CNAS-GL037-2019 临床化学定量检验程序性能验证指南.pdf

CNAS-GL037临床化学定量检验程序性能验证指南Guidance on the Verification of Quantitative Measurement Procedures used in the ClinicalChemistry中国合格评定国家认可委员会前言本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是对CNAS-CL02《医学实验室质量和能力认可准则》和CNAS-CL02-A003《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明》中有关临床化学定量检验程序进行性能验证实验所做的具体解释和指导，供医学实验室和评审员参考使用。

本文件为首次发布。

临床化学定量检验程序性能验证指南1 范围本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对临床化学检验程序进行性能验证，也可供评审员在现场评审过程中参考使用。

本指南主要适用于医学实验室使用的临床化学定量检验方法，其他专业领域使用的定量检验程序/方法可参考使用。

临床化学定量检验程序，也称临床化学定量检验方法，在本指南中统一称为临床化学定量检验程序（以下简称“检验程序”）。

本指南适用于实验室采用的经确认的检验程序。

2 规范性引用文件下列文件对于本指南的应用是必不可少的。

凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。

凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。

GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂（盒）》WS/T 408-2012《临床化学设备线性评价指南》WS/T 416-2013 《干扰实验指南》WS/T 420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T 492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》3 术语和定义对于本指南，GB/T 29791.1-2013（ISO 18113-1：2009，IDT）中的定义适用。

下列术语和定义适用于本指南。

3.1 可报告范围 reportable range体外诊断医疗器械性能特征已被验证的测量区间。

学术论著中国医学装备2023年8月第20卷第8期 China Medical Equipment 2023 August V ol.20 No.8*基金项目：军队生物安全研究专项资助项目(19SWAQ06)“超级细菌生物学特性及防控技术的研究”①解放军总医院第五医学中心南院区检验科 北京 100073*通信作者：*********************；***********作者简介：袁方，女，(1989- )，本科学历，主管技师，从事医院分子诊断技术及研究工作。

[文章编号] 1672-8270(2023)08-0039-05 [中图分类号] R446 [文献标识码] APerformance verification and evaluation of PCR system in detecting HCMV DNA/YUAN Fang, TONG Li-wei, YAN Yan, et al//China Medical Equipment,2023,20(8):39-43.[Abstract] Objective: T o conduct performance verification and evaluation of real-time fluorescent quantitative-polymerase chain reaction (FQ-PCR) system in detecting human cytomegalovirus deoxyribonucleic acid (HCMV DNA) so as to satisfy the demands of clinical detection. Methods: The clinical samples of hospital and the standard samples provided by third party were collected, and the real-time FQ-PCR system was adopted to detect the performance of HCMV DNA reagent and conduct evaluation. The accuracy, measurement precision (intra batch repeatability and inter batch precision), linear interval, detection limit, anti-interference ability, cross reaction and other performance of the detection method of HCMV DNA FQ-PCR system were verified and evaluated according to the corresponding requirements of the series of documents of <Guidance on the Performance V erification for Molecular Diagnostic Procedures (CNAS-CL039)> and <Guidance on the V erification of Quantitative Measurement Procedures used in the Clinical Chemistry (CNAS-GL037)> of China National Accreditation Service for Conformity Assessment, and the EP series files of Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) of American. Results: The accuracy of FQ-PCR system was within the permissible range in detecting HCMV DNA, and the coefficients of variation (CVs) of precision of intra batch repeatability of low and high concentrations samples (1.72E+04copies/ml and 2.74E+09 copies/ml) were respectively 3.90% and 0.11%, and the inter batch precision CVs of them were respectively 4.05% and 0.94%. The linear relationship was favorable within the range between 4.00E+02 and 4.00E+09 copies/ml (R 2=0.999), which met the requirements. The lower limit of detection could reach to 4.00E+02 copies/ml, and the absolute deviations between the detective results of the interferences (total bilirubin, triglycerides and hemoglobin) and the control sample were ≤± log0.4. The detective results of cross reactions of pathogens [hepatitis B virus, hepatitis C virus, herpes simplex virus, human herpesvirus type 4 (EB virus), human papillomavirus type 6 / 11)] were negative. Conclusion: The each performance indicator of the FQ-PCR detection method of HCMV DNA is consistent with the statement of the manufacturer, which can be used in clinical detection.[Key words] Human cytomegalovirus (HCMV); Deoxyribonucleic acid (DNA); Performance verification; Real-time fluorescence quantitation[First-author’s address] Qinghai Provincial Drug Inspection and T esLaboratory, The South Branch of the Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital, Beijing 100073, China.[摘要] 目的：利用实时荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)系统检测人巨细胞病毒脱氧核糖核酸(HCMV DNA)的性能验证及评价，以满足临床检测需要。

CNAS—GL03能力验证样品均匀性和稳定性评价指南 Guidance on Evaluating the Homogeneity and Stability of Samples Used for Proficiency Testing中国合格评定国家认可委员会二〇〇六年六月能力验证样品均匀性和稳定性评价指南1.前言比对样品的一致性对利用实验室间比对进行能力验证至关重要。

