈缓慢上升的趋势；总体菌群数量第6至8周变化较大，且第8周总菌数量增至最大，此后基本保持稳定，巴马香猪肠道内的总菌的明显增加，说明有害菌的增加比有益菌的减少更为严重。
肠杆菌在第6周增至最大，然后慢慢减少；乳杆菌两次明显的变化发生在第10周和第16周，总体数量略微减少，肠球菌和梭菌保持比较稳定的状态。
4.讨论
正常肠道微生态环境是肝病患者维持肠道屏障的完整性的必要条件，肠道菌群失调可导致肝病加重。
实验表明，在6周之前肝脏损伤前期，肝硬化还未形成，巴马香猪肠道菌群的变化并不明显，而肝硬化形成后菌群的变化出现了显着性差异。
我们的实验结果与贾辅中的研究有相似性，其研究表明肠道微生态环境的改变很少发
生在普通型肝病患者中，即使有些微的变化，在病情恢复过程中也能自然纠正，而重型肝病如肝硬化等因肝脏功能低下，肠道菌群在组成数量和定位方面都可发生变化。
另有研究表明，肝硬化患者均有不同程度的肠道菌群失调，特别是厌氧双歧杆菌、拟杆菌、真杆菌以及需氧肠杆菌、酵母样真菌的数量发生改变，本实验也出现了肝硬化形成过程中厌氧性益生菌如拟杆菌、乳酸菌、双歧杆菌等明显减少，而链球菌、真菌等有害菌增加的现象，赵海英等关于肝硬化患者肠道菌群的研究也有类似的结果。
作者简介：
陈玉龙（1984-）男，江西丰城人，助教，硕士，江西中医学院教师。
研究方向：动物分子遗传。
