单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性测定试剂盒说明书

琥珀酸脱氢酶（SDH）活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4333规格：100T/96S微量法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体110mL×1瓶-20℃保存试剂二液体1mL×1支-20℃保存试剂三液体18mL×1瓶4℃保存试剂四粉剂×1支4℃保存试剂五粉剂×1瓶4℃保存试剂六粉剂×1瓶-20℃保存溶液的配制：1、试剂四：临用前加入到试剂三中溶解待用；2、试剂五：临用前加入4mL双蒸水，用不完的试剂仍4℃保存；3、试剂六：临用前加入3.333mL双蒸水，用不完的试剂4℃保存。

产品说明：SDH（EC1.3.5.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。

SDH是线粒体的一种标志酶，位于线粒体内膜上的一种膜结合酶，是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。

此外，为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。

SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸（PMS）传递还原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），并且在600nm处具有特征吸收峰，通过600nm吸光度的变化，测定2,6-DCPIP的还原速度，代表SDH酶活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10μL试剂二，用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨，4℃11000g离心10min，取上清，置冰上待测。

二、测定步骤1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至600nm，蒸馏水调零。

单胺氧化酶测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中单胺氧化酶的活性。

1.1 规格试剂盒是由试剂组成的液体单试剂，质控品为冻干粉。

规格及装量见表1。

表1 规格及装量1.2主要组成成分试剂主要组分：质控品主要组分：2.1外观试剂为无色透明澄清液体，液体试剂不得有沉淀和絮状物；质控品为白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体。

试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰。

2.2装量试剂瓶内液体装量不应低于规定规格的标准体积。

2.3 空白吸光度当用纯化水作样本分析时，波长340nm（副波长405nm）, 比色光径1cm, 反应温度37℃检测，吸光度大于1.0。

2.4分析灵敏度测定浓度为20U/L的样品时吸光度差值：△A≥0.005。

2.5线性2.5.1在（1，98]U/L区间内，线性回归的相关系数r应不低于0.990；2.5.2（1，45）U/L区间内绝对偏差不超过±6.75U/L；[45，98]U/L区间内相对偏差不超过±15%。

2.6重复性重复测试控制血清，变异系数（CV）应<10%。

2.7 准确度参照EP9-A2的方法，用比对试剂盒同时测试40例线性区间内的不同浓度的血清样本。

其相关系数（r）不小于0.990。

每个浓度点在（1，45）U/L区间内绝对偏差不超过±6.75U/L；[45，98]U/L区间内相对偏差不超过±15%。

2.8批间差试剂（盒）批间相对极差应＜15%。

2.9 质控品批内瓶间差变异系数（CV）应≤10%。

2.10质控品赋值有效性质控品测值应在靶值范围内。

2.11 稳定性2.11.1效期稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃条件下贮存达到18个月后的试剂进行检测，应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.10之规定。

2.11.2复溶稳定性质控品复溶后在2℃～8℃密闭避光保存，稳定期为7天，稳定期满后1天内，性能应符合2.10的要求。

单胺氧化酶测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人血清中单胺氧化酶的活性。

1.1 产品型号/规格1×32 ml；2×25 ml；1×45 ml；2×45 ml；4×45 ml ；1×50 ml ；2×50 ml；4×50 ml；8×50 ml；1×60 ml；2×60 ml；2×70 ml；6×70 ml；2×100 ml；4×100 ml；2×16 ml；4×24 ml；8×24 ml；1×25 ml；4×60 ml；8×60 ml。

1.2 主要组成成分Tris缓冲液 150 mmol/Lα-酮戊二酸10 mmol/L 乙二胺四乙酸（ETDA） 2 mmol/L谷氨酸脱氢酶 1 KU/L苄胺20 mmol/L烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）0.25 mmol/LProclin-300 0.1%2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；中文包装标签应清晰、准确、牢固。

