辣椒红检测程序

辣椒色价检测方法
一）样品准备
1. 将干辣椒去籽去把，取有代表性的样品200g左右。

2. 在粉碎机上磨碎(锣孔径0.5mm)。

将磨后辣椒粉搅拌10分钟，再点取出样品约10g，再用药匙充分搅拌5分钟，取样检测色价二）检测
1. 将辣椒粉充分搅匀后，称取样品1.0000±0.0010g，置于100ml
容量瓶中;
2. 加试剂油至刻度线下2cm，摇匀后于25℃条件下避光静置1
小时50分钟。

3. 取出容量瓶加试剂油定容至刻度并震摇几次使溶液均匀后再
避光静置10分钟，使溶液分层；
4. 移取容量瓶中上层清液5ml，用试剂B稀释至一定浓度，在分
光光度计上460nm处测吸光度A （0.300＜A＜0.700）；
5. 按公式
一、色调
一）检测
1. 取检测色价时的稀释液，在分光光度计470nm及454nm处分
别测其吸光度 A470和A454（0.300＜A＜0.700）；
2. 色调CR=A470/A454
二）产品合格判定：CR>0.800为合格。

辣椒红色素中苏丹红的测定序列号：DM-P-0521 序言苏丹红是一种人工合成的染料，为亲脂性偶氮化合物，主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四种类型。

常作为一种工业染料，在食品中非天然存在，如果食品中的苏丹红含量较高，达上千毫克，则苏丹红诱发动物肿瘤的机会就会上百倍增加，特别是由于苏丹红有些代谢产物是人类可能的致癌物。

早在2003年5月，法国发现从印度进口的红辣椒产品中含有苏丹红Ⅰ号。

随后，在欧盟成员国加强检测后，又在包括咖喱粉在内的一系列进口辣椒产品中发现了苏丹红Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号。

2005年2月，英国食品标准局在英国“第一食品公司”制造的伍斯特郡辣酱油使用的辣椒粉中查处了苏丹红Ⅰ号。

并于2月下旬，向全球发出十五安全警告。

随后，我国也加强了苏丹红Ⅰ~Ⅳ号的检测工作，发布了“食品中苏丹红染料的检测方法-高效液相色谱法”国家标准。

2 样品准备/提取(1) 称取0.1 g~0.2 g样品于离心管中，加入10 mL乙腈；(2) 涡旋混合5 min，超声提取5 min，6000 rpm下离心3 min，收集上清液；(3) 残渣再用10 mL乙腈提取，每次涡旋混合5 min，超声提取5 min ，6000 rpm下离心3 min；合并两次提取液；(4) 在40 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干，然后用5 mL正己烷溶解，待净化。

3 SPE柱净化——ProElut Silica 1 g/6 mL（Cat.#：63006）(1)活化：10 mL正己烷，流出液弃去；(2)上样：将待净化液加入小柱，流出液弃去；(3)洗脱：15 mL乙醚：乙腈=1：9洗脱，收集流出液；(4)重新溶解：在40 ℃下用减压蒸馏将收集的流出液蒸干，然后用乙腈定容至2 mL后供HPLC分析。

4 分析条件色谱柱：Diamonsil C8(2) 150×4.6 mm，5 μm（Cat.#：99650）流速： 1.0 mL/min检测器：* UV：478 nm柱 温： 30 ℃ 进样量： 20 μL 流动相： A ：乙腈，B ：水5添加回收结果辣椒油中苏丹红的添加回收结果Tim e (m in)V o l t s苏丹红5.0 mg/L 的标准液相色谱图Tim e (m in)V o l t s辣椒红色素中苏丹红（添加浓度50 mg/kg ）的液相色谱图2468101214Tim e (m in)0.000.020.040.060.08V o l t s辣椒红色素中苏丹红（未添加）的液相色谱图。

实验七辣椒红色素的分离提取及测定综述：辣椒红色素为深红色粘性油状液体，是以辣椒为原料，用石油醚、丙酮、正己烷等有机溶剂提取得到的天然色素。

主要由辣椒红素、辣椒玉红素、辣椒酮、辣椒红呋喃素、玉米黄质等化合物组成，，依据来源和制法的不同，因含有辣椒碱而具有不同程度的辣味。

辣椒红素几乎不溶于水，可任意溶解于丙酮、乙酸乙酯、正己烷，易溶于乙醇，稍难溶于丙三醇。

紫外光可以使辣椒红素褪色，但辣椒红素对热稳定，160℃加热两小时几乎不褪色，Fe3+、Cu2+可使之褪色。

pH对色素色度无影响。

辣椒红素一、实验目的：本实验为自主设计实验，要求学生几人一些小组，自己查阅文献、制定实验方案、在教师指导下讨论通过后进行实验。

通过对辣椒红色素的提取、分离及测定，初步了解和掌握食品中某些成分的提取技术、分离技术以及测定方法，从而对食品有效成分的分析有比较系统的认识，为能灵活运用食品化学的研究方法打下良好的基础。

