激光诱导荧光检测技术简介
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它们在科学研究和工程应用中具有重要的作用。
激光诱导荧光光谱仪的特点及应用介绍激光诱导荧光光谱仪(LIF)是基于激光荧光光谱技术的一种仪器。
使用激光束激发样品中的荧光分子,再通过荧光分子发出的光进行分析和检测。
本文将介绍LIF的特点及其应用。
一、LIF的特点1. 高分辨率LIF检测方法的检测灵敏度非常高,可以达到ppb(10-9)的级别。
同时,它的分辨率也极高,可以轻松实现nm(10-9)级别的分辨能力。
2. 非破坏性检测LIF的激发方法是使用激光来刺激样品中的荧光分子,因此不需要使用试剂或化学处理样品。
这种非破坏性检测方法可以有效避免样品被污染或被毁坏的风险。
3. 灵敏度高LIF仪器可以检测非常小的样品量,通常只需要微升级别的样品,即可得到足够的信号。
此外,LIF还有极高的分析速度和高精度。
4. 检测范围广LIF可以对多种物质进行检测,包括生物分子、有机物、无机盐、气体等等。
这种广泛的检测范围使得LIF成为一种多功能性的检测技术,可以用于许多不同领域。
二、LIF的应用1. 生物医学领域LIF在生物医学领域的应用非常广泛,常被用于病原体检测、药物筛选、生物分子的研究等方面。
因为LIF具有非常高的灵敏度和分辨率,所以能够检测到非常微小的基因和蛋白质,有助于生物医学领域的诊断和治疗。
2. 环境监测LIF也可以被应用于环境监测领域,比如空气和水质的检测。
以卤代烃类物质为例,使用激光激发样品中的卤代烃分子,通过监测荧光信号,可以得知样品中的卤代烃物质浓度。
此外,LIF还能在行星地质学、气象等方面应用。
3. 药物研发药物研发中,LIF被广泛用于药物筛选和分析。
使用LIF检测药物作用的生物分子,可以准确地测定药物的作用和分布。
4. 食品安全检测LIF也可以用于食品安全监测。
比如使用LIF检测食品中的有害物质,就能够快速准确地检测出未加工,在加工过程中添加的可以残留在食品中的有害物质。
结论总之,激光诱导荧光光谱仪(LIF)以其高分辨率、非破坏性检测、高灵敏度、广泛的检测范围等特点,在生物医学、环境监测、药物研发和食品安全方面都具有重要的应用价值。
激光诱导荧光原理介绍激光诱导荧光是一种通过激光光源激发物质发射荧光的技术。
该技术可以广泛应用于生物医学、物质检测和化学分析等领域。
本文将深入探讨激光诱导荧光的原理及其应用。
原理激光光源激光诱导荧光技术所使用的关键组件是激光光源。
激光光源产生的光具有高度单色性、方向性和相干性,能够提供足够的能量来激发物质的荧光发射。
能级跃迁当物质受到激光光源的激发时,其能级会发生跃迁。
物质的电子从低能级跃迁到高能级,吸收了激光能量。
此后,电子会自发地从高能级返回到低能级,释放出光子。
这些光子就是荧光的来源。
荧光发射当物质的电子从高能级返回到低能级时,会释放出能量。
这个能量以光子的形式发射出来,形成荧光。
荧光的特征是波长比激发光源长,并且具有特定的发射光谱。
荧光发射的波长和强度可以提供有关物质结构和性质的信息。
应用生物医学激光诱导荧光技术在生物医学领域有广泛应用。
通过标记生物分子或细胞,可以使用荧光探针来观察细胞结构和功能的变化。
这些荧光标记物可以在细胞、组织甚至整个生物体中进行定位,使研究者能够实时监测生物过程,并了解疾病的发展和治疗。
物质检测激光诱导荧光技术在物质检测领域也有广泛应用。
荧光标记的探针可以被应用于环境监测、食品安全和毒理学检测等领域。
例如,通过标记某种特定物质的荧光探针,可以快速检测食品中的有害物质,确保食品安全。
化学分析激光诱导荧光技术在化学分析中发挥着重要作用。
通过选择适当的荧光探针,可以实现对化学物质的快速、灵敏和选择性检测。
