黄芪对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的探究

2020年第33卷第1期中国科技核心期刊足细胞损伤是糖尿病肾病(diabeticnephro-

pathy，DN)发生发展的关键环节［1］。但是其损伤

机制目前尚未阐明。足细胞具有独特的形态结构，

即足突。足突与足突的连接依赖于裂孔隔膜蛋白。

研究证实足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin和Podocin

等表达异常是足细胞早期损伤的特征性标志［2］。

目前尚无有效药物防治DN足细胞损伤。据统计，

在常用的中医治疗糖尿病的处方中黄芪使用频率最高［3］。我国药典及美国药典均把黄芪作为“补

中益气、健脾利水”的传统中草药广泛应用于治疗

DN及原发性肾病引起的蛋白尿。最近的一项Meta

分析结果显示黄芪能够有效降低蛋白尿，改善肾

功能［4］。黄芪的这种肾脏保护作用已得到公认，

故进一步明确其有效成分及分子机制成为目前研

究的热点。黄

芪甲

苷(AstragalosideⅣ，AS-Ⅳ)

是黄芪的主要活性成分之一，有抗氧化、减轻心脑·药理研究

黄芪甲苷对糖尿病肾病

大鼠足细胞裂孔隔膜的保护作用*

宋志霞，饶毅峰△，刘阳，夏蓉，徐双双，杨林宜昌市中心人民医院/三峡大学第一临床医学院肾病内科，湖北宜昌443000

［摘要]目的：探讨黄芪甲苷对糖尿病肾病(diabeticnephropathy，DN)大鼠足细胞裂孔膈膜的保护作用及其可能机制。方法：利用腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)建立糖尿病大鼠模型。将40只雄性SD大鼠随机分为4组各10只：正常对照组(NC组)、黄芪甲苷组(astragalosideIV，AS-IV组)、糖尿病肾病组(DN组)和糖尿病肾病+黄芪甲苷干预组(DN+AS-IV组)。造模成功后每6、12周检测大鼠体质量及24小时尿蛋白量。造模后12周末留取大鼠血样本和肾组织标本并处死大鼠。检测大鼠肌酐(serumcreatinine，SCr)、尿素氮(bloodureanitrogen，BUN)和尿蛋白；PAS及Masson染色观察肾脏病理改变；电镜观察足细胞超微结构变化；免疫组化法及WesternBlot法检测肾组织Nephrin、Podocin、Desmin表达。结果：与DN组相比黄芪甲苷可明显降低大鼠蛋白尿，改善大鼠肾脏病理损伤。DN组Nephrin、Podocin蛋白表达量均低于NC组(P＜0.05)，Desmin蛋白表达量高于NC组(均P＜0.05)，AS-IV组肾脏病理改变及各指标明显改善，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：黄芪甲苷可能通过稳定足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin和Podocin来抑制STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏损伤。［关键词］肾病，糖尿病；足细胞；裂孔隔膜蛋白；Nephrin；Podocin；黄芪甲苷；大鼠［中图分类号］R587.2［文献标识码］A［文章编号］1004-6852(2020)01-0013-06

中国中医急症２０１３年１０月第２２卷第１Ｏ期　ＪＥＴＣＭ．Ｏｃｔ．２０１３，Ｖｏ１．２２，Ｎｏ．１０　

肾炎康复片对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用　

机制研究　

宋晶晶　傅晓宁　刘　键０　

（１．武警北戴河疗养院，河北秦皇岛０６６１００；２．北京军区天津疗养院，天津３００３８１）　

中图分类号：Ｒ２８５．５文献标志码：Ａ文章编号：１００４—７４５Ｘ（２０１３）１０—１７３３—０３　

【摘要】目的通过观察。肾炎康复片对糖尿病肾损伤大鼠肾脏病理及足细胞相关蛋白表达的影响，探讨其肾　脏保护机制。方法用高脂高糖饲料加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病肾病（ＤＮ）大鼠模型，随机分为治疗组、　对照组、模型组及正常组。治疗组给予肾炎康复片、对照组给予盐酸贝那普利，模型组与正常组均给予生理盐　水灌胃。第８周末对各组大鼠进行尿蛋白定量、血液生化、肾脏病理、足细胞相关蛋白的免疫组化比较。结果　各项结果显示，ＤＮ大鼠中，肾炎康复片组肾脏病变最轻。结论肾炎康复片可有效减轻糖尿病造成的肾病　损害，其发生机制可能为不完全依赖于降低血糖的足细胞保护作用。　【关键词】　糖尿病肾病　中药　足细胞　肾炎康复片　

