植物样含氮量的测定浓硫酸双氧水法(运用半自动定氮仪)

植株全氮的测定1 主题内容与适用范围本标准规定了植株全氮测定的硫酸-过氧化氢消煮、碱化后蒸馏定氮的方法。

本标准适用于禾本科植株全氮含量的测定。

2引用标准GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法NY/T 297-1995 有机肥料全氮的测定3 方法原理植株样品用浓硫酸加双氧水消煮，使有机氮转化为铵盐。

铵盐经碱化后形成氨，经蒸馏将氨吸收到硼酸溶液中。

以甲基红—溴甲酚绿为指示剂，用标准酸滴定，测定植株中的全氮含量（不包括全部硝态氮）。

4 试剂所有试剂除注明者外，均为分析纯。

分析用水应符合GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法三级水的规格。

4.1 硫酸（GB/T 625）。

4.2 30%过氧化氢（GB 6684）。

4.3氢氧化钠：40%，（m/V）溶液称取40g氢氧化钠（GB 629 分析纯）溶于100mL水中。

4.4硼酸：2%（v/m）溶液20g硼酸（GB 628）溶于1L约60℃去离子水中，冷却后再用稀碱调节溶液pH至4.5。

使用前每升硼酸溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂20mL，并用稀酸或稀碱调节至微红色，此时该溶液的PH值为4.5。

4.5甲基红-溴甲酚绿混合指示剂0.5g溴甲酚绿(HG 3-1220)和0.1g甲基红(HG 3-958)于研钵中，加少量95%乙醇研磨至指示剂全溶为止，最后加95%的乙醇至100mL。

4.6硫酸标准液[c（1/2 H2SO4）=0.02mol/L]（GB 601）。

5 仪器通常实验室仪器和5.1消煮管：50mL或100mL。

5.2消煮炉或可调电炉：1000W。

5.3弯颈小漏斗：￠2cm。

5.4 凯氏定氮仪：全自动或半自动。

5.5分析天平：感量为0.1mg。

5.6移液管：5，10mL。

6 检试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后，按四分法缩减至100g，粉碎，籽粒全部通过0.25mm（秸秆通过0.5mm）孔径筛，装入样品瓶备用。

植株全氮、磷、钾测定方法‎一、植物全氮测‎定（一）H2SO4‎-H2O2消‎煮法1、适用范围本方法不包‎括硝态氮的‎植物全氮测‎定,适合于含硝‎态氮低的植‎物样品的测‎定。

2、方法提要植物中的氮‎、磷大多数以‎有机态存在‎,钾以离子态‎存在。

样品经浓H‎2S O4和‎氧化剂H2‎O2消煮,有机物被氧‎化分解,有机氮和磷‎转化成铵盐‎和磷酸盐,钾也全部释‎出。

消煮液经定‎容后,可用于氮、磷、钾的定量。

采用H2O‎2为加速消‎煮的氧化剂‎,不仅操作手‎续简单快速‎,对氮、磷、钾的定量没‎有干扰,而且具有能‎满足一般生‎产和科研工‎作所要求的‎准确度。

但要注意遵‎照操作规程‎的要求操作‎,防止有机氮‎被氧化成N‎2气或氮的‎氧化物而损‎失。

3、试剂（1）硫酸(化学纯,比重1.84);（2）30% H2O2(分析纯)。

4、主要仪器设‎备。

消煮炉，定氮蒸馏器‎。

5、操作步骤称取植物样‎品(0.5mm)0.3～0.5g(称准至0.0002g‎)装入100‎m l开氏瓶‎或消煮管的‎底部,加浓H2S‎O45ml‎,摇匀(最好放置过‎夜),在电炉或消‎煮炉上先小‎火加热,待H2SO‎4发白烟后‎再升高温度‎,当溶液呈均‎匀的棕黑色‎时取下。

稍冷后加班‎10滴H2‎O2(3),再加热至微‎沸,消煮约7～10min‎,稍冷后重复‎加H2O2‎,,再消煮。

如此重复数‎次,每次添加的‎H2O2应‎逐次减少, 消煮至溶液‎呈无色或清‎亮后,再加热10‎m in,除去剩余的‎H2O2。

取下冷却后‎,用水将消煮‎液无损地转‎移入100‎m l容量瓶‎中,冷却至室温‎后定容(V1)。

用无磷钾的‎干滤纸过滤‎,或放置澄清‎后吸取清液‎测定氮、磷、钾。

每批消煮的‎同时,进行空白试‎验,以校正试剂‎和方法的误‎差。

6、注释（1）所用的H2‎O2应不含‎氮和磷。

H2O2在‎保存中可能‎自动分解,加热和光照‎能促使其分‎解,故应保存于‎阴凉处。

3 方法原理样品用浓硫酸加过氧化氢消化，将有机氮转化为铵盐,在碱性条件下蒸馏,经硼酸吸收溶液吸收，用硫酸标准溶液滴定，测定植株全氮含量.4 试剂和溶液所有试剂除注明者外，均为分析纯.分析用水应符合GB/T 6682中至少三级水的规格要求.试验中所需标准滴定溶液、制剂及制品，在没有注明其它要求时均按GB/T 601、GB/T 603之规定制备。

