培养基一般采用高压蒸汽灭菌法

培养基的灭菌方法培养基的灭菌是微生物实验中非常重要的一步，它直接关系到后续实验结果的准确性和可靠性。

正确的灭菌方法能够有效地杀灭培养基中的细菌、真菌和其它微生物，保证培养基的纯净度。

下面将介绍几种常用的培养基灭菌方法。

一、高压蒸汽灭菌法。

高压蒸汽灭菌法是实验室中常用的一种灭菌方法。

它利用高压蒸汽的热量能够迅速杀灭细菌和真菌，保证培养基的纯净度。

在进行高压蒸汽灭菌时，首先要将培养基装入耐高温的容器中，然后将容器密封好，放入高压灭菌器中进行灭菌处理。

处理时间和温度需要根据不同的培养基种类和容器大小来确定，一般情况下需要在121摄氏度下压力为15磅的条件下进行20分钟的灭菌处理。

高压蒸汽灭菌法能够有效地杀灭培养基中的各种微生物，是一种非常可靠的灭菌方法。

二、紫外线灭菌法。

紫外线灭菌法是一种常见的表面灭菌方法，它适用于一些不耐高温的培养基或器皿。

在进行紫外线灭菌时，首先要将培养基或器皿放置在紫外线灯下，保持一定的距离，然后开启紫外线灯进行照射。

照射时间一般为15-30分钟，可以有效地杀灭表面的细菌和真菌。

但需要注意的是，紫外线灭菌只能杀灭表面的微生物，对于内部较深的微生物可能效果不佳，因此在使用紫外线灭菌法时，需要搭配其它灭菌方法来确保培养基的纯净度。

三、化学灭菌法。

化学灭菌法是利用化学药剂来进行培养基的灭菌处理。

常见的化学灭菌药剂有过氧化氢、乙醛等。

在进行化学灭菌时，首先要将培养基或器皿浸泡在化学药剂中一定时间，然后取出晾干即可。

化学灭菌法能够有效地杀灭各种微生物，并且操作简单，适用于一些不耐高温的培养基或器皿。

但需要注意的是，化学灭菌药剂可能对培养基产生一定的影响，因此在使用时需要根据实际情况选择合适的药剂和浸泡时间。

综上所述，培养基的灭菌是微生物实验中不可或缺的一环，选择合适的灭菌方法能够有效地保证培养基的纯净度，为后续实验结果的准确性提供保障。

在进行培养基灭菌时，需要根据培养基的种类和实验需求选择合适的灭菌方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保实验结果的可靠性。

