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胰岛素抵抗细胞模型研究进展

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胰岛素抵抗细胞模型研究进展

陈梦云;江国荣

【摘 要】Insulin resistance is an important pathophysiological basis of type

2 diabetes and is a dominant feature for metabolic syndrome. Due to the

complex insulin signaling, in order to clarify the specific mechanism of

insulin resistance, targeted at the mechanism of disease development, the

researchers aimed to the establishment of insulin resistant cell model, in

which fat cell and liver cell models were used more often. However, under

different cell types degrees of insulin resistance are different, and so are

the mechanism by the same induction factors. In this paper,the

establishment of insulin resistance model under different cell tryes is

summarized.%胰岛素抵抗是2型糖尿病和代谢综合征共同的重要病理生理基础和显著特征.由于胰岛素信号传递复杂,为阐明胰岛素抵抗产生的具体机制,研究者通过建立胰岛素抵抗细胞模型进行胰岛素抵抗研究,其中脂肪细胞和肝细胞是应用较多的两种细胞模型.然而在相同的诱导因素下不同的细胞类型发生胰岛素抵抗的程度都会不同,其机制也不尽相同.该文就关于不同细胞类型建立胰岛素抵抗模型做个相关综述.

【期刊名称】《安徽医药》

【年(卷),期】2012(016)002

【总页数】3页(P141-143)

【关键词】胰岛素抵抗;靶器官;细胞模型 【作 者】陈梦云;江国荣

【作者单位】南京中医药大学,江苏,南京,210029;南京中医药大学,江苏,南京,210029

【正文语种】中 文

胰岛素抵抗(Insulin Resistance，IR)是指一定量的胰岛素与其特异性受体结合后生物效应低于正常，表现为外周组织尤其是脂肪、肌肉组织对葡萄糖的摄取障碍及肝葡萄糖输出增多［1］。胰岛素作用的靶器官有脂肪、肝脏、肌肉等，然而在同一机体不同组织中胰岛素抵抗的程度存在组织器官特异性，导致了胰岛素抵抗机制的复杂性和研究结果的矛盾性。因此，建立理想的胰岛素抵抗细胞模型对于进一步研究糖尿病及相关疾病发生发展的病理生理机制、治疗及其并发症的转归，以及探索糖尿病防治药物具有重要的临床意义。

1 脂肪细胞IR模型

目前认为，脂肪组织不仅是机体内最大的能量储存器官，更是机体重要的内分泌器官，脂肪组织过多的积累，导致大量脂肪酸溢出，并异位沉积，继而引起脂质代谢紊乱和IR发生［2］。因此，脂肪组织及脂肪酸代谢在IR发生发展中起着关键作用。

目前，对于建立供脂肪细胞体外培养及人脂肪细胞激素长时调控的细胞模型的研究逐渐深入。80年代，已有学者建立鼠源性的前脂肪细胞系，并且证实其在增殖数小时后依然保持对胰岛素的敏感性。在目前现有的脂肪细胞胰岛素抵抗模型中，以诱导3T3-L1前脂肪细胞的胰岛素抵抗模型最为广泛，3T3-L1是小鼠来源性的前脂肪细胞株，于乐等［3］将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞，采用高浓度葡萄糖(25 mmol·L-1)、胰岛素(10-6 mol·L-1)联合诱导培养的方法，建立了脂肪细胞胰岛素抵抗模型。曾天舒等［4］采用IL-6与诱导分化成熟的3T3-L1前脂肪细胞共培养48 h后发现，胰岛素刺激的葡萄糖摄取明显受到抑制，说明此时细胞呈现胰岛素抵抗。同时还发现脂肪细胞内IRS-1蛋白水平经IL-6处理后明显减少，伴随着几乎同等水平的胰岛素刺激的IRS-1酪氨酸磷酸化水平下降。杨桂枝［5］将诱导分化成熟的3T3-L1前脂肪细胞，在地塞米松(1μmol·L-1)和胰岛素(10 nmol·L-1)的长时间作用下，以微量化GOD-POD法判定抵抗脂肪细胞摄取葡萄糖的能力显著降低，成功建立了胰岛素抵抗脂肪细胞模型。张汝学等［6］将地塞米松作用于3T3-L1脂肪细胞，96 h后脂肪细胞胰岛素抵抗模型建立，该模型能够在24 h内维持稳定;同时又将HepG2细胞置于(10-6 mol·L-1)胰岛素培养液中36 h，HepG2细胞对胰岛素的抵抗作用更为明显，该特性可维持48 h，并未发现细胞形态学变化。目前也有学者利用SW872细胞建立IR模型，但关于该种细胞的研究报道很少。吴汉荣等［7］采用(25、50 mmol·L-1)葡萄糖刺激分化成熟的3T3-L1和SW872前脂肪细胞，研究发现3T3-L1脂肪细胞的基础葡萄糖转运随葡萄糖浓度的增高相应增加。在低浓度葡萄糖时，胰岛素明显增加葡萄糖的转运;而在高浓度葡萄糖刺激下，细胞对胰岛素的敏感性减弱，发生了胰岛素抵抗。对SW872细胞而言，高糖对SW872细胞的基础糖转运无明显影响，但高糖亦可诱导SW872细胞产生胰岛素抵抗。