4.1 硫酸:ρ（H2SO4）=1.84g/mL。

4。

2 过氧化氢:φ（H2O2）≥30%。

4.3 氢氧化钠溶液：c（NaOH)=10mol/L。

4.4 氢氧化钠溶液:c（NaOH）=0。

1mol/L；4。

5 硼酸吸收溶液：20g硼酸溶于950mL约60℃的水中，冷却至室温后,每升硼酸溶液中加入甲基红–溴甲酚绿混合指示剂（4.7）20mL，并用氢氧化钠溶液（4。

4)调节至微红色(pH约4.5），定容至1L。

4.6 硫酸标准滴定溶液：c（1/2H2SO4）=0。

02mol/L。

4。

7 甲基红–溴甲酚绿混合指示剂：将0。

099g溴甲酚绿和0.066g甲基红于研钵中，加少量乙醇（体积分数为95%）研磨至指示剂全溶为止，最后用乙醇（体积分数为95%）定容至100mL.5 仪器设备5.1 凯氏定氮仪：全自动或半自动型。

5.2 消煮炉：温度可达400℃,200℃～400℃温度范围内，温差不大于±3℃。

5。

3 分析天平：感量0.1mg.5。

4 容量瓶：100mL。

5。

5 弯颈小漏斗：直径2cm。

5。

6 移液管：10mL。

5。

7 滴定管:25mL、50ml.6 分析步骤警告——使用本标准的工作人员应有正规实验室工作的实践经验。

本标准未指出所有可能的安全问题.使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

6.1 试样溶液制备称取按DB/T XXXX操作所得实验室样品0。

5g（精确至0。

0001g），置于消煮炉所配消煮管底部（勿将样品粘附在瓶壁上）。

1 植株氮、磷、钾测定（H2SO4—H2O2消煮法）一．仪器：三角瓶小弯颈漏斗100mL容量瓶二．试剂：1.浓硫酸2.过氧化氢三．操作步骤：称取烘干、磨碎植物样品0.5xxxg左右，置于150mL小口三角瓶里，（或消煮管里）滴入少许水湿润样品，然后，加8mL浓硫酸轻轻摇匀，（最好放置过夜），瓶口放一弯颈小漏斗，在电炉（或消煮炉）上先小火消煮，待硫酸分解冒大量白烟后，再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下，（三角瓶上没有什么杂物）稍冷后加10滴过氧化氢，摇匀，再加热至微沸，消煮约5分钟取下，稍冷后，重复加过氧化氢（每次减少2滴）再消煮，直到消煮溶液呈无色或清亮后，取下，冷却。

用少量水冲洗弯颈漏斗，洗液流入三角瓶，将消煮液无损地洗入100mL容量瓶中，用水定容，摇匀。

放置澄清后供氮、磷、钾测定。

同时做空白试验。

四．注意事项：1.加过氧化氢时，直接滴入瓶底溶液中，否则将影响N、P、K的比色测定。

2.过氧化氢不宜过早加入，每次用量不可过多，加入后的消煮温度不要太高，只要保持消煮液微沸即可。

1.1 植株全氮测定（定氮仪法）一．试剂：1. 甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红放到玛瑙研钵中混合加入100mL乙醇（95%乙醇），研磨至指示剂全部溶解。

（装滴瓶）2. 2%硼酸溶液：20g硼酸溶于1L水中（P H4.5—5.5之间）。

3. 10 N氢氧化钠：400g氢氧化钠溶于1L水中。

4. 0.2N硫酸标准溶液的配制及标定：吸6mL浓硫酸置于1L容量瓶用水定溶。

标签上写0.2N硫酸。

然后，标定，用三个150mL三角瓶分别称（经1600C烘干2小时）无水碳酸钠0.2xxxg左右,分别加30mL水溶解，分别加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，（用尖端没有玻璃球的那一种酸式滴定管滴定）用0.2N硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为紫红色，再煮沸2—3分钟逐尽CO2，冷却后继续滴定至溶液突变为葡萄酒红色为终点。