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光激化学发光在光电子学中的应用与发展光激化学发光是一种利用光能激发化学物质发出荧光的现象，其在光电子学领域中具有广泛的应用前景。
本文将探讨光激化学发光的基本原理、应用情况以及未来的发展方向。
一、光激化学发光的基本原理光激化学发光是指通过外界光能的激发，使得化学物质发生激发态与基态之间的能量转换，并伴随着光子的辐射发出荧光。
这种现象是光电子学领域中的一个重要研究对象，研究其基本原理对于实现新型光电子器件的设计与制备具有重要意义。
二、光激化学发光的应用情况1. 生物医学领域：光激化学发光在生物标记、病理诊断和生物传感等方面具有重要的应用价值。
通过将特定的化学物质与生物分子结合，可以实现对生物分子的高灵敏度检测。
此外，光激化学发光还可用于荧光显微镜成像，提高生物组织的可视化效果。
2. 光电子器件：光激化学发光在光电子器件中的应用日益广泛。
例如，光激化学发光可用于LED显示屏的背光源，提高显示屏的亮度和颜色还原度。
同时，光激化学发光还可用于激光器、太阳能电池等器件的制备，提高器件的性能和效率。
3. 环境监测：光激化学发光可应用于环境监测领域，实现对污染物的快速检测和监测。
利用特定的化学发光反应，可以对大气中的有害气体、水中的污染物等进行高效、敏感的检测，为环境保护和污染治理提供技术支持。
4. 安全防伪：光激化学发光在安全防伪领域有着重要的应用。
通过使用特定的化学物质和发光标记技术，可以制备防伪标签、防伪图案等，用于商品的真伪鉴别、身份证明等方面，提高产品的安全性和可信度。
三、光激化学发光的发展方向1. 材料研究：进一步深入研究光激化学发光材料的性能与结构之间的关系，开发出更高效、更稳定的发光材料，以满足不同应用领域的需求。
2. 技术创新：发展更加便捷、高效的光激化学发光激发技术，探索新型的光源和激发方式，提高光激化学发光的发光效率和响应速度。
3. 应用拓展：加强与其他学科的交叉合作，将光激化学发光技术与微纳制造、生物医学、环境监测等领域相结合，开发出更多新颖的应用方向。
化学发光免疫分析技术在临床诊断中的应用化学发光免疫分析技术是一种基于特定抗体和荧光标记物的检测方法，通过测量样品中的荧光强度，可对特定生物分子（如蛋白质、激素、抗体等）进行定量检测。
这种技术广泛应用于医学领域，特别是在临床诊断和药物研发方面，发挥着重要的作用。
一、化学发光免疫分析技术的原理与优势化学发光免疫分析技术是基于光致化学反应的原理，当样品中存在特定生物分子与荧光标记物结合时，激发荧光标记物时产生能量，并在光致化学反应的过程中释放荧光。
通过检测荧光信号的强度，可以测量样品中特定生物分子的含量。
与传统的ELISA（酶联免疫吸附测定法）相比，化学发光免疫分析技术具有很多优势。
首先，其检测灵敏度高，可以检测到非常低浓度的生物分子，能够提高疾病诊断的准确性。
其次，化学发光免疫分析技术具有高度的特异性，可以仅检测到特定的生物分子，而不受其他交叉反应的影响。
此外，该技术快速、可靠，自动化程度高，具有批量分析的能力，大大提高了分析效率和精度。
二、化学发光免疫分析技术在临床诊断中的应用非常广泛，例如：1. 甲状腺功能检测甲状腺功能检测是临床常用的一项检查，常用T3、T4、TSH等指标来确定甲状腺功能的异常。
化学发光免疫分析技术可以用来准确测量这些指标的含量，从而确定甲状腺功能异常的类型和严重程度。
2. 肝功能检测肝功能检测可通过检测ALT、AST、ALP、GGT等多种指标来确定肝功能异常。
使用化学发光免疫分析技术，可以快速、准确地测量这些指标的含量，以及检测血清中的乙型肝炎病毒等。
3. 细胞因子水平检测细胞因子是调节免疫反应的重要分子，其水平的异常会导致许多免疫性疾病的发生。
化学发光免疫分析技术可以用来检测细胞因子的含量，从而确定免疫反应的程度和类型。
4. 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测是诊断肿瘤的重要手段之一，常用于癌症的早期筛查和治疗效果监测。
化学发光免疫分析技术可以用来检测血液或尿液中特定肿瘤标志物的含量，从而提高癌症的检测准确率和治疗效果监测的精度。
化学发光免疫分析技术及其在临床检验中的应用化学发光免疫分析技术，实质上就是将免疫分析方法与化学发光有机结合在一起的一项技术，也是现阶段最为先进的一项标记免疫分析技术，具备免疫分析的高选择性与化学发光的高灵敏度，在药物分析与临床监测中的应用范围非常广泛，尤其是在临床检验中的应用。
本文主要针对化学发光免疫分析技术进行深入分析，探究化学发光免疫分析技术在临床检验中的应用方法与效果。
Abstract：Chemiluminescence immunoassay technology，essentially immune analysis method in combination with chemical luminescence of a technology，is also a mark immune analysis at present the most advanced technology，with high selectivity and chemiluminescence immune analysis of high sensitivity，and its application in pharmaceutical analysis and clinical monitoring scope is very broad，especially the application in the clinical laboratory.This paper focuses on analyzing the chemiluminescence immunoassay technology，explore the chemiluminescence immunoassay technology application in the clinical test methods and results.Key words：Chemiluminescence immunoassay technology；Clinical trial；Application临床检验过程中，经常需要检测与分析一系列表征性物质，以此对疾病进行判断[1]。