在实施能力验证计划时，组织方应确保能力验证中出现的不满意结果不归咎于样品之间或样品本身的变异性。

因此，对于能力验证样品的检测特性量，必须进行均匀性检验和（或）稳定性检验。

对于制备批量样品的检测能力验证计划，通常必须进行样品均匀性检验。

对于稳定性检验，则可根据样品的性质和计划的要求来决定。

对于性质较不稳定的检测样品如生物制品，以及在校准能力验证计划中传递周期较长的测量物品，稳定性检验是必不可少的。

对于均匀性检验或稳定性检验的结果，可根据有关统计量表明的显著性或样品的变化能否满足能力验证计划要求的不确定度进行判断。

本指南为这种判断和评价提供了指导。

2.适用范围本指南适用于CNAS能力验证计划中的样品均匀性和稳定性检验，也可为其他机构实施能力验证计划提供参考。

3.参考文件下列文件中的条款通过引用而成为本文件的条款。

以下引用的文件，注明日期的，仅引用的版本适用；未注明日期的，引用文件的最新版本（包括任何修订）适用。

ISO/IEC指南43-1《利用实验室间比对的能力验证第1部分：能力验证计划的建立和运作》（GB/T 15483.1）ISO 13528：2006 《利用实验室间比对的能力验证中所用的统计方法》ISO指南35 《标准物质定值——一般原则和统计原理》APLAC PT001 《校准实验室间的比对》APLAC PT002 《检测实验室间的比对》CNAS-RL02 《能力验证规则》4.均匀性检验4.1 均匀性检验的要求和方法4.1.1 对能力验证计划所制备的每一个样品编号。

