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免疫标记技术名词解释免疫标记技术是一种广泛应用于生物医学研究和临床诊断的技术。
它利用特异性抗体与待检测的分子结合，然后利用这些抗体上的标记物（如酶、荧光剂或放射性同位素）来检测和定量目标分子的存在和表达水平。
下面是一些常见的免疫标记技术及其解释：1. 免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）：在组织切片或细胞上，利用抗体与特定抗原结合，再利用染色剂（如酶、荧光剂）将目标抗原可视化，从而研究和分析细胞或组织中特定蛋白质的表达和定位情况。
2. 免疫荧光（Immunofluorescence，IF）：通过与荧光素结合的抗体，将特定蛋白质或其他目标分子在细胞或组织中可视化。
这种技术不仅可以用于检测蛋白质的表达和定位，还可以用于研究细胞的功能、相互作用和信号通路等。
3. 免疫酶标记（Immunoenzymatic labeling）：利用酶标记（如辣根过氧化物酶-HRP）结合抗体，形成特定酶抗体复合物。
通过加入合适底物和显色反应，可以观察到酶的活性，从而实现对目标分子的检测和定量。
4. 免疫原位杂交（Immunohistochemical In Situ Hybridization，IHC-ISH）：结合免疫组化和原位杂交的技术，可以同时检测细胞或组织中的蛋白质表达和基因表达情况。
通过使用标记有荧光或酶的核酸探针，可以在组织切片或细胞上可视化特定基因的表达位置。
5. 流式细胞术（Flow cytometry）：该技术利用荧光标记的抗体与细胞中的特定分子结合，经过流式细胞仪检测细胞的荧光强度和分布情况。
这种技术可以用于检测和分析细胞表面标记物、细胞周期、凋亡等多种细胞特性。
免疫标记技术的应用范围非常广泛，可以用于癌症诊断、药物研发、免疫学研究和疫苗开发等领域。
通过免疫标记技术，科研人员可以更加准确地了解分子的功能、定位以及其在疾病中的变化，从而为疾病的早期诊断和治疗提供重要的依据。
现代生物技术在植物检疫中的作用摘要：本文阐述了免疫学技术中的酶联免疫法、免疫荧光技术、斑点免疫法、免疫电镜技术、免疫染色标记技术及其他抗体介导的检测方法、核酸技术中的核酸探针、RFLP技术、PCR技术等的在植物检疫中的应用原理及优缺点。
关键词：免疫学技术；核酸技术；植物检疫随着我国动植物产品进出口贸易的日益增多，传统的检测手段已不能满足植物检疫需要，检疫手段的优化迫在眉睫，近年来在免疫学、分子生物学等领域取得了巨大的进步，为全面优化检疫手段，加快检测速度打下了坚实基础。
1 免疫学技术1.1 酶联免疫法自酶联免疫吸附技术问世以来，已日益广泛应用于植物病毒、真菌、MID等的检测之中，如病毒方面，对种子中的大豆花叶病毒(SMV)、苜蓿花叶病毒(AMV)、大麦条纹花叶病毒(BSMV)、烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草环斑病毒(TRSV)、等病毒的诊断和检测；真菌方面，疫霉、腐霉、黑盘菌、等真菌的ELISA试剂盒已被商业化生产，并已广泛应用。
利用上述ELISA试剂盒检测大豆根茎组织、土壤悬浮液中的大豆疫霉菌；土壤中大豆疫霉的游动孢子、卵孢子和菌丝；病组织中隐地疫霉；灌溉水中的疫霉游动孢子，效果都很好[1]。
1.2 免疫荧光技术免疫荧光技术是另一种以抗体为基础的在植物病害检疫中具有重要应用价值的检测手段，现已成功应用于植物组织、种子及土壤中细菌及真菌的检测。
利用免疫光技术成功的检测出菜豆萎蔫病菌，并且检测的灵敏度达到4.5×lO4cuf ／mL，有效地解决了假阳性反应问题。
此外，免疫荧光技术在检测土壤根组织的辣阑疫霉菌丝、土壤中樟疫霉游动孢子、瓜果疫霉游动孢子、叶组织中灰葡萄孢；病土、根组织中芸苔根肿菌休眠孢子；根组织中菌丝的厚垣孢子、组织切片中菌丝均取得了ELISA无法达到的效果。
