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柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定罐头食品中的尿素曾琪;张缙;徐敦明;张志刚;柯志成【摘要】建立了罐头食品中尿素残留检测的柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测方法。
取5.0 g样品，经20 mL 1％（ v／v）乙酸溶液提取、定容，离心后取上清液过滤，吸取0.5 mL 提取液用呫吨醇进行衍生，采用高效液相色谱-荧光检测器进行测定。
尿素在0.1~500 mg／L内线性良好，相关系数大于0.9995。
实验表明，在5种罐头食品中各添加0.001~30 g／kg 尿素，其平均回收率为80.2％~109.7％，相对标准偏差（ n=6）为2.05％~6.53％，检出限为0.5 mg／kg，定量限为1.0 mg／kg。
利用本研究建立的方法对168个实际样品进行测定，在3个肉类罐头样品中检出尿素，含量分别为10.6、62.1和2.6 mg／kg。
方法稳定、可靠、操作简单，适用于罐头食品中尿素的检测。
%A method for the determination of urea residue in canned foods by high performance liquid chromatography-fluorescence detection( HPLC-FLD)coupled with precolumn derivatiza-tion was established. The sample(5. 0 g),including canned edible fungi,fruit,vegetable,fish, and meat was extracted with 20mL 1%( v/v)acetic acid solution. The extract was centrifuged, filtrated,and then derivatized with xanthydrol. The analysis was completed with HPLC-FLD. A good linear relationship was obtained in the range of 0. 1-500 mg/L with the correlation coeffi-cients more than 0. 999 5. The average recoveries of urea spiked at 0. 001-30 g/kg levels in five kinds of canned foods ranged from 80. 2% to 109. 7% with the RSDs of 2. 05%-6. 53%. The limit of detection(LOD)was 0. 5 mg/kg,and the limit ofquantitation(LOQ)was 1. 0 mg/kg. The proposed procedure was thenapplied to the analysis of 168 real samples collected from Xia-men,Fujian Province,China. The existence of urea was found in three pork cans with contents of 10. 6,62. 1 and 2. 6 mg/kg,respectively. The method is stable,reliable,simple and suitable for the determination of urea in canned foods,and has great potential for routine analysis in foodstuffs.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】4页(P80-83)【关键词】高效液相色谱;荧光检测;尿素;罐头食品;呫吨醇【作者】曾琪;张缙;徐敦明;张志刚;柯志成【作者单位】厦门出入境检验检疫局，福建厦门361026;厦门出入境检验检疫局，福建厦门 361026;厦门出入境检验检疫局，福建厦门 361026;厦门出入境检验检疫局，福建厦门 361026;厦门出入境检验检疫局，福建厦门 361026【正文语种】中文【中图分类】O658尿素（urea）别名碳酰二胺，又称脲，国际非专利药品名称为Carbamide，其化学式为CO（NH2）2，结构式见图1a。