㊃论著㊃D O I:10.3969/j.i s s n.1672-9455.2024.04.013高敏丙型肝炎病毒核糖核酸在丙型肝炎中的诊断价值*戴倩梅1,丁体龙1ә,代雪枫2,于莉2,陈策2中国人民解放军联勤保障部队第九O二医院:1.中心实验室;2.感染科,安徽蚌埠233015摘要:目的比较高敏丙型肝炎病毒核糖核酸(H C V-R N A)与普通H C V-R N A㊁丙型肝炎病毒(H C V)核心抗原检测在丙型肝炎临床诊断中的优势,探讨高敏H C V-R N A在临床诊断和病情监测中的应用价值㊂方法选择48例H C V抗体阳性的门诊及住院患者作为观察组,另选择同期40例H C V抗体阴性的健康体检者作为对照组㊂采集所有研究对象5m L空腹静脉血标本,留取血清㊂高敏H C V-R N A采用赛沛全自动医用聚合酶链反应(P C R)分析系统检测,普通H C V-R N A采用厦门安普利生物技术有限公司A n a d a s9850全自动核酸提纯系统及荧光定量P C R分析系统及配套试剂检测,H C V抗体及H C V核心抗原检测采用酶联免疫吸附试验㊂试验前,先对赛沛高敏H C V-R N A检测进行性能验证㊂结果高敏H C V-R N A检测性能验证准确度㊁重复性㊁线性范围和最低检出限符合要求㊂高敏H C V-R N A诊断丙型肝炎灵敏度明显高于普通H C V-R N A及H C V核心抗原检测㊂结论高敏H C V-R N A是丙型肝炎诊断的重要指标,并可用于丙型肝炎治疗终点判断和病情监测㊂关键词:丙型肝炎病毒;丙型肝炎病毒核糖核酸;高敏;丙型肝炎病毒核心抗原;诊断中图法分类号:R446.9文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)04-0487-04T h e c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e o f h i g h-s e n s i t i v e h e p a t i t i s C v i r u s-R N A o n t h e d i a g n o s i s o f h e p a t i t i s C*D A I Q i a n m e i1,D I N G T i l o n g1ә,D A I X u e f e n g2,Y U L i2,C HE N C e21.C e n t r a l L a b o r a t o r y;2.D e p a r t m e n t o f I n f e c t i o u s D i s e a s e,902n d P e o p l e's L i b e r a t i o nA r m y S u p p o r t U n i t H o s p i t a l,B e n g b u,A n h u i233015,C h i n aA b s t r a c t:O b j e c t i v e T o c o m p a r e t h e a d v a n t a g e s o f h i g h s e n s i t i v i t y h e p a t i t i s C v i r u s r i b o n u c l e i c a c i d (H C V-R N A),c o mm o n H C V-R N A a n d h e p a t i t i s C v i r u s(H C V)c o r e a n t i g e n d e t e c t i o n i n t h e c l i n i c a l d i a g n o-s i s o f h e p a t i t i s C,a n d t o e x p l o r e t h e a p p l i c a t i o n v a l u e o f H C V-R N A i n c l i n i c a l d i a g n o s i s a n d d i s e a s e m o n i t o-r i n g.M e t h o d s A t o t a l o f48p a t i e n t s w i t h p o s i t i v e H C V a n t i b o d y w e r e s e l e c t e d a s t h e o b s e r v a t i o n g r o u p,a n d 40h e a l t h y p a t i e n t s w i t h n e g a t i v e H C V a n t i b o d y w e r e s e l e c t e d a s t h e c o n t r o l g r o u p.A t o t a l o f5m L f a s t i n g v e n o u s b l o o d s a m p l e s w e r e c o l l e c t e d f r o m a l l s u b j e c t s a n d s e r u m w a s r e t a i n e d.H i g h-s e n s i t i v e H C V-R N A w a s d e t e c t e d b y C e p h e i d a u t o m a t i c m e d i c a l p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n(P C R)a n a l y s i s s y s t e m,a n d c o mm o n H C V-R N A w a s d e t e c t e d b y X i a m e n A n p l iB i o t e c h n o l o g yC o.,L T D.A n a d a s9850a u t o m a t i c n u c l e i c a c i d p u r i f i c a t i o n s y s t e m,f l u o r e s c e n t P C R a n a l y s i s s y s t e m a n d s u p p o r t i n g r e a g e n t s.H C V a n t i b o d i e s a n d H C V c o r e a n t i g e n w e r e d e t e c t e d b y e n z y m e-l i n k e d i mm u n o s o r b e n t a s s a y.B e f o r e t h e e x p e r i m e n t,t h e p e r f o r m a n c e o f C e p h e i d h i g h-s e n s i t i v e H C V-R N A w a s v e r i f i e d.R e s u l t s T h e a c c u r a c y,r e p e a t a b i l i t y,l i n e a r r a n g e a n d m i n i m u m d e t e c-t i o n l i m i t o f h i g h-s e n s i t i v e H C V-R N A d e t e c t i o n m e t t h e r e q u i r e m e n t s.T h e s e n s i t i v i t y o f h i g h-s e n s i t i v e H C V-R N A i n d i a g n o s i s f o r h e p a t i t i s C w a s s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h a t o f c o mm o n H C V-R N A a n d H C V c o r e a n t i-g e n d e t e c t i o n.C o n c l u s i o n H i g h-s e n s i t i v e H C V-R N A i s a n i m p o r t a n t m a r k e r f o r t h e j u d g m e n t o f h e p a t i t i s C, a n d c a n b e u s e d f o r t h e d i a g n o s i s o f h e p a t i t i s C t r e a t m e n t e n d p o i n t a n d d i s e a s e m o n i t o r i n g.K e y w o r d s:h e p a t i t i s C v i r u s;h e p a t i t i s C v i r u s-R N A;h i g h-s e n s i t i v e;h e p a t i t i s C v i r u s c o r e a n t i g e n;d i a g n o s i s丙型肝炎是较常见的病毒性肝炎之一,发病率仅次于乙型肝炎㊂丙型肝炎病毒核糖核酸(H C V-R N A)是判断丙型肝炎活动性的最重要指标㊂由于技术原因,普通H C V-R N A的检测下限一般为500I U/ m L,H C V-R N A阴性患者丙型肝炎病毒(H C V)仍可能处于活动期,传染性也可能仍然较强,不能准确反映H C V在体内的复制状态㊂高敏H C V-R N A检测是近年来发展起来的一项新技术,将H C V-R N A的检出下限提升至15I U/m L,甚至10I U/m L,为丙型肝炎的疗程监测和治疗终点的判断提供了很大的帮助㊂有关高敏H C V-R N A研究的相关报道较少,本研究采用赛沛全自动医用聚合酶链反应(P C