免疫荧光技术具有间接和直接免疫荧光法，其中间接免疫荧光法在实践中用途较广，一抗与结合有荧光色素的二抗结合，所发出的荧光可由免疫荧光显微进行检测，如利用免疫光技术可在显微镜下检测出结合有荧光色素抗体的细菌阳性细胞，免疫荧光技术检测的灵敏度一般约为lO3～lO5 cfu／mL，不仅对每个荧光细胞可以记数，而且可以观察有关细胞的形态特征。
植物病毒病检测方法植物病毒病是农业生产上一种重要病害，严重影响农作物的产量和质量, 目前还没有1种治疗效果较理想的药剂，对发病植株做到早期诊断及提前检测就显得尤为重要。
植物病毒学历经近百年的发展，植物病毒的检测方法与手段也在不断发展与改进。
常用的方法有侵染力测定法、血清学方法、电子显微镜计数和分子生物学法等。
1.4.1侵染力测定法侵染力测定法是将病毒样本接种在植物上，根据侵染力的大小定量。
它的灵敏度在所有定量法中是比较高的，而且是其他定量法的基础。
设计一种新的定量法，如果不经过侵染力的验证，将无法判断测定的是病毒或者是具有侵染力的病毒。
侵染力测定法包括局部枯斑法、淀粉－碘斑法、系统感染率的测定法等。
侵染力测定多用粗汁液来接种，为了避免抑制物质的作用和使半叶枯斑数目控制在一定范围，须用缓冲液稀释接种物。
局部枯斑法1929年F.O.Holmes发现TMV在心叶烟（Nicotiana glutinosa）接种叶片上引起局部坏死斑点，在一定的病毒浓度范围内，所产生的斑点数目与病毒浓度成正比例。
这一发现成为病毒侵染性定量测定的基础（田波，1987）。
所有机械传染的病毒都有可能应用局部斑点法，但实际上只有少数病毒具有可用于定量测定的局部斑寄主。
一个待测样品所形成的斑点数目除取决于接种物中病毒浓度外，还受试验植物种类、环境条件和接种物中是否含有病毒抑制物质的影响。
淀粉－碘斑法当所研究的病毒没有过敏性枯斑寄主时，采用此法。
Holmes（1931）发现TMV接种的烟叶上有时形成明显的黄化斑块，但不能用于计数。
将这种接种叶用95％乙醇加热到80℃固定，然后用I2和KI混合液（10克I2，30克KI，1500毫升H2O）染色时，则侵染点处出现淀粉－碘的蓝色反应。
当下午采摘叶片，褪色过夜，然后用碘液染色，则侵染点较周围组织着色浅；当采摘叶片前，植株先在黑暗中放几个小时，再用碘液染色，则侵染点组织着色深。
这是由于病毒侵染既降低光合组织中碳水化合物的形成，也降低碳水化合物从光合组织中的运出。
植物病毒病检测及防治的研究进展摘要：植物病毒病又称植物癌，给农作物及经济作物带来了严重危害，降低了农作物产量和质量，每年仅在我国因病毒感染农作物造成的损失就可达200亿美元，植物病毒病造成的损失是世界人口生存的威胁之一。
关键词：植物病毒病；检测；防治一、植物病毒病的检测技术病毒有两种，以DNA为遗传物质的病毒称为DNA病毒，以RNA为遗传物质的病毒称为RNA病毒，90%的植物病毒是RNA病毒。
早期RNA植物病毒病的检测一般采用传统的生物学方法(指示植物检测法)，即通过汁液摩擦接种或嫁接传染方式，将待测带毒植株汁液接种到一株或多株指示植物上，从而观察其在指示植物上的症状。
指示植物是对某一种或某几种病毒和类病毒敏感的植物，感染后可迅速出现明显症状。
传统生物学方法鉴定谱广，操作简单，但需培育大量指示植物，检测速度慢，易受外界环境影响。
随着电子显微镜的出现，病毒的真实形态才得以展现。
电子显微镜观察结果直观、准确，还能观察病毒引起的寄主细胞病变及内含体特征，是深入研究病毒病机理的重要手段之一。
但仪器设备昂贵，制片及操作技术复杂，难以掌握，对操作人员技术水平要求高。
由于每一种植物病毒产生的抗血清各有特性，人们研发一种利用抗原抗体外特异性免疫反应检测植物病毒的方法。