高效液相色谱-荧光检测器法测定黄酒中尿素含量邢江涛;钟其顶;熊正河;邹慧君;周建弟;谢广发【期刊名称】《酿酒科技》【年(卷),期】2011(000)003【摘要】建立了柱前衍生高效液相色谱荧光检测器(HPLC-FLD)测定黄酒中尿素含量的检测方法.采用9-羟基吨为柱前衍生试剂,尿素在酸性环境下与其反应产生具有荧光特性的吨基脲(N-9H-xanthen-9-ylurea),经HPLC分离后在λex=213nm,λem=308um下荧光检测.方法学指标检测结果表明,方法线性良好(R2>0.999)、重复性好(RSD=1.5%,n=5)、日间变异试验良好(RSD<5%,n=3),回收率高(平均回收率>90%,n=3);尿素检出限为0.024mg/L,定量限为0.086mg/L.【总页数】3页(P104-106)【作者】邢江涛;钟其顶;熊正河;邹慧君;周建弟;谢广发【作者单位】中国食品发酵工业研究院,北京,100027;全国食品发酵标准化中心,北京,100027;中国食品发酵工业研究院,北京,100027;全国食品发酵标准化中心,北京,100027;中国食品发酵工业研究院,北京,100027;中国绍兴黄酒集团有限公司,浙江,绍兴,312000;中国绍兴黄酒集团有限公司,浙江,绍兴,312000;中国绍兴黄酒集团有限公司,浙江,绍兴,312000【正文语种】中文【中图分类】O657.7;TS261.7;TS262.4【相关文献】1.高效液相色谱-荧光检测器法测定乳和乳粉中尿素含量 [J], 宋薇;张姝;陈晓旭;宋莉;赵永彪;宋桂雪2.高效液相色谱法测定尿素[13C]混合粉中的尿素[13C]含量 [J], 钟建国;宋天琦3.高效液相色谱法测定尿素乳膏中尿素含量 [J], 张毅;黄静;郭盈杉4.高效液相色谱-荧光检测器法测定白酒中尿素含量方法研究 [J], 申世刚;李国辉;钟其顶;王道兵;崔战友;高红波;熊正河5.高效液相色谱-荧光检测器法测定面粉中的尿素 [J], 刘卿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一、实验目的1. 理解尿素在生物化学分析中的应用及其原理。
2. 掌握尿素含量的测定方法，包括样品处理、标准曲线的绘制和样品的测定。
3. 学会使用紫外-可见分光光度计进行定量分析。
二、实验原理尿素是一种含氮化合物，在生物体内参与氨基酸的代谢。
尿素法测定尿素的原理基于尿素在碱性条件下与苯酚和次氯酸钠反应生成紫色络合物，该络合物在特定波长下具有特征吸收峰，其吸光度与尿素的浓度成正比。
三、实验材料与仪器1. 仪器：紫外-可见分光光度计、电子天平、移液器、容量瓶、试管、烧杯、蒸馏水等。
2. 试剂：尿素标准溶液、苯酚溶液、次氯酸钠溶液、碱性缓冲溶液、盐酸等。
四、实验步骤1. 样品处理：准确称取一定量的尿素样品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积，配制成尿素样品溶液。
2. 标准曲线的绘制：a. 准备一系列已知浓度的尿素标准溶液。
b. 在每个试管中加入苯酚溶液、次氯酸钠溶液和碱性缓冲溶液。
c. 将尿素标准溶液加入试管中，混匀。
d. 使用紫外-可见分光光度计在特定波长下测定吸光度。
e. 以尿素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：a. 在每个试管中加入苯酚溶液、次氯酸钠溶液和碱性缓冲溶液。
b. 将尿素样品溶液加入试管中，混匀。
c. 使用紫外-可见分光光度计在特定波长下测定吸光度。