R)分析系统检㊃784㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第4期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y2024,V o l.21,N o.4*基金项目:联勤保障部队第九O二医院医学科技创新计划项目(21MA004)㊂作者简介:戴倩梅,女,主管技师,主要从事分子生物学检验研究㊂ә通信作者,E-m a i l:133********@163.c o m㊂测48例H C V抗体阳性患者和40例H C V抗体阴性的健康体检者血清中H C V-R N A水平,计算灵敏度和特异度,与普通P C R法检测的H C V-R N A和H C V 核心抗原进行比较,探讨高敏H C V-R N A在丙型肝炎诊断和病情监测中的应用价值,现将结果报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料选择2020年5月至2022年10月于本院门诊及住院的48例慢性丙型肝炎患者作为观察组,男32例,女16例;年龄11~78岁,平均(49.0ʃ11.3)岁;H C V抗体均为阳性,符合‘丙型肝炎防治指南(2015年更新版)“的诊断标准[1]㊂另选择同期本院健康体检中心40例健康体检者作为对照组,其中男25例,女15例;年龄18~69岁,平均(47.6ʃ12.6)岁;H C V抗体均为阴性㊂所有研究对象乙型肝炎病毒表面抗原㊁人类免疫缺陷病毒抗体㊁梅毒螺旋体抗体检测结果均为阴性,无精神病史;1周内未使用抗病毒药物和保肝降酶药物㊂所有研究对象均充分了解并同意参与本研究,本研究开展前获得本院医学伦理委员会批准(伦理批号20200302001),对所有研究对象的个人资料和检查结果予以保密㊂1.2方法1.2.1标本采集采集所有研究对象空腹静脉血5 m L,以2000r/m i n转速分离血清, 80ħ低温冰箱保存待检㊂1.2.2高敏H C V-R N A检测的性能验证参照C N A S-G L037‘临床化学定量检验程序性能验证指南“(2019版)对赛沛全自动医用P C R分析系统(G e n e X p e r t)检测H C V-R N A进行性能验证㊂(1)正确度验证:采用H C V血清(冻干)标准物质S3 (4.40ˑ105I U/m L)和阴性血浆制成验证标本,稀释成G e n e X p e r t检测单位,每个浓度单位10份标本,分别为H C V1(44000I U/m L)㊁H C V2(4400I U/m L)㊁H C V3(440I U/m L)㊁H C V4(44I U/m L)㊁H C V5(11I U/m L),统计所有标本的检测结果㊂(2)精密度验证:采用H C V2作为精密度验证标本,重复检测3次,并计算精密度㊂(3)线性区间验证:采用H C V血清(冻干)标准物质S3(4.40ˑ105I U/m L)和阴性血浆制成验证标本,稀释成G e n e X p e r t检测单位,每个浓度单位3份标本,分别为H C V1(44000I U/m L)㊁H C V2(4400I U/m L)㊁H C V3(440I U/m L)㊁H C V4 (44I U/m L)㊁H C V5(11I U/m L),将检测定值结果绘制成线性图㊂将H C V1㊁H C V2㊁H C V3㊁H C V4㊁H C V5检测定值的平均值取对数值后,与理论靶值结果作图,验证不同浓度的线性相关性㊂(4)可报告范围验证:采用H C V血清(冻干)标准物质S3(4.40ˑ105I U/m L)和阴性血浆制成验证标本,稀释成G e n e X p e r t检测单位为H C V L o D(4.4I U/m L)上机检测,统计检测结果㊂(5)特异度验证:采用溶血血浆和脂血血浆将H C V血清(冻干)标准物质S3(4.40ˑ105I U/m L)分别稀释成4400I U/m L和440I U/m L 两个可检测浓度,每份标本重复检测3次,计算平均值和标准差㊂(6)灵敏度验证:采用H C V血清(冻干)标准物质S3(4.40ˑ105I U/m L)和阴性血浆制成验证标本,稀释成G e n e X p e r t检测单位为H C V L o D (4.4I U/m L)上机检测,统计检测结果㊂1.2.3 H C V抗体检测 H C V抗体采用酶联免疫吸附试验检测试剂盒检测,试剂盒购自华大吉比爱生物技术有限公司,严格按照试剂盒说明书操作㊂1.2.4高敏H C V-R N A检测 G e n e X p e r t购自美国赛沛(C e p h e i d A B)生物技术有限公司,型号为X V I D x,所用试剂为X p e r t H C V V i r a l L o a d,由瑞典赛沛(C e p h e i d A B)生物技术有限公司生产,检测下限值为10I U/m L㊂试验前,对高敏H C V-R N A进行了性能验证,性能验证试验所用标本购自北京康彻斯坦生物技术有限公司,H C V血清(冻干品)标准物质,国家标准物质证书:G B W(E)090142,浓度编号S3,靶值4.40ˑ105I U/m L,不确定度为ʃ0.5ˑ105I U/m L,参考范围为(3.90~4.90)ˑ105I U/m L(对数值: 5.59~5.69)㊂1.2.5普通H C V-R N A检测采用厦门安普利生物技术有限公司的全自动核酸提纯系统(A n a d a s9850)㊁荧光定量P C R分析系统及其配套的核酸提取试剂(批号:A105420220713)㊁扩增试剂(批号: A2020202220811),由专人严格按照设备及试剂盒说明书操作㊂1.2.6 H C V抗体及H C V核心抗原检测 H C V抗体及H C V核心抗原检测采用酶联免疫吸附试验,试剂盒由山东莱博生物科技有限公司提供,批号: 202209005,由专人严格按照试剂盒说明书操作㊂1.3统计学处理采用简明统计V14.0软件进行数据处理及统计学分析㊂计数资料以百分率表示,组间比较采用χ2检验㊂线性范围验证采用不同浓度的标准品取对数与预期浓度对数值进行回归方程,计算R2㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1高敏H C V-R N A性能验证结果2.1.1正确度验证结果 H C V1㊁H C V2㊁H C V3㊁H C V4㊁H C V5检测结果的对数值与理论值偏差都在ʃ0.5之内,符合标准物质说明书正确度要求(检测值与理论值取对数偏差不超过ʃ0.5)㊂2.1.2精密度验证结果 H C V2重复检测3次结果分别为4255㊁4683㊁4435I U/m L,变异系数分别为-3%㊁6%㊁1%,都在ʃ10%以内,检测重复性良好,试剂盒精密度符合要求㊂2.1.3线性区间验证结果不同浓度标准物质检测结果计算得到回归方程Y=1.0225X 0.1312,︱r︱>0.98,斜率>0.95验证通过,线性预测结果可靠,一致性好㊂见图1㊂G e n e X p e r t检测提供的说明书中表示H C V V L A s s a y在0.8~8.0l o g10I U/m L 范围内呈线性,R2>0.997,在0.994~0.998以内,所有基因型均呈线性反应㊂㊃884㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第4期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y2024,V o l.21,N o.4图1 G e n e X pe r t H C V -R N A 检测值与靶值线性相关关系2.1.4 可报告范围验证结果 H C V L o D (4.4I U /m L )的检测结果为H C V -R N A <10I U /m L ,G e n e X pe r t 可检测浓度为104I U /m L ,最大稀释倍数为104倍,检测上限值为108I U /m L ㊂可报告范围为10~108I U /m L ,符合可报告范围要求,最低检出限和最高检出限符合验证标准㊂2.1.5 特异度验证结果 溶血血浆和脂血血浆稀释后的标准物质与定值比较,变异系数均在ʃ10%以内,特异度高,试剂盒特异度验证符合标准㊂2.1.6 灵敏度验证结果 H C V L o D (4.4I U /m L )的检测结果为H C V -R N A<10I U /m L ,最低检测下限为10I U /m L ,灵敏度验证符合要求㊂2.2 高敏H C V -R N A 与普通H C V -R N A 在丙型肝炎诊断中的灵敏度及特异度比较 高敏H C V -R N A 诊断灵敏度为91.67%,特异度为92.50%,诊断试验四格表见表1,普通H C V -R N A 诊断灵敏度为68.75%,特异度为100.00%,诊断试验四格表见表2㊂高敏H C V -R N A 诊断丙型肝炎的灵敏度明显高于普通H C V -R N A ,特异度略低于普通H C V -R N A ,差异有统计学意义(P <0.05)㊂表1 高敏H C V -R N A 诊断丙型肝炎结果(n )高敏H C V -R N A H C V 抗体阳性阴性阳性443阴性437表2 普通H C V -R N A 诊断丙型肝炎结果(n )普通H C V -R N A H C V 抗体阳性阴性阳性330阴性15402.3 高敏H C V -R N A 与H C V 核心抗原在丙型肝炎诊断中的灵敏度及特异度比较 H C V 核心抗原诊断灵敏度为66.67%,特异度为97.50%,诊断试验四格表见表3㊂高敏H C V -R N A 诊断丙型肝炎的灵敏度明显高于H C V 核心抗原,特异度略低于H C V 核心抗原,差异有统计学意义(P <0.05)㊂表3 H C V 核心抗原诊断丙型肝炎结果(n )H C V 核心抗原H C V 抗体阳性阴性阳性321阴性16393 讨 论H C V -R N A 检测结果主要用于判断H C V 的复制情况,是丙型肝炎传染性强弱的重要标志,也可用于丙型肝炎抗病毒治疗方案的选择和治疗后的预后判断[2]㊂传统的H C V -R N A 检测方法主要采用荧光定量P C R 法检测,检测下限值一般为500I U /m L ㊂由于实验环境中可能存在R N A 