利用荧光分析技术,可以对物质的组成、浓度和反应动态等进行准确测量,为化学研究和工业生产提供有力支持。
优点与展望激光诱导荧光技术具有以下优点:1.高灵敏度:由于激光光源具有高能量和方向性,可以实现对微量物质的敏感检测。
2.高选择性:通过选择合适的荧光探针,可以实现对特定物质的选择性检测。
3.高空间分辨率:可以实现对微小结构的高空间分辨率观察。
展望未来,激光诱导荧光技术将继续在各个领域发挥重要作用。
lec检查法摘要:1.Lec 检查法简介2.Lec 检查法的原理3.Lec 检查法的应用领域4.Lec 检查法的优势与局限性正文:Lec 检查法,全称为“激光诱导荧光检测法”,是一种基于激光技术的光谱分析方法。
这种方法通过激光激发样品分子产生荧光,然后检测荧光信号来分析样品的成分和性质。
接下来,我们将详细介绍Lec 检查法的原理、应用领域、优势与局限性。
首先,我们来了解Lec 检查法的原理。
当激光照射到样品上时,样品中的分子会被激发并产生荧光。
荧光的强度和波长与样品中分子的种类和浓度有关。
通过检测荧光信号,可以获得关于样品成分和性质的信息。
Lec 检查法利用这一原理,实现了对样品的高灵敏度、高精度分析。
Lec 检查法广泛应用于各个领域,如环境监测、生物医学、化学分析等。
在环境监测领域,Lec 检查法可以用于检测水中的有害物质,如重金属离子、有机污染物等。
在生物医学领域,Lec 检查法可以用于检测生物分子,如蛋白质、核酸等。
在化学分析领域,Lec 检查法可以用于分析样品中的有机化合物、无机化合物等。
尽管Lec 检查法具有许多优势,但也存在一些局限性。
首先,Lec 检查法对样品的要求较高,需要样品具有一定的荧光特性。
其次,Lec 检查法的检测结果可能受到荧光干扰物的影响,如样品中的其他荧光物质、实验环境中的荧光污染等。
此外,Lec 检查法的仪器设备较昂贵,对实验条件和操作技巧也有较高要求。
总之,Lec 检查法作为一种基于激光技术的光谱分析方法,具有高灵敏度、高精度等优点,广泛应用于环境监测、生物医学、化学分析等领域。
然而,Lec 检查法也存在一定的局限性,如对样品的要求较高、可能受到荧光干扰物的影响等。
LSD平面激光诱导荧光-米氏散射法是一种用于表面形貌测量的高精度技术。
该技术结合了激光诱导荧光(LIF)和米氏散射原理,能够实现对物体表面微小高度变化的检测,广泛应用于光学加工、半导体制造、生物医学和材料科学等领域。
下面将从基本原理、实验方法和应用领域等方面对LSD平面激光诱导荧光-米氏散射法进行介绍。
一、基本原理LSD平面激光诱导荧光-米氏散射法利用激光在物体表面的激发光谱和米氏散射光谱之间的微小差异,通过光谱分析来获取表面高度变化的信息。
当激光束照射到样品表面时,会激发样品表面的荧光发射,同时也会引起样品表面的米氏散射。
由于荧光发射和米氏散射的光谱特性略有不同,因此可以通过光谱分析来获取样品表面的高度信息。
二、实验方法1. 仪器设备LSD平面激光诱导荧光-米氏散射法的实验设备主要包括激光器、光谱仪、样品评台和数据处理系统等。
激光器用于产生激发光束,光谱仪用于采集荧光发射和米氏散射的光谱信息,样品评台用于支撑样品并控制样品的移动,数据处理系统用于对采集到的光谱信息进行处理和分析。
2. 实验步骤(1)将样品放置在样品评台上,并调整样品评台使得激光束垂直照射到样品表面。
(2)打开激光器,并调整激光束的功率和聚焦度,使得激光束可以有效地激发样品表面的荧光发射和引起米氏散射。
(3)通过光谱仪采集荧光发射和米氏散射的光谱信息,可以得到两者在波长和强度上的差异。
(4)利用数据处理系统对采集到的光谱信息进行处理和分析,可以获得样品表面的高度变化信息。
