实验动物采血完全指南
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大、小鼠摘眼球采血标准操作规程一、目的本规程规定了实验室大、小鼠摘眼球采血的操作步骤、注意事项和安全要求,以确保实验结果的准确性和动物福利的考虑。
二、适用范围本规程适用于实验室进行大、小鼠摘眼球采血的操作。
三、操作步骤1.准备工具和材料:眼科剪、眼科镊、止血棉球、生理盐水或肝素抗凝剂。
2.操作前准备:确保实验动物处于深度麻醉状态,以减少动物的痛苦和应激。
3.保定动物:将动物固定在实验台上,保持头部和身体稳定。
4.剪毛消毒:用剪刀轻轻剪去眼睑周围的毛发,然后使用消毒液对眼部进行消毒。
5.暴露眼球:用眼科镊轻轻分开眼睑,暴露出眼球。
6.采血:用眼科剪在眼球根部剪断血管,然后用止血棉球压迫止血。
如果需要采集较多血液,可以在剪断血管后轻轻挤出血液。
7.抗凝处理:将采集的血液样本放入含有肝素抗凝剂的试管中,轻轻摇匀,防止血液凝固。
8.清理动物:在采血完成后,用生理盐水清洁眼部,避免感染。
9.观察动物:密切观察动物的恢复情况,确保无并发症发生。
四、注意事项1.操作过程中要轻柔、迅速,减少动物的痛苦和应激。
2.采血时要注意血管的选择和剪断,避免破坏其他组织。
3.使用抗凝剂时要注意与血液的比例,防止影响实验结果。
4.在操作过程中要保持实验台和工具的清洁消毒,避免交叉感染。
5.如果动物出现并发症或死亡,应立即停止操作并向上级报告。
五、安全要求1.操作人员必须经过专业培训,熟悉操作步骤和注意事项。
2.实验动物必须处于深度麻醉状态,以减少动物的痛苦和应激。
3.在操作过程中要注意自我防护,避免受伤或感染。
4.对于使用过的工具和材料要进行妥善处理,防止交叉感染或环境污染。
5.在实验结束后要做好记录和分析,以便于数据的追溯和总结。
动物心脏采血要领动物心脏采血要领动物心脏采血是一项常见的科研工作,需要进行正确、规范的操作,以确保采集到的血液质量可靠。
本文将介绍动物心脏采血的步骤和注意事项,帮助读者掌握正确的操作方法。
一、必备器材1. 必要的消毒器具:如手套、口罩、消毒液等。
2. 适当长度的手术剪刀:手术剪刀长度应大于10厘米,以便快速、整洁地进行操作。
3. 夹子:好的夹子应该有够长度和钝度,以避免无意中损伤心脏。
4. 血采管和离心管:为了防止任何污染,建议选择透明或半透明的管子。
5. 实验试剂:如抗凝剂等。
二、采集方法1. 准备工作:所有必须的物品和试剂应提前准备,并且有任何特殊的物品,您应该先确保您已经弄清楚了使用方法。
2. 麻醉动物:麻醉是动物心脏采血的第一步,因此必须使用足够的麻醉剂以确保动物能够安静、无痛地进行操作。
3. 手术准备:剪除动物的胸部,确保心脏明显可见,并用夹子固定。
4. 切开心脏:使用手术剪刀缓慢地将心脏中央部位剖开。
剖开时不要切断动脉和静脉的连接。
5. 采集血液:使用血采管轻轻地插入心脏的间隔室或左心室,然后取出血针,待采集完毕后将血液放入离心管中。
(必要时使用抗凝剂)6. 顺手关上心脏:在完成采血后,将心脏缓慢地合并起来,并逐渐将多余的血液挤压出来,尽可能避免形成气体或血块。
三、注意事项1. 操作应该规范化,避免操作员存在任何的动作误差,给动物带来的伤害。
2. 采血过程中,应避免感染或者误伤动物,需要对手术室环境、操作器材以及操作者的手部进行严格消毒。
同时,需要在操作时观察动物心跳和呼吸等生理情况,注意发现异常情况时及时处理。
3. 在整个采血过程中,应该注意保温,以确保采血的血液不会丧失其活力。
4. 采血完毕后,应及时将采血管封闭,并标记离心管样本信息。
本文介绍了正确的动物心脏采血要领,希望能帮助读者进一步提高科学采血的技能水平,更好地完成科研任务。
大鼠和小鼠的采血方法1.麻醉方法:在采血前,先给大鼠或小鼠进行麻醉,以减少它们的疼痛感受。
常用的麻醉方法有以下几种:-静脉麻醉:将合适剂量的麻醉剂通过尾静脉或背静脉注射给大鼠或小鼠,使其进入麻醉状态。
-吸入麻醉:将麻醉气体或气溶胶通过麻醉箱或麻醉罩给大鼠或小鼠吸入,达到麻醉效果。
-局部麻醉:将麻醉剂涂抹在采血部位的皮肤上,使局部麻木,减少疼痛感。