越来越多的研究认为脂肪组织是胰岛素抵抗产生的始发部位。一方面循环中FFA升高使脂质过度沉积，导致脂肪细胞体积增大并伴有数目增多，另一方面增大的脂肪细胞通过合成和分泌多种活性物质，包括瘦素、抵抗素、肿瘤坏死因子、白介素、促分裂原活化蛋白激酶等，它们在胰岛素抵抗与DM的发生发展过程中具有重要作用［8］。如出现瘦素抵抗时，瘦素对胰岛素的抑制作用减弱，正常的脂肪—胰岛素反馈机制破坏，胰岛素大量分泌，引起高胰岛素血症，并降低胰岛素受体数量，导致胰岛素抵抗的发生［9，10］。又如，Kubeta等发现脂联素缺乏的杂合子小鼠出现轻度胰岛素抵抗，纯合子小鼠出现中度胰岛素抵抗，证实脂联素能拮抗胰岛素抵抗［11］。由于脂肪细胞的一些生物学特性，注定了它在胰岛素抵抗发生时起着重要作用。

2 肝细胞IR模型

肝脏、骨骼肌和脂肪作为胰岛素作用的经典靶器官，其中肝脏是体内物质代谢的中心，在糖代谢中起着重要作用，且肝脏是人体胰岛素受体最密集的脏器之一，对胰岛素促进葡萄糖摄取作用极为敏感。目前使用的肝细胞模型大多来源于人肝癌细胞，系一种表型与肝细胞极为相似的肝胚胎瘤细胞株，既保留了正常肝细胞的基本生物特性，又排除了正常肝细胞表现的细胞衰亡的现象，而且便于体外培养。但是，也有一些研究表明某些肿瘤细胞本身也存在着胰岛素抵抗［12］。如万学东等［13］采用含(0.25 mmol·L-1)软脂酸或含(100 nmol·L-1)胰岛素的DMEM培养基孵育HepG2细胞24 h，建立胰岛素抵抗模型，并证明细胞产生了胰岛素抵抗且胰岛素信号传导途径存在障碍，并提示胰岛素抵抗的形成可能与IRS-2及PI3K相关分子缺陷有关。Burant等［14］将单层贴壁HepG2细胞置于(10-7 mol·L-1)胰岛素的 DMEM培养液中，孵育24 h，从而成功建立胰岛素抵抗的HepG2细胞模型。李长贵等［15］将HepG2细胞置于(10-7 mol·L-1)胰岛素培养液中24 h发现:下调HepG2细胞胰岛素受体减少了56%，将下调的HepG2细胞置于不同胰岛素培养液中胰岛素受体数目仍明显减少，该胰岛素抵抗状态可维持48 h。此外，陈秋等［16］将HepG2细胞置于(5×10-7 mol·L-1)胰岛素培养液中24 h，或将高胰岛素诱导培养的HepG2细胞置于不含胰岛素的培养液中60 h。研究发现HepG2细胞被孵育24 h后，此时该细胞对胰岛素的生物学效应产生抵抗，其胰岛素抵抗状态可维持60 h。