酶而导致扩增抑制,造成假阴性结果,或者扩增产物的污染易造成假阳性结果[3]㊂目前常用的核酸提取方法分为磁珠提取法和柱提法㊂有研究发现,磁珠提取法比柱提法敏感度更高,尤其在低病毒载量标本的检测中优势明显[4],具有较高的临床应用价值㊂随着分子诊断技术的不断进步,H C V -R N A 的检测下限值不断被刷新㊂G e n e X pe r t 运用半巢式定量P C R+微流控技术,整合标本制备㊁核酸扩增和检测3个步骤于一个独立的试剂盒中,并将其自动化,使标本处理既方便又快捷,整个标本处理过程可在2m i n 内处理完毕㊂核酸提取过程则在试剂盒的不同通道中完成,可最大限度地减少污染的发生㊂为了比较高敏H C V -R N A 与普通H C V -R N A 在诊断丙型肝炎中的灵敏度,课题组采用G e n e X p e r t 和厦门安普利A n a d a s 9850同时检测了48例H C V 抗体阳性患者和40例H C V 抗体阴性的健康体检者的H C V -R N A ,结果显示高敏H C V -R N A 的灵敏度明显高于普通H C V -R N A ,差异有统计学意义(P <0.05)㊂H C V 核心抗原是丙型肝炎诊断的另一敏感指标,可能会通过影响基因组的表达调控,从而影响细胞的增殖分化[5]㊂本研究结果显示,高敏H C V -R N A 诊断丙型肝炎的灵敏度明显高于H C V 核心抗原,差异有统计学意义(P <0.05)㊂与鞠伟[6]的研究结论相类似,提示高敏H C V -R N A 在丙型肝炎病原学诊断中优势最为明显㊂由于常规P C R 法检测H C V 的灵敏度较低,在临床上易造成部分患者的漏诊和漏治㊂欧洲肝病协会在有关丙型肝炎防治指南中推荐采用高敏H C V -R N A (检测下限15I U /m L )作为急慢性丙型肝炎的诊断指标[7],对于治疗方案的拟订和预后判断具有重要的指导意义㊂目前,临床上常用的丙型肝炎抗体检测方法有酶联免疫吸附试验㊁金标法和化学发光法等[8]㊂一般来说,酶联免疫吸附试验的阳性检出率比金标法高,具有较高的灵敏度和特异度,磁微粒化学发光法与酶联免疫吸附试验比较,其灵敏度更高,检测时间更短,可提高临床丙型肝炎检测的准确度[9]㊂但由于窗口期的存在,H C V 感染后3~4周才能检测到H C V 抗体,或者由于患者本身的免疫缺陷,导致机㊃984㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第4期 L a b M e d C l i n ,F e b r u a r y 2024,V o l .21,N o .4体不能产生抗体或抗体产生的量达不到检测标准,都会导致H C V抗体假阴性,本研究对照组40例H C V 抗体阴性者中,H C V-R N A阳性有3例,可能属于上述情况㊂常规P C R检测H C V-R N A,由于灵敏度不够,在H C V抗体阴性患者中鉴别是否有H C V感染优势不明显㊂而高敏H C V-R N A则可在H C V急性感染的早期检出,提示高敏H C V-R N A检测在H C V抗体阴性人群中有较大意义,可用于义务献血人群丙型肝炎的筛查㊂H C V-R N A与丙氨酸氨基转移酶(A L T)水平可能存在一定的相关性,有研究发现,血清A L T水平较高的患者,H C V-R N A相对较高,二者呈正相关(P< 0.05)[10-12]㊂A L T主要存在于肝细胞中,可少量释放于血液中,一般不高于40I U/L㊂病毒性肝炎的急性期或药物性肝炎导致肝细胞大量坏死时,A L T可大量释放入血液中,所以A L T是反映肝细胞损伤的重要标志物㊂有研究发现H C V-R N A高水平组[(1ˑ106~ 1ˑ108)c o p y/m L]谷氨酰转移酶(G G T)㊁天门冬氨酸氨基转移酶(A S T)㊁A L T等肝功能指标水平均明显高于低水平组[(1ˑ103~1ˑ105)c o p y/m L]和中等水平组[(1ˑ105~1ˑ106)c o p y/m L][13]㊂也有学者认为,血清A L T水平与H C V-R N A存在相关关系,但A L T异常率与H C V-R N A之间无相关性[14]㊂H C V-R N A与A L T的关系将是本课题组未来的研究方向㊂丙型肝炎H C V-R N A载量与多个血清学指标相关㊂据报道,H C V-R N A载量与T细胞亚群明显相关,与C D8+水平呈正相关,与C D4+㊁C D4+/C D8+水平呈负相关[15-16];H C V-R N A载量与血清白细胞介素(I L)-6㊁I L-10㊁I L-32及免疫球蛋白(I g)G㊁I g A㊁I g M 水平存在显著正相关[17];血常规中红细胞分布宽度/血小板比值(R P R)及血小板/淋巴细胞比值(P L R)与慢性丙型肝炎肝硬化代偿期的发生㊁纤维化进展程度相关[18-19];H C V-R N A水平与血小板计数(P L T)和血小板压积(P C T)呈负相关,与血小板分布宽度(P DW)㊁平均血小板体积(M P V)和血小板比值指数评分(A P R I)呈现正相关[20];抗核抗体的产生与丙型肝炎肝功能指标和H C V-R N A载量有关[21]㊂以上研究提示H C V-R N A与血清学指标联合检测有助于判断丙型肝炎病情㊂综上所述,H C V-R N A一定程度上可反映肝脏的损伤情况,高敏H C V-R N A的灵敏度明显高于普通H C V-R N A和H C V核心抗原检测,在丙型肝炎的临床诊断中具有十分重要的应用价值㊂参考文献[1]中华医学会肝病学分会,中华医学会感染病学分会.丙型肝炎防治指南(2015年更新版)[J].临床肝胆病杂志, 2015,31(12):1961-1979.[2]潘美晨,郭杰,孟欢,等.基于全自动核酸检测平台高敏H C V R N 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[6]鞠伟.H C V-核心抗原及H C V R N A检测在慢性丙型肝炎诊断中的价值分析[J].当代医学,2021,27(1):52-54.[7]E u r o p e a n A s s o c i a t i o n f o r t h e S t u d y o f t h e L i v e r.E A S L r e c o mm e n d a t i o n s o n t r e a t m e n t o f h e p a t i t i s C2015[J].JH e p a t o l,2015,63(1):199-236.[8]王显贵,许月爱,周景明.不同检验方法在丙型肝炎诊断中的价值[J].深圳中西医结合杂志,2020,30(7):93-94.[9]高瑞,刘雪娇,杨齐.酶联免疫吸附法和磁微粒化学发光法检测丙型肝炎病毒抗体的结果对比[J].临床医学工程,2022,29(3):351-352.[10]秦宏.H C V-R N A载量与慢性丙型肝炎患者肝功能的相关性[J].河南医学研究,2020,29(11):2075-2076. [11]邓波,邱振华,龙则平,等.丙型肝炎抗体阳性患者H C VR N A和肝功能指标联合检测的价值[J].吉林医学, 2021,42(9):2136-2138.[12]张美华,王莹,高海燕,等.血清丙型肝炎病毒核糖核酸变化与丙型肝炎患者肝功能损伤程度的相关性[J].实用医技杂志,2021,28(6):780-782.[13]付冬琴.丙型肝炎H C V-R N A及肝功能指标的变化特点与临床意义[J].当代医学,2021,20(20):48-50. [14]宋丽,侯远沛.磁珠法和柱提法检测丙型肝炎病毒载量与肝损伤相关性分析[J].实用医技杂志,2020,27(8):1029-1031.[15]周伟,石磊.T细胞亚群㊁炎症指标及f e t u i n-A与慢性丙型肝炎的相关性[J].海南医学,2022,33(6):718-721.[16]邵婧.外周血T淋巴细胞亚群与丙型肝炎患者肝损伤的相关性[J].航空航天医学杂志,2020,31(3):300-302.[17]资云菊,陆昱,陆宏.丙型肝炎患者H C V-R N A载量与血清I L-6㊁I L-10㊁I L-32水平及免疫球蛋白的关系[J].医学理论与实践,2021,34(6):1024-1026.[18]杨娜,何华,赵天业.红细胞分布宽度/血小板比值㊁血小板/淋巴细胞比值㊁中性粒细胞/淋巴细胞比值对慢性丙型肝炎肝硬化代偿期的预测价值[J].临床肝胆病杂志, 2021,37(6):1319-1325.[19]L I X,X U H,G A O P.R e d b l o o d c e l l d i s t r i b u t i o n w i d t h-t o-p l a t e l e t r a t i o a n d o t h e r l a b o r a t o r y i n d i c e s a s s o c i a t e d w i t h s e v e r i t y o f h i s t o l o g i c a l h e p a t i c f i b r o s i s i n p a t i e n t s w i t h a u t o i mm u n e h e p a t i t i s:a r e t r o s p e c t i v e s t u d y a t a s i n-g l e c e n t e r[J].M e d S c i M o n i t,2020,26:e927946.[20]王晓川,马丽,王秀丽,等.血小板参数与丙型肝炎患者R N A水平的相关性[J].中国民康医学,2020,32(15):3-5.[21]贺琤雯,薛苗,姚文杰,等.慢性丙型肝炎患者抗核抗体谱的表达及临床意义[J].国际检验医学杂志,2020,41(9): 1034-1041.(收稿日期:2023-02-18修回日期:2023-11-11)㊃094㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第4期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y2024,V o l.21,N o.4。

