基因工程-2

基因工程强化训练（精品）

1．(2018·全国卷Ⅰ，38)回答下列问题：

(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了_________________________________________________________________

___________________________________________________(答出两点即可)。

(2)体外重组的质粒可通过Ca2＋参与的________方法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA通常需与________组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是________。

(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解，在实验中应选用________的大肠杆菌作为受体细胞，在蛋白质纯化的过程中应添加________的抑制剂。

2、(2018·天津卷，10)甲型流感病毒为RNA病毒，易引起流感大规模流行。我国科学家在2017年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法，主要环节如下。

(1)改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。以病毒RNA为模板，逆转录成对应DNA后，利用________技术扩增，并将其中某些基因(不包括表面抗原基因)内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列。与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的________，因此不能产生子代病毒。将该改造基因、表面抗原基因等其他基因分别构建重组质粒，并保存。

(2)构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与(1)中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸(Uaa)。将该基因与________连接后导入宿主细胞。提取宿主细胞的________进行分子杂交鉴定，筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。

复习题 2 基因重组与基因工程

一、A型题

1.实验室内常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是：（ A ）

A．DNA连接酶 B．DNA聚合酶Ⅰ C．DNA聚合酶Ⅱ

D．DNA聚合酶Ⅲ E．反转录酶

2.用来鉴定DNA的技术是：（ B ）

A．Northern印迹 B．Southern印迹 C．Western印迹

D．亲和层析 E．离子交换层析

3.下列那项不是重组DNA技术中常用的工具酶：（ D ）

A．限制性核酸内切酶 B．DNA连接酶 C．DNA聚合酶Ⅰ

D．RNA聚合酶 E．反转录酶

4.关于限制性核酸内切酶的叙述，下列哪项是错误的？ （ E ）

A．限制性核酸内切酶分为三类，用于基因工程的为Ⅱ酶

B．限制性核酸内切酶切割后可产生粘性末端或平端

C．识别的核苷酸序列个数可以是6个或8个

D. 识别的序列一般具有回文结构

E．识别的DN A为单链

5.关于基因工程的叙述，下列哪项是错误的？ （ B ）

基因工程技术的应用现状

摘要：基因工程作为一门理论性与实践性较强的学科,其方法与技术已经渗透到现代生命科学的各个分支领域,成为生命科学的一门核心技术。基因工程包含许多独特的实验方法和技术,不仅内容丰富,涉及面广,实用性也强。基因工程是通过DNA 重组技术, 获得具有特殊生物遗传性状和功能的遗传工具生物体, 基因工程技术广泛应用于农业、医学、食品工业等。本文就基因工程的应用现状综合阐述。

关键词：基因工程 应用现状

前言：

基因工程技术是一项极为复杂的高新生物技术, 它利用现代遗传学与分子生物学的理论和方法, 按照人类所需, 用DNA 重组技术对生物基因组的结构和组成进行人为修饰或改造, 从而改变生物的结构和功能, 使之有效表达出人类所需要的蛋白质或人类有益的生物性状[1]。基因工程从诞生至今, 仅有30 年的历史, 然而, 无论是在基础理论研究领域, 还是在生产实际应用方面, 都已取得了惊人的成绩。首先,基因工程给生命科学自身的研究带来了深刻的变化。目前科学家已完成了多种细胞器的基因组全序列测定工作。其次, 基因工程具有广泛的应用价值, 能为工农业生产、医药卫生、环境保护开辟新途径。

1.基因工程

1.1 概念

基因工程( 又称DNA 重组技术、基因重组技术) , 是20 世纪70 年代初兴起的技术科学, 是用人工的方法将目的基因与载体进行DNA重组, 将DNA 重组体送入受体细胞, 使它在受体细胞内复制、转录、翻译, 获得目的基因的表达产物。这种跨越天然物种屏障, 把来自任何生物的基因置于毫无亲缘关系的新的寄主生物细胞之中的能力, 是基因工程技术区别于其他技术的根本特征。

1.2 基因工程研究内容

(1) 从复杂的生物有机体基因组中, 经过酶切消化或PCR 扩增等步骤, 分离出带有目的基因的DNA 片段。

(2) 在体外, 将带有目的基因的外源DNA 片段连接到能够自我复制并具有选择记号的载体分子上, 形成重组DNA分子。

1 第2节 基因工程及其应用（第1课时）

知识链接及考试地位

本知识与“DNA分子的结构与复制”、“基因突变和基因重组”、“DNA重组技术的基本工具”、“基因工程的基本操作程序”等内容相联系，考试过程中常设计基因工程的原理、基本工具等基础知识，多以个别填空或选择题的形式呈现。

知识回顾

1、DNA分子的结构特点是什么？

2、什么是基因重组？

学习目标

1、简述基因工程的诞生。

2、简述基因工程的原理及技术。要明确基因工程操作的基本步骤和最基本的工具。

重难点

1．教学重点

基因工程的基本原理。

2．教学难点

基因工程的基本原理

新知探究

传统育种的方法一般只能在 生物中进行，很难将一种生物的优良性状移植到 生物身上。基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿 地改变生物，培育出 。

一、基因工程的原理

基因工程又叫做 或 。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以 ，然后放到另一种生物细胞里， 地改造生物的遗传性状。基因工程是在DNA上进行的 水平的设计施工，基因的剪刀是指 ，简称限制酶。其作用特点是一种限制酶只能识别一种 序列。基因的针线是指 。目前常用的运载体有 、 和 等。质粒存在于许多 以及 等生物中，是细胞染色体外能够自主复制的小型 分子。

基因工程的操作步骤是： 、目的基因与运载体结合，目的基因导入受体细胞、目的基因的 和 。

二、基因工程的原理、操作对象各是什么？

三、限制性内切酶的分布、特点、作用部位和作用结果如何？