化学发光免疫分析方法与应用进展【摘要】化学发光免疫分析在药品检验、食品检验等多领域广泛应用。
本文对当前化学发光免疫分析方法以及发展进行分析，以供参考。
【关键词】化学发光免疫；应用；发展一、前言化学发光免疫分析方法灵敏度高、适用范围广泛受到了人们的认可，在医学、食品、药品等众多领域广泛使用。
传统的免疫分析需要的培育时间长，因此，提高分析的时间和效率是当前研究人员重点解决的问题。
二、化学发光免疫分析法化学发光分析是根据化学反应产生的辐射光的强度来确定物质含量的分析方法。
化学发光免疫分析是将化学发光系统与免疫反应相结合，用化学发光相关的物质标记抗体或抗原，与待测的抗原或抗体反应后，经过分离游离态的化学发光标记物，加入化学发光系统的其它相关物产生化学发光，进行抗原或抗体的定量或定性检测。
化学发光免疫分析中使用最多的4类标记物为鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物，吖啶酯衍生物，过氧化物酶和碱性磷酸酶。
以酶为标记物的化学发光仍然是化学发光免疫分析的主流，辣根过氧化物酶(HRP)与碱性磷酸酶(ALP)是两种常见的标记酶，均有其相应的化学发光底物，在临床检验中有广泛应用，开发催化活性更高、稳定性更好、发光动力学曲线更符合免疫分析的酶和底物是化学发光免疫分析的研究热点之一。
三、PEC免疫分析的基本装置PEC分析需要在光电检测系统中实现.该系统主要包括激发光源、吸收池以及三电极体系的电化学装置.在光激发条件下,电解质溶液中光电活性材料的表面将发生电荷的分离与跃迁,电极表面发生一定的氧化还原反应从而在外电路产生电流,这一过程由电化学装置所记录并用于特定检测对象的测定.PEC免疫分析的基本原理是基于免疫反应前后光电流信号的变化。
在一个简单典型的PEC免疫系统中,免疫探针分子(通常是特异性的抗体或抗原)首先被固定在光电换能器(transducer)表面作为识别元件(recognitionelement),抗原(或抗体)作为待测物与探针分子在电极表面形成免疫复合物,导致光电流信号的增强或降低.本节将介绍PEC免疫传感界面的基本构建过程,主要包括光电极的选择与制备、免疫探针分子的固定等重要步骤。
光激化学发光在生物医学成像中的应用与进展光激化学发光，作为一种重要的荧光标记技术，在生物医学成像领域具有广泛的应用前景。
本文将探讨光激化学发光在生物医学成像中的应用与进展。
一、光激化学发光技术简介光激化学发光是一种基于可见光或近红外光激发荧光物体发射荧光的技术。
其原理是通过光激活荧光分子内的激发态，使其产生荧光发射。
由于荧光发光的特异性和高灵敏度，光激化学发光技术被广泛应用于生物医学成像领域。
二、光激化学发光在生物医学成像中的应用1. 细胞成像光激化学发光技术可以用于对细胞进行高分辨率成像。
通过选择合适的荧光标记剂，可以实现对细胞器和分子的准确标记。
这不仅有助于研究细胞组织的结构与功能，还可以用于研究细胞的病理变化。
2. 活体小动物成像光激化学发光技术在活体小动物成像中起到了重要作用。
利用激光光源和高灵敏度的光学成像系统，可以实现对小动物体内组织和器官的高分辨率三维成像。
这为深入研究小动物的生理和病理过程提供了强大的工具。
3. 荧光探针成像光激化学发光技术被广泛用于荧光探针成像。
荧光探针是一种特殊的荧光标记剂，通过与目标分子的结合发出特定的荧光信号。
利用光激化学发光技术，可以实现对生物体内各种分子和生物过程的高灵敏度检测和成像。
4. 癌症诊断和治疗光激化学发光技术在癌症诊断和治疗中具有巨大潜力。
通过选择合适的荧光标记剂和针对靶向分子的光敏剂，可以实现对癌细胞的高灵敏度诊断和定位。
同时，光激化学发光技术也可以用于光动力疗法，通过激活局部的光敏剂，来杀灭癌细胞。
三、光激化学发光在生物医学成像中的进展随着技术的不断发展，光激化学发光在生物医学成像中取得了许多重要进展。
1. 提高成像分辨率通过改进荧光标记剂和光学成像系统，光激化学发光技术在成像分辨率上取得了较大突破。
新型的荧光探针和高分辨率显微镜的应用，使得生物体内微小结构和细胞器的成像更加清晰和精准。
2. 增强成像深度针对传统光激化学发光技术在成像深度上的限制，研究人员利用近红外光等长波长的光激发方式，成功增强了光激化学发光技术的成像深度。
化学发光免疫分析技术及其应用研究进展作者：姚彦红张芳妮来源：《中国保健营养·下旬刊》2014年第03期[摘要] 目前化学发光免疫分析技术在医学以及食品安全检测中都有着较多的应用，本文主要通过介绍化学发光免疫分析技术的基本原理，来介绍化学发光免疫技术的应用以及化学发光免疫分析技术的研究进展。
[关键词] 化学发光免疫分析技术；研究进展；应用章编号：1004-7484（2014）-03-1787-01化学发光免疫分析起源于1977年，化学发光免疫分析主要利用了化学发光测定技术和免疫反应，化学发光测定技术有着非常高的灵敏性同时免疫反应有着非常高的特异性，通过两者的结合使得化学发光免疫技术成为现今最新的免疫分析技术。
化学发光免疫分析技术较其他免疫分析技术而言拥有着高灵敏度、价格低以及操作简便等多种优点，正因为这些优点使得化学发光免疫分析技术被广泛的运用。