CNAS-GL037临床化学定量检验程序性能验证指南Guidance on the Verification of Quantitative Measurement Procedures used in the ClinicalChemistry中国合格评定国家认可委员会前言本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是对CNAS-CL02《医学实验室质量和能力认可准则》和CNAS-CL02-A003《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明》中有关临床化学定量检验程序进行性能验证实验所做的具体解释和指导，供医学实验室和评审员参考使用。

本文件为首次发布。

临床化学定量检验程序性能验证指南1 范围本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对临床化学检验程序进行性能验证，也可供评审员在现场评审过程中参考使用。

本指南主要适用于医学实验室使用的临床化学定量检验方法，其他专业领域使用的定量检验程序/方法可参考使用。

临床化学定量检验程序，也称临床化学定量检验方法，在本指南中统一称为临床化学定量检验程序（以下简称“检验程序”）。

本指南适用于实验室采用的经确认的检验程序。

2 规范性引用文件下列文件对于本指南的应用是必不可少的。

凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。

凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。

GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂（盒）》WS/T 408-2012《临床化学设备线性评价指南》WS/T 416-2013 《干扰实验指南》WS/T 420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T 492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》3 术语和定义对于本指南，GB/T 29791.1-2013（ISO 18113-1：2009，IDT）中的定义适用。