三、应用领域LSD平面激光诱导荧光-米氏散射法在许多领域都有广泛的应用,主要包括以下几个方面:1. 光学加工在光学元件的制造中,需要对元件表面的形貌进行精密测量,以保证元件的光学性能。
LSD平面激光诱导荧光-米氏散射法可以实现对光学元件表面微小高度变化的测量,帮助优化光学加工工艺,提高元件的质量和工作效率。
2. 半导体制造在半导体工业中,需要对芯片表面的形貌进行精确测量,以保证芯片的性能和可靠性。
激光诱导荧光技术在海洋水质监测中的应用激光诱导荧光技术(LIF)是一种光谱分析技术,通过利用激光作为激发光源,诱导样品中的荧光发射信号,实现对样品的定量分析与检测。
在海洋水质监测领域,激光诱导荧光技术已经被广泛应用,为海洋环境保护与管理提供了有效的技术手段。
激光诱导荧光技术的原理是通过激光对水中的溶解性有机物(DOM)进行激发,从而产生荧光信号。
溶解性有机物是海洋水质监测中的重要指标之一,它既可以反映海洋富营养化程度,也可以用来评估水生态系统的健康状况。
传统的方法通常采用的是显微镜和化学分析等手段来测量溶解性有机物的含量,但这些方法不仅操作繁琐,而且需要大量的时间和人力资源。
相比之下,激光诱导荧光技术具有快速、准确、无损伤等优点,因此被广泛应用于海洋水质监测。
首先,该技术可以快速获取大量的数据,并实现实时监测。
通过选择不同波长的激光光源,可以激发样品中的特定组分发出荧光信号,从而实现对多个指标的同时测量。
这使得海洋监测人员可以及时了解海洋水质状况的变化,并作出相应的调整和决策,保护和管理海洋生态系统。
其次,激光诱导荧光技术还具有较高的测量精度和准确性。
在样品处理过程中,不需要添加任何化学试剂,减少了产生误差的可能性。
同时,由于荧光信号的强度与样品中特定组分的含量成正比,因此可以通过荧光信号的强弱来定量分析溶解性有机物的浓度,提高数据的可靠性和精度。
此外,激光诱导荧光技术还能够对特定的溶解性有机物进行快速鉴别和定位。
传统的方法需要进行复杂的化学分析,而激光诱导荧光技术只需利用特定的波长激光来激发样品,就能够得到特定组分的荧光信号。
通过对这些荧光信号的分析,可以判断出溶解性有机物的类型和来源,为寻找污染物的来源和监测状况提供了重要的依据。
在实际应用中,激光诱导荧光技术已经成功应用于海洋富营养化和沿海水质监测中。
比如,在海洋富营养化监测中,通过测量海洋中叶绿素等溶解性有机物的含量,可以及时监测和评估海水中藻类和蓝藻等富营养化指标的变化,及时采取措施防止海洋生态系统受到破坏。
荧光分析法原理:根据物质分子吸收光谱和荧光光谱能级跃迁机理,具有吸收光子能力的物质在特定波长光(如紫外光)照射下可在瞬间发射出比激发光波长长的光,即荧光。
荧光强度与物质浓度的关系可表示为:I=kC,因此紫外荧光光强I与样气的浓度C成线性关系。
这是紫外荧光法进行定量检测的重要依据。
两种测定方法:直接测定法:利用物质自身发射的荧光进行测定分析。
间接测定法:由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。
例如用某些试剂(如荧光染料),使其与不发射荧光的物质生成络合物,这种络合物能发射荧光,再进行测定。
因此荧光试剂的使用,对一些原来不发荧光的无机物质和有机物质进行荧光分析打开了大门,扩展了分析的范围。
不管是直接测定,还是间接测定,一般的采用标准工作曲线法,取各种已知量的荧光物质,配成一系列的标准溶液,测定出这些标准溶液的荧光强度,然后给出荧光强度对标准溶液的浓度的工作曲线。
在同样的仪器条件下,测定未知样品的荧光强度,然后从标准工作曲线上查出未知样品的浓度(即含量)。
一般常用的荧光分析仪器有:目测荧光仪(荧光分析灯),荧光光度计和荧光分光光度计三种。