2.采血部位:常用的大鼠采血部位有尾静脉、颈静脉、眼眶突静脉等,而小鼠采血部位则有尾静脉、颈静脉、眼眶突静脉、前肢静脉等。
3.采血工具和器材:-采血针:选择合适大小的采血针,不同大小的动物需要选择不同规格的针头。
-注射器:用于抽取和储存血液样本的容器。
常用的有离心管、毛细管等。
-注射器插管:将采集到的血液导入注射器中储存。
4.采血方法:-尾静脉采血:将大鼠或小鼠的尾巴用温水浸泡,使其尾部静脉扩张。
然后用酒精消毒尾巴,用手指轻轻压住尾部静脉靠近尾根的部位,使尾尖鼓胀,再用采血针针尖刺破尾尖的皮肤,顺着静脉方向将血吸入注射器中。
-颈静脉采血:将大鼠或小鼠定位于侧卧位,用酒精消毒颈部的皮肤。
手指轻轻压住颈侧的静脉,使其充血,然后用采血针针尖针插入触及到静脉,将血液吸入注射器中。
-眼眶突静脉采血:先给大鼠或小鼠进行眼眶突的局部麻醉,随后用消毒酒精将眼眶突部分消毒。
再用适当大小的针头插入眼眶突静脉,将血液抽取到注射器中。
5.采血后的处理:-停血:采血后需用无菌棉球或无菌纱布轻轻按住针刺处,让血液凝结停止流血。
-保存:将采集到的血液样本转入离心管中,用离心机离心,分离血浆和血细胞。
将血浆或血细胞储存在冷冻管中,冷冻保存。
以上就是大鼠和小鼠采血的最全方法。
在进行采血操作时,需要注意动物的麻醉和疼痛管理,操作要轻柔、快速、准确,以减少动物的痛苦和疼痛。
另外,为了确保采血的科学性和准确性,还需要遵守实验室的相关规范和伦理要求,确保实验与动物实验道德的合理性。
目录-----------------------------------------1 实验一--------------------------------------2 实验二--------------------------------------5 实验三--------------------------------------9 实验四--------------------------------------12 实验五--------------------------------------16 实验六--------------------------------------20 实验七--------------------------------------23 实验八--------------------------------------26 实验九--------------------------------------29 参考文献-----------------------------------331 / 34实验一家禽血液样品采集1. 实验目的及要求:1.1 实验目的:了解家畜血样采集的方法1.2 实验要求:①学会采血针和注射器的使用方法②学会鸡冠采血法③学会翼下静脉采血法1.3 实验规定学时:( 1.5学时)1.4 实验性质:综合2. 实验原理:静脉又称容量血管,其内含血量较多且流速较慢,位于腋窝部的翼下静脉具此特点,此静脉易找到,在此可采血10~20ml。
2 / 343. 实验仪器、装置、工具及主要材料鸡、脱脂棉、酒精、采血针、注射器、抗凝剂4. 实验方法与步骤鸡的采血方法(1)鸡冠采血法用于需要少量血液的采血,用采血针或针头刺破鸡冠吸取血液,然后消毒伤口。
(2)翼下静脉采血法①先将鸡侧卧保定,露出腋窝部,拔去该部羽毛,可见翼下静脉。
②压迫翼下静脉的近心端,使血管怒张,消毒后,实验者手持有针头的注射器,由翼根向翅膀方向沿静脉平行刺入,见回血后抽出血液。
一、实验目的1. 掌握动物采血的基本方法与技巧。
2. 了解不同动物采血方法的特点及适用范围。
3. 培养实验操作技能,提高实验成功率。
二、实验材料1. 实验动物:豚鼠、小鼠、兔2. 采血工具:注射器、止血带、剪刀、刀片、酒精棉球、碘酒棉球、无菌纱布、脱脂棉、止血钳、手术刀、手术台、酒精灯3. 试剂:20%柠檬酸钠溶液、抗凝剂、生理盐水三、实验方法1. 豚鼠采血(1)耳缘剪口采血:将豚鼠固定,消毒耳缘,用锐器割破耳缘,涂抹20%柠檬酸钠溶液,待血液自动流出,进入盛器。
(2)心脏采血:取血前探明心脏搏动最强部位,选心跳最显的部位作穿刺。