下列术语和定义适用于本指南。

3.1 可报告范围 reportable range体外诊断医疗器械性能特征已被验证的测量区间。

学术论著①中国中医科学院西苑医院检验科 北京 100091②河北北方学院 河北 张家口 075132作者简介：郭盼，女，(1972- )，本科学历，副主任技师，从事临床医学检验工作。

[文章编号] 1672-8270(2022)03-0057-05 [中图分类号] R197.39 [文献标识码] APerformance analysis of blood-gas analyzer/GUO Pan, LIU Wen-juan, WU Jing, et al//China Medical Equipment,2022,19(3):57-61.[Abstract] Objective: T o evaluate the precision and accuracy of detection results of GEM Premier5000 blood-gas analyzer (GEM Premier 5000) and verify the performance of the instrument. Methods: The systematic quality control product of GSE Premier 5000 was adopted for precision evaluation, and the mean value, standard deviation (SD) and coefficient of variation (CV) of the tested results were calculated according to ISO15189 "Accreditation Criteria for the Quality and Competence of Medical Laboratories" and CNAS-GL037:2019 "Guidelines on the V erification of Quantitative Measurement Procedures used in the Clinical Chemistry". And Siemens RAPIDPoint500 blood-gas analyzer (RAPIDPoint500) and GEM Premier 5000 were adopted to compare the accuracies of them in detecting pH value, partial pressure of carbon dioxide (pCO 2), oxygen partial pressure(pO 2), glucose (Glu), lactic acid (Lac), total hemoglobin (THb), and sodium (Na +), potassium (K +), calcium (Ca +) and chlorine (Cl -). The linear regression was adopted to compare and analyze the consistency of the detection results between two detection system. Results: The precisions of GEM Premier 5000 in detecting pH value, pCO 2, pO 2, Glu, Lac, THb, Na +, K +, Ca + and Cl - were within tolerance interval. In the evaluation results of accuracy, the differences of the results of pH value, pCO 2, pO 2, Glu, Lac, THb, Na +, K +, Ca + and Cl - between RAPIDPoint 500 and GEM Premier 5000 were no significance, and the correlations of these indicators between RAPIDPoint 500 and GEM Premier 5000 were favorable (R 2=0.9815, R 2=0.9541, R 2=0.9763, R 2=0.9924, R 2=0.9800, R 2=0.9981, R 2=0.9998, R 2=0.9657, R 2=0.9998, R 2=0.8939, R 2=0.8867, R 2=0.9922, R 2=0.8539, R 2=0.9225, P <0.0001). And the comparison average deviations both two detection systems were less than the corresponding deviation range. Conclusion: Both precision and accuracy of GEM Premier 5000 blood-gas analyzer were within the tolerance interval, and it can provide reliable detection report for clinical diagnosis.[Key words] Blood gas analyzer; Performance test; Precision; Accuracy[First-author’s address] Department of Clinical Laboratory, Xiyuan Hospital of China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100091, China.[摘要] 目的：评价GEM Premier 5000型血气分析仪(简称GEM Premier 5000)检测结果的精密度和准确度，验证仪器性能。

CNAS-GL038临床免疫学定性检验程序性能验证指南Guidance of Verification of Qualitative Measurement Procedures used in the Clinical Immunology中国合格评定国家认可委员会前言本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是对CNAS-CL02：2012《医学实验室质量和能力认可准则》和 CNAS-CL02-A004：2018《医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学定性检验领域的应用说明》中有关临床免疫学定性检验程序进行性能验证实验所做的具体解释和指导，供医学实验室和评审员参考使用。

本文件为首次发布。

临床免疫学定性检验程序性能验证指南1 范围本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对临床免疫学（定性）检验程序进行性能验证实验活动，也可供评审员在现场评审过程中参考使用。

本指南主要适用于医学实验室使用的临床免疫学定性检验方法，其他专业领域使用的定性检验程序/方法可参考使用。

临床免疫学定性检验程序，也称临床免疫学定性检验方法，在本指南中统一称为临床免疫学定性检验程序（以下简称“检验程序”），包括纯定性免疫检验、半定量（滴度）的免疫检验和以定量方式报定性结果的免疫检验等各项检验活动。

本文件适用于医学实验室采用的经确认的检验程序。

2 规范性引用文件下列文件对于本指南的应用是必不可少的。

凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。

凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。

WS/T 416-2013《干扰实验指南》WS/T 494-2017《临床定性免疫检验重要常规项目分析质量要求》WS/T 505-2017《定性测定性能评价指南》WS/T 514-2017《临床检验方法检出能力的确立和验证》3 术语和定义对于本标准，GB/T 29791.1-2013（ISO 18113-1：2009，IDT）中的定义适用。

CNAS—GL02能力验证结果的统计处理和能力评价指南（试用）中国合格评定国家认可委员会二〇〇六年六月能力验证结果的统计处理和能力评价指南（试用）1．目的与范围1.1本指南对CNAS能力验证结果的统计处理和根据统计处理结果对实验室进行能力评价的方法提供了指南。

1.2本指南适用于CNAS的能力验证活动以及将结果应用于CNAS认可的能力验证活动。

2．引用文件ISO/IEC指南43-1：1997《利用实验室间比对的能力验证——能力验证计划的建立和运作》（GB/T15483.1，IDT）APLACPT001《检测实验室间的比对》APLACPT002《校准实验室间的比对》《NATA能力验证指南》ISO5725：19941-6《测量方法和结果的准确度（正确度和精密度）》3．统计处理3．1统计设计3.1.1能力验证的结果可以以多种形式出现，并构成各种统计分布。

分析数据的统计方法应与数据类型及其统计分布特性相适应。

无论使用哪一种方法对参加者的结果进行评价，一般应包括以下几方面内容：a）确定指定值；b）计算能力统计量；c）评价能力；d）在某些情况下需预先确定被测样品的均匀性和稳定性。

