食用菌母种

食用菌母种制作的两种简易方法
一、灰树花母种制作
1. 收集准备
选择新鲜的床树花，将彩色的花芯拆开，将母种和母粉分离出来，然后收集并保存在干燥的玻璃杯中。

2.加工加工
将母粉放入清水中浸泡2~3小时，然后用手轻轻挤压，将母粉中的器官质质因子都细化拌和均匀，待水质变得透明后即可取出。

3.蒸煮蒸煮
将母粉放入不锈钢锅中，将水添加到母粉的一半位置，然后加入适量盐及其他调料，浓度不应过于浓稠，并将温度调节到90~100℃，蒸煮数小时，直到母粉颜色发生变色，再加入适量的植物油使其更加香，即熟母粉即可回收。

二、松露母种制作
1.收集准备
选择新鲜的松露，将其细切粉末，并加入少量水混合成浆，导出松露的母种。

2.提取精粹
将提取的母种放在碗里，过滤掉母粒状的淤泥，然后将其加入少量水重复搅拌，分离母粉与母粒，然后用一滤纸将母粉过滤至精粹完成。

3.蒸煮母粉
将精粹放入不锈钢锅中，然后加入水、盐、酱油等调料，并加入植物油以香，将温度控制在90~100℃，不时的翻动内容物蒸煮30分钟，再加入少量冷水即可取出。

做出的母粉可直接拌入食物中食用。

食用菌母种的制作方法：培养基配制，灭菌、菌种分离、培养及管理一、食用菌菌种瓶的选择用100毫升医用盐水瓶代替试管作盛装培养基的容器。

二、培养基的配制1．配方：马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂18～20克，水1000毫升。

2．制作：马铃薯挖去芽眼，去皮洗净，切成薄片后加水，在铝锅中煮沸25～30分钟，用4层纱布过滤，取滤液放入铝锅中，加入琼脂，小火加热并不断搅拌，待琼脂溶化后加入葡萄糖，加开水补足1000毫升，搅匀，趁热装入盐水瓶中，每瓶装8～10毫升，塞上棉塞棉塞要求干燥、松紧、长度合适，再用牛皮纸包住棉塞及瓶口部分，用胶圈扎紧瓶口。

三、灭菌采用高压灭菌，若没有专用高压锅，可用家用高压锅进行灭菌。

方法是：将装好培养基的菌种瓶放置在高压锅中，瓶间留有空隙，不可堆放过紧，以利蒸汽循环，灭菌彻底。

当压力表指针指到0．05时，打开放气阀，集中排出冷空气，使压力降到零时，关闭排气阀进行升压灭菌，自动放气后保持30分钟家用普通高压锅灭菌1．5小时，让其自然冷却，取出放置在接种箱中备用。

四、菌种分离主要采用组织分离法。

通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种，操作时，从子实体内切取一小块组织，放在培养基中培养可长出纯菌种，且菌丝萌发快，遗传性状稳定，后代不易发生变异。