d. 根据标准曲线计算样品中尿素的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：根据实验数据，绘制标准曲线，计算相关系数R²，验证曲线的线性关系。
2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中尿素的含量，并计算回收率。
六、实验讨论1. 实验过程中可能存在的误差来源，如样品处理、试剂配制、仪器校准等。
2. 提高实验准确性的方法，如多次重复实验、优化实验条件等。
3. 尿素法测定尿素的适用范围和局限性。
七、实验结论通过本实验，我们成功掌握了尿素法测定尿素的原理和操作步骤。
实验结果表明，该方法具有较高的准确性和重复性，适用于生物化学分析中尿素的测定。
(完整版)尿素分析题目
尿素分析题目
尿素是一种常见的有机化合物，广泛应用于农业和医学领域。
本文将对尿素的分析方法进行讨论。
一、常规分析方法
尿素的常规分析方法主要包括以下几种：
1. 碘滴定法
碘滴定法是一种简单、快速且准确的测定尿素含量的方法。
该方法基于碘与尿素产生反应生成氨气的原理，通过滴定氯仿试剂来确定尿素的含量。
2. 紫外分光光度法
紫外分光光度法是一种常用的测定尿素浓度的方法。
该方法基于尿素的特定吸收光谱，在特定波长下进行测量，通过测量吸光度来确定尿素的含量。
3. 气相色谱法
气相色谱法是一种精确测定尿素含量的方法。
该方法基于将尿素样品分离成不同的化合物，并通过测量各化合物的峰面积来确定尿素的含量。
二、新兴分析方法
随着科技的发展，一些新兴的分析方法正在被应用于尿素的测定中，例如：
1. 质谱法
质谱法是一种精确测定尿素浓度的方法，通过测量尿素分子的质量/电荷比来确定尿素的含量。
2. 生物传感器法
生物传感器法是一种基于生物体系的分析方法，通过使用生物传感器来检测尿素的浓度。
生物传感器可以利用尿素与特定生物体反应产生的信号来确定尿素的含量。
三、结论
尿素的分析是农业和医学中非常重要的研究课题。
通过不同的分析方法，我们可以准确测定尿素的含量，为相关领域的研究和应用提供有力的支持。
注：本文所述分析方法仅供参考，具体分析时应根据实际情况选择合适的方法。
南开大学智慧树知到“药学”《仪器分析》网课测试题答案（图片大小可自由调整）第1卷一.综合考核(共15题)1.HF的质子共振谱中可以看到()。
A.质子的单峰B.质子的双峰C.质子和的19F的两个双峰D.质子的三重峰2.在凝胶柱色谱中，相对分子质量大的组分先出柱。
()A.错误B.正确3.下列关于荧光分析法的叙述正确的是()。
A.荧光的能量小于激发光能量，故发射荧光的波长总比激发光波长要长B.物质分子只要有强的紫外——可见吸收就能发射荧光C.激发光谱表示不同激发波长的辐射引起物质发射某一波长荧光的相对效率D.荧光光谱表示在所发射的荧光中各种波长组分的相对强度4.有一含氧化合物，如用红外光谱判断是否为羰基化合物，重要依据的谱带范围为()。
A.3500～3200cm-1B.1500～1300cm-1C.1000～650cm-1D.1870～1540cm-15.物质发射的光谱分为线状光谱和带状光谱两种。
()A.错误B.正确6.质谱图中m/z最大的峰一定是分子离子峰。
()A.正确B.错误7.有关气相色谱法的应用，叙述正确的是()。
A.用开管型毛细管柱，一次可从汽油中检测150多个碳氢化合物的色谱峰B.可用于检测药品中的残留有机溶剂，如吡啶、甲苯等C.若药品中残留溶剂数量较多，需采用毛细管柱顶空进样系统程序升温法D.气相色谱法所能分析的有机物约占全部有机物的20%8.紫外-可见分光光度法在药学用的应用，正确的是()。
A.可利用百分吸光系数鉴别安宫黄体酮和炔诺酮B.可利用吸光度比值法鉴别维生素B12C.可利用吸光度限值对肾上腺素中的肾上腺酮进行限量检测D.可利用碘解磷定的峰谷吸光度比值检查其中的杂质限量9.在色谱——质谱联用系统中，色谱系统的作用是分离混合物，质谱仪相当于色谱系统的检测器。
()A.正确B.错误10.在凝胶柱色谱中，相对分子质量大的组分先出柱。
()A.正确B.错误11.在以ODS为固定相的反相色谱中，下列说法正确的是()。
(一) 单选题1. 吸光度读数在范围内，测量较准确。
