实验二 细胞形态观察
一、实验目的：
1. 认识人体及植物细胞的基本形态；
2. 认识红细胞和白细胞的构造特点；
3. 掌握临时装片和血涂片的制备方法；
4. 掌握光学显微镜的使用方法以及光镜下所见细胞的绘图记录方法。
二、实验原理：
细胞是生物体结构和功能的基本单位，构成高等生物体的细胞种类繁多、形态各异。由于大多数细胞体积微小，必须借助光学显微镜才能被观察到，并且大多数细胞是透明的，须经染色处理，才能看清细胞结构。在普通光学显微镜下，一般可见的基本细胞结构为细胞膜、细胞质和细胞核3个部分。
三、实验器具、材料与试剂：
1．器具：光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、牙签、吸水纸、染缸、一次性医学取血针、
2．材料：洋葱、西红柿、
3．试剂：
（1）1%碘液：1g碘片、2g碘化钾溶于100mL 80%的乙醇或蒸馏水中即可。
（2）75%酒精
（3）Giemsa-Wright联合染液
四、实验内容与方法：
1．植物细胞形态观察：
（1）洋葱鳞茎表皮细胞（平面）的标本制备与观察：
制片：取干净载玻片，中央滴一滴2%碘液；取洋葱肉质磷叶，用镊子在其内表面轻轻撕取一小块方形膜质表皮（边长3-4mm），置于载玻片的碘液滴中，铺平，用镊子夹取干净的盖玻片，将其一侧先接触标本旁的碘液，再缓缓的盖上盖玻片，尽量避免产生气泡，用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察：先用低倍镜观察，再用高倍镜；绘制并描述观察到的细胞形态。
（2）番茄果肉细胞（立体）的标本制备与观察：
制片：掰开番茄的果实，用牙签挑一些熟透的果肉放在载玻片上，加1滴稀释的紫药水（2-3滴水加1滴紫药水），盖上盖玻片，在玻片上轻轻地压一下。
观察：置显微镜下观察，可见立体细胞，轻轻推动一下盖玻片，就能看到分离的果肉细胞在滚动，这样细胞的几个面就看的很清楚。注：水太多，推片时就看不到细胞滚动，可以用吸水纸在盖玻片的边上吸去。
所有分类 共有 11 个相册,230 张相片。
细菌图谱
|16张
红系统 |39张
粒系统 |53张
血小板 |5张
淋巴细胞系 |11张
尿液图谱 |64张
粪便图谱 |5张
精液图谱 |18张
关节腔积液 |5张
脑脊液图谱 |3张
其它体液图谱 |11张
最新更新情况，截止到 2010-7-23 11:26:37 血液图谱 共有 5 个相册。
细菌图谱
|16张
红系统 |39张
粒系统 |53张
血小板 |5张
淋巴细胞系 |11张
尿液图谱
白细胞管型（SM染色）
白细胞管型（未染色）
表层移行上皮细胞
草酸钙结晶
胆固醇结晶
胆红素结晶
非晶性尿酸盐
非均一性血尿红细胞
胱氨酸结晶
含铁血黄素颗粒
含铁血黄素阳性细胞
均一性红细胞血尿
尿液图谱
均一性红细胞血尿
酪氨酸结晶
亮氨酸结晶
粗颗粒管型
红细胞管型
宽大管型
蜡样管型（未染色）
肾上皮细胞管型
透明管型（染色）
透明管型（未染色）
细颗粒管型
脂肪管型
尿液图谱
磷酸钙结晶
尿酸结晶
三联磷酸盐结晶
药物结晶（吡哌酸）
药物结晶（磺胺甲基异
造影剂结晶（碘番酸）
造影剂结晶（泛影葡胺
造影剂结晶（泛影酸）
鳞状扁平上皮（SM染色）
鳞状扁平上皮
肾小管上皮细胞
中层移行上皮细胞
马耳他交叉现象
尿白细胞（未染色）
尿液中巨噬细胞
尿液中巨噬细胞
尿中酵母菌（未染色）
尿中酵母菌(SM染色)
尿液白细胞
白细胞管型
扁平上皮细胞
草酸钙结晶
大圆上皮细胞
胆固醇结晶
尿液图谱
胆红素结晶
滴虫
非晶体尿酸盐
胱氨酸结晶
尿红细胞
红细胞管型
颗粒管型
蜡样管型
酪氨酸结晶
亮氨酸结晶
尿酸结晶
肾衰竭管型
尿液图谱
肾小管上皮细胞 肾小管上皮细胞管型 透明管型 尾形上皮细胞
鲍氏志贺菌
鲍氏志贺菌
鲍氏志贺菌
鲍氏志贺菌
第 1 页 共 4 页 细胞形态学观察