1 化学发光免疫分析技术的基本原理化学发光免疫分析最关键的步骤就是化学发光以及免疫，免疫分析技术就是对分析的抗原进行标记，而化学发光分析技术就是对所产生的微观反应进行检测，以此来达到分析的目的。
免疫分析就是利用抗原与抗体之间的特异性结合所产生的明显现象来检测所检测物质，而采用标记免疫分析就是通过对抗原进行放射性的标记，这样就能够更好的检测微观物质所发生的化学反应[1]。
化学发光技术则是化学反应中的一种现象，化学反应必然伴随着能量的迁移，而具备能量的分子为了达到稳定的状态就要释放多余的能量，能量则是通过光形式释放出来，对所发出的光和能量迁移进行分析便可以知道内部所发生的化学变化。
2 化学发光免疫分析技术的应用由于化学发光免疫分析技术不仅拥有较好的灵敏度以及较高的自动化程度，而且其还有较高的精密程度，所以得到了较多的应用。
化学发光免疫分析技术在兽医学、临床医学以及食品分析中都得到了相当多的应用，下面将进行详细介绍。
2.1 化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用还处于早期阶段，因此没有得到较多的应用。
化学发光免疫分析技术的临床应用及研究进展【摘要】本文介绍了化学发光免疫分析技术的基本原理、分类及其在临床医学上的应用研究进展。
【关键词】化学发光免疫分析技术;基本原理;分类;应用近10多年来,当代生物技术的研究和应用取得高速发展的同时,也大大推动了化学发光免疫分析方法(CLIA))的更新换代速度。
化学发光免疫分析法(CLIA)是建立在放射免疫分析技术(RIA)理论的基础上,以标记发光剂为示踪物信号建立起来的一种非放射标记免疫分析法,具有灵敏度高、线性范围宽、仪器设备简单、操作方便、分析速度快和容易实现自动化和不污染环境等优点,特别是能在较短的时间内得到实验结果,因此深受检验医学工作者和临床医师的好评。
1 化学发光免疫分析的原理化学发光免疫分析技术的基本原理,化学发光免疫分析含有免疫分析和化学发光分析两个系统[1]。
免疫分析系统是将化学发光物质或酶作为标记物,直接标记在抗原或抗体上,经过抗原与抗体反应形成抗原-抗体免疫复合物。
化学发光分析系统是在免疫反应结束后,加入氧化剂或酶的发光底物,化学发光物质经氧化剂的氧化后,形成一个处于激发态的中间体,会发射光子释放能量以回到稳定的基态,发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测[2]。
根据化学发光标记物与发光强度的关系,可利用标准曲线计算出被测物的含量。
2 化学发光免疫分析的分类化学发光免疫分析根据应用发光体系应用于免疫分析中的方式不同可分为直接标记发光物质的免疫分析,酶催化化学发光免疫分析,电化学发光免疫分析(ECLIA)。
直接标记发光物质的免疫分析,目前常见的标记物主要为鲁米诺类和吖啶酯类化学发光剂。
3 化学发光免疫分析的临床应用CLIA已广泛应用于基础和临床医学的各个领域,成为替代RIA的首选技术。
Amersham公司针对AmerliteTM发光增强酶免疫分析系统研制出的试剂盒项目有甲状腺功能检测的促甲状腺素、三碘甲腺原氨酸、甲状腺素、甲状腺素结合球蛋白、游离甲状腺素,与性激素有关的有促黄体激素、促卵泡激素、人绒毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睾酮,以及其他方面的如癌胚抗原、铁蛋白、地高辛等。
化学发光免疫分析技术及其应用研究进展发表时间：2014-12-16T16:00:48.107Z 来源：《科学与技术》2014年第10期下供稿作者：岳伦[导读] 通过对化学发光免疫分析技术及其应用的相关研究，我们可以发现，该项技术的良好效果已经被普遍应用在临床检验与检测当中岳伦重庆热展建筑工程咨询服务中心重庆 400012【摘要】本文首先介绍了化学发光免疫分析技术的基本原理，分析了其基本装置。
在探讨化学发光免疫分析技术在临床检验中应用的基础上，研究了其应用进展。
【关键词】化学发光；免疫分析技术；应用；研究进展一、前言作为一项效果较为理想的分析技术，化学发光免疫分析技术近期得到了长足的发展。
研究该项技术的应用进展情况，能够更好地把握其运用动态，以更好地指导该项技术的实际应用。
本文从介绍该项技术的基本原理着手本课题的研究。
二、化学发光免疫分析技术的基本原理化学发光免疫分析技术是由免疫分析和化学发光分析两个系统构成的。
其中免疫分析是用标记物直接标记在抗原或抗体之上的，然后再经过抗原与抗体反应生成抗体免疫复合物，其中标记物可以是化学发光物质，也可以是某种酶。
化学发光免疫分析系统是在免疫反应结束后，加入氧化剂或酶的发光底物，待发光物质氧化后就会形成一个处于激发态的中间体，会发射光子释放能量以回到稳定的基态，发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测，其中被测物的含量就是根据化学发光标记物与发光强度的关系利用标准曲线计算出来的。
化学发光的原理是指分子或原子中的电子吸收能量后，发生能级跃迁而释放光子的过程，能级跃迁过程是电子从基态到激发态的过程，实现了从较低能级向较高能级的跃迁。
其中可以根据形成激发态分子的能量来源不同将发光过程分为化学发光、光照发光和生物发光。
化学发光又可分为直接化学发光和间接化学发光，若参加反应的物质是一个反应产物分子，且被激发到能发射光的电子激发态，那么这就是直接化学发光过程。
若参加反应的物质激发能传递到另一个未参加化学反应的分子D上，使D分子激发到电子激发态，D分子从激发态回到基态时发光，这种过程叫间接化学发光。
化学发光技术在免疫分析中的应用案例简介：化学发光技术是一种基于化学反应产生可见光的分析技术，广泛应用于生命科学、药物研发和临床诊断等领域。
本文将通过几个实际案例，探讨化学发光技术在免疫分析中的应用。
