唑类抗真菌药物耐药机制的研究进展

・综述・ 抗真菌药物耐药机制的研究进展毛琼蕾陈小清房月近年来，随着抗真菌药、广谱抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂在临床上的广泛应用，条件致病菌感染发生率急剧增加，真菌的耐药性也在不断加重。

耐药真菌所致的深部感染，已成为临床治疗失败的一个重要原因，抗真菌研究面临克服真菌耐药性的问题。

本文按耐药机制发生的频率，综述相关耐药机制的研究进展。

目前研究认为，真菌耐药性的产生机制主要有以下几种：（1）真菌细胞内药物累积减少；（2）药物靶酶产生增多或靶酶结构改变；（3）靶酶的缺失，导致细胞代谢途径的改变；（4）生物被膜形成；（5）细胞壁的合成障碍；（6）细胞应激反应[1-2]。

耐药菌株的各种耐药机制既可以单独起作用，也可以两种或多种机制同时起作用。

一般情况下，参与耐药的机制越多，耐药程度越重[3]。

一、耐药真菌细胞内药物浓度的降低研究发现敏感念珠菌细胞内唑类药物的浓度约是细胞外药物的浓度的3倍，而耐药菌株胞内唑类药物的浓度反而约为胞外的一半[4]。

目前多从两个方面来解释耐药真菌细胞内药物浓度降低的现象：（1）真菌膜通透性减低，使可进入胞内的药物减少。

（2）细胞膜上参与药物外排有关的运载蛋白的表达上调，是现在认为许多耐药真菌细胞内药物浓度降低的主要原因。

目前比较明确的与外排泵有关的运载蛋白有两大类，一类是含ATP结合区的ABC转运蛋白超家族（ATP-binding cassette transporters，ABCT），其中Cdr1p（candida drug resistance protein）和Cdr2p是对唑类药物产生耐药最主要的ABCT[2]。

CDR1为白色念珠菌中最先发现的外排泵基因。

大多数对氟康唑耐药的白色念珠菌株中均发现CDR1超表达[5]。

Cdr1p的表达使白色念珠菌产生对氟康唑耐药性比Cdr2p的表达影响更大[6]。

Cdr2单独破坏株并未显示对唑类药物高度敏感，Cdr1和Cdr2同时破坏株显示对唑类药物高度敏感[7]。

(上接第127页)进行LC A白细胞共同抗体、角蛋白CK的抗体一步法[122]。

对鉴别淋巴瘤及分化差的癌、肉瘤,应用微波的方法对冰冻切片进行了免疫组织化学染色,得到了满意效果。

我们使用DAK O EPOS G FAP抗体,采用微波辐射技术进行石蜡切片的免疫组织化学染色目前文献中尚未见报道。

从微波法与标准法两种方法在组织形态学的免疫组织化学染色结果看,胶质肉瘤、胶质母细胞瘤及星形细胞瘤G FAP均出现了阳性表达,而且阳性程度一致,阳性对照组的脑组织中星形细胞阳性,阴性对照组脑膜瘤细胞为阴性表达,这说明微波法与标准法同样准确、清晰度高,而在时间上微波法比标准法大大节省了时间,占有优势,染色仅需20min,而常规染色则需要80min。

由此看出,使用微波的方法为快速的病理鉴别诊断工作提供了可靠的依据,值得推广应用。

参考文献:[1]　Chiosi M,Lestani M,Pedron S,et al.A rapid immunostainingMethod for frozen section.Biotech Histochem,1994,69:2352239.[2]　马大烈,郑青渝,李全华.微波En vision免疫组织化学技术及其应用.中华病理杂志,1998,27:1532154.(收稿日期:2005-09-14)中图分类号:R99 文献标识码:B 文章编号:1002-3127(2006)02-0128-03・药物毒理・唑类抗真菌药物的药理学和毒理学研究进展曹安民,施畅,廖明阳(军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850)关键词:唑类抗真菌药物;药理学;毒理学 唑类抗真菌药在临床上广泛用于治疗深部真菌和浅表真菌感染,早期开发的咪唑类药物以克霉唑和酮康唑为代表,是治疗浅表性真菌感染的首选药物。

此类药物可与人体细胞色素P450(CY P450)蛋白血红素辅基Fe原子配位结合,因而具有一定的肝毒性,并对肾上腺和性腺有一定的抑制作用,致使其临床应用受到限制。