目前，学者利用原代肝细胞研究糖尿病的报道较少，李晨钟等［17］原代分离大鼠肝细胞采用高浓度胰岛素诱导培养法复制Wistar大鼠原代肝细胞，建立了原代大鼠肝细胞的胰岛素抵抗模型。也有报道部分现代学者利用张氏肝细胞建立一种比较全面反映糖尿病病理的原代肝细胞模型，李铖铖等［18］以张氏肝细胞为研究对象，采用高浓度胰岛素体外诱导法诱发张氏肝细胞胰岛素抵抗，分别在含不同浓度牛胰岛素培养液中培养24 h，发现经(100 nmol·L-1)胰岛素培养的细胞消耗葡萄糖最少，即胰岛素抵抗作用最为显著，该抵抗状态在36 h内维持稳定。张氏肝细胞是人永生化正常肝细胞株，具有人类肝细胞的特征，其表面表达高亲和力的胰岛素受体满足典型胰岛素受体所要求的标准，包括葡萄糖的摄取、糖原合成酶的活性、脂类生成及RNA的合成［19］。张氏肝细胞的研究为胰岛素抵抗和2型糖尿病又提供了一种新的可靠的胰岛素抵抗细胞模型。

3 骨骼肌细胞IR模型

在目前现有的细胞模型中，以诱导3T3-L1前脂肪细胞和HepG2肝癌细胞的胰岛素抵抗模型最为常见，对分布最为广泛靶组织骨骼肌胰岛素抵抗模型国外报道较少，国内仅有原代培养骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型相关报道。L6细胞株是骨骼肌发育分化研究中常用的细胞模型，成肌过程是一个成肌诱导增殖和分化的过程，分化成熟后的细胞具有骨骼肌的生物学特性，并在此基础上拟对骨骼肌细胞采用诱导的方法建立胰岛素抵抗模型。张召锋等［20］采用地塞米松诱导L6肌细胞产生胰岛素抵抗。同时发现地塞米松刺激24 h后能显著降低胰岛素刺激后的L6肌细胞葡萄糖转运，另外还发现地塞米松作用24 h后将引起细胞胰岛素受体底物-1的Ser307蛋白磷酸化。穆颖等［21］采用新生SD大鼠四肢进行原代骨骼肌细胞培养，分别与胰岛素和棕榈酸两种因素诱导，发现两者均可成功诱导骨骼肌细胞的抗性模型，且抑制程度呈浓度依赖性的趋势，另外还发现棕榈酸、胰岛素于CO2培养箱中孵育过夜，均能显著抑制骨骼肌细胞胰岛素刺激状态下的葡萄糖转运。研究结果显示，2型糖尿病病人骨骼肌胰岛素刺激下葡萄糖转运明显减少，在胰岛素刺激下，葡萄糖转运总量在骨骼肌约占75%，认为骨骼肌是2型糖尿病患者药物治疗的靶器官［22］，同时认为骨骼肌胰岛素依赖的葡萄糖摄取和磷酸化抵抗是2型糖尿病发展历程中的一个早期过程［23］。

目前体外研究胰岛素抵抗的细胞模型与方法较多，但大多集中在依赖胰岛素的葡萄糖利用器官如脂肪、肝脏、骨骼。由于，脂肪细胞的生物学特性，其抗性模型主要适用于胰岛素抵抗发生及糖尿病前期的研究，而肝脏以及骨骼肌的抗性模型更适合于糖尿病及其并发症的研究。目前也有学者采用地塞米松联合胰岛素长时间作用于猪卵巢颗粒细胞，发现细胞摄取葡萄糖能力降低，细胞产生胰岛素抵抗状态［24］。但是，脂肪及外周组织如肝脏、骨骼肌等是胰岛素作用的靶组织，是IR产生的主要部位，目前能有效预防或延缓该病程发展的措施还相当有限。因此，建立体外胰岛素抵抗模型，不仅广泛应用于细胞及分子水平研究胰岛素抵抗的发病机制，更适用于改善胰岛素抵抗药物的筛选及其机制研究。总之，以上介绍的几种常用胰岛素抵抗模型较为稳定、可靠，尤其复制周期较短、易于重复、影响因素易于控制，基本模拟了临床胰岛素抵抗的效应，是目前普遍采用的胰岛素抵抗方面研究的良好模型。