荧光分析是一种先进的分析方法,它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及,这同荧光分析具有很多优点分不开的。
荧光分析所用的设备较简单,如目测荧光仪和荧光光度计构造非常简单完全可以自己制造。
比起质谱仪、极谱仪和电子探针仪来它在造价上要便宜很多倍,而且荧光分析的最大特点是:分析灵敏度高、选择性强和使用简便。
同时具备这三大特点的仪器并不多.激光诱导荧光分析(LIF)激光的特点:亮度高,方向性好,单色性好,相干性好仪器组成:与普通的荧光检测器一样,激光诱导荧光检测器主要由光源、光学系统、检测池和光检测元件组成,两者最重要的区别是激光诱导荧光检测器的光源是激光器。
激光器:激光器是激光诱导荧光检测器的重要组成部分,用脉冲激光为光源,采用时间分辨技术可消除瑞利散射光(半径比光或其他电磁辐射的波长小很多的微小颗粒对入射光束的散射)和拉曼散射光(光波在被散射后频率发生变化)对测定的干扰,同时增加被测成分之间测定的选择性。
激光诱导荧光原理
激光诱导荧光是一种利用激光光源来激发样品分子或原子能级跃迁,从而产生荧光信号的技术。
其原理基于分子或原子的能级结构和电磁波与物质相互作用的量子力学理论。
当激光束照射到样品上时,其能量会被吸收并转移到样品中的分子或原子。
这些分子或原子会因此从低能级跃迁到高能级,形成一个激发态。
在这个过程中,吸收激光的波长必须与样品中分子或原子的能级差相匹配。
在分子或原子处于激发态时,它们会逐渐回到基态,并释放出多余的能量。
其中一部分能量以荧光形式辐射出去,即发射出荧光信号。
这个过程称为自发辐射。
为了增强荧光信号强度和提高检测灵敏度,通常需要使用特定的荧光探针来标记样品中感兴趣的分子或细胞器等结构。
这些探针可以是天然存在于生物体内的染料(如叶绿素、荧光素等),也可以是人工合成的分子(如荧光蛋白、荧光染料等)。
在使用荧光探针标记样品后,激光束照射到样品上时,只有探针分子能够吸收激光的波长并发生能级跃迁。
因此,荧光信号只来自于标记
了探针的结构。
为了进一步提高检测灵敏度和空间分辨率,通常需要使用显微镜将样品放大到合适的倍数,并使用滤波器选择出发射出来的特定波长范围内的荧光信号。
这样可以避免来自其他非感兴趣结构或背景噪声的干扰信号。
总之,激光诱导荧光技术是一种基于量子力学原理和化学生物学知识相结合的高灵敏度、高空间分辨率的生物成像技术。
它在生命科学、医学研究以及材料科学等领域都有广泛应用。
激光诱导荧光光谱激光诱导荧光光谱(Laser-Induced Fluorescence Spectroscopy,简称LIF)是一种常见的光谱分析技术,广泛应用于生物医学、环境、材料等领域。
本文将介绍激光诱导荧光光谱的基本原理、应用和发展趋势。
激光诱导荧光光谱是一种通过激光进样样品,通过光的诱导机制产生荧光,并通过光谱分析荧光特性来判定样品的成分和性质的技术。
在LIF中,激光光源通过光学透镜成一个点,照射到样品表面或样品内部。
样品中的分子吸收入射光能量,并通过电荷转移或激发态跃迁的方式将能量转化为荧光。
荧光光子经过处理后,通过光谱仪进行检测和分析,得到荧光光谱信息。
通过分析荧光光谱特征,可以了解样品的化学成分、结构和性质。
激光诱导荧光光谱在生物医学领域有广泛应用。
例如,通过荧光标记蛋白质、细胞或分子,可以实现对生物分子和细胞的检测和定位。
通过针对特定蛋白质或染料的荧光探针,可以实现对细胞内生化分子的成像和分析。
光谱分析可以提供准确的信息,用于诊断和研究各种疾病,如肿瘤、心血管疾病等。
此外,激光诱导荧光光谱还在环境监测和材料科学等方面得到广泛应用。
LIF技术的优点之一是其高灵敏度和选择性。
由于荧光往往是一个特定基团或物质的属性,因此可以通过荧光信号来识别不同的化学物质。
同时,激光诱导荧光光谱也具有高灵敏度,可以检测到非常低浓度的物质。