廛睦痘生挂痘２Ｑ！Ｑ堡≥旦筮！兰鲞箜！期』旦！婴！１２１２赶塑堕！！望曼！塑！垒碰：丛型２Ｑ！Ｑ：！堂：丝：堕垒！・综述・２３Ｒｅｔｒｕｖｉｒｕｓｅｓ，２００８，２４（５）：７３３—７４２．［２１］ＴｕＹＱ，ＷａｎｇｈＩＪ，ＹａｏＪ，ｅｔａ１．Ｈｕｎｕｍｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｅｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ一１ｇｅｎｏｔｙｐｉｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｍｏｎｇｖｏｌｕｎｔｅｅｒｂｌｏｏｄｄｏｎｏｒｓｉｎＹｕｎｎａｎ，Ｃｈｉｎａ【Ｊ］．Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，２００９，４９（９）：１８６５－１８７３。

［２２］ＧｕｎＤ，ＤｉｎｇＮ，ＸｕＹ，ｅｔａ１．Ｎｅａｒ柚卜ｌｅｎｇｔｈｇｅｎｏｍｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａ－ｔｉｏｎｏｆａｎＨＩＶ—ｌＣＲＦ０ｌ—ＡＥ６ｔｌ＇，ａｉｎｉｎＪｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ：ｅｖｉｄｅｎｃｅｏｆｔｗｏｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｆｒｏｍＦｕｊｉａｎ［Ｊ］。

ＡＩＤＳＲａｓＨｕｍＲｅｔｒｏｖｉｔｕｓｅｓ，２００９，２５（６）：６１９－６２３．［２３］冯铁建。

赵广录，陈琳，等．深圳市ＨＩＶ一１毒株的流行状况［Ｊ］．中国医学科学院学报，２００６，２８（５）：６３７－６４１．［２４］ＧｕｎＨ。

Ｗｅｉ．ＩＦ，ＹａｎｇＨ，ｅｔａ１．ＲａｐｉｄｌｙｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｐｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆＨＩＶａｎｄｓｙｐｈｉｌｉｓａｎｄＨＩＶ一１ｓｕｂｔｙｐｅｃｈａｒａｅｔｅｒｉｚａｌｉｏｎａｍｏｎｇｍｅｎｗｈｏｈａｖｅｓｎｗｉｔｈｍｅｎｉｎＪｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．ＳｅｘＴｒａｎｍＤｉｓ，２００９，３６（２）：１２０一１２５．［２５］刘翌．艾滋病病毒分子‘哑型流行病学研究进展［Ｊ］．中国国境卫生检疫杂志，２００６，２９：１４６—１５０．［２６］ＧｕｎＨ，ＧｕｎＤ，ＷｅｉＪＦ，ｅｔａ１．ＦｉｒｓｔｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｎｏｖｅｌＨⅣｔｙｐｅｌＣＲＦ０７＿ＡＥ／０７＿ＢＣｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｍｏｎｇ卸ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｎｇｉｅａｌｌｙｌｉｎｋｅｄｃｏｈｏｒｔｏｆＩＤＵｓｉｎＪｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｒｍ［Ｊ］．ＡＩＤＳＲｅｓＨｕｍＲｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅａ，２００９，２５（４）：４６３－４６７．［２７］黄海龙，刑辉，马鹏飞，等．中国ＨⅣ一ｌ主要流行重组株Ｂ／ＣＴａｔ基因第一外显子序列特征分析ＣＪ］．中华实验和临床病毒学杂志，２００６，２０（４）：３９０－３９２．【２８］ＷａｎｇＬ，ＺｈｅｎｇＸＷ，ＱｉａｎＨＺ。

１概述为适应临床抗深部真菌感染的需要，抗深部真菌药逐渐向低毒、广谱和高效的方向发展。

如通过改进两性霉素Ｂ的剂型而研制出３种脂质型制剂，减少了肾毒性和发热等即刻反应。

在筛选新的化学结构寻求新靶点方面开发出β－Ｄ－葡聚糖合成酶抑制剂棘白菌素类抗真菌药。

而三唑类抗真菌药物的开发在优化氟康唑等化学结构，研制出第二代三唑类伏立康唑和开发β－环糊精包合型新制剂等两方面都获得了显著的成就（见表１）。

本文仅对抗深部真菌感染的三唑类的临床药学进展进行简介。

２三唑类抗深部真菌药概况唑类（吡咯类）按化学结构可分为咪唑类和三唑类，按其抗真菌作用可分为３代，而三唑类（第三代唑类）按抗真菌作用分为两代（见表２、表３）。

２．１咪唑类咪唑类抗深部真菌药已逐渐被三唑类所取代。

①咪唑类抗真菌药咪康唑由于抗菌活性低，美国等国家只有局部外用剂型用于浅部真菌病，不再作为全身给药。

全身用药已从２００２版我国基本药物中删除。

②由于不良反应严重酮康唑已很少作为全身用药。

酮康唑片剂已从２０００版我国基本药物名单中删除。

２．２三唑类唑类抗真菌药是作用于真菌细胞膜的麦角固醇合成酶抑制剂，即通过抑制细胞色素Ｐ４５０１４α－脱甲基酶而引起羊毛固醇的堆积和麦角固醇的缺乏，导致真菌细胞膜结构和功能障碍而发挥抗真菌作用。