培养基用什么方法灭菌培养基在微生物实验室中是必不可少的，但是在使用培养基前，我们需要对其进行灭菌处理，以确保实验结果的准确性和可靠性。

那么，培养基用什么方法进行灭菌呢？下面将为大家详细介绍几种常见的培养基灭菌方法。

首先，我们可以选择高压蒸汽灭菌法。

这是一种常见的培养基灭菌方法，其原理是利用高温高压的蒸汽对培养基进行灭菌。

在实验室中，我们通常会使用高压灭菌器来进行这一操作。

在进行高压蒸汽灭菌时，需要将培养基装入专用的培养皿或试管中，然后放入高压灭菌器中进行灭菌处理。

这种方法能够有效地杀灭培养基中的各类细菌、真菌和孢子，确保培养基的无菌状态。

其次，还可以选择紫外线灭菌法。

紫外线灭菌是一种简单、快速的灭菌方法，适用于一些对高温高压敏感的培养基。

在进行紫外线灭菌时，我们需要将培养基暴露在紫外线灭菌箱中，利用紫外线的杀菌作用对培养基进行灭菌处理。

需要注意的是，在进行紫外线灭菌时，要确保培养基暴露在紫外线下的时间足够长，以确保彻底灭菌。

另外，还可以选择化学灭菌法。

化学灭菌法是利用化学药剂对培养基进行灭菌处理的方法。

常用的化学灭菌剂包括过氧化氢、乙醛等，这些化学物质能够有效地杀灭培养基中的各类微生物。

在进行化学灭菌时，需要将适量的化学灭菌剂加入培养基中，然后进行充分混合，确保培养基受到均匀的灭菌处理。

除了以上几种方法外，还有一些其他的培养基灭菌方法，如滤过灭菌法、辐射灭菌法等。

在选择培养基灭菌方法时，需要根据实验需求和培养基的特性进行合理选择，以确保灭菌效果和实验结果的准确性。

总的来说，培养基的灭菌是微生物实验中非常重要的一环，选择合适的灭菌方法能够有效地保证培养基的无菌状态，确保实验结果的可靠性。

在进行培养基灭菌时，需要严格按照操作规程进行，确保每一步都符合要求，以避免因灭菌不彻底而导致实验结果的偏差。

希望本文所介绍的培养基灭菌方法能够对大家有所帮助，也希望大家在进行微生物实验时能够严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。

培养皿灭菌方法培养皿灭菌是微生物实验中非常重要的一步，它可以有效地杀灭培养皿中的细菌和真菌，确保实验结果的准确性。

下面我们将介绍几种常用的培养皿灭菌方法。

一、高压蒸汽灭菌法。

高压蒸汽灭菌法是最常见的培养皿灭菌方法之一。

首先将培养皿装入专用的培养皿架中，然后放入高压灭菌锅中。

在高压蒸汽灭菌锅中，将水加热至100摄氏度以上，产生高压蒸汽，持续一定时间后，将培养皿取出晾干，即可完成培养皿的灭菌工作。

二、紫外线灭菌法。

紫外线灭菌法是一种快速、方便的培养皿灭菌方法。

将待灭菌的培养皿放入紫外线灭菌箱中，启动紫外线灯管，让紫外线照射培养皿表面一定时间，即可完成培养皿的灭菌工作。

需要注意的是，紫外线具有一定的杀菌作用，但并不能彻底灭菌，因此在使用紫外线灭菌后，还需谨慎操作，避免再次污染。

三、化学灭菌法。

化学灭菌法是利用化学药剂对培养皿进行灭菌的方法。

常用的化学灭菌剂有过氧乙酸、乙醛等。

将培养皿浸泡在稀释后的化学灭菌剂中一定时间，然后取出晾干即可。

需要注意的是，在使用化学灭菌剂时，应该注意剂量和浸泡时间，避免对实验产生不良影响。

四、干热灭菌法。

干热灭菌法是利用高温对培养皿进行灭菌的方法。

将培养皿放入干热灭菌箱中，加热一定时间，达到一定温度后保持一段时间，即可完成培养皿的灭菌工作。

需要注意的是，干热灭菌法对一些热敏感的培养基可能会产生影响，因此在选择灭菌方法时需要根据实验要求进行选择。

总结。

在进行微生物实验时，培养皿灭菌是至关重要的一步。

不同的灭菌方法有着各自的特点和适用范围，实验者应根据实际情况选择合适的灭菌方法，并严格按照操作规程进行操作，确保实验结果的准确性和可靠性。

希望以上介绍的培养皿灭菌方法能对大家有所帮助，祝大家实验顺利！。

微生物的选择培养和计数必备知识基础练1.研究人员通过对大肠杆菌进行基因改造,可以使其不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料,还能以广泛存在于植物纤维中的半纤维素为原料,分解产生燃料物质。

若要将这种大肠杆菌分离出来,应将它们接种在()A.不含氮源的培养基上B.含有蛋白胨的固体培养基上C.只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上D.不含营养要素的培养基上,改造后的大肠杆菌“能以广泛存在于植物纤维中的半纤维素为原料,分解产生燃料物质”,因此若要将这种大肠杆菌分离出来,应将它们接种在只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上。

2.用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验,是在某病原菌均匀分布的平板上,铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。

图示为培养的结果,其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。

下列分析正确的是()A.在图示固体培养基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌B.未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异C.形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感D.不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响,A项错误;病原菌发生抗性变异在与抗生素接触之前,B项错误;微生物对药物较敏感形成的抑菌圈应较大,C项错误;纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后,便不断向纸片周围区域扩散,不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响,D项正确。