1．种菇消毒：种菇采下后，切去菌柄，放入洗净的盘内，在装有紫外灯的接种箱内照射20～30分钟。

2．接种块切取：在已消毒的接种箱内，撕开子实体，用经酒精灯火焰杀菌冷却的小刀，在菌柄与菌盖交接处内部切取黄豆大小组织块，放入菌种瓶内培养基上培养。

3．接种块选择部位：接种块选择部位因食用菌种类不同而异，菇体肥厚的种菇，在菌盖外缘菌盖皮和菌褶交接处切取组织块进行分离。

菌体小、盖薄、柄空的菌类如金针菇，应快速击掉菌盖，用接种针钩取菌柄顶端生长点组织进行分离。

菌肉极薄菌柄中空孢子不易萌发的伞菌类，可采用子实层分离法，选取半破膜的子实体，移入培养基上，菌丝萌发后即转入新的培养基上。

灭菌物品不要装得太满，留出一定空间，便于蒸汽流通，否则易造成灭菌不彻底。 组织分离后的试管斜面，经过7～10 d培养后，若在斜面上或组织块周围，没有任何杂菌生长，只有从组织块上长出的洁白、粗壮纯净的菌丝体，说
❖ 2、盖上锅盖，盖锅盖时应将锅盖上的排汽管插 明组织分离成功。
2、马铃薯综合培养基：马铃薯(去皮)100 g，蔗糖10 g，琼脂9～10 g，硫酸镁0. 7、将同类菌种扎好，送到该菌所要求的最适温度下(恒温箱或恒温室内)培养，一般培养2 d，检查有无杂菌生长，7～15 d母种菌丝即可长满斜面。
❖ 5、接种完毕，再将接种针在火焰上灼烧灭菌。以免使 接种的菌丝扩散，造成污染。
❖ 6、菌种接完后。贴好标签或用记号笔在试管壁上注明 菌种名称及接种日期等。 7、将同类菌种扎好，送到该菌所要求的最适温度下(恒 温箱或恒温室内)培养，一般培养2 d，检查有无杂菌生长， 7～15 d母种菌丝即可长满斜面。
先贴用好酒 标使精签棉或试球用将记管手号擦笔内拭在消试培毒管，壁养再上用注基镊明子菌成夹种取名一酒称精及斜棉接球种面将日菇期。正等、。斜反面面消毒的。 长度一般为试管长度的3／5。用 注意切于忌在保压力藏表未菌到“种0”的位时试就放管汽，斜以免面试管应内的适培养当基向短上冲些浸湿，棉塞以，造减成以少后菌蒸种的发污染面。 积。气温较低时，
三、实验内容与方法
❖ 常用配方： ❖ 1、马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)： ❖ 马铃薯(去皮)100 g，蔗糖10 g，琼脂9～10 g，水500ml，pH自
然。 ❖ 2、马铃薯综合培养基：马铃薯(去皮)100 g，蔗糖10 g，琼脂9～
10 g，硫酸镁0.8g,磷酸二氫钾，水500ml，pH自然
母种质量检查
❖
通过培养，在试管斜面上长出洁白、粗壮的菌丝体，说明接种

食用菌母种生产技术食用菌母种生产技术母种生产主要包括培养基制备、纯种分离或转管扩大、培养等环节。

一、母种培养基制备1.母种培养基常用配方（1）PDA培养基：马铃薯(去皮，下同)200克，葡萄糖20克，琼脂18-20克，水l000毫升。

（2）加富PDA培养基①综合PDA培养基：马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾3克，硫酸镁1.5克，维生素B110毫克，琼脂18-20克，水1000毫升。

②蛋白胨－综合PDA培养基：在加富PDA培养基①中添加5克蛋白胨。

③麦麸－PDA培养基：在培养基（1）中添加100克麦麸。

④麦芽汁－PDA培养基：在培养基（1）中添加50克大麦芽。

（3）鲜蘑菇浸出液培养基：鲜蘑菇200-250克，葡萄糖20克，琼脂18-20克，水1000毫升。

将蘑菇切碎，煮30分钟，取其液汁。

（4）粪汁培养基：干马粪或牛粪150克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升。

将马粪或牛粪打碎，煮沸30分钟，取其溶液。

（5）完全培养基（CM）培养基：蛋白胨2克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾0.46克，硫酸镁0.5克，磷酸氢二钾1克，琼脂18-20克，水1000毫升。

2.母种培养基制作方法不同配方培养其制作方法基本相同，现以综合PDA培养基为例介绍其制作方法。

（1）培养基制作。

将土豆洗净、去皮、挖去芽眼及变青绿部分，称取200克，切成约长宽各2厘米厚3毫米左右的薄片，在1200毫升水煮沸10－15分钟，然后用4－6层纱布过滤，倒掉残渣并洗净铝锅。

将滤液倒入锅内，加清水补足 1000毫升，同时放入琼脂并重新开始加热，最好小火加热，不断搅拌至琼脂完全溶化，再用纱布过滤一次，补水至1000毫升。

最后依次将称好的葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和维生素加入，继续加热并搅拌至全部溶化，停止加热。

如果要加入蛋白胨需将蛋白胨用冷水溶化后加入，可以避免蛋白胨因结块而分散不均。

图3－11 试管分装（2）分装试管。

左手持3-4支试管，管口朝上，令下端整齐，上移试管至漏斗软管，插入试管内约3厘米。