糖尿病肾病…（ＤＮ）为糖尿病（ＤＭ）临床常见并发　

症之一。本研究通过血液生化、光镜、电镜、免疫组化　

等方法观察肾炎康复片对ＤＮ大鼠肾脏病理、足细胞　

相关蛋白ｎｅｐｈｒｉｎ与Ｐｏｄｏｃｉｎ［　表达的影响，探讨该药　

在临床中应用于ＤＮ患者时减少蛋白尿、改善肾功能　

的作用机制。　

１材料与方法　

１．１试剂与仪器链脲佐菌素（ＳＴＺ），美国Ｓｉｇｍａ生　

产；胆固醇、胆酸钠，美国Ｓｉｇｍａ生产；辣根酶标记羊　

抗兔ＩｇＧ。北京中杉金桥生物技术有限公司生产；兔抗　

大鼠ｎｅｐｈｒｉｎ、ｐｏｄｏｃｉｎ，武汉博士德生物工程有限公司　

生产：ＪＥＭ一１２３０透射电子显微镜．日本电子株式会社　

生产。图像采用Ｍｉａｓｐｒｏ图像分析系统进行分析。　１．２动物ＳＰＦ级雄性ＳＤ大鼠共１３５只，体质量为　

关于黄芪治疗糖尿病的探究

【摘 要】目的：探究中药黄蔑治疗糖尿病的疗效及安全性。方法：将63例病人随机分为对照组及治疗组，对照组给予糖尿病教育、饮食控制和血糖控制，治疗组在此基础上给予黄茂颗粒治疗，疗程3个月。治疗组在上述治疗的基础上予黄芪针60ｍｌ加入0.9%氯化钠250～500ｍｌ中静脉滴注，1次/ｄ，疗程3～4周。结果：治疗组尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白和尿微量白蛋白在治疗后均低于对照组（P<0.05）；2组治疗后空腹血糖均控制在良好水平；治疗组用药后总胆固醇和三酰甘油水平均较用药前降低。结论：黄芪对糖尿病早期肾损害的发生、发展具有一定的保护作用，这种保护作用可能与黄芪改善血流动力学和其他多方面机制有关。

【关键词】黄芪；糖尿病；肾损害

【中图分类号】R781.6+4【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-04-128-01

糖尿病肾病是糖尿病严重的微血管并发症，若不及时治疗，将导致终末期肾衰竭。近年来，随着糖尿病发病率的逐年增多，由其引起的终末期肾脏病目前针对糖尿病肾病的发病机制，尚未形成统一的观点，但近年来国外学者研究认为，该病的发病主要受遗传因素影响，当患者发病后，一方面糖毒性的进行性侵蚀，导致肾内血流动力学发生改变，另一方面大量的生长因子和细胞因子参与了肾血管的氧化应激反应，从而导致疾病的发生，这一观点被得到普遍的认同。亦逐年增加，如何早期诊治糖尿病肾损害，遏止其肾损害进一步恶化已成为当今的热门课题。现阶段治疗蛋白尿主要以血管紧张素转化酶抑制剂或血管紧张素11受体拮抗剂类药物为主，而以上药物有明确的禁忌证及不良反应。中药黄芪具有调理机体免疫功能，增加肾小球滤过率，减轻通透性蛋白尿，减少尿微量白蛋白的作用。黄芪含有蔗糖、葡萄糖醛酸、黏液质、多种氨基酸、苦味素、胆碱等多种化学成分；同时富含钙、磷、镁、铁等常量及微量元素，可以从多个方面调节糖尿病，协同治疗。本院2013年7月—2015年7月采用黄芪注射液治疗糖尿病肾病患者63例，疗效较好，现报道如下。