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胰岛素抵抗的发病机制研究进展

胰岛素抵抗的发病机制研究进展

临　床　Ｃ　ＨｊＮＥＳＥ　ＣＯＭＭＵＮＩＷ　０ｏＣＴ０ＲＳ　李晓光　胰岛素抵抗的发病机制研究进展　１　１０００２辽宁省沈阳市沈洲医院　摘要胰岛素抵抗是糖尿病、高血压、　肥胖症、动脉硬化等代谢综合征疾病代谢　紊乱的基础，其发病机制存在着复杂的遗　传因素和环境因素（年龄、肥胖、不同种　族）。这里将不同类型胰岛素抵抗的发　病机制综述如下。　关键词胰岛素抵抗代谢综合征肥　胖原发性高血压　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７—６１４ｘ．２０１０．　０】．００５　胰岛素抵抗（ＩＲ）的定义　胰岛素是机体内一种重要的内分泌　激素，它与受体结合后经过一系列的信号　转导来调节基　表达，作　于主要靶器　官——肝脏、肌肉和脂肪组织，参与体内　多种物质的代谢调节。ＩＲ是指胰岛素维　持正常血糖的能力下降，其产生的生物学　效应低于正常水平，或组织对胰岛素的反　应性下降。机体为了保持胰岛素血内环　境稳定和血糖正常，代偿性地增加胰岛素　分泌，临床表现高胰素血症‘　。ＩＲ和高　胰素血症常共存，但其含义不一致，因为　血中胰岛素水平除与ＩＲ程度有炎外，还　与胰岛１３细胞分泌功能和胰岛素代谢清　除率有关。当这两方面　素正常时，血胰　岛素水平才反映ＩＲ的程度　。　肥胖引起胰岛素抵抗的内分泌机制　近几年，脂肪组织作为一个活跃的内　分泌器官已在学术界形成共识。研究发　现脂肪组织町以分泌一系列激素和细胞　因子，参与调节一些生理病理过程，与２　型糖尿病、肥胖、心口ＩＬ管疾病、免疫反应等　疾病和病理过程有密切的关系　。　高血压病胰岛素抵抗机制　胰岛素抵抗致ｆｆＩＬ压升高的可能机制，　目前认为有下列几个方面：①交感神经系　统兴奋性增加；②肾脏水钠潴留增加；⑧　影响细胞膜钠钾泵和钙泵活性；④ｍ管平　滑肌细胞的增殖；⑤增加内皮素的合成与　释放；⑥增加缩血管物质对血管的敏感性　技降低舒』ｆ『Ｌ管物质的敏感性；⑦影响前列　腺素的生成。　皮下胰岛素抵抗机制　皮下胰岛素抵抗　一般意义的胰岛　素抵抗不同，是糖尿病患者对皮下注射胰　岛素不敏感，但对静脉注射胰岛素的敏感　性正常或接近正常。胰岛素皮下抵抗是　糖尿病患首在胰岛素治疗过程巾，　皮肤　阻碍或延迟胰岛素吸收进入循环，导致葡　萄糖代谢失衡，是脆性糖尿病的一部分。　发病机芾ＩＪ为吸收异常与降解异常有关。　胰岛素样生长因子与胰岛素抵抗的机制　胰岛素样生长Ｌ大］子（ＩＧＦｓ）概述：ＩＧＦｓ　任正常生理活动中起着极为重要的作用，　与胚胎分化、个体发育密切相关，参与糖、　脂肪和蛋白质代谢。该系统异常是糖尿　病、ｌＲ、内分泌紊乱、癌症、营养不良、骨骼　发育不良、骨密度降低和多囊卵巢综合　（ＰＣＯＳ）等多种疾病的病　之一。该家族　主要有３种肽类激素（或生长　子）：胰　岛索、ＩＧＦ—Ｉ、ＩＧＦ—ｌＩ。ＩＲ是指机体组　织细胞对胰岛素促进ｍ糖摄取和利　｝＿｝Ｊ的　敏感性卜降，使一　定量的胰岛素产生的生　物学效应低于正常水平，从而继发高胰岛　素【ｆｆＬ症（ＨＩＳ）。　