2.1.2 试剂应为无色至浅黄色澄清液体。

2.2 净含量不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在光径1 cm、主波长340 nm下，以纯化水为检测样本时，吸光度应不小于0.800。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率在光径1 cm、主波长340 nm下，以纯化水为检测样本时，吸光度变化率(△A/min)应小于0.01。

2.4 分析灵敏度MAO含量为6 U/L时，测定吸光度变化率（△A/min）应不小于0.001。

2.5 线性范围MAO试剂在线性范围[0.5，100] U/L内：（a）相关系数r应不小于0.990；（b）在[0.5，10]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±1 U/L；（c）在（10，100]U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10 %。

苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)简介：苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase,MDH)是合成苹果酸的关键酶之一，催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化，参与众多生理代谢途径如TCA循环C4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等，因此MDH在植物的生长发育中发挥着重要作用，广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上，为三羧酸循环中的一种酶，由于酶的来源不同，其某些性质也不尽相同。

MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。

根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体中。

Leagene苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)检测原理是在弱碱条件下，以草酰乙酸(OAA)作为显色底物，OAA在MDH催化下被NADH还原为苹果酸(Mal)，每催化1分子OAA消耗1分子NADH，通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度的变化，计算出NADH的消耗速率进一步推算出苹果酸脱氢酶活性水平。

该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中苹果酸脱氢酶活性。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、研钵或匀浆器2、离心管或试管3、低温离心机4、比色杯5、分光光度计操作步骤(仅供参考)：编号名称TE046350TStorage试剂(A):MDH Lysis buffer250ml4℃避光试剂(B):PMSF1ml-20℃试剂(C):MDH Assay buffer100ml RT试剂(D):NADH1支-20℃试剂(E):ddH2O10ml RT使用说明书1份1、配制MDH Lysis buffer工作液：取出MDH Lysis buffer和PMSF，恢复至室温，MDHLysis buffer：PMSF按一定比例混合，混匀，即配即用，不易久置，否则白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。

硝酸还原酶（NR ）活性检测试剂盒（Griess 显色法）说明书微量法货号：BC4965规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件诱导剂储备液液体100 mL×1瓶4℃保存提取液液体60 mL×1瓶4℃保存试剂一液体5 mL×1瓶-20℃保存试剂二粉剂×2支-20℃保存试剂三液体6 mL×1瓶4℃保存试剂四液体6 mL×1瓶4℃保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制：1、诱导液：将诱导剂储备液用蒸馏水10倍稀释后使用，即取10 mL 诱导剂储备液加90 mL 蒸馏水，充分混匀。

现配现用。

2、试剂二：加入1mL 蒸馏水，-20℃分装保存，可以-20℃保存2周。

临用前用蒸馏水将试剂二稀释50倍，备用，即取10 μL 试剂二加入490 μL 蒸馏水混匀。

3、标准品：10 μmol/mL 亚硝酸钠标准溶液。

临用前将用蒸馏水标准溶液稀释100倍得到0.1 μmol/mL 的亚硝酸钠标准液，备用。

产品说明：NR （EC 1.7.1.3）广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。

NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO 3ˉ +NADH+H ＋→NO 2ˉ+NAD ＋+H 2O 。

在酸性条件下，产生的NO 2ˉ能够参与重氮化反应生成紫红色化合物，这种紫红色化合物在540 nm 处有吸收峰，540 nm 下吸光值的变化即可表示酶活。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织前处理：（1） 取适量诱导液于烧杯中，将新鲜标本洗净，滤纸吸干，放入诱导液中（淹没即可），避光浸泡2 h ，取出样本，滤纸吸干后，-20℃冷冻30 min ，取出样本，滤纸吸干。

NAD-苹果酸脱氢酶（NAD-MDH）试剂盒使用说明货号：BC1040规格：50管/48样产品内容：试剂一、提取液60mL×1瓶，在4℃保存；试剂二、液体50mL×1瓶，在4℃保存；试剂三、粉剂×2支，-20℃保存；临用前加入300μL蒸馏水，用不完的试剂仍-20℃保存；试剂四、粉剂×2支，-20℃保存；临用前加入300μL蒸馏水，用不完的试剂仍-20℃保存。