由于人体内普遍存在细胞色素Ｐ４５０酶系，三唑类对Ｐ４５０１４α－脱甲基酶的选择性较咪唑类强，所以对肝脏等不良反应较低。

三唑类以氟康唑临床应用最为广泛，在最多见的白色念珠菌感染的防治中发挥了十分重要的治疗作用，是全身白色念珠菌感染的首选药物，而且对热带念珠菌、近平滑念珠菌、葡萄牙念珠菌等有极好的抗菌活性。

为了适应近年非白色念珠菌感染和侵袭性曲霉菌病呈增多趋势，对第一代三唑类进行了结构改造，研制出伏立康唑、雷伏康唑、泊沙康三唑类抗深部真菌药的临床药学进展文章编号：１６７２－３３８４（２００７）－０１－０００１－０７【作者】王汝龙首都医科大学附属北京友谊医院（北京１０００５０）【中图分类号】Ｒ９７８．５【文献标识码】Ｂ作用机理分类代表性类别代表性品种作用于细胞膜作用于细胞壁作用于细胞膜作用于细胞核两性霉素Ｂ卡泊芬净米卡芬净氟康唑伏立康唑伊曲康唑５－氟胞嘧啶麦角固醇结合剂β－１，３－葡聚糖合成酶抑制剂固醇１４－α－去甲基酶抑制剂抑制ＲＮＡ、ＤＮＡ合成多烯类棘白菌素类唑类氟胞嘧啶类表１抗深部真菌药的分类代表性品种咪唑类三唑类第一代第二代第三代咪康唑（ｍｉｃｏｎａｚｏｌｅ）酮康唑（ｋｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅ）氟康唑（ｆｌｕｃｏｎａｚｏｌｅ）伏立康唑（ｖｏｒｉｃｏｎａｚｏｌｅ）伊曲康唑（ｉｔｒａｃｏｎａｚｏｌｅ）化学分类分代表２唑类抗深部真菌药第二代氟康唑类伊曲康唑类氟康唑伊曲康唑伏立康唑雷伏康唑泊沙康唑化学分类第一代表３三唑类抗深部真菌感染药的分类芳环唑等，且研制出环糊精包合型的伊曲康唑注射剂和口服剂型以及伏立康唑的注射剂。

·综述·白念珠菌唑类药物耐药机制研究进展纪凌云， 周爱萍， 马 俊， 金 宁， 谭光坤， 吴文娟关键词： 白念珠菌； 抗真菌药物，唑类； 耐药机制中图分类号：R379.4；R978.5 文献标识码：A 文章编号：1009-7708 ( 2019 ) 02-0218-06DOI: 10.16718/j.1009-7708.2019.02.018Research updates on the mechanism of azole resistance in Candida albicansJI Lingyun, ZHOU Aiping, MA Jun, JIN Ning, TAN Guangkun, WU Wenjuan. （Department of Laboratory Medicine, Shanghai East Hospital, Tongji University, Shanghai 200123, China ）基金项目： 国家自然科学基金（81472032）；浦东新区卫生系统重点学科建设资助（P W Z x k 2017-09）；上海市市级医疗卫生优秀学科带头人培养计划资助（2017BR032）。

作者单位：同济大学附属东方医院医学检验科，上海 200123。

第一作者简介： 纪凌云（1991—），女，医学硕士，检验技师，主要从事微生物学研究。

通信作者：吴文娟，E-mail ：wwj1210@ 。

近年来，随着广谱抗菌药物、糖皮质激素、免疫抑制剂的广泛应用，以及各种介入诊疗、器官移植的大量开展，念珠菌病的发病率逐渐升高。

据相关统计，发生侵袭性念珠菌感染的患者达25万例/年，死亡病例超过5万例，年发病率在（2～14）/100 000[1-2]。

白念珠菌是一种定植在正常人群口腔黏膜、上呼吸道、肠道及阴道等部位的酵母样真菌，为条件致病性真菌。

近十年来，越来越多的其他念珠菌种被发现或成为重要的病原菌，使得菌种分布发生了变化，但白念珠菌占比达50%，仍占主要地位[3]。