酶联免疫吸附法(ELISA)是通过酶催化颜色反应将抗原抗体结合起来的一种方法，其具有灵敏、快速、特异性强、分析率高、成本低等优点，可用于大规模样品检测，是血清学中应用最广泛的方法，已成为检测植物病毒的关键技术。
随着生物体遗传物质研究的逐步深入，人们发现通过核酸能准确、快速地鉴定植物、动物和微生物的物种和种群。
基于核酸检测的分子生物学方法比血清学方法具有更宽的检测范围、更高的灵敏度、更强的特异性，适用于大批量样本检测，在植物病毒检测中得到了迅速而广泛的应用。
包括核酸杂交技术(Nucleic acid hybridiza-tion)、反转录PCR技术(RT-PCR)、荧光定量PCR技术(real-timePCR)、DNA微阵列技术(DNA microarray)。
临床医学检验临床免疫：免疫标记技术考试答案（强化练习）1、单选免疫放射分析（IRMA）的最大特点是（）A.应用过量标记抗体B.有分离步骤C.应用过量标记抗原D.无分离步骤E.应用放射标记物正确答案：A2、单选（江南博哥）可用免疫渗滤试验和免疫层析试验检测的项目没有OA.抗HCVB.HIVC.HCGD.HBsAgE.HAV正确答案：E3、一多选毛细管电泳仪的主要结构有（）A.高压源B.毛细管柱C.检测器D.缓冲液槽E.记录装置正确答案：A,B,C,E4、单选目前应用最广泛的荧光素为OA.异硫氟酸荧光素FITCB.四乙基罗丹明RB200C.四甲基异硫氟酸罗丹明D.锢系螯合物E.藻红蛋白R-BE正确答案：A参考解析：异硫氟酸荧光素（FITC）为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或乙醇等溶剂。
分子量为389.4,最大吸收光波长为490〜495nm,最大发射光波长520〜530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。
其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感。
②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。
被广泛的应用于临床试验中。
5、单选生化标志最低检测限为个肿瘤细胞OA.105B.106C.107D.108E.10正确答案：D6、单选电泳时对支持物的一般要求除不溶于溶液、结构均一而稳定外，还应具备（）A.导电、不带电荷、没有电渗、热传导度小B.不导电、不带电荷、没有电渗、热传导度大C.不导电、带电荷、有电渗、热传导度大D.导电、不带电荷、有电渗、热传导度大E.导电、带电荷、有电渗、热传导度小正确答案：B7、单选荧光寿命指的是OA.荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光随时间而衰减到一定程度所用的时间B.荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光随时间而增强到一定程度所用的时间C.非荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光随时间而衰减到一定程度所用的时间D.非荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光随时间而增强到一定程度所用的时间E.以上都不是正确答案：A8、单选在用RIA检测某种激素在血清中的浓度时，其抗原抗体复合物中的放射性强度越大，表明（）A.该激素在血清中的浓度越高B.该激素在血清中的浓度越低C.游离的标记激素的浓度越高D.对这种激素的特异性抗体浓度越高E.游离的标记激素浓度越低正确答案：B参考解析：RIA原理：标记抗原与非标记抗原（待测物）对有限量特异性抗体竞争性结合，Ag—Ab复合物放射性越大，则表示被标记的抗原结合越多，而非标记标原（待测物）浓度越低。