ＩＧＦｓ与胰岛素抵抗的机制探讨：ＩＧＦ　Ｉ改善ＩＲ作用町能通过以一Ｖ＊ＪＬ￥０：①　类似胰岛素的促进组织摄取葡萄糖，促进　糖原异生、糖酵解和蛋Ｆ１质和脂肪合成，　抑制蛋Ｆ１质币¨脂肪分解，减少血液游离脂　肪酸和氨基酸的浓度；直接　胰岛素受体　结合，改善胰岛素或胰岛素受体后敏感性　达到降糖作用；②ＩＧＦ—Ｉ能抑制ＧＨ　和胰岛素分泌，降低高胰岛素血症；③刺　激ＲＮＡ、ＤＮＡ的合成和细胞增殖，特别是　在细胞循环周期ＧＯ～Ｇ１和Ｇ１～Ｇｓ等有　丝分裂阶段。　ＩＧＦ—Ｉ对【ｆＩｌ糖的调节机制如Ｆ：①　组织中高效表达的１ＧＦ—Ｉ，必然影响　Ｉ（　Ｆ—Ｉ、ＩＧＦ—ｌ结合蛋Ｉ　｛、ＩＧＦ—Ｉ受　体（ＩＧＦ—Ｉ　Ｒ），　ＩＧＦＢＰ的变化又反馈　影响游离ＩＧＦ—Ｉ在组织和ｍ循环中重　分布，从而增强ＩＧＦ—Ｉ主要生物学效　应；②ＩＧＦ—Ｉ升高，尚能纠正ＤＭ动物体　内ＧＨ／ＩＧＦ—Ｉ／ＩＧＦＢＰ轴缺陷，提高胰岛　素敏感性，使糖代谢紊乱有所改善；③体　内高浓度ＩＧＦ—Ｉ还能　胰岛素受体结　合，通过类胰岛素样作月｛，进一　步弥补胰　８中国社区医师·医学专业２０１０年１月中期（第１２卷总第２２７期　岛素合成和分泌缺陷。　１ＧＦ—Ｉ提高胰岛素或胰岛素受体后　敏感性，ＩＧＦ—Ｉ与胰岛素敏感陛丰ｆＩ关，低　浓度ＩＧＦ—Ｉ町增加代谢综合　的危险　性。ＩＧＦ—ｌ　ｕ丁反馈性地抑制ＧＨ分泌，　阻止胰高糖素分泌，减少ＧＨ和胰高糖素　对胰岛素的影响。ＩＧＦ—Ｉ通过降低生长　激素水平Ｅ调胰岛素受体等途径增加脏　器、组织对胰岛素的敏感性。ＩＧＦ—Ｉ浓　度主要受生长激素ＧＨ凋节，ＧＨ分泌过　多使空腹　糖增加，减少胰岛素和外源性　胰岛素的敏感性。同时，改变月十糖输出和　外周血糖利川。ＧＨ增强碳水化合物代　谢时的胰岛素抵抗和高胰岛素　症，ＩＧＦ　Ｉ町通过负反馈涮节ＧＨ水平。１ＧＦ、一　Ｉ能抑制Ｃ肽、ＧＨ、胰岛素和胰高　糖素　的水平，抑制Ｈｆ糖冗的输出，降低血巾游　离脂肪酸和氨基酸水平。ＩＧＦ—Ｉ主要通　过ＩＧＦ—Ｉ　Ｒ起作　，ＩＧＦ—Ｉ与受体结　合后，肩动两条信号传递链，一是磷酸化　磷酯酰肌醇（ＰＩＰ３）介导的途径，即通过　磷酸化的胰岛素受体底物激活磷酯酰肌　醇３激酶（ＰＩ一３激酶），传递细胞生长的　信息。另一种是激活有丝分裂原激活蛋　白激酶（ＭＡＰｋ），发挥受体的各种生物学　效应，促进细胞的新陈代谢变化。这种作　川可分为近期类胰岛素样作川：促进葡萄　糖的摄取，糖原的合成，ＩＧＦ—ｌ町通过内　分泌，旁分泌和白分泌作川ｌ丁靶细胞，在　转录和翻译水平上促进蛋白合成，减少蛋　白分解及加速外源性氨基酸的摄取，ＩＧＦ　ｌ还能加速脂肪转变成乙酰辅酶Ａ而　促进脂肪动员，加速脂肪分解；远期的有　丝分裂原作州：促进蛋白，ＲＮＡ、ＤＮＡ合　成和细胞复制　参考文献　１刘晓民．胰岛素抵抗——一个重要的超学　科问题．黑龙江医学，２００４，２８（６）：４０１—　４０２．　２　Ｄｅｆｉｎｎｚｏ　ＲＡ．　Ｆｏｔ）ｉｎ　ＪＯ．Ａｎｄｒｅｓ　Ｒ．Ｇｌｕ｛　｛）ｓｅ　ｃｌａｍｐ　ｌｅｃｈｎｉｑｕｅ：Ａ　ｌｌｌｅ＇ｌｈｏｄ“１　ｑｕａｎｔｉｆｙｉｎｇ　ｉｎ—　ｓｕｌｉｎ　ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｓｉｓｄｌａｎｃｅ．Ａｍ　Ｊ　Ｐｈｓｉａ１．　１９７９，２３７（３）：Ｅ２１４～Ｅ２２３．　３　中庆运．肥胖引起胰岛素抵抗的内分泌机　制研究进展．泰山医学院学报，２００８，２９　（４）：３２８—３２０．　４叶威巍．脂肪组织的内分泌功能研究进展．　巾华医学研究杂志，２００６，６（４）：３３２—３３５．