案例一：免疫发光法检测甲状腺功能甲状腺功能异常对人体健康有重要影响，因此准确测量甲状腺激素水平是临床诊断的关键。
传统方法使用辐射同位素来测量，但存在成本高、操作复杂等问题。
化学发光技术的应用为解决这些问题提供了新的选择。
该应用案例中，通过免疫发光法测量血清中的三碘甲状腺原氨酸(T3)和四碘甲状腺原氨酸(T4)的浓度。
首先，利用特定抗体与待测物结合形成免疫复合物；然后使用该免疫复合物激发化学发光物质；最后，通过检测化学发光物质的发光强度来判断甲状腺功能是否正常。
相比传统方法，免疫发光工艺更安全、灵敏度更高，且无需放射性物质。
该技术的出现大大简化了甲状腺功能测试的流程，提高了诊断的准确性。
案例二：化学发光免疫分析在癌症检测中的应用癌症早期诊断对治疗和预后有重要意义。
化学发光免疫分析技术的应用为癌症的早期筛查和确诊提供了新的方法。
以乳腺癌为例，化学发光免疫分析技术可以测量血清中肿瘤标志物Ca 15-3的浓度。
Ca 15-3是乳腺癌的常用指标，其浓度水平与肿瘤的大小和进展程度密切相关。
通过测量Ca 15-3的浓度，可以辅助医生进行乳腺癌的筛查和监测治疗效果。
此外，化学发光免疫分析技术还可以应用于其他类型的癌症检测，如肺癌、胃癌等。
通过测量血清中特定的肿瘤标志物，可以帮助医生评估癌症的早期风险及其进展情况，提供更精确的治疗方案。
案例三：药物免疫性检测药物免疫性检测是化学发光技术的又一个重要应用领域。
通过检测血清中特定药物的浓度，可以评估药物的吸收、代谢和排泄情况，为药物治疗提供指导。
以抗生素检测为例，化学发光技术可以测量血清中抗生素的浓度。
随着抗生素的广泛使用，耐药性成为严重的公共卫生问题。
通过检测血清中抗生素的浓度，可以判断患者是否在合适的剂量下使用抗生素，避免耐药性的产生。
浅谈化学发光免疫分析的研究进展建立在放射免疫分析技术理论基础上的化学发光免疫分析，是一种非放射标记免疫分析法，这种免疫分析方法主要以标记发光剂为示踪物信号建立起来。
近十年来在世界范围内发展迅速，它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。
1化学发光免疫分析技术的研究历史背景免疫分析的发展伴随着抗体制备技术的改进而不断提高。
美国科学家Yalow等人首先将标记技术引入免疫分析，他们首先用放射免疫分析法RIA进行测定胰岛素。
由于这种试验方法限制了试剂的寿命，难以获得长期稳定的检测标准，同时由于存在同位素的使用，不仅会损害操作人员身体健康，也会带来污物处理困难的问题。
为了找到更为合理的免疫分析法成为以后20年来研究的热点。
直到70年代末，国外有学者将免疫反应与化学发光测定技术相结合，这种集高灵敏度和高特异性的技术称之为化学发光免疫分析法，化学发光免疫技术优势比较明显，主要有以下几点：第一，灵敏度高，检测限范围更精准;第二，自动化程度高，并且没有放射性辐射危害;第三，发光标记物稳定，有效期长，同时应用范围宽，对于分子大小不同的抗原、半抗原及抗体都可检测。
因此，化学发光免疫分析在临床、卫生、食品、环保和军事等领域正被越来越多地用于激素、蛋白质、肿瘤、毒物、病毒等成分检测。
2免疫分析基本原理由免疫反应系统和化学发光分析系统两个关键部分组成了化学发光免疫分析的基本原理，化学发光分析系统主要氧化以及催化的作用于化学发光物质，产生一个激发态的中间体，在处于稳定状态时，发射出光子，然后通过测量仪器测量光量子。
通过标记物与发光强度的关系，进而测出被测物质含量。
而免疫反应系统是将发光物质在抗原或抗体上直接标记。
3化学免疫分析分类化学发光免疫分析法主要以标记法的不同来进行分类，目前习惯上将免疫分析法主要分为两类，第一主要是标记免疫分析法，其次是酶免疫分析法，前者是以化学发光标记，后者是以酶标记，以化学发光底物作为信号试剂来进行发光，其原理是不相同的。
本科毕业论文题目：化学发光免疫分析技术及在临床检验中的应用学院：化学与环境工程学院班级：2011级应用化学2班姓名：王俊烽指导教师：李小花职称：讲师完成日期：2015年05 月22 日化学发光免疫分析技术及在临床检验中的应用摘要：化学发光免疫分析技术（CLIA）是把免疫反应和化学发光检测方法结合的一种分析技术。
其中免疫反应的特异性和灵敏度都很高。
CLIA是在酶联免疫分析、放免疫分析和荧光免疫分析后面发展起来的一种检测技术。
由于其具有操作简单，标记方便，稳定度和检测灵敏度高，速度快，对环境没有污染等优点因此CLIA在临床上受到医学检验者和医生的一致好评。
关键词：化学发光免疫分析技术；基本原理；临床；医学检验CLIA Technology And Its Application in The Clinical LaboratoryAbstract：Chemiluminescence immunoassay (CLIA) is an analytical technique the immune response and chemiluminescent detection methods combined. Which the immune response is very high specificity and sensitivity. CLIA is the enzyme-linked immunoassay, put immunoassay and fluorescence immunoassay later developed a detection technology. Because of its simple, easy to mark, high stability and sensitivity, speed, no environmental pollution, etc. Therefore CLIA praise medical tests and doctors at the clinic.Key words :chemiluminescent immunoassay; fundamental; clinical; medical laboratory目录1. CLIA的基本简介 ····················································错误!未定义书签。