天然产物研究与开发 iVai Dez; 2017,29:1558-1562文章编号：1〇〇1_6880(2017)9-1558~05化瘀通络中药不同配伍对糖尿病肾病大鼠肾脏 保护作用及对肾小球P-cadherin表达的影响霍贝贝\白璐1，张肖2,陈志强郭倩1，徐晶31河北医科大学;2河北省中医院，石家庄050017;3河北中医学院，石家庄050200摘要:为观察化瘀通络中药不同配伍对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及对肾小球足细胞裂孔膜蛋白P-cad- herm表达的影响，将70只雄性SD大鼠随机分为正常组和模型组、化瘀通络组、厄贝沙坦组、化瘀组和通络组，灌胃干预16周。检测大鼠的体重、肾重、肾脏指数、24 h尿蛋白定量，分别采用实时定量PCR和蛋白印迹法检 测P-cadherm的表达。结果显示，与模型组比较，化瘀通络组大鼠的肾脏指数、24 h尿蛋白定量明显下降（P <0. 01)，体重增加、P-cadherin mRNA和蛋白表达明显上调（P <0. 01)。提示化瘀通络中药可能通过上调P-cad- herin mRNA和蛋白的表达，减少尿蛋白，延缓糖尿病肾病病程进展。关键词:糖尿病肾病;化瘀通络;P-cadWm;裂孔膜蛋白中图分类号：R2-031 文献标识码：A DOI ： 10. 16333/j. 1001 -6880.2017. 9. 018Protective Effect of Different Combinations of Chinese Recipe of Stasis-removing-and-Collaterals-dredging on the Kidney of Diabetic Nephropathy Ratsand Its Effect onthe Expression of P-cadherin in the GlomerularHUO Bei-bei1 ,BAI Lu1,ZHANG Xiao2,CHEN Zhi-qiang1'2* * ,GU0 Qian1 ,XU Jing31 Hebei Medical University \2 Hebei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shijiazhuang 050017, China \3 Hebei College of Traditional Chinese Medicine, Shijiazhuang 050200, ChinaAbstract：To observe the protective effect of different combinations of Chinese recipe of stasis-removing-and-collaterals- dredging on the kidney of diabetic nephropathy (DN) rats and its effect on the expression of slit diaphragm protein P- cadherin in the podocyte,70 male Sprague Dawleg rats were randomly divided into control group,model group,stasis-re- moving-and-collaterals-dredging group,irbesartan group,stasis-removing group and collaterals-dredging group,and differ­ent medicines were intragastrically fed once a day for 16 weeks. Body weight, kidney weight, kidney index and 24 h uri­nary total protein were tested at the end of week 16. The expression of P-cadherin was detected by Real-time PCR,West- ern blot,respectively. The results showed that compared with the model group,kidney index,24 h urinary total protein of stasis-removing-and-collaterals-dredging group were significantly decreased (P <0. 01 ) ,body weight and the mRNA and protein expression of P-cadherin were significantly increased (P <0. 01 ). It suggested that Chinese medicines of stasis- removing-and-collaterals-dredging may increase the mRNA and protein expression of P-cadherin to reduce urinary pro­tein and delay the progression of DN.Key words：diabetic nephropathy；stasis removing and collaterals dredging； P-cadherin；slit diaphragm protein糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN)是糖尿 病最严重的并发症之一，也是终末期肾病的第二大 病因。有数据显示，截至2013年我国糖尿病患者达 9840万，已成为糖尿病患者人数最多的国家，DN的收稿日期:2016-12-21 接受日期:2017-02-24基金项目：国家自然科学基金（81373804,81173419)* 通信作者 Tel: 86-311-69095003 ; E-mail: chenzhqiang2011 @ 163.发病率也逐年提高[1]。DN发病早期主要表现为肾 小球高滤过和肾脏肥大，随后出现持续微量蛋白尿， 一旦出现明显蛋白尿，病情将不断进展，直至发展为 肾衰，严重威胁人们的健康，因此DN的防治极为迫 切。近年来，中医药在改善DN临床症状、降低蛋白 尿等方面表现出独有优势m，中医学认为“久病入 络”，瘀血是DN主要病机，故化瘀通络中药成为基 础用药，其疗效也得到认可[M]，但其作用机制仍