脂肪细胞因子与胰岛素抵抗的研究进展

脂肪细胞因子与胰岛素抵抗的研究进展

河北医药２００７年３月筮　鲞筮　塑　』　墼　Ｑ　ｚ　：　

脂肪细胞因子与胰岛素抵抗的研究进展　

王欣王战建　

脂肪组织也是内分泌器官的理论已经被广泛接受。脂肪　

细胞分泌的许多细胞因子、活性蛋白，不仅与脂肪细胞自身分　

化和脂肪形成有关，其对全身代谢的调节也存在重要的影响。　

脂肪细胞因子在胰岛素抵抗中的作用被许多研究者所关注。　

本文就近年来备受关注的一些脂肪细胞因子与胰岛素抵抗的　

研究作一综述。　

１脂联素与胰岛素抵抗　

１．１脂联素改善胰岛素抵抗脂联素的胰岛素敏感作用在　

２００１年首次被３个研究小组所证实。脂联素明显改善高脂饮　

食导致的胰岛素抵抗和高甘油三酯血症，这一点使我们认识到　

脂联素是一种胰岛素增敏的细胞因子…。Ｂｅｒｇ等　报道在野生　

小鼠和糖尿病小鼠，循环脂联素水平的急性增加通过抑制肝糖　

酶的表达和内源性葡萄糖的产生引起了血糖水平的降低，因而　

他们认为脂联素使机体对胰岛素的敏感性增加。蛋白分解的　

脂联素片段重组成完整的脂联素后，增加肌肉的脂肪酸氧化，　降低血糖和小鼠的体重　］。后来在生物体内对脂联素在胰岛　

素抵抗方面的慢性作用也进行了研究。Ｋｕｂｏｔａ等　进一步发现　

脂联素缺乏的杂合子小鼠（ａｄｉｐｏ　一小鼠）出现轻度胰岛素抵　

抗，纯合子小鼠（ａｄｉｐｏ　一小鼠）出现中度胰岛素抵抗，外源性补　

充脂联素可改善糖耐量异常。Ｓｔｅｆａｎ等　研究１４３例正常血糖　

水平、糖耐量异常及２型糖尿病患者的空腹血清脂联素水平与　

内源性血糖水平（ＥＧＰ－ｂａｓａ１）及输注胰岛素时的血糖水平（ＥＧＰ－　

ｉｎｓｕｌｉｎ）的关系，调整其他影响因素后的结果显示，脂联素与　

ＥＧＰ－ｂａｓａｌ和ＥＧＰ－ｉｍ￣ｉｎ呈显著负相关（Ｐ＝０．００６，Ｐ＜０．０１），　

与动物实验中研究结果一致，即脂联素可增加胰岛素敏感性。　

１．２脂联素改善胰岛素抵抗的作用机制　Ｙａｍａｕｃｈｉ等　发现　

全长脂联素激活肝脏的腺苷酸活化蛋白激酶（ＡＭＰＫ）磷酸化　

胰岛素抵抗患者前脂肪细胞培养及增殖与分化模型的建立

胰岛素抵抗患者前脂肪细胞培养及增殖与分化模型的建立

第３７卷第５期第６６５页　２００８年１Ｏ月　华中科技大学学报（医学版）　Ａｃｔａ　Ｍｅｄ　Ｕｎｉｖ　Ｓｃｉ　Ｔｅｃｈｎｏｌ　Ｈｕａｚｈｏｎｇ　Ｖｏ１．３７　ＮＯ．５　Ｐ．６６５　０ｃｔ．　２００８　