细胞毒性也可通过细胞形态变幻来推断。形态观看是辨认细胞最容易、最挺直的办法，由于其中大多数细胞的形态与药物或者毒物的作用有关系。细胞形态变幻很难定量，但可通过形态变幻程度分级，或按照形态转变细胞数所占的百分比举行半定量。细胞形态转变可在电子显微镜下挺直观看，也可经染色后观看，苏木精一伊红（HE）染色和吉姆萨（Giemsa )染色是观看细胞形态的最常用的办法，也是把细胞作为标本保存的主要办法。 （一）倒置显微镜下挺直观看细胞形态 细胞形态变幻包括：细胞核、细胞膜和细胞质的转变，即细胞是否有空泡堆积和脂质小滴、是否可见细胞膜膨出（鼓泡）、细胞核染色质的变幻以及细胞器如线粒体、溶酶体等的变幻、细胞脱壁和贴壁、细胞膜表面是否毛糙无光泽、细胞是否裂解为碎片等。通过细胞形态的这些变幻，可直观迅速地推断细胞毒性。 （二）透射电子显微镜观看 【材料】 1. 2％～3％。
2. 2％～2.5％。 3. 1％。 4. 0.2M PBS缓冲液。 5．梯度丙酮。分离为50%,70%,90%,100％浓度的。 【办法】 1．收集对数生长久的培养细胞5x107左右。将细胞连同培养液放入2ml的离心管中，然后用PBS清洗2～3次，1000～1500r/min离心样品5～10分钟，吸去上清液，混匀细胞。 2．沿管壁当心加入2％～2.5％的冷，轻轻吹打，使细胞混匀。在4℃的环境中固定30分钟，然后用指弹法将细胞团块弹散，继续用新的固定液固定细胞30分钟。1000r/min离心5分钟，弃上清液。 3．在4℃下用PBS冲洗后放置1～2小时或者过夜，离心后弃上清液。 4．管内加入0.1～0.5m1 37℃的2％～4％的液，混匀并冷却，形成细胞琼脂凝胶预包埋块。 5．离心管中加入少量的PBS或者75％的乙醇，用铝片沿管壁当心地将细胞琼脂糖松动，预包埋块移到含有75％的瓶中，一天后换固定液一次。4℃保存。 6．将预包埋块切成1 mm3大小，放到1％中4℃固定1～ 2小时。用PBS反复漂洗后放置30分钟或过夜。 7．分离用50%,70%,90%,100％的脱水一次，每次10～15分钟；然后100％脱水3次，每次30分钟。 8．浸入稀
淋巴细胞系统形态
淋巴细胞系统包括原始淋巴细胞、幼稚淋巴细胞以及成熟的淋巴细胞。
（1）原始淋巴细胞：胞体直径10～18μm，圆或椭圆形。胞核大，位于中央或稍偏一侧，圆或椭圆形、核染色质细致，呈颗粒状，但比原粒细胞稍粗，排列匀称，核膜浓厚，界限清晰，核仁1～2个，胞质极少，呈淡蓝色，透明，核周界明显，无颗粒。
（2）幼稚淋巴细胞：胞体直径10～16μm，胞核圆或椭圆形，核仁模糊不清或消失，核染色质仍较细致。胞质较少，淡蓝色，偶有少许天青胺蓝颗粒。
（3）淋巴细胞：①大淋巴细胞：胞体圆形，直径12～15μm，胞核椭圆形稍偏一侧，核染色质排列紧密而均匀。胞质较多，呈清澈的淡蓝色，可有少量大小不等的天青胺蓝颗粒。②小淋巴细胞：胞体圆形，直径6～9μm，胞核圆形或有小切迹，核染色质聚集紧密成大块状。胞质量很少，颇似裸核，如可见，呈淡蓝色，一般无颗粒。
表 原淋、幼淋和成熟淋巴细胞的鉴别 细胞结构 原始淋巴细胞 幼稚淋巴细胞
成熟淋巴细胞
核仁 明显 模糊 消失或有假核仁
核染色质 粗颗粒状 较粗糙 粗糙
颗粒 无 偶有 可有
单核细胞系统形态
单核细胞系统包括原始单核细胞、幼稚单核细胞和成熟单核细胞。
（1）原始单核细胞：胞体直径15～20μm，圆或椭圆形。胞核较大，圆形、类圆形。核染色质纤细，呈疏松网状，核仁1～3个。胞质较丰富，呈灰蓝色，不透明，边缘不规则，有时可见伪足状突出。
（2）幼稚单核细胞：胞体直径15～25μm，圆形，不规则形。胞核圆或不规则形，呈扭曲折叠状，核染色质较原单核细胞粗糙疏松，呈丝网状，无核仁。胞质较多，染灰蓝色，可见细小染紫红色的天青胺蓝颗粒。
（3）单核细胞：胞体直径12～20μm，圆或不规则形，胞核形态不规则并有明显的扭曲折叠。核染色质较细致，疏松呈丝网状或条索状。胞质量多，染灰蓝色和淡粉红色，胞质内见细小的、分散均匀的灰尘样紫红色天青胺蓝颗粒。