针头宜稍细长些,以免发生手术后穿刺孔出血。
(3)肌动脉采血:将动脉仰位固定在手术台上,剪去腹股沟区的毛,麻醉后,局部用碘酒消毒。
切开长约2~3cm的皮肤,使股动脉暴露及分离。
然后,用镊子提起股动脉,远端结扎,近端用止血钳夹住,在动脉中央剪一小孔,用无菌玻璃小导管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入,放开止血钳,血液即导管口流出。
(4)背中足静脉取血:助手固定动物,将其右或左右膝关节伸直提到术者面前。
术者将动物脚背面用酒精消毒,找出背中足静脉后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿的注射针刺入静脉。
拔针后立即出血,呈半球状隆起。
2. 小鼠采血(1)割(剪)尾采血:固定动物并露出鼠尾,剪去尾部毛,消毒,将尾部浸在45左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。
再将尾擦干,用锐器割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取。
3. 兔采血(1)耳静脉采血:将兔放入仅露出头部及两耳的固定盒中,选耳静脉清晰的耳朵,去除耳静脉部位的毛,局部消毒。
用手指轻轻摩擦兔耳,使静脉扩张。
用注射器在耳缘静脉末端刺破血管待血液流出,接取血液。
(2)耳中央动脉采血:在兔耳的中央有一条较粗、颜色较鲜红的中央动脉,一手固定兔耳,另一手持注射器,在中央动脉的末端,沿着动脉平行地向心方向刺入动脉,轻轻回抽取血。
小鼠采血及给药方法一、小鼠采血方法1.静脉采血法:(1)静脉穿刺法:将小鼠固定在实验台上,清洁采血部位(常常是尾静脉),用适当的方法固定小鼠尾部,例如用取血夹固定。
用消毒棉球涂抹于采血部位,利用一只针筒或采集针对静脉进行穿刺。
(2) 尾静脉切割法:先用消毒棉球涂抹于小鼠尾部静脉附近,接着使用锋利的剪刀剪切尾部皮肤,直到出现静脉。
使用脱针管(micro-hematocrit tube)将血液抽吸出来。
采血结束后,可用消毒剂处理采血点,以防止感染。
2.额高度法:采用颅内针,固定小鼠在颅骨穿刺装置上,选用滑动固定针。
先用洗净针按住头部,再通过颅针插入到穿刺装置中。
同时使用抽吸器抽取出血液。
3.围尾车压法:将小鼠固定在一块平板上,用三个围绳将其尾部固定,留一个关节使小鼠尾部随意摆动。
在上方围绳旁边的固定处架设一只容器,用于收集滴下的尾血。
二、小鼠给药方法1.口服给药:该方法较简单,将药物以适当的剂量溶解于注射用水或生理盐水中,用灌胃针或注射器将药液直接灌入小鼠口腔中。
要确保给药的准确剂量和流量,避免嗓子喉咙堵塞。
2.腹腔注射法:将小鼠放在工作台上,用适当的方法固定小鼠身体,清洗注射部位。
用消毒棉球涂抹于腹部,使用22-25号注射针或微量注射器将药物缓慢注射入腹腔。
注射速度要控制得适当,避免损伤内脏器官。
3.尾静脉注射法:将小鼠固定在工作台上,清洁尾部毛发,用爪式血管夹固定尾部血管。
使用注射针插入尾静脉,并注意发现血斗标志。
缓慢将药物注射入尾静脉。
4.静脉注射法:将小鼠固定在工作台上,清洗注射部位。
用消毒棉球涂抹于注射部位(通常是尾静脉),固定小鼠尾部。
使用注射针或微量注射器将药物注射入静脉。
5.肌肉注射法:将小鼠放在工作台上,用适当的方法固定小鼠身体。
将药物以适当的剂量溶解后,使用注射针插入小鼠腹股沟或胫肌中缓慢注射。
以上是小鼠采血及给药的常用方法,注意采血和给药的操作应该规范、缓慢、准确,以避免对小鼠造成不必要的伤害。
动物心脏采血要领
动物心脏采血是一种常用的实验技术,用于获取动物体内
的血液样本。
以下是一些采集动物心脏血液样本的要点:
1. 动物选择:选择符合实验需求的动物进行心脏采血。
通常,小鼠和大鼠是最常用的实验动物。
2. 麻醉:在采血前,使用适当剂量的麻醉剂使动物处于无
痛苦状态。
确保麻醉剂的剂量和方式符合动物福利准则。
3. 准备工具:确保准备好所需的工具和材料,包括注射器、采血针、吸管或培养皿等。
4. 解剖:在麻醉后,通过剖腹或取样位置的皮肤切口暴露
心脏。