本次实验还拟通过这种方式，使同学们了解一个研究性试验的基本过程，从而提高对科学研究的兴趣，为今后创新性实验的开发奠定一定的能力基础，同时也在于培养大家团队协作的团队精神。

二、实验原理辣椒红色素为脂溶性色素，选用适当的方法提取后，可采用不同的分离技术对色素进行分离。

三、实验材料与设备1.材料：干红辣椒2.试剂：石油醚、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、氯仿、甲醇、柱层析用硅胶、薄层层析用硅胶、0.5%羧甲基纤维素钠等。

3.设备：粉碎机、超声波清洗机、旋转蒸发仪、薄层层析板、柱层析、层析缸等。

四、实验步骤1.色素的提取：称取1-2g 干红辣椒，掰开去籽，放入粉碎机中粉碎。

将粉碎好的粉末倒入一干燥洁净的三角瓶，加入50-100ml 丙酮，用保鲜膜封口，并在保鲜膜上扎几个眼儿。

将三角瓶放入超声清洗机20-30min ，过滤后放入旋蒸瓶内旋蒸，直至完全蒸干。

向内壁附着有辣椒红色素的旋蒸瓶内加入3-4ml 左右的石油醚，轻摇将辣椒红色素溶解在石油醚中，最后把石油醚倒入小试管，密封好放入冰箱保存。

饲料中辣椒红的测定高效液相色谱法1范围本文件描述了饲料中辣椒红的高效液相色谱测定方法。

本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料中辣椒红的测定。

本文件的检出限为0.05mg/kg，定量限为0.1mg/kg。

2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理试样中的辣椒红（以辣椒红素和辣椒玉红素表示）用乙腈提取，高效液相色谱仪测定，外标法定量。

5试剂或材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

5.1水：GB/T6682，一级。

5.2乙腈：色谱纯。

5.380%乙腈溶液：取80mL乙腈，加水稀释至100mL，混匀。

5.4辣椒红素和辣椒玉红素标准储备溶液（100μg/mL）：准确称取辣椒红素（CAS号：465-42-9，纯度不低于95%）和辣椒玉红素（CAS号：470-38-2，纯度不低于95%）标准品各10mg(精确至0.01mg)，分别置于100mL棕色容量瓶中，用乙腈溶解、定容，混匀。

2℃～8℃保存，有效期为1个月。

5.5混合标准中间溶液(10μg/mL)：准确移取1mL辣椒红素和辣椒玉红素标准储备溶液（5.4）于10mL 棕色容量瓶中，用乙腈稀释、定容，混匀。

临用现配。

5.6混合标准系列溶液：准确移取适量混合标准中间溶液（5.5）于10mL棕色容量瓶中，用80%乙腈溶液（5.3）稀释、定容，混匀。

配制系列标准溶液，浓度分别为0.020μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL和5.0μg/mL。

临用现配。

5.7微孔滤膜：0.2μm，有机相。

6仪器设备6.1高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。

红辣椒中红色素的提取实验目的1. 学习从红辣椒中提取红色素2. 学习薄层层析法和柱层析法及应用3. 掌握提取、分离、鉴定天然化合物的方法 产品介绍天然红辣椒中含有辣椒红色素（简称辣椒红），辣椒素、辣椒油酯等。

辣椒红是辣椒红素、辣椒玉红素、β-胡萝卜素等色素的混合物，为深红色油状液体。

辣椒红是食品和化妆品中的天然色素添加剂。

其化学组成为呈深红色的色素主要是由辣椒红脂肪酸酯和辣椒玉红素脂肪酸酯所组成。

呈黄色的色素则是β-胡萝卜素，化学结构：HOCH 3CH 3OCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3OHCH 3CH 3H 3C辣椒红OCH 3CH 3OCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3H 3C OCO RCO R辣椒红的脂肪酸酯（R=3个或更多碳的链）另一个具有稍大R f 值的较小红色斑点，可能是由辣椒玉红素的脂肪酸酯组成。

CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3H 3Cβ-胡萝卜素 实验原理：色谱法是分离、纯化、鉴定有机化合物的重要方法之一，有着广泛的用途。

色谱法是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。

流动的混合物称为流动相；固定的物质称为固定相（可以是固体，也可以是液体）。

依据各组分在固定相中的作用原理不同，可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱等；依据操作条件的不同，又可分为柱色谱、薄层色谱、纸色谱、气相色谱、高效液相色谱等。