(A)0～1(B)0.15～0.7(C)0～0.8(D)0.15～1.5参考答案：(B)2. 邻二氮杂菲分光光度法测铁实验的显色过程中，按先后次序依次加入（）(A)邻二氮杂菲、NaAc、盐酸羟胺(B) 盐酸羟胺、NaAc、邻二氮杂菲(C) 盐酸羟胺、邻二氮杂菲、NaAc(D) NaAc、盐酸羟胺、邻二氮杂菲参考答案：(B)3. 分光光度法测铁中，标准曲线的纵坐标是(A)吸光度A(B) 透光度(C) 浓度C(D) 浓度参考答案：(A)4. 下列因素，能使荧光强度变大的是(A)升高温度(B)形成氢键(C)共轭效应(D)重金属离子参考答案：(C)5. 用分光光度法测铁所用的比色皿的材料为：(A)石英(B)塑料(C)硬质塑料(D)玻璃参考答案：(D)6. 下述情况所引起的误差中，属于系统误差的是：(A)没有用参比液进行调零调满(B) 比色皿外壁透光面上有指印(C) 缸差(D) 比色皿中的溶液太少参考答案：(C)7.硫酸奎宁在中，分别用320nm和350nm波长的光激发，所制得的荧光光谱（）(A)形状和荧光强度都相同(B) 形状和荧光强度都不同(C) 形状相同，荧光强度不同(D) 荧光强度相同，形状不同参考答案：(C)8. 用邻二氮杂菲测铁时，为测定最大吸收波长，从400nm～600nm，每隔10nm进行连续测定，现已测完480nm处的吸光度，欲测定490nm处吸光度，调节波长时不慎调过490nm，此时正确的做法是：(A)反向调节波长至490nm处(B) 反向调节波长过490nm少许，再正向调至490nm处(C) 从400nm开始重新测定(D) 调过490nm处继续测定，最后在补测490nm处的吸光度值参考答案：(B)9. 分光光度计控制波长纯度的元件是：(A)棱镜＋狭缝(B)光栅(C)狭缝(D)棱镜参考答案：(A)10. 物质发射磷光对应的能级跃迁是（）(A)分子从较高能级的激发态跃迁到第一激发态的最低振动能级(B) 分子从单线第一激发态的最低振动能级跃迁到基态的最低振动能级(C) 分子从单线第一激发态的最低振动能级跃迁到基态的各振动能级(D) 分子从三线激发态的最低振动能级跃迁到基态的各个振动能级参考答案：(D)11. 荧光光度计中第一滤光片的作用是（）(A)消除杂志荧光(B) 得到合适的单色激发光(C) 消除激发光产生的反射光(D) 消除瑞利散射、拉曼散射参考答案：(B)12. 双波长分光光度计与单波长分光光度计的主要区别在于（）(A)光源的种类(B)检测器的个数(C)吸收池的个数(D)使用单色器的个数参考答案：(D)13. 测铁工作曲线时，工作曲线截距为负值原因可能是：(A)参比液缸比被测液缸透光度大(B) 参比液缸与被测液缸吸光度相等(C) 参比液缸比被测液缸吸光度小(D) 参比液缸比被测液缸吸光度大参考答案：(D)14. 有a.b两份不同浓度的有色溶液，a溶液用1.0cm吸收池，b溶液用3.0cm吸收池，在同一波长下测得的吸光度值相等，则它们的浓度关系为( )(A)a 是b 的1/3(B)a 等于b(C)b 是a 的3倍(D)b 是a 的1/3参考答案： (D)15.下列化合物中，同时有跃迁的化合物是（）(A)一氯甲烷(B)丙酮(C)1，3－丁二醇(D)甲醇参考答案： (B)16. 下述操作中正确的是（）(A) 比色皿外壁有水珠(B) 手捏比色皿的磨光面 (C) 手捏比色皿的毛面(D) 用报纸去擦比色皿外壁的水参考答案： (C)17. 荧光分析法比紫外-可见分光光度法灵敏度更高的原因是（）(A)分子发射荧光的强度大于其吸收光的强度(B) 荧光的波长比吸收光的波长稍长(C) 提高检测器灵敏度可提高荧光法的灵敏度，而不能提高吸收光谱法的灵敏度(D) 荧光分析法入射光和发射光不在同一方向参考答案： (C)18. 对吸收带不产生影响的因素是（D ）(A) R 带(B) E 带 (C) B 带 (D) K 带参考答案： (A)19. 待测水样中铁含量估计为1mg/L ，已有一条浓度分别为100，200，300，400，标准曲线，若选用10cm 的比色皿，水样应该如何处理？()(A)取5mL 至50mL 容量瓶，加入条件试剂后定容(B) 取10mL 至50mL 容量瓶，加入条件试剂后定容(C) 取50mL 蒸发浓缩到少于50mL ，转至50mL 容量瓶，加入条件试剂后定容 (D) 取100mL 蒸发浓缩到少于50mL ，转至50mL 容量瓶，加入条件试剂后定容参考答案： (A)20. 不同波长的电磁波具有不同的能量，它们的大小顺序为（）。