化学发光免疫分析技术及临床检验中的应用化学发光免疫分析，是一种新型的免疫分析技术，广泛应用于临床检验、环境监测、药物以及食品工业分析等各个领域，结合了化学发光法和免疫分析法，有着灵敏度高、选择性高的优点。
本文主要围绕其在临床检验中的应用来做一个研究与分析，确定其临床应用价值。
标签：化学发光免疫分析技术；临床检验；应用在现代生物医学中，有一门检测分析技术是不可或缺的，那就是免疫分析。
而自1977年化学发光技术与之相结合之后，便逐渐发展成为了一种克服了放射性污染的检测技术，比酶免疫分析更灵敏，比荧光免疫测定更易推广。
1简述化学发光免疫分析技术1.1化学发光免疫分析技术的简介化学发光免疫分析，由两部分结合而成，一是化学发光测定技术，其具有高灵敏度；二是免疫分析，其具有高特异选择性。
所以，此等技术同时具备了这两种特性。
化学发光免疫分析的应用前景非常广泛，适用的领域包括了临床检验、环境监测、药物及食品工业分析等，一般是对各种抗原、抗体和半抗原进行免疫测定。
化学发光免疫分析，即chemiluminescence immunoassay，常常被称为CLIA，这一名称是在1980年，首次将之应用于检测抗原或抗体之后出现的。
根据抗原抗体等标记物的不同，化学发光免疫分析也有不同的分类，一般标记物有化学发光物质、酶以及荧光物质等。
其优点除了灵敏度高和选择性高之外，还有线性范围比较宽、没有放射性污染、全自动化以及标记物有效期较长等等[1]。
1.2化学发光免疫分析技术的原理想要深入了解化学发光免疫分析技术的原理，就需要先分别了解一下化学发光和免疫分析的基本原理。
化学发光指的是在特定的化学反应之中化学物质产生的光辐射，其反应包含了两个过程，分别是化学激发和发光过程。
如下图所示，一些激发态分子能量会在这一过程中消失。
正是因为化学发光的强度和速率是有着关联性，影响到反应速率的因素就可以作为依据来建立测定方法，于是化学发光就能够进行分析测定。
均相光激化学发光免疫分析技术的研究进展张存亮;聂福平;王昱;杨俊;李应国;蔡家利【摘要】The new technology of amplified luminescent proximity homogeneous assay linked immunosorbent assay is based on the development of luminescent oxygen channeling immunoassay technology, and it is characterized with more sensitivity、homogeneity、low back ground、no-wash and less sample size. The technology has been used in the detection of biomarkers、kinases、antigens、antibodies、protein-protein interactions and in the research of High-throughput screening and disease diagnosis. The technology will be applied and developed in more regions with progress in science.%均相光激化学发光免疫分析技术是一种基于纳米微珠的化学发光的新型技术，其具有更高的敏感度、均一性、背景低，且不用洗涤及样本需求量少等特点。
该技术可用于生物标志物、激酶及抗原抗体的检测，蛋白：蛋白相互作用的检测，高通量分析的研究及疾病诊断等方面。
优化和发展均相光激化学发光免疫分析技术将会在更多研究领域中得到应用。
【期刊名称】《中国动物检疫》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】3页(P46-47,50)【关键词】均相光激化学发光免疫分析技术;检测;发展【作者】张存亮;聂福平;王昱;杨俊;李应国;蔡家利【作者单位】重庆理工大学，重庆南岸400000; 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心，重庆江北400020;重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心，重庆江北400020; 重庆大学，重庆沙坪坝400030;重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心，重庆江北400020; 重庆大学，重庆沙坪坝400030;重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心，重庆江北400020;重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心，重庆江北400020;重庆理工大学，重庆南岸400000【正文语种】中文【中图分类】R446.6均相光激化学发光免疫分析（AlphaLISA）技术起源于20世纪90年代问世的光激化学发光（LOCI）技术[1]。