胰岛素抵抗患者前脂肪细胞培养　

及增殖与分化模型的建立＊　

闵　洁　邱红玉　孙永玉　王泽华△　

华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科，武汉４３００２２　

摘要　目的探索多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）胰岛素抵抗（ＩＲ）患者的前脂肪细胞原代培养模型。方法　取ＰＣＯＳ　ＩＲ　

患者腹部纯脂肪颗粒，采用改进的“贴壁一天花板”法，培养出梭形细胞，同时取皮肤组织，进行成纤维细胞培养作对照，采　用胰岛素样生长因子一１（ＩＧＦ－１）为主的脂肪细胞分化培养液，诱导前脂肪细胞的分化。结果培养出的梭形细胞成分均　

一，增殖旺盛，分化率高。经形态学动态观察、生长曲线及对ＩＧＦ一１和地塞米松反应的测定证明其是功能活跃的前脂肪　细胞，在体外重现了其增殖、分化的全过程。结论采用改良“贴壁一天花板”法，能成功地培养出胰岛素抵抗患者前脂肪　细胞；采用ＩＧＦ－１取代胰岛素作为脂肪细胞分化培养液，可以诱导前脂肪细胞的分化。　关键词多囊卵巢综合征；胰岛素抵抗；前脂肪细胞；原代培养　

中图法分类号　Ｒ３２９．２　ＤＯＩ：１０．３８７０／ｉ．ｉｓｓｎ．１６７２—０７４１．２００８．０５．０２７　

Ｐｒｉｍａｒｙ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ　ｉｎ　Ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｉｎｓｕｌｉｎ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　

Ｍｉｎ　Ｊｉｅ，Ｑｉｕ　Ｈｏｎｇｙｕ，Ｓｕｎ　Ｙｏｎｇｙｕ　ｅｔ　ａｌ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ　ａｎｄ　Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ，Ｕｎｉｏｎ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｇｊ　ｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，　Ｈｕａｚｈｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ　４３００２２　

胰岛素抵抗及胰岛素抵抗综合征研究展望

胰岛素抵抗及胰岛素抵抗综合征研究展望

胰岛素抵抗及胰岛素抵抗综合征研究展望

1988年Reaven提出著名的“X综合征”的概念[1]，这在胰岛素抵抗(IR)认识史上是一个新的里程碑。他不仅大大推动了糖尿病的研究与防治，刷新了对糖尿病机制及防治的认识，同时还促进了包括内分泌及代谢病、心血管疾病、 肾脏病、妇产科学以及药学等多学科的交叉渗透。故自90年代以来一直成为世界医学前沿的 一大亮点。现就当前研究中最新进展的一些重要问题作一简要讨论，以供今后研究参考。

1、临床流行病学研究

1.1 IR/胰岛素抵抗综合征(IRS)流行病学：2型糖尿病普遍存在IR早已定论。但2型糖尿病中究 竟有多少人有IR则缺乏准确数据。最近Haffner等采用改良FSIGT微小模型法测定了479例2型 糖尿病，以胰岛素敏感指数≥1.61×10-4min-1*μU-1*ml-1( 高于非糖尿病者的中位数)定义为对胰岛素敏感，结果胰岛素敏感的2型糖尿病为37例(8%)，而2型糖尿病中有IR者占442例(92%)[2]。

在大规模人群中的IR患病率的调查资料极为有限。Bloomgarden估计在美国人中7，000～8，000万人有IRS，占美国人口的1/3[3]。这是一个十分惊人的数字!

IRS的患病率近来也开始进行研究。一项888例的多国群体研究表明IRS中糖耐量低减(IGT)+血脂异常+高尿酸血症+高血压的联合流行率可高达81%。在中国，贾伟平等报告上海40～49岁人群随机抽样的771例男性和1，189例女性IR流行情况。以高血糖、高血压及血脂异常兼具者为全代谢综合征。结果，标化后的患病率分别为超重33.3%，肥胖4.3%，糖尿病11.9%，空腹血糖异常升高(IFG)/IGT 12.1%，高血压44%，血脂异常67.5%， 全代谢综合征12.4%。在正常体重〔体重指数(BMI)18.5～25〕，超重(BMI 25～30)及肥胖( BMI＞30)三组中全代谢综合征的患病率分别为8.0%、21.6%及29.6%。进一步将正常组按BMI 23kg/m2分为两组，发现BMI＞23者全代谢综合征的相对危险度较BMI＜23者高2～4倍。因此，作者等提出对中国人IRS、BMI＞23的人群应进行干预[4]。