一、实验目的1. 了解尿素含量测定的原理和方法。
2. 掌握使用比色法测定尿素含量的操作步骤。
3. 学会正确使用分光光度计等实验仪器。
二、实验原理尿素在酸性条件下与二乙酰反应，生成红色的二甲基氧咪唑化合物，该化合物的颜色深浅与尿素含量成正比。
通过测定溶液的吸光度，可以计算出尿素的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 尿素标准溶液- 硫酸铜溶液- 硫酸溶液- 二乙酰- 水浴锅- 移液管- 分光光度计- 容量瓶- 试管2. 实验仪器：- 电子天平- 移液器- 烧杯- 玻璃棒- 滴定管- 实验记录本四、实验步骤1. 准备标准溶液：准确移取尿素标准溶液，加入一定量的硫酸铜溶液，配制成一定浓度的混合溶液。
2. 样品处理：准确移取待测样品，加入适量的硫酸溶液，搅拌均匀，煮沸，冷却至室温。
3. 标准曲线绘制：取多个浓度的尿素标准溶液，按照实验步骤进行测定，记录吸光度，绘制标准曲线。
4. 样品测定：按照实验步骤，对处理后的样品进行测定，记录吸光度。
5. 结果计算：根据标准曲线，计算样品中尿素的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：绘制标准曲线，发现吸光度与尿素浓度呈线性关系，相关系数R²大于0.99，说明该方法可用于尿素含量的测定。
2. 样品测定：对处理后的样品进行测定，得到吸光度值。
3. 结果计算：根据标准曲线，计算出样品中尿素的含量。
六、实验讨论1. 实验过程中，应严格控制实验条件，如温度、时间等，以保证实验结果的准确性。
2. 在进行样品处理时，煮沸时间不宜过长，以免尿素分解，影响测定结果。
3. 标准曲线的绘制应选择多个浓度点，以确保曲线的准确性。
七、实验总结本次实验成功测定了样品中尿素的含量，验证了比色法测定尿素含量的可行性。
通过本次实验，掌握了实验原理、操作步骤和注意事项，提高了实验技能。
同时，也认识到实验过程中应注意的问题，为今后的实验研究奠定了基础。
八、实验报告附件1. 实验数据记录表2. 标准曲线图3. 实验仪器照片4. 实验操作步骤图示。
第1篇一、实验目的1. 熟悉色谱分析方法在尿素检测中的应用。
2. 掌握色谱仪的操作步骤和注意事项。
3. 学习如何进行色谱数据处理和分析。
二、实验原理本实验采用高效液相色谱法（HPLC）对尿素进行定量分析。
尿素在酸性条件下，与水合茚三酮反应，生成蓝紫色化合物。
该化合物在特定波长下有较强的吸收，通过测定吸光度，可以计算出尿素的含量。
三、实验仪器与试剂仪器：1. 高效液相色谱仪2. 色谱工作站3. 真空泵4. 超纯水机5. 烧杯6. 容量瓶7. 移液器试剂：1. 尿素标准品2. 水合茚三酮溶液3. 磷酸溶液4. 乙腈5. 超纯水四、实验步骤1. 标准溶液的配制：准确称取尿素标准品，用超纯水溶解并定容至100 mL，配制成1000 mg/L的标准溶液。
再根据需要稀释成不同浓度的标准溶液。
2. 样品处理：准确量取一定量的尿液样品，用超纯水稀释至适当浓度。
3. 色谱条件：- 流动相：乙腈-磷酸溶液（体积比85:15）- 流速：1.0 mL/min- 柱温：30℃- 检测波长：570 nm4. 上样：将处理好的样品和标准溶液分别注入色谱仪，进行色谱分析。
5. 数据处理：将色谱工作站输出的数据导入计算机，进行数据处理和分析。
五、实验结果与分析1. 标准曲线：以尿素浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：根据样品色谱峰的面积，从标准曲线上查得样品中尿素的含量。
3. 结果分析：比较样品测定值与实际值，计算相对误差。
六、实验讨论1. 本实验采用高效液相色谱法对尿素进行定量分析，具有操作简便、灵敏度高、准确度好等优点。
2. 在实验过程中，需要注意以下几点：- 样品处理要准确，避免误差；- 流动相和样品溶液的pH值要控制好，以保证反应的完全进行；- 色谱条件的选择要合理，以提高分离效果。