3.微生物代谢过程中产生的C O32-,可与环境中的Ca2+反应形成碳酸钙沉淀,这种现象称为微生物诱导碳酸钙沉淀(MICP)。

MICP形成的机制多种多样,通过细菌分解尿素引起碳酸钙沉淀是最常见的方式。

下列相关说法正确的是()A.尿素只有被土壤中的细菌分解成氨后,才能被植物利用B.通常用以尿素为唯一碳源的培养基筛选分解尿素的细菌C.在培养基中加入酚酞指示剂,可以初步鉴定尿素分解菌D.尿素分解菌可以分解碳酸钙质碎石,有效避免土壤板结,只有被土壤中的细菌分解成氨气,氨气再转化为N O3-、N H4+后,才能被植物吸收利用,A项正确;通常用以尿素为唯一氮源的培养基筛选分解尿素的细菌,B项错误;在培养基中加入酚红指示剂,通过指示剂是否变红可以初步鉴定尿素分解菌,C项错误;尿素分解菌分解尿素可引起碳酸钙沉淀,而不能分解碳酸钙质碎石,D项错误。

1.2.1微生物的培养技术及应用1、关于培养基的配制说法不正确的是()A．在配制培养乳酸杆菌的培养基时，需加入维生素B．微生物的适应性强，配制培养基时可以不考虑pHC．虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐D．配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例【答案】B【解析】培养基除需要满足碳源、氮源、水和无机盐几种营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，A正确，B错误；虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，C正确；不同微生物的生长对各种营养物质的需求不同，配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例，D正确。

2、下列关于灭菌和消毒的理解，正确的是()A．灭菌是指杀死环境中的原核生物B．消毒可以杀死微生物细胞和全部芽孢C．常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法D．常用的灭菌方法有加热法、紫外线法、化学药品法【答案】C【解析】灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子，A错误；消毒可以杀死物体体表或内部的一部分微生物细胞，但是不能杀死芽孢，B错误；常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法等，C正确；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，D错误。

3、下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是()【答案】D【解析】倒平板时，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的杂菌污染，A正确；接种时，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，B正确；划线时，从第二次划线开始，每次划线都要从上一次划线的末端开始，让菌种来源于上一次划线末端，这样才能使菌种逐渐稀释，C正确，D错误。

4、有关平板划线操作的说法正确的是()A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D．该方法常用于微生物的分离纯化【答案】D【解析】接种环在使用过程中需要多次灭菌，第一次灭菌是为了杀死其他微生物，每次划线结束后需要灭菌是为了杀死上次残留的菌种，A错误；打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，接种后还需要通过火焰灭菌再塞上棉塞，B错误；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入，C错误。