这使得LIF在追踪和分析环境中微量物质、检测生物分子以及荧光探针的研发等方面具有潜力。
此外,LIF技术还具有快速性和非破坏性。
相对于传统的化学分析方法,激光诱导荧光光谱可以快速获取样品的荧光光谱信息,避免了长时间的化学反应和分析步骤。
同时,LIF对于样品的破坏非常小,可以进行无损检测,保留样品的完整性和结构。
然而,激光诱导荧光光谱在应用中也面临一些挑战。
首先是荧光信号的强度。
由于背景荧光或其他干扰信号的存在,荧光信号常常被掩盖或稀释。
因此,需要采取一系列信号增强和背景抑制的手段来提高信噪比。
激光技术在水质检测中的应用研究水是生命之源,其质量直接关系到人类的健康和生态环境的平衡。
随着工业化和城市化的快速发展,水污染问题日益严峻,对水质检测的准确性和灵敏度提出了更高的要求。
激光技术作为一种先进的检测手段,凭借其高分辨率、高灵敏度和非接触式测量等优点,在水质检测领域展现出了广阔的应用前景。
一、激光技术的基本原理激光是一种具有高度相干性、单色性和方向性的光源。
在水质检测中,常用的激光技术包括激光诱导荧光(LIF)、拉曼散射(Raman scattering)、激光吸收光谱(LAS)等。
激光诱导荧光技术是基于某些物质在受到特定波长的激光激发后会发出荧光的特性。
不同的物质具有不同的荧光光谱,通过检测荧光的强度和光谱特征,可以对水中的污染物进行定性和定量分析。
拉曼散射则是激光与水分子或水中的杂质相互作用时,发生非弹性散射产生的一种现象。
拉曼散射光谱能够反映物质的分子结构和化学键信息,从而用于识别水中的各种化学成分。
激光吸收光谱是通过测量激光在通过水样时被吸收的程度来确定水中污染物的浓度。
由于不同物质对特定波长的激光吸收程度不同,因此可以根据吸收光谱的特征来定量检测污染物。
二、激光技术在水质检测中的具体应用(一)检测水中的有机物水中的有机物,如多环芳烃、农药、抗生素等,对人体健康和生态环境具有潜在危害。
激光诱导荧光技术可以快速、灵敏地检测出这些有机物的存在。
例如,对于一些具有强荧光特性的多环芳烃,如蒽、芘等,通过激发其荧光并测量荧光强度,可以准确测定其浓度。
(二)检测重金属离子重金属离子如汞、镉、铅等在水中的含量超标会导致严重的环境污染和健康问题。
利用激光诱导击穿光谱(LIBS)技术,可以对水中的重金属离子进行实时检测。
LIBS 技术通过高能量的激光脉冲在水样中产生等离子体,分析等离子体发射的光谱,从而确定重金属离子的种类和浓度。
(三)检测微生物和藻类水中的微生物和藻类的过度繁殖会影响水质和水生态系统。
激光诱导荧光光谱激光诱导荧光光谱(Laser-induced fluorescence spectroscopy)是一种分析样品中含有的荧光材料的方法。
它利用激光的高能量激发样品中的部分荧光材料,进而通过检测产生的荧光信号来分析样品的组成和性质。
本文将从原理、应用以及未来发展方向三个方面来探讨激光诱导荧光光谱。
一、原理激光诱导荧光光谱的原理基于激光激发样品中的荧光物质,通过光谱仪测量产生的荧光信号。
激光通过样品时,样品中的荧光物质会处于基态。
当激光的能量与荧光物质的能级差相匹配时,荧光物质会被激发到激发态,进而发射荧光。
因为每种荧光物质都有独特的能级结构,所以它们在被激发后会发射出特定波长的荧光光谱。
通过测量荧光光谱,我们可以得到关于样品中荧光物质的信息,如浓度、结构等。
二、应用激光诱导荧光光谱在许多领域都有广泛的应用。
首先,在环境监测方面,它被用于检测水中的污染物,如重金属离子和有机化合物。
通过激光诱导荧光光谱,我们可以快速准确地确定水样中的有害物质浓度,从而提供有关水质安全和环境监测的重要信息。
其次,在生物医学研究中,激光诱导荧光光谱被广泛应用于细胞和组织的荧光成像。