下面着重介绍柱色谱与薄层色谱：柱色谱常用的有吸附色谱和分配色谱两种。

吸附色谱常用氧化铝和硅胶为吸附剂。

分配色谱用硅胶、硅藻土、纤维素等为支持剂，以吸收大量的液体作为固定相。

吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。

待分离的混合物溶液流过吸附柱时，各种组分同时被吸附在柱的上端。

食品安全国家标准食品添加剂辣椒红1 范围本标准适用于以辣椒（Capsicum annuum L）果皮及其制品为原料，经萃取、过滤、浓缩、脱辣椒素等工艺制成的食品添加剂辣椒红。

2 分子式、结构式和相对分子质量2.1 分子式辣椒红素：C40H56O3辣椒玉红素：C40H56O42.2 结构式辣椒红素：辣椒玉红素：2.3 相对分子质量辣椒红素：584.87（按2007年国际相对原子质量）辣椒玉红素：600.87（按2007年国际相对原子质量）3 技术要求3.1 感官要求感官要求应符合表1的规定。

GB 10783—201X3.2 理化指标理化指标应符合表2的规定。

表2 理化指标附录A 检验方法A.1 一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和符合GB/T 6682规定的三级水。

试验中所用标准溶液、杂质标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定配制。

试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2 鉴别试验 A.2.1 溶解性溶于乙醇，易溶于植物油、丙酮、乙醚、三氯甲烷，几乎不溶于水，不溶于甘油。

A.2.2 显色反应在1滴试样中加2～3滴三氯甲烷和1滴硫酸，应呈现暗蓝色。

A.2.3 最大吸收峰样品溶解在正己烷中，在约470nm 处有最大吸收峰。

A.3 吸光度的测定 A.3.1 试剂和材料丙酮。

A.3.2 仪器和设备A.3.2.1 分光光度计，附1 cm 比色皿。

A.3.3 分析步骤准确称取0.1g 试样（精确至0.000 2g ），用丙酮稀释于100mL 容量瓶中，再精确吸取稀溶液10mL ，稀释至100 mL ，用分光光度计在460nm 波长处，用丙酮作参比液，于1cm 比色皿中测定其吸光度。

注：被测比色液的吸光度范围宜控制在A=0.30～0.70范围内。

A.3.4 结果计算吸光度nm E cm 460%11按公式（A.1）计算：1001460%11⨯⨯=m f A nm E cm ………………………………（A.1） 式中：A ——实测试样溶液的吸光度； f ——稀释倍数；m ——试样质量，单位为克（g ）。

辣椒检测程序一．辣椒的取样辣椒收购点的取样暂定方案：1、带袋或捆装大货样品取样：a：以进货件数计，200件以下抽取20件，200件以上按照件数的10%抽取。

从被抽到辣椒袋中各取300g左右有代表性的辣椒样品定为原始样品。

b:缩分样品：将取出的原始样品倒在清洁、干燥的路面上（也可在塑料布上进行），用四分法缩分。

由相对的两边对准中心混合,反复混匀后,将样品铺成厚度均匀的正方形平面,而后截划两条对角分割线,分成四个相等的三角形,任意舍去两个对顶三角形样,其余两个对顶三角形样品合并,按上法继续分取,直至最后两份对顶三角形样品的总重量略高于2kg,任取其中一份对顶三角形状样品作为平均样品。

分样时应注意散落椒籽、椒梗的均匀分配。

2、散装大货可以在装车过程中，间隔取样，取样量根据辣椒的均匀情况及批次大小而定，一般按照总量的10%取样，然后依据缩分法进行缩分，取出2kg样品。

也可以装包，依据方法1的取样过程进行取样。

3、包装：取样后样品应进行特殊包装，及时随车带回，避免水分和色价变化。

一般情况下，为避免水分损失，可将所取样品装入双层塑料袋中密封保存。

第二种方法，把取到的样品，称准确重量进行标识，实验室接到样品时，再称重量，这样就知道损失重量。

4、运送：将包装好的样品随大货由司机带回。

样品要与大货在一起。

到公司后，司机马上将样品交予仓库保管，并由仓库保管送实验室进行报检检测，如仓库保管不能及时送往实验室，应将样品避光暗处存放。

备注：货前样品由经营部采购人员取样。

二．辣椒报检1、批次合并：保管应知道各收购点的进货计划，为便于检测、辣椒加工的工作，可以选择相同产地、品种相同、入厂时间不超过3天、批量不超过40吨的批次进行合并，在报检时注明合并的批号、数量和检测项目，由质检部采取加权平均的方法出具检测结果。

2、报检：报检的辣椒要注明产地、品种、数量、车次、袋数，检测项目，需要合并批次的报检时注明，等样品到齐之后检测。

样品在检测之前由质检部负责保管。