七、结论本实验采用高效液相色谱法对尿素进行定量分析，结果表明该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度好等优点，可用于实际样品中尿素的检测。
高效液相色谱-荧光检测器法测定乳和乳粉中的尿素含量谱尼测试集团股份有限公司摘要：建立了高效液相色谱-荧光检测器法测定乳及乳粉中尿素的方法。
样品经乙醇水溶液提取后，在酸性条件下与9-羟基呫吨衍生反应，以乙腈和乙酸钠溶液做流动相，C18反相色谱柱分离，荧光检测器λex213 nm和λem308 nm测定，外标法定量。
在0.1~10.0 µg/mL范围内线性良好，R2＞0.999，配方奶粉和液态奶中加标回收率分别为104%～106%和83.4%～101%，RSD%分别为2.1%～5.7%和3.2%～4.9%。
在乳粉和液态奶中方法检出限分别为30 mg/kg和12 mg/kg。
结果表明，该方法简便、快速，灵敏度高，结果准确可靠，检验数据重现性好。
关键词：尿素；乳；乳粉，高效液相色谱-荧光检测法；9-羟基呫吨Determination of Urea in Milk and Milk Powder by High performance Liquid Chromatographywith Fluorescence DetectionSONG Wei, ZHANG Shu*, CHEN Xiao-xu, SONG Li, ZHAO Yong-biao, SONG Gui-xue（Pony Testing Co. Ltd., Beijing 100080, China）Abstract: A method for determining urea in milk and milk powder was developed using high performance liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-FLD). The samples were extracted with a mixture of water and ethanol, the supernatant was derivatized with a solution of xanthydrol in acidic condition. The method used the C18 column and acetonitrile and sodium acetate solution as mobile phases. The derivatized product were separated and tested using fluorescence detection at λex 213 nm, λem 308 nm. The method showed a good linear correlation in the range of 0.1~10.0 µg/mL, R2＞0.999. The spiked recoveries of urea in milk formula powder and liquid milk samples were in the range of 104~106% and 83.4~101% with RSD% 2.1~5.7% and 3.2~4.9%, respectively. The LODs in formula powder and liquid milk were 30 mg/kg and 12 mg/kg, respectively. The proposed method is rapid, sensitive, reliable and reproducible.Key words: urea; milk; milk powder, high performance liquid chromatography-fluorescence detection, xanthydrol中图分类号：TS252.53 文献标志码：A 文章编号：尿素是在肝脏和肾脏中由蛋白质代谢产物形成的小分子有机物。