这种成像技术可以帮助了解人体组织的分子结构和功能,有助于疾病的早期诊断和治疗。
此外,激光诱导荧光光谱还被用于材料科学、食品安全和工业生产等领域。
三、未来发展方向尽管激光诱导荧光光谱已经在许多领域取得了重要的应用,但仍然存在一些挑战和发展方向。
首先,当前大部分激光诱导荧光光谱的分析仪器仍需使用复杂的实验装置,对操作人员的要求较高。
未来的发展应该着重于简化和便携化仪器设备,以满足不同领域的实际应用需求。
其次,提高荧光材料的效率和选择性也是一个重要的研究方向。
通过改进荧光材料的结构和性质,可以提高激光激发后的荧光强度和光谱特征,进一步提高分析的准确性和灵敏度。
此外,结合其他分析技术,如光谱成像和机器学习等方法,也是未来发展的趋势。
这将提高激光诱导荧光光谱在复杂样品分析和多组分分析中的应用能力。
化学发光微粒子免疫检测法和磁微粒化学发光1.引言1.1 概述概述激光诱导的化学发光技术是一种基于化学发光原理的新型检测方法。
该技术利用发出的激光照射样品中的化学发光微粒子,通过测量微粒子发出的光信号来获得样品中所含目标物质的信息,并达到快速、敏感、特异性的检测效果。
与传统的免疫分析方法相比,化学发光微粒子免疫检测法具有更低的检测下限和更高的灵敏度,可以应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。
此外,磁微粒化学发光技术是一种结合了磁性微粒与化学发光的检测方法。
通过将磁性微粒与特定的抗体或抗原结合,实现对目标物质的高选择性识别,再利用化学发光原理进行信号放大和检测。
与传统的免疫检测方法相比,磁微粒化学发光技术具有更高的准确性、更强的稳定性和更低的检测下限。
它在生物医学、生物分析和环境监测等领域具有广泛的应用前景。
本文将重点介绍化学发光微粒子免疫检测法和磁微粒化学发光技术的原理和应用。
首先,将对化学发光微粒子免疫检测法进行详细阐述,包括其原理和应用领域。
随后,将介绍磁微粒化学发光技术的原理和应用案例。
最后,将对这两种技术进行总结和展望,探讨其在未来的发展趋势和应用前景。
通过深入了解化学发光微粒子免疫检测法和磁微粒化学发光技术,我们可以更好地认识它们在生物医学和环境检测等领域的优势和潜力,为科学研究和应用创新提供有力支撑。
1.2文章结构1.2 文章结构本文主要分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分首先对化学发光微粒子免疫检测法和磁微粒化学发光进行了概述,简要介绍了它们的原理和应用。
接着阐述了本文的目的,即探讨这两种方法在生物医学领域的潜力和应用前景。
正文部分分为两个主要章节:化学发光微粒子免疫检测法和磁微粒化学发光。
在每个章节中,首先介绍了其原理,详细阐述了这两种方法的工作机制和关键步骤。
接着,分析了它们在生命科学研究、临床诊断和药物开发等方面的应用。
具体地介绍了相关的实验设计、实验结果以及研究领域中的一些具体案例。
激光诱导荧光光谱
激光诱导荧光光谱(Laser-Induced Fluorescence,简称LIF)是一种用于测量物质分子吸收和发射光的光谱技术。
它通过使用高能激光器产生的脉冲光束照射样品,使样品中的分子被激发到高能级状态,然后通过自发辐射或外部光激励的方式返回到低能级状态,释放出荧光光子。
这些荧光光子可以被探测器捕捉并转换成电信号,进而得到样品的光谱信息。
LIF技术具有高灵敏度、高时间分辨率和空间分辨率等优点,因此在化学、生物、材料科学等领域得到了广泛应用。
例如,在环境监测中,LIF可以用于检测水中的重金属离子、有机污染物等;在生物医学研究中,LIF可以用于研究细胞内的蛋白质结构、代谢过程等;在材料科学中,LIF可以用于研究材料的光学性质、表面反应动力学等。