光激化学发光免疫检测技术与临床应用研究进展高云朝近半个世纪以来，临床化学微量免疫分析技术从放射免疫分析、酶联免疫分析，到化学发光免疫分析，经历了检测方法的革新与技术的进步，医学检验质量和数量得到了迅速的提高；20世纪90年代问世的LOCI(Luminescent oxygen channeling immunoassay，LOCI)技术以其独特的检测方法，实现了均相、一步、免清洗和高通量的检测，并以其高灵敏度和特异性等突出的检测性能为世人所瞩目。
该技术最初由Ullman等[1]在1994年报道，由美国德灵公司研发成功，后由PerkinElmer公司生产相关试剂(AlphaScreen TM)，西门子公司生产免疫诊断试剂（LOCI）。
国产光激化学发光免疫检测系统由博阳生物科技（上海）有限公司建立在该技术之上，并称之为LiCA（Light Initiated Chemiluminesence Assay，LiCA TM）。
仅此对该技术基本原理和特点，以及目前国内外研究现状综述如下。
一、技术原理和特点1．LOCI检测原理：基于非竞争的免疫检测方法类似于ELISA，而基于的竞争的免疫检测方法类似于放射免疫分析法。
以前者为例，双抗体夹心结构(抗体包被发光珠-抗原-生物素化抗体)与链霉亲和素包被的感光珠，通过链霉亲和素与生物素结合到一起，并拉近发光珠和感光珠的间距。
然后，感光珠在680nm激发光的照射下，使周围氧分子激发变成单线态氧(1△g O2，带有1个激发态电子的氧分子)，后者扩散至发光珠并传递能量，发光珠发射520-620 nm荧光信号并被光子计数器探测。
此过程中，单线态氧的半衰期只有4μs，且最大扩散距离大约200nm。
而一般而言，当体系中不存在抗原抗体复合物时，发光珠和感光珠之间的距离大于200nm。
因此，此三级发光系统只有结合态发光珠才能传递单线态氧的能量并发光；非结合态发光珠由于相距较远，无法获得能量而不发光[1-6](图1)。
浅谈化学发光免疫分析方法与应用进展作者：柳晖来源：《中国科技博览》2016年第14期[摘要]随着社会技术的不断进步，在临床、环境、食品、药物检测等领域不断地被运用新技术。
化学发光免疫分析法因为其具有选择性良好、灵敏度较高、分析速度较快而且设备简单等特点被广泛的应用。
在实际应用中，进行测定的往往是一些复杂样品或者是低丰度分析物样品，而一些经典商品化的免疫分析方法不仅需要消耗的样品多、而且成本高、周期长，远不能满足需求，为此，建立一个低成本、高效率、高灵敏度的免疫检测方法非常的必要。
化学发光分析方法因为满足与现实应用的要求，所以获得了广泛的发展，本文就化学发光免疫分析方法进行分析，并对其前景进行展望。
[关键词]化学发光免疫分析；免疫传感；快速检测中图分类号：TP317 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）14-0049-01近年来，化学发光免疫分析法备受人们的青睐，主要是因为此方法具有高灵敏度、强特异性、广适用面和设备简单等特点。
在临床医学、食品药物等领域，此方法被广泛应用于抗原与抗体间的识别。
生物分子的体积大、扩散率比较小，所加之对识别微电具有空间阻碍作用，所以受到传质速率和反应动力学控制的免疫反应速率一般都会比较低。
传统的免疫分析方法需要的温育时间比较长，大大限制了样品测试的通量和适用范围。
所以为了缩短免疫分析的时间，需要不断的进行技术创新，从而扩展化学发光免疫分析的应用范围。
一、化学发光免疫分析法化学发光分析是一种利用化学反应产生的辐射光的强度来进行物质含量确定的分析方法。
这种分析是化学发光系统和免疫反应的完美结合，主要是利用化学发光的相关物质对抗体或者是抗原进行标记，等到与需要进行测定的抗原或者抗体反应之后，再利用分离游离态化学发光物质的方法，使得加入到化学发光系统中的其他相关物产生化学发光，然后进行抗原或者是抗体的定量或者是定性的检测。
在化学发光免疫分析中，主要使用4类标记物，分别是异鲁米诺及其衍生物、过氧化物酶和碱性磷酸酶、鲁米诺和吖啶酯衍生物。
临床免疫分析发展趋势及化学发光技术应用细胞和分子生物学的快速发展，使得免疫学分析技术得以广泛应用于临床诊断和治疗。
免疫分析是一种通过检测机体内特定物质与免疫分子（如抗原和抗体）相互作用来诊断和监测疾病的方法。
近年来，这一领域取得了重大的进展，特别是化学发光技术的引入，为临床免疫分析带来了革命性的变化。
化学发光技术是一种利用化学反应产生可见光或近红外光来检测免疫分子相互作用的方法。
它与传统的光学检测方法相比，具有更高的灵敏度和更宽的动态范围。
在临床免疫分析中，化学发光技术已被广泛应用于检测血清中的肿瘤标志物、生物分子、感染和免疫指标等。
一方面，随着科学技术的不断进步，化学发光技术的灵敏度不断提高，逐渐成为临床免疫分析的新宠。
对于低浓度血清标志物的检测，传统的光学检测方法常常无法满足需求，而化学发光技术可以通过放大光信号以提高检测的灵敏度。
此外，由于化学发光技术使用化学反应代替物理性质（如吸光度或荧光）的测量，大大减小了潜在的非特异性干扰。
这使得化学发光技术在临床诊断中的应用变得更加可靠和精确。
另一方面，化学发光技术的应用也在不断拓展，推动了临床免疫分析的发展。
目前，已有许多新型的化学发光探针被开发出来，用于检测不同类型的分子和细胞。
这些探针能够通过与特定的抗体或配体结合，产生光信号，从而实现对生物分子的高灵敏度检测。
例如，一种名为纳米颗粒封装的化学发光探针，可以通过与抗原-抗体相互作用，引发化学反应并放出可见光。
这种探针不仅能够在血液和尿液中检测疾病标志物，还可以在组织和细胞水平上实现定位检测。
此外，化学发光技术的应用还拓宽了临床免疫分析的领域。
传统的免疫分析主要集中在体外诊断，即通过检测血清或其他体液中的标志物来诊断疾病。
然而，随着化学发光技术的发展，越来越多的研究者开始探索其在体内免疫分析中的应用。
例如，可以通过向体内注射化学发光探针，在体内实现特定分子的定位检测。