产品说明：MDH（EC1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。

草酰乙酸是重要的中间产物，连接多条重要的代谢途径。

因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。

根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。

NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。

操作步骤：一、样本测定的准备：三、NAD-MDH活力单位的计算：1、血清（浆）NAD-MDH活力的计算单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟消耗1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

NAD-MDH（U/mL）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=6430×ΔA2、组织、细菌或细胞中NAD-MDH活力的计算:（1）按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每mg组织蛋白每分钟消耗1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

NAD-MDH（U/mg prot）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr)÷T=6430×ΔA÷Cpr（2）按样本鲜重计算：单位的定义：每g组织每分钟消耗1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

单胺氧化酶测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人血清中单胺氧化酶的活性。

1.1包装规格a) 试剂1:1×60ml，试剂2:1×15ml；b) 试剂1:2×60ml，试剂2:2×15ml；c) 试剂1:4×60ml，试剂2:1×60ml；d) 试剂1:2×40ml，试剂2:2×10ml；e) 试剂1:2×400ml，试剂2:2×100ml；f) 试剂1:2×80ml，试剂2:2×20ml；g）试剂1:6×16ml，试剂2:6×4ml；h）试剂1:1×20ml，试剂2:1×5ml。

1.2主要组成成分试剂1主要组成成分：Tris缓冲液 (PH 7.0-10.0) ≥200mmol/LNADPH ≥0.2mmol/L试剂2主要组成成分：Tris缓冲液 (PH 6.0-9.0) ≥200mmol/Lα-酮戊二酸≥10mmol/L苄胺≥30mmol/L2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。

2.1.2 试剂1应为无色或淡黄色透明溶液;试剂2应为无色或淡黄色透明溶液。

2.2 净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度测定试剂空白吸光度，应≥0.5。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.1。

2.4 分析灵敏度测试180U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.003。

2.5 准确性回收率，应在80%～120% 范围内。

2.6 重复性变异系数（CV）应不超过5％。

2.7 线性2.7.1 在（1，200）U/L范围内，线性回归的相关系数应不低于0.990；2.7.2 测试浓度（30，200）U/L的样品，相对偏差≤15%；测试浓度（1，30]U/L 的样品，绝对偏差≤5U/L。

货号：QS1304 规格：50管/48样抗坏血酸过氧化物酶活性测定试剂盒(APX)说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：APX是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。

APX具有多种同功酶，分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类囊体膜上。

APX 催化H2O2氧化AsA，是植物AsA 的主要消耗者。

APX的活性直接影响到AsA的含量，APX与AsA具有一定的负相关性。

测定原理：APX 催化催化H2O2氧化AsA，通过测定AsA氧化速率，来计算得APX活性。

自备实验用品及仪器：低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：试剂一：液体90mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。

临用前加5 mL蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体5mL×1支，4℃保存。

粗酶液提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。

13000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。

测定：1. 分光光度计预热30 min，调节波长到290nm，用蒸馏水调零。

2. 试剂一在25℃中预热30min。

3. 依次在1mL石英比色皿中加入100μL上清液、700μL预热的试剂一、100μL试剂二和100μL试剂三，迅速混匀后在290nm测定10 s和130 s光吸收A1和A2，△A=A1-A2。

APX活性计算公式：(1) 按样本蛋白浓度计算活性单位定义：每毫克蛋白每分钟氧化1μmol AsA 为1个酶活单位。

APX(μmol/min/mg prot) = △A÷(ε×d）×V反总×106÷(Cpr×V样)÷T=1.79×△A÷ Cpr（2）按样本质量计算活性单位定义：每g组织每分钟氧化1μmol AsA 为1个酶活单位。