5. 定位:通过手术镊子将心脏固定,并找到适当的位置进
行血液采集。
通常,左心室或右心房是最常用的采集点。
6. 采血:使用注射器和采血针小心地穿刺心室或心房,在
注射器中吸取所需的血液样本。
注意,采血时要尽量避免
心脏损伤和其他组织的污染。
7. 存储:将采集的血液样本转移到适当的容器中。
根据实
验需要,血液样本可以被分装成小份,并冷藏或冷冻保存。
8. 清洁和恢复:在完成采血后,使用适当的方法清洁和缝
合切口。
接下来,提供适当的康复和监护,确保动物快速
恢复。
血液采集是一项技术性很强的任务,如果你不熟悉或没有
经验,最好请找有经验的实验技术人员进行操作,确保操
作安全和准确。
同时,保证动物的福利,并遵守当地的伦
理和法规要求。
一、实验目的1. 熟悉动物采血的基本原理和操作步骤。
2. 掌握不同动物采血方法,如尾尖采血、眼眶后静脉丛采血等。
3. 了解采血过程中应注意的问题,确保实验安全。
二、实验材料1. 实验动物:小鼠、大鼠、豚鼠、兔等。
2. 采血工具:注射器、采血针、剪刀、镊子、棉球、酒精、碘酒、消毒液等。
3. 实验器材:手术台、解剖显微镜、烧杯、试管等。
三、实验方法1. 尾尖采血:适用于所需血量较少的实验。
- 将动物固定在手术台上,露出鼠尾。
- 剪去鼠尾毛,用酒精消毒。
- 将鼠尾浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。
- 擦干鼠尾,用剪刀或刀片割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取。
- 采血结束后,伤口消毒并压迫止血。
2. 眼眶后静脉丛采血:适用于中等血量的实验。
- 将动物固定在手术台上,捏紧头部皮肤,使头部固定。
- 轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突。
- 右手持毛细玻璃管,沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入,深度小鼠2-3mm,大鼠4-5mm。
- 当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,血液即流入玻璃管中。
- 得到所需的血量后,拨出玻璃管。
3. 心脏采血:适用于较大血量的实验。
- 取血前应探明心脏搏动最强部位,通常在胸骨左缘的正中。
- 针头宜稍细长些,以免发生手术后穿刺孔出血。
- 用锐器在心脏搏动最强部位穿刺,血液即流入注射器中。
4. 耳缘剪口采血:适用于豚鼠等动物。
- 将豚鼠耳消毒后,用锐器(刀或刀片)割破耳缘。
- 在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液,阻止血凝。
- 血液可自切口自动流出,进入盛器。
四、实验结果1. 尾尖采血:小鼠每次可取血0.1ml,大鼠每次可取血0.2-0.3ml。
2. 眼眶后静脉丛采血:小鼠每次可取血0.2-0.3ml,大鼠每次可取血0.5-1ml。
3. 心脏采血:豚鼠每次可取血10-20ml。
4. 耳缘剪口采血:豚鼠每次可取血0.5ml左右。
家畜临床实验采血家畜临床实验是一项重要的科研工作,采血作为其中一项关键步骤,在实验结果的准确性和可靠性上起着至关重要的作用。
本文将介绍家畜临床实验采血的方法和注意事项。
一、采血方法1. 选择合适的采血部位在家畜临床实验中,常用的采血部位主要有颈静脉、耳静脉和尾静脉。
根据不同实验需要和动物的特点,选择合适的采血部位非常重要。
2. 准备好采血工具在进行家畜临床实验采血时,需要准备好以下工具:注射器、采血针、采血管等。
确保这些工具干净、无细菌污染,并符合实验要求。
3. 消毒准备采血前,需对采血部位进行消毒处理,以避免感染和交叉感染的风险。
可以使用酒精来进行局部消毒,确保消毒过程干净、彻底。
4. 采血操作在准备就绪后,将采血针插入已消毒的采血部位,以一定的角度与血管相平行,注意不要插入过深,以免受伤。
然后,将采血管连接到采血针上,并轻轻抽取血液。
二、注意事项1. 动物福利在进行家畜临床实验采血时,要保证动物的福利和权益。