这种方法不仅可以用于监测疾病进展，还可以用于评估药物疗效和药物代谢等。
光激化学发光免疫检测技术与临床应用研究进展高云朝近半个世纪以来，临床化学微量免疫分析技术从放射免疫分析、酶联免疫分析，到化学发光免疫分析，经历了检测方法的革新与技术的进步，医学检验质量和数量得到了迅速的提高；20世纪90年代问世的LOCI(Luminescent oxygen channeling immunoassay，LOCI)技术以其独特的检测方法，实现了均相、一步、免清洗和高通量的检测，并以其高灵敏度和特异性等突出的检测性能为世人所瞩目。
该技术最初由Ullman等[1]在1994年报道，由美国德灵公司研发成功，后由PerkinElmer公司生产相关试剂(AlphaScreen TM)，西门子公司生产免疫诊断试剂（LOCI）。
国产光激化学发光免疫检测系统由博阳生物科技（上海）有限公司建立在该技术之上，并称之为LiCA（Light Initiated Chemiluminesence Assay，LiCA TM）。
仅此对该技术基本原理和特点，以及目前国内外研究现状综述如下。
一、技术原理和特点1．LOCI检测原理：基于非竞争的免疫检测方法类似于ELISA，而基于的竞争的免疫检测方法类似于放射免疫分析法。
以前者为例，双抗体夹心结构(抗体包被发光珠-抗原-生物素化抗体)与链霉亲和素包被的感光珠，通过链霉亲和素与生物素结合到一起，并拉近发光珠和感光珠的间距。
然后，感光珠在680nm激发光的照射下，使周围氧分子激发变成单线态氧(1△g O2，带有1个激发态电子的氧分子)，后者扩散至发光珠并传递能量，发光珠发射520-620 nm荧光信号并被光子计数器探测。
此过程中，单线态氧的半衰期只有4μs，且最大扩散距离大约200nm。
而一般而言，当体系中不存在抗原抗体复合物时，发光珠和感光珠之间的距离大于200nm。
因此，此三级发光系统只有结合态发光珠才能传递单线态氧的能量并发光；非结合态发光珠由于相距较远，无法获得能量而不发光[1-6](图1)。
注：光激化学发光检测时，a 图为感光珠和发光珠结合时则发光，b 图为感光珠和发光珠不结合则不发光图1 光激化学发光检测感光珠和发光珠的原理示意图2．技术特点：光激化学发光技术的特点是基于偶联在供体-受体微球表面的发光物质经光激发和能量传递而诱导发光，能量传递依赖于受体-配体结合所致的供体-受体微球相互靠近而实现，而常见的受体-配体系统如抗原-抗体、生物素-亲和素、蛋白酶-底物。
其采用纳米级微粒作为固相载体，增加了反应的比表面积，极大地提高了检测灵敏度和缩短了反应时间；恰当的荧光波长及时间分辨计数模式，有效提高了信噪比，增加了特异性[1-2]；均相反应模式实现了一步、免清洗检测。
检测过程不易受到荧光淬灭、样本常见干扰物质、pH值、离子强度及温度等因素的影响，保证了检测的稳定性[7-9]。
样本用量少(一般2.5μl)，易于实现机器的小型化和样本的高通量检测[10]，且有利于基于小动物的基础研究[7]。
二、国内外研究现状和应用光激化学发光技术应用广泛，涵盖蛋白质、多肽激素、核苷酸等领域，在受体／配体、蛋白质／蛋白质、蛋白质／DNA之间相互作用方面的研究成果，对发病机制的研究和新药研发具有重要指导意义。
(一)小分子半抗原1．地高辛：临床检验急症项目要求准确而快速的结果回报(TAT)，。
目前，全自动化学发光法的反应时间一般为18 min；LOCI法通常只需要5 min，甚至可以缩短至l min，且不明显影响其检测性能，有效检测范围为0.5-5μg／L[2]。
2．环孢霉素A(CsA)：CsA是接受器官移植时通常采用的免疫抑制剂，其在不同个体的生物利用率和药代动力学不同，不同个体对其敏感性和耐受性也存在较大差异。
因此，血药浓度检测及药代动力学研究，对器官移植的成败非常重要。
传统方法(高压液相、放免分析等)一般在全血样本溶解后，需要离心去除细胞碎片；LOCI方法可直接在上述混合溶液中进行，由此简化了操作步骤，减少了实验误差，其有效检测范围为0-750μg／L[2]。
3．其他：如茶碱、雌二醇、游离甲状腺素、叶酸等，都可以采用光激化学发光法检测。
与传统分析方法相较，具有反应时间短、样本用量少、免洗、高通量等优点[1-2]。
(二)抗原分子1．促甲状腺素(TSH)：在甲状腺功能评价中，TSH检测范围为0.01-300 mU／L，对于甲状腺机能减低(TSH升高)或甲状腺机能亢进(TSH降低)的诊断和疗效评价具有重要意义。
LOCI检测TSH的灵敏度达0.002 mU／L，优于化学发光法的0.01 mU／L，这对于亚临床甲状腺机能亢进的诊断与治疗更为有利。
此外，当反应时间由14 min缩短至2 min以内时，灵敏度仍然可达0.007 mU／L，完全满足临床诊治需要，同时，极大地提高检测效率，有效缩短TAT时间。
通过对20例垂体切除后患者血清TSH(期望值为0)检测表明，其平均浓度与0 mU／L差异无统计学意义。
为适应高通量和小型化芯片技术，Dafforn等[10]将样本用量由常规的80μl(一般免疫分析方法用量为100-200μl)减少至l0μl，虽然检测灵敏度出现轻度下降，但仍可满足临床要求。
2．绒毛膜促性腺激素(hCG)：孕妇血清或后穹隆穿刺液中hCG浓度常常高于目前绝大多数免疫分析方法的检测上限(1000 U／L)，需要稀释后重新检测，有时甚至需要多次稀释，这既浪费了时间，又增加了成本。
Ullman等[2]用LOCI技术检测hCG的上限达100000 U／L，使绝大多数样本1次检测即可获得准确结果；而且，与常规免疫检测方法比较，样本用量更少(10μl)、检测时间更短(7.5 min)，这对于穿刺液量少和急诊患者极为有利。
3．胰岛素：胰岛素既是一种药物，也是评价胰岛B细胞功能的生物标志物，其浓度检测对于糖尿病的发病机制研究、分型、疗效检测等具有重要价值。