3.1.2在统计设计中应考虑下列事项及其相互影响：a) 所涉及测试的精密性和正确性；b) 在要求的置信水平下检出参加者之间的最小差异；c) 参加者的数量；d) 待检样品的数目和对每一被测样品进行重复检测/测量的次数。

在校准能力验证计划中，应考虑比对的周期；e) 估算指定值所使用的程序，及识别离群值所使用的程序；f) 校准能力验证计划中，参考实验室必须能够给出优于参加者的测量不确定度（应尽量选择拥有国家基标准的实验室）。

3.1.3在缺乏4.1.2 a)的可靠信息时，可能有必要组织一次先导性实验室间比对(协同试验)，以获得该信息。

3.2指定值及其不确定度的确定3.2.1确定指定值的方法有多种，下面是最常用的几种。

按不确定度增加的顺序（多数情况下如此）排列如下：a）已知值——其结果由特定样品配制（如制备、稀释）时确定。

CNAS-GL039分子诊断检验程序性能验证指南Guidance on the Performance Verification for Molecular Diagnostic Procedures中国合格评定国家认可委员会前言本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是对CNAS-CL02：2012《医学实验室质量和能力认可准则》和 CNAS-CL02-A009：2018《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》中有关分子诊断相关检验程序进行性能验证实验所做的具体解释和指导，供医学实验室和评审员参考使用。

本文件为首次发布。

分子诊断检验程序性能验证指南1 范围本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对分子诊断相关检测程序进行性能验证实验活动时使用，也可供医学实验室评审员在现场评审过程中参考使用。

本指南适用的分子诊断技术包括：PCR、Sanger测序、二代基因测序(NGS)、原位杂交等，其他分子诊断使用的检验程序/方法可参考使用。

本文件适用于医学实验室采用的经确认的检验程序。

注：鉴于实际临床工作中进行分子诊断的样本类型（如进行原位杂交的样本有血液、羊水穿刺、肿瘤组织等）以及预期用途差别较大，而不同样本类型对性能验证的要求和难易程度差别较大，建议结合实际情况酌情选择与之相符合的性能验证方案。

2规范性引用文件下列文件对于本指南的应用是必不可少的。

凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。

凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。

WS/T 420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T 492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》WS/T 505-2017《定性测定性能评价指南》YY/T 1261-2015《HER2基因检测试剂盒（荧光原位杂交法）》YY/T 1459-2016《人类基因原位杂交检测试剂盒》3 术语和定义对于本指南，GB/T 29791.1-2013/ISO 18113-1：2009）中的定义适用。

CNAS-GL038临床免疫学定性检验程序性能验证指南Guidance of Verification of Qualitative Measurement Procedures used in the Clinical Immunology中国合格评定国家认可委员会前言本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是对CNAS-CL02：2012《医学实验室质量和能力认可准则》和 CNAS-CL02-A004：2018《医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学定性检验领域的应用说明》中有关临床免疫学定性检验程序进行性能验证实验所做的具体解释和指导，供医学实验室和评审员参考使用。

本文件为首次发布。

临床免疫学定性检验程序性能验证指南1 范围本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对临床免疫学（定性）检验程序进行性能验证实验活动，也可供评审员在现场评审过程中参考使用。

本指南主要适用于医学实验室使用的临床免疫学定性检验方法，其他专业领域使用的定性检验程序/方法可参考使用。

临床免疫学定性检验程序，也称临床免疫学定性检验方法，在本指南中统一称为临床免疫学定性检验程序（以下简称“检验程序”），包括纯定性免疫检验、半定量（滴度）的免疫检验和以定量方式报定性结果的免疫检验等各项检验活动。

本文件适用于医学实验室采用的经确认的检验程序。

2 规范性引用文件下列文件对于本指南的应用是必不可少的。

凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。

凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。

WS/T 416-2013《干扰实验指南》WS/T 494-2017《临床定性免疫检验重要常规项目分析质量要求》WS/T 505-2017《定性测定性能评价指南》WS/T 514-2017《临床检验方法检出能力的确立和验证》3 术语和定义对于本标准，GB/T 29791.1-2013（ISO 18113-1：2009，IDT）中的定义适用。

CNAS-GL037临床化学定量检验程序性能验证指南Guidance on the Verification of Quantitative Measurement Procedures used in the ClinicalChemistry中国合格评定国家认可委员会前言本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是对CNAS-CL02《医学实验室质量和能力认可准则》和CNAS-CL02-A003《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明》中有关临床化学定量检验程序进行性能验证实验所做的具体解释和指导，供医学实验室和评审员参考使用。

本文件为首次发布。

临床化学定量检验程序性能验证指南1 范围本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对临床化学检验程序进行性能验证，也可供评审员在现场评审过程中参考使用。

本指南主要适用于医学实验室使用的临床化学定量检验方法，其他专业领域使用的定量检验程序/方法可参考使用。

临床化学定量检验程序，也称临床化学定量检验方法，在本指南中统一称为临床化学定量检验程序（以下简称“检验程序”）。

本指南适用于实验室采用的经确认的检验程序。

2 规范性引用文件下列文件对于本指南的应用是必不可少的。

凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。

凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。

GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂（盒）》WS/T 408-2012《临床化学设备线性评价指南》WS/T 416-2013 《干扰实验指南》WS/T 420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T 492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》3 术语和定义对于本指南，GB/T 29791.1-2013（ISO 18113-1：2009，IDT）中的定义适用。

下列术语和定义适用于本指南。

3.1 可报告范围 reportable range体外诊断医疗器械性能特征已被验证的测量区间。