培养基用什么方法灭菌
培养基在微生物实验中起着至关重要的作用，而培养基的灭菌则是确保实验结
果准确性的关键步骤。

那么，培养基用什么方法灭菌呢？接下来，我们将详细介绍几种常用的培养基灭菌方法，以及它们各自的优缺点。

首先，常见的培养基灭菌方法之一是高压蒸汽灭菌。

这是一种常用的灭菌方法，其原理是利用高温高压的蒸汽对培养基进行灭菌。

这种方法的优点是能够灭杀各类微生物，包括芽孢菌和病毒等，灭菌效果好，且操作相对简单。

然而，高压蒸汽灭菌设备价格昂贵，对实验室条件要求较高。

其次，干热灭菌是另一种常用的培养基灭菌方法。

这种方法的原理是利用高温
对培养基进行灭菌，其优点是不会使培养基受潮，灭菌效果好且操作简便。

然而，干热灭菌需要较长时间来达到灭菌效果，且对部分热敏感物质有破坏作用。

另外，化学灭菌也是一种常见的培养基灭菌方法。

这种方法的原理是利用化学
药剂对培养基进行灭菌，其优点是操作简便，不需要高压设备，且能够有效灭杀各类微生物。

然而，化学灭菌对某些化学药剂敏感的微生物可能产生抗药性，且残留的化学药剂可能对实验结果产生影响。

最后，紫外线灭菌是一种常用的表面灭菌方法。

这种方法的原理是利用紫外线
对培养基表面进行灭菌，其优点是操作简便，不会产生化学污染，且灭杀效果明显。

然而，紫外线灭菌只能对表面进行灭菌，对深层微生物的灭杀效果较差。

综上所述，不同的培养基灭菌方法各有优缺点，实验室在选择灭菌方法时需要
根据实际情况进行综合考虑。

在进行培养基灭菌时，要严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性和可靠性。

希望本文对您有所帮助，谢谢阅读！。

培养基的灭菌方法 1、高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。

培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。

灭菌时一般是在0。

105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。

消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解，失去营养作用，也会使培养基变质、变色，甚至难以凝固。

将蒸馏水或自来水装在三角瓶中，装水量一般不超过瓶的2/3，用牛皮纸或硫酸纸包扎封口，然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。

灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d，若无污染现象，则证明灭菌是彻底的，可以使用。

暂时不用的培养基最好置于10℃下保存。

含IAA或GA3的培养基应在1周内用完，其他培养基最多也不要超过1个月。

2、过滤灭菌：一些植物生长调节剂及有机物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇热容易分解，不能与培养基一起进行高温灭菌，而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。

细菌过滤器与滤膜（孔径0。

45微米）使用之前要先进行高压灭菌。

过滤后的溶液要立即加入培养基中，若为液体培养基，可在培养基冷却至30℃时加入；若为固体培养基，必须在培养基凝固之前（50-60℃）加入，振荡使溶液与其他成分混合均匀。