激光诱导荧光光谱作为一种强大的光谱分析工具,为我们提供了一种非侵入性、实时、高灵敏度的研究手段,有助于揭示物质的微观结构和动态过程。
随着激光技术和荧光探测技术的不断发展,LIF在未来的应用前景将更加广阔。
荧光分析法
原理:根据物质分子吸收光谱和荧光光谱能级跃迁机理,具有吸收光子能力的
物质在特定波长光(如紫外光)照射下可在瞬间发射出比激发光波长长的光,即荧光。
荧光强度与物质浓度的关系可表示为:I=kC,因此紫外荧光光强I与样气的浓度C成线性关系。
这是紫外荧光法进行定量检测的重要依据。
两种测定方法:
直接测定法:利用物质自身发射的荧光进行测定分析。
间接测定法:由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。
例如用某些试剂(如荧光染料),使其与不发射荧光的物质生成络合物,这种络合物能发射荧光,再进行测定。
因此荧光试剂的使用,对一些原来不发荧光的无机物质和有机物质进行荧光分析打开了大门,扩展了分析的范围。
不管是直接测定,还是间接测定,一般的采用标准工作曲线法,取各种已知量的荧光物质,配成一系列的标准溶液,测定出这些标准溶液的荧光强度,然后给出荧光强度对标准溶液的浓度的工作曲线。
在同样的仪器条件下,测定未知样品的荧光强度,然后从标准工作曲线上查出未知样品的浓度(即含量)。
一般常用的荧光分析仪器有:目测荧光仪(荧光分析灯),荧光光度计和荧光分光光度计三种。
荧光分析是一种先进的分析方法,它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及,这同荧光分析具有很多优点分不开的。
荧光分析所用的设备较简单,如目测荧光仪和荧光光度计构造非常简单完全可以自己制造。
比起质谱仪、极谱仪和电子探针仪来它在造价上要便宜很多倍,而且荧光分析的最大特点是:分析灵敏度高、选择性强和使用简便。
同时具备这三大特点的仪器并不多.
激光诱导荧光分析(LIF)
激光的特点:亮度高,方向性好,单色性好,相干性好
仪器组成:与普通的荧光检测器一样,激光诱导荧光检测器主要由光源、光学系统、检测池和光检测元件组成,两者最重要的区别是激光诱导荧光检测器的光源是激光器。
激光器:激光器是激光诱导荧光检测器的重要组成部分,用脉冲激光为光源,采用时间分辨技术可消除瑞利散射光(半径比光或其他电磁辐射的波长小很多的微小颗粒对入射光束的散射)和拉曼散射光(光波在被散射后频率发生变化)对测定的干扰,同时增加被测成分之间测定的选择性。
以上这些特性使激光诱导荧光检测器的信噪比大大增强,显示出最高的灵敏度和较好的选择性。
光学系统:激光诱导荧光检测器的光学系统元件主要为光学透镜和单色器。
光检测器用两个单色器分光,消除杂散光对荧光检测的干扰。
激发单色器将光源分光,得到所需要波长的激发光束,发射单色器用于去除干扰荧光和其它杂散光。
而用激光为光源时,尤其是可调谐激光器,仅用一个发射单色器即可。
用光栅分光能得到较高的信噪比,但其透光效率低,如f/4 光栅大约仅能透过入射光强度的0.3%。
滤光片具有相对较高的透光效率(>50%)。
激光本身有很好的单色性,因此很少采用带通滤光片,采用较多的是剪切式滤光片和空间滤光片。
检测池:常规液相色谱检测池,采用立方形的较多。
激光垂直入射到检测池上,消除了由于激光散射产生的背景噪声,提高检测灵敏度。
光检测元器件:可采用的光检测元器件有光电倍增管、二极管阵列检测器和电荷耦合器件,以光电倍增管的应用最为普遍。
三者比较,电荷耦合器件具有较高的量子效率和信噪比,增强型的甚至可以进行单分子检测。
通过加和和合并,电荷耦合器件还可以进一步提高信噪比,但价格昂贵限制了它的应用。
应用:化学、生物、药物分析;司法取证鉴定;环境污染监测;测量技术;生物体疾病诊断。