采血过程中,动物应尽量减少痛苦和压力,确保其身心健康。
2. 采血量控制采血量的控制非常重要,过少的采血量可能导致实验结果不准确,而过多的采血量可能对动物的健康产生不良影响。
要根据实验需要和动物的身体状况,合理控制采血量。
3. 采血频率在进行家畜临床实验采血时,要注意采血频率的控制。
频繁的采血可能会对动物的生理状况产生不利影响,因此需要根据实验要求和动物的耐受能力,合理安排采血频率。
4. 样本保存和处理采集到的血液样本应及时处理或保存起来,确保实验的完整性和可靠性。
根据实验需要,可以选择不同的保存方式和条件,比如冷藏或者冷冻保存。
三、伦理与法规在进行家畜临床实验采血时,需要严格遵守相关的伦理规定和法律法规。
确保实验符合伦理标准,保护动物的权益和福利,避免违法行为。
总结:家畜临床实验采血是一项关键的步骤,对实验结果的准确性和可靠性起着重要作用。
在采血过程中,要选择合适的采血部位,准备好采血工具,并进行消毒处理。
1. 掌握狗采血的方法和技巧。
2. 熟悉狗采血过程中的注意事项。
3. 提高动物实验操作技能。
二、实验材料1. 实验动物:健康成年狗一只。
2. 采血器材:无菌注射器、无菌针头、胶带、剪刀、碘酒、酒精、消毒巾、狗架等。
3. 实验用品:试管、抗凝剂、试管架等。
三、实验方法1. 狗采血部位选择本次实验采用后肢外侧小隐静脉采血法。
在狗的后肢胫部下1/3的外侧浅表皮肤上寻找小隐静脉,该静脉由前侧方向后行走。
2. 狗采血步骤(1)将狗固定在狗架上或使狗侧卧,由助手将狗固定好。
(2)将抽血部位的毛剪去,用碘酒消毒皮肤。
(3)左手拇指和食指握紧剪毛区上部,使下肢静脉充盈。
(4)右手用连有6号或7号针头的消毒器迅速穿刺入静脉。
(5)左手放松将针固定,以适当速度抽血(以无气泡为宜)。
(6)采血完毕,迅速拔出针头,用消毒巾压迫穿刺部位,直至止血。
3. 采血量一只狗一般采10-20mL血并不困难。
四、实验结果本次实验成功采集了狗的血液,血样无污染,符合实验要求。
1. 狗采血部位的选择:后肢外侧小隐静脉采血法是最常用的采血方法,操作简便,成功率较高。
2. 采血过程中的注意事项:在采血前,应对狗进行适当训练,使其在采血过程中保持安静。
在采血过程中,应避免对狗造成疼痛,以免影响采血质量。
3. 采血量:根据实验需求,可适当调整采血量。
本次实验采血量为10-20mL,符合实验要求。
4. 采血后的处理:采血后,应将血样及时放入试管中,加入适量的抗凝剂,防止血液凝固。
六、实验总结本次实验成功掌握了狗采血的方法和技巧,了解了采血过程中的注意事项。
在今后的动物实验中,我们将不断提高实验操作技能,为科研工作提供有力支持。
实验动物采血完全指南
凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。
当需血量较多时可作静脉采血。
静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。
例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度,必须采取动脉血液。
采血时要注意:⑴采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25-28℃,冬季,15-20℃为宜;⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂.
1.取少量血
a.尾静脉大鼠、小鼠
b.耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊
c.眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠
c.舌下静脉兔
d.腹壁静脉青蛙、蟾蜍
e.冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅
2.取中量血
a.后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫
b.前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫
c.耳中央动脉兔
d.颈静脉狗、猫、兔
e.心脏豚鼠、大鼠、小鼠
f.断头大鼠、小鼠
g.翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅
h.颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅
3.取大量血
a.股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔
b.心脏狗、猴、猫、兔
c.颈静脉马、牛、山羊、绵羊
d.摘眼球大鼠、小鼠
采动物品种最大安全采血量(ml) 最小致死采血量(ml)
小鼠0.2 0.3
大鼠 1 2
豚鼠 5 10
兔10 40
狼狗100 500
猎狗50 200
猴15 60
1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。
固定动物并露出鼠尾。
将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃
左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。
再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。
也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0.1ml,大鼠
0.3~0.5ml。
2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦
拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手
套),应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。
右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。
当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。
若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。
若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。
左右两眼轮换更好。
体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血
0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。
4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿
势。
右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。
小鼠可采用约0.8~1.2ml;
大鼠约5-10ml。
5.心脏采血鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。
活体采血方法与豚鼠相同。
若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。
小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。
6.颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注
射器吸出血液。
在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。
7.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清
楚暴露。
用注射器吸出血液,防止溶血。
或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术
剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。
8.股动(静)脉采血先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。
或者以搏动为指标,
右手用注射器刺入血管。
体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。
正在做小鼠肿瘤动物模型方面的实验,对于小鼠的取血方法,效果比较满意:
1尾动脉针刺取血:将小鼠固定后,用25G(5号)针头,在远端垂直刺入为正中动脉,用200ul微量吸管吸取。
该方法一次可以取0.2-0.3ml,比较安全可靠,可多次反复采血。
2小鼠心脏穿刺采血:需技术熟练,不过可以获得较多血标本。
小鼠麻醉后固定,一助手用刀柄推挤右侧胸廓,使心脏相对固定,取血者用29G胰岛素注射针在心尖搏动最强处或第三肋间胸骨左缘4mm处进针,刺入8-10mm后,便回抽便缓慢拔出针,见到血液回流后,固定针头,抽取需的血标本量。
技术熟练可以多次取血,间隔2-3天。
总结一下小鼠采血的几个问题:
1。
最大安全采血量:小鼠循环血量占体重的6%,或50-70mi/kg
采血占全血量的10%不会对机体造成严重的不良影响。
3-4周后可以重新采集一次。
特别注意的是:老年小鼠血量降低。
疾病会加重不良反应,所以必须考虑这些影响因素。
采血后应补充响应体积的液体
如果需要很短时间反复采血,比如每天一次,每次的采血量不应超过全血的1%。
30g*6%=血量1.8mls
1.8mls*10%=0.18mls(最大安全采血量)
2。
隐静脉采血法
隐静脉采血法是小量、反复小鼠采血的常用方法。
特点是不用麻醉
3。
颈静脉采血法
隐静脉采血法也是小量、反复小鼠采血的常用方法。
特点是需要麻醉
4。
心脏穿刺采血法。
麻醉动物
将动物仰放
局部酒精消毒
,用塑料注射器,从动物的左侧胸部,肋沿下,心尖部向右侧15-30度角刺入心脏,给小负压,小心操作. 采用大鼠股动脉采血。
你可以先仔细分离股动脉,然后找医用最小号的静脉留置针,它是有个针芯的,小心一点还是很容易进针,固定好针头,如果您的大鼠不需要再继续存活的话,只需要把试管放在那让它自然放血,一次采血5-8ml是没有问题的。
从颈总或者腹主都可以取出5-6ml。
200g的大鼠大概有10ml的血。
抗凝方法:
1,乙二胺四乙酸二钠(EDTA-NA2) 浓度10%,每0.1ml可使5ml血液不凝固.可用于血液学检验.
2,草酸盐合剂草酸铵6.0g,草酸钾4.0g,水定容到100ml,每0.1ml可使5ml血液不凝固.可用于血液学检验. 3,枸橼酸钠浓度3.8%,每0.5ml可使5ml血液不凝固.但仅使用于血沉检验.
4,肝素浓度0.5-1.0%,每1ml可使3-5ml血液不凝固.可用于血液有机成分与无机成分的测定,需要冰箱保存.
作用原理:
EDTA-NA2通过夺取血液中的钙离子,以阻止凝固.
草酸盐合剂与钙离子结合,形成草酸钙沉淀,以阻止凝固.
枸橼酸钠与钙离子形成非离子的可溶性化合物而阻止血凝。
肝素阻止血液中的凝血酶原形成凝血酶而阻止凝集.
常用的血液抗凝剂
1、1%肝素溶液0.1ml于试管内,旋转试管,使溶液均匀浸湿试管内壁,放入80~100℃烘箱烤干,每管能使5~10ml血液不凝。
急性血压实验时可在充满生理盐水的动脉套管内注入肝素20~25mg。
体内抗凝:500~1000u/kg。
市售的肝素注射液每1ml含肝素12500u(相当于肝素钠125mg,即1mg相当于100u)。
应置冰箱内保存。
2、枸橼酸钠3.8%的枸橼酸钠溶液1份可使9份血液不凝,用于红细胞沉降速率的测定。
因其抗凝血作用较弱而碱性较强,不适用于供化验用的血液样品。
做急性血压实验时则用5~7%的枸橼酸钠溶液。
3、草酸钾常用于供检验用血液样品的抗凝。
在试管内加饱和草酸钾溶液2滴(或10%溶液0.2ml),轻轻敲击试管,使溶液分散到管壁四周,置80℃以下的烘箱中烤干(烘烤温度过高,可使草酸钾分解为碳酸钾而失效),每管能使3~5ml血液不凝。
供钾、钙含量测定的血样不能用草酸钾抗凝。