特别在药代动力学和药效学研究领域．快速、高通量、微量样本检测技术无疑是非常重要的，而大批量小动物实验研究尤其如此。
Poulsen和Jensen [7]应用LOCI检测技术在384孔板上测定人血浆胰岛素，样本用量仅5μl，分析灵敏度为0.3 pmol/L，功能灵敏度为1.0 pmol/L，最高浓度可以达到10000 pmol/L。
同时具有较高的批内(1.9％-3.8％)和批间(4.6％-7.3％)精密度；中度溶血、黄疸、脂血、生物素、维生素C对检测无明显影响(严重溶血时，回收率降低到73％)；与酶免分析方法具有很好的相关性。
4．β淀粉样蛋白：脑内淀粉样蛋白斑块的形成和沉积是老年性痴呆(Alzheimer病)的病理特点，准确测量生物体液中的淀粉样蛋白含量对该病的研究有重要意义。
Szekeres等[11]建立的血清β淀粉样蛋白1-40和1-42 LOCI检测法灵敏度<2 pg/ml，且较ELISA分析方法更灵敏，适用于Alzheimer病的早期诊断。
5．其他：在心肌梗死的早期诊断和疗效评价方面，国内学者[12-13]用LOCI检测血清肌钙蛋白I和肌红蛋白。
结果表明该方法具有很高的灵敏度，对血红蛋白、总胆红素、三酰甘油等具有较好的抗干扰性，其方法学特性和临床检测性能可完全满足临床要求。
(三)核苷酸与前述的抗原-抗体免疫反应不同，LOCI技术对核苷酸的检测采用的是碱基互补配对原则和定量PCR扩增原理（图2）。
Patel等[14]采用该技术对目标DNA分别进行了实时(real-time)和终点(end-point)测量，可检测目标DNA浓度的范围分别为103倍和106倍，对单链DNA扩增片段的检测灵敏度达2-10 mol/L。
Beaudet等[15]将LOCI技术与等位基因特异性扩增(ASA)和等位基因特异性杂交(ASH)结合后。
建立了单核苷酸多态性(SNP)分析平台，可对基因组DNA 每个基因型进行精确定量，其灵敏度< 2 ng。
与目前绝大多数SNP分析方法比较，该技术省去了扩增后PCR产物纯化和酶反应过程，减少了污染，而且样本用量减少至2μl，为实现高通量检测提供了可行性。
图2光激化学发光法检测核苷酸原理简图（碱基互补配对原则）(四)配体与受体1．OX40和OX40L：OX40(CD134)属于肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族成员，其配体OX40L与TNF具有同源性，属Ⅱ型膜蛋白，与CD4+T淋巴细胞介导的多种炎症效应有关，包括实验性自身免疫性脑脊髓炎、类风湿性关节炎、炎症性皮肤病和移植物抗宿主疾病等。
因此，高通量筛选OX40与OX40L特异性结合干扰物(拮抗剂)在药物开发(抗炎)领域具有非常重要的价值。
Wilson等[16]的研究表明，OX40和OX40L的特异性结合可被拮抗剂——苏拉明抑制，而且这种抑制作用在一定范围内具有浓度依赖性；研究者还试验了一系列OX40L结构类似物，筛选出了新的拮抗剂——PV肽(含31个氨基酸的短肽)，它在浓度为50μmol/L时，对反应的抑制率达73％，这无疑对抗炎药物的开发有重要价值。
2．孤儿核受体I型类固醇生成因子(SF-1)：SF·1作为核受体家族成员，在肾上腺和生殖腺等内分泌腺体及其上级控制中枢的分化与发育等方面发挥重要作用，是个体发育过程中最重要的内分泌功能调节因子之一。
因此，对其配体(内源性和外源性)及其拮抗剂和受体激动剂的甄别具有重要的基础研究和临床应用价值。
Li等[8]研究发现，SF-1的转录活性受磷脂调节，其与配体的相互作用因磷脂脂肪酸侧链长度不同，可表现为激活作用或抑制作用。
3．其他：众多学者用LOCI技术还研究了DAF-12受体-配体结合[9]、蛋白激酶及其抑制物[17]、蛋白质与多肽或基因之间的相互作用[17-20]，这些研究成果均为药物开发提供了新的思路和方向。
综上所述，LOCI技术实现了均相、一步、免清洗、免分离检测，使分析过程简单化，并彻底避免了由于清洗和分离所带来的误差，保持高度灵敏度和特异性；随着样本用量的大幅度减少，使检测小型化、芯片化和高通量成为可能，为临床超微量分析和新药开发提供了一个便捷高效的研究平台，也为科学研究提供了又一有力工具。
志谢：博阳生物(上海)科技有限公司赵卫国教授、吴旸技师等给予本研究协助参考文献[1] Ullman EF，Kirakossian H，Singh S，et a1. Luminescent oxygen channeling immunnoassay: measurement of particle binding kinetics by chemiluminescence．Proc Natl Acad Sci U S A，1994，91：5426-5430．[2] Ullman EF，Kirakossian H，Switchenko AC，et a1．Luminescent oxygen channeling assay(LOCI): sensitive，broadly applicable homogeneous immunoassay method．Clin Chem，1996，42：1518- 1526．[3] Kricka LJ．Clinical applications of chemiluminescence．Anal Chlm Acta，2003，500：279-286．[4] Peppard J，Glickman F，He Y，et a1．Development 0f a high-throughput screening assay for inhibitors of aggrecan cleavage using luminescent oxygen channeling(Alphascreen)．J Biomol Screen。