培养基和培养皿的灭菌方法一、前言在微生物学和生物学实验中，培养基和培养皿的灭菌是非常重要的步骤。

如果没有彻底灭菌，会导致实验结果不准确甚至失败。

因此，本文将介绍培养基和培养皿的灭菌方法。

二、材料准备1. 培养基：选择合适的培养基，根据需要添加相应的试剂。

2. 培养皿：选择合适的大小和形状，根据需要选择不同种类的培养皿。

3. 灭菌设备：可以使用高压蒸汽灭菌器、紫外线灯或者烘箱等设备进行灭菌。

4. 灭菌液：可以使用75%乙醇或者84消毒液等消毒液进行表面消毒。

5. 其他材料：酒精棉球、无尘纸巾等。

三、高压蒸汽灭菌法1. 准备好要灭菌的培养基和培养皿，并放入高压蒸汽灭菌器中。

2. 根据设备说明书设置温度和时间，一般为121℃，15-20分钟。

3. 开始启动高压蒸汽灭菌器，等待灭菌完成。

4. 灭菌完成后，关闭高压蒸汽灭菌器，等待冷却。

5. 取出培养基和培养皿，注意不要碰触到未消毒的表面。

6. 使用酒精棉球擦拭外部表面，避免污染。

四、紫外线灭菌法1. 准备好要灭菌的培养基和培养皿，并放入紫外线灯下。

2. 打开紫外线灯，照射15-30分钟。

3. 灭菌完成后，关闭紫外线灯。

4. 取出培养基和培养皿，注意不要碰触到未消毒的表面。

5. 使用酒精棉球擦拭外部表面，避免污染。

五、烘箱灭菌法1. 准备好要灭菌的培养基和培养皿，并放入烘箱中。

2. 根据需要设置温度和时间。

一般为160℃，2小时或180℃，1小时。

3. 开始启动烘箱，等待灭菌完成。

4. 灭菌完成后，关闭烘箱并等待冷却。

5. 取出培养基和培养皿，注意不要碰触到未消毒的表面。

6. 使用酒精棉球擦拭外部表面，避免污染。

六、表面消毒法1. 准备好要灭菌的培养基和培养皿。

2. 使用酒精棉球或者喷雾器喷洒75%乙醇或84消毒液等消毒液进行表面消毒。

3. 等待消毒液挥发干燥后，即可使用。

七、注意事项1. 在进行灭菌前，必须确保培养基和培养皿的外部表面已经清洁干净。

2. 在进行灭菌时，必须按照设备说明书上的要求设置温度和时间，并确保设备正常运行。

培养基常用的灭菌方法培养基是适于细菌生长繁殖需要的各种营养物质人工配制而成的基质。

按营养成分和用途不同，分为基础、合成、营养、鉴别、选择和厌氧培养基。

按物理形态分为固体、半固体和液体三类。

根据细菌的种类和培养目的不同，可采用不同的培养基。

1、灭菌方法培养基的灭菌方法主要有两种，湿热灭菌及0.22μm微孔滤膜过滤除菌。

与过滤相比，高压蒸汽灭菌的工作强度小，成本较低但易造成营养成分的流失，而且在多次加样（无菌谷氨酰胺溶液，无菌碳酸氢钠溶液等）过程中容易造成二次污染。

大多数培养基采用0.1～0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤除菌，并且已成为培养基除菌的发展方向，它可低限度地减少培养基的营养损失。

1.1 湿热灭菌蒸汽在冷凝时释放出大量潜能，并且蒸汽具有强大穿透力，蒸汽的湿热破坏菌体蛋白质和核酸的化学键使酶失活，微生物因代谢障碍而死亡。

湿热灭菌的效果取决于致死温度和致死时间。

致死温度是杀灭微生物的极限温度。

致死时间是在致死温度下杀灭全部微生物所需时间。

高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。

灭菌时一般是在121℃、15psi，15分钟的条件下完全可达到灭菌效果及营养成分的最小损失，不需将灭菌时间延长。

为保证高压灭菌的效果，灭菌设备的验证很关键。

1.2 过滤灭菌可供过滤灭菌使用的滤膜很多，其材料多为聚醚砜（PES）膜、聚偏二氟乙烯（PVDF）膜、聚四氟乙烯（PTFE）膜、醋酸纤维素、硝酸纤维素等等。

一般采用正压过滤，正压过滤较之负压过滤具有高流速、过滤快、不易污染，可避免蛋白质产生大量气泡等优点。

目前大多数实验室和制药企业采用微孔滤膜、一体式过滤器（囊式过滤器）或筒式滤芯除菌。

微孔滤膜需配套不锈钢夹具，中间可夹放0.22um滤膜。

使用这种滤器最重要步骤是安装滤膜及无菌过滤过程。

筒式滤芯亦需配套不锈钢滤壳。

如果是少量过滤(<200ml)可选配针头过滤器。

1．天然培养基是采用化学成分很复杂的天然物质配制而成的,所以营养成分不丰富。

2．固体培养基中必须加入琼脂。

3．呈液体状态的培养基，叫液体培养基或培养液，可以广泛用于微生物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。

4．培养基的营养成分一般应包括碳源、氮源、生长因子、无机盐和水等。

5．固体培养基中琼脂浓度常控制在20%。

6．合成培养基是一类用化学成分完全不知道的培养基。

7．根据培养基的用途来区分，可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等。

8．根据状态分为天然培养基、化学合成的培养基、半合成培养基。

9．一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌30分钟的方法。

10．一般培养基无需调节pH值。

11．培养基应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱内保存。

12．培养基还应具有适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力及一定的氧化还原电位和合适的渗透压。

13．培养基可以用热空气进行灭菌。

14．碳源提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分。

15．种子培养基一般C/N高。

16．查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的培养基。

17．干麦芽汁可以用来培养酵母菌。

18．培养基是指一切可供生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质和原料。

19．保藏菌种用的培养基应该营养成分丰富，避免菌种死亡。

20．常用的EMB伊红美蓝乳糖培养可用于大肠杆菌的鉴定。

21．高氏1号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基。

22．酵母菌的培养基初始pH一般是碱性的。

23．固体培养基可用于菌种分离、鉴定、育种、保藏等方面。

24．培养基中常用的凝固剂是凝胶。

25．热空气灭菌利用高温干燥空气（160－170C）加热灭菌1－2h。

26．代谢产物的发酵培养基一般C/N低。

27．培养基中可以加入缓冲液来调节pH变化。

28．酵母膏、蛋白胨，花生饼粉等是常用的碳源。

29．培养基中必须加入能源物质。

30．培养基中有些营养成分是多功能。

31．溶解营养成分时无先后顺序，不影响试验结果。