梅天妮课件

T Cell Activation/Expansion Kit
T Cell Activation/Expansion Kit，human T Cell Activation/Expansion Kit， non-human primate T Cell Activation/Expansion Kit， mouse
•Note: 这类客户通常需要验证效果。必要的时候我们可以提供试用装。
Poll 1 Which product can be sold in China：
A ， HSC-CFU complete with Epo B， HSC-CFU complete w/o Epo C， HSC-CFU lite with Epo D， HSC-CFU basic
HSC engraftment - CFU-Assay
• CFU（克隆形成单位）检测是评估用于造血干细胞移植细胞
的造血潜能的标准方法。 移植: 在这个过程中造血干细胞开始分化为新的白细胞、红细 胞和血小板。
•
CFU检测：在以甲基纤维素和IMDM培养基为基础，补充了 FCS(胎牛血清)和多种生长因子(如 GM-CSF, G-CSF, SCF, IL-3, IL-6和 Epo)的半固体培养基上进行。
HSC-CFU media – potential customers
市场/客户:
- 血库，脐血库 - 移植中心 - 献血中心 - CD34/CD133磁珠用户(科研和临床)
(用于诊断和分析目的，评价移植物的分化潜能)
HSC-CFU media – competition
•Stem Cell Technology - MethoCult •Sigma - Stemline Media •Stemgenix •Gencyte •StemBio •R&D System
T cell activation
涉及到的信号分子
第一信号：MHC抗原肽和CD3结合 第二信号：B7分子和CD28结合 细胞因子促进T细胞的充分活化
methods DC细胞共培养 有丝分裂原刺激 游离抗体刺激 培养板结合的抗体刺激 磁珠偶联的抗体刺激
comparison
DC细胞共培养 成本高，培养难度大 有丝分裂原刺激 在培养体系中长期存在会引起过度激活造成的细胞凋亡 游离抗体刺激 效果较差 培养板结合的抗体刺激 操作耗时
cells bind to the loaded MACSiBead Particles and get activated by the stimulation of CD2, CD3, and CD28 on their cell surface.
Activation
Expansion
T Cell Activation / Expansion Kits
HSC-CFU media and MACS Cell Stimulation Reagents
Technical support specialist Tony Pan
Agenda
1. HSC engraftment - CFU-Assay 2. HSC-CFU media – strategy 3. MACS Cell Stimulation Reagents 4. T Cell Activation/Expansion Kit 5. Treg Expansion Kit 6. NK Cell Activation/Expansion Kit 7. Suppression Inspector
HSC engraftment - CFU-Assay
HSC-CFU Epo
CFU-G, CFU-M, CFU-GM BFU-E, CFU-E, and CFU-GEMM HSC-CFU basic medium Stem Cell Factor GM-CSF G-CSF IL-3 IL-6 Erythropoietin
complete with Epo
√ √ √ (50 ng/ml) (20 ng/ml) (20 ng/ml) (20 ng/ml) (20 ng/ml) (3 U/ml)
complete w/o Epo
√ – √ (50 ng/ml) (20 ng/ml) (20 ng/ml) (20 ng/ml) (20 ng/ml) (0 U/ml)
Agenda
1. HSC engraftment - CFU-Assay 2. HSC-CFU media – strategy 3. MACS Cell Stimulation Reagents 4. T Cell Activation/Expansion Kit 5. Treg Expansion Kit 6. NK Cell Activation/Expansion Kit 7. Suppression Inspector
T Cell Activation/Expansion Kit
TCAEK,H 偶联抗体 CD2-Biotin； CD3-Biotin； CD28-Biotin TCAEK,NHP CD2-Biotin； CD3-Biotin； CD28-Biotin TCAEK,M CD3ε-Biotin； CD28-Biotin
Principle of MACSiBead™ Particles for stimulation of T cells
Stimulation
MACSiBead Particles are loaded with biotinylated CD2, CD3, and CD28 antibodies
用于CFU检测的甲基纤维素造血干细胞培养基 HSC-CFU complete with Epo HSC-CFU complete w/o Epo HSC-CFU lite with Epo HSC-CFU basic 100 ml 24x3 ml 100 ml 24x3 ml 100 ml 24x3 ml 80 ml #130-091-280 #130-091-278 #130-091-277 #130-091-276 #130-091-281 #130-091-282 #130-091-275
所用产品均只能用于科研
HSC engraftment - CFU-Assay
HSC-CFU 基础培养基 80 ml
基础培养基不包含EPO和其他细胞因子，可以由科研人员自由选择加入何种 细胞因子和生长因子。 IMDM培养基(补充了 2mM L-谷氨酰胺) 甲基纤维素 (1%) FBS (30%) BSA （牛血清白蛋白）(1%) 2-巯基乙醇 (10-4M)
Kinetics of T cell activation was monitored during 72 hours of culture in the presence or absence of Anti-Biotin MACSiBead Particles loaded with biotinylated CD2, CD3, and CD28 antibodies. The expression of CD25 on human CD4+ and CD8+ T cells was analyzed by flow cytometry.
MACSiBead Particles 数 刺激比例（beads： cells）
4×108
4×108
4×108 1:1 2:1
免疫器官细胞悬液中的 Resting T细胞；MACS 或其他分选出的多种T 细胞
1:2
1:2 PBMC 抗原特异性T细胞
激活扩增细胞种类 PBMC 抗原特异性T细胞
分选出的多种T细胞
HSC-CFU media – strategy
什么是客户考虑更换成我们培养基的动力? 在品质相同的情况下，我们的产品价格更低.
HSC-CFU media – pricing
价格 :
• 比主要竞争对手SCT目录价至少低20%。
HSC-CFU media – pricing
MACS HSC-CFU HSC-CFU complete with Epo HSC-CFU complete w/o Epo HSC-CFU lite with Epo 100 ml 24x3 ml 80 ml H4434 344-535 € 484-775 € 135-215 € 100 ml 24x3 ml H4535 337-540 € 476-739 € 100 ml 24x3 ml H4435 403-585 € 542-869 € Price MethoCult (SCT) Price
HSC engraftment - CFU-Assay
细胞来源:
- 经过分选的造血干细胞 (如：CD133+, CD34+, CD117+ cells) - 未经分选的移植物 (外周血、脐带血、骨髓或胎肝)
HSC engraftment - CFU-Assay
监视培养10-20天后，祖细胞的克隆形成情况
பைடு நூலகம்
lite with
√ √ √ (50 ng/ml) (10 ng/ml) – (10 ng/ml) – –
HSC-CFU media – storage/logistics
• HSC-CFU培养基在使用前必须一直冷冻状态。
–20 °C保存。
• 在发货过程中货物必须置于干冰上。
Agenda
1. HSC engraftment - CFU-Assay 2. HSC-CFU media – strategy 3. MACS Cell Stimulation Reagents 4. T Cell Activation/Expansion Kit 5. Treg Expansion Kit 6. NK Cell Activation/Expansion Kit 7. Suppression Inspector