生物组织中还原糖的测定
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检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法糖类的检测方法:1.放射免疫法:利用放射性同位素标记的抗体或反应物与目标糖类结合,通过测量放射同位素的放射性强度来定量糖类。
2.高效液相色谱法:利用高效液相色谱仪将样品中的糖类分离,并通过检测器测定糖类的浓度。
3.还原糖法:通过还原糖的特性,将还原糖与试剂反应生成有色化合物,通过测量其吸光度来定量糖类的浓度。
4.酶法:利用具有特异性的酶针对特定的糖类进行酶解反应,生成可测定的产物,通过检测产物的浓度来定量糖类。
脂肪的检测方法:1.水解法:将样品中的脂肪水解为脂肪酸和甘油,再通过酶法或化学法测定脂肪酸或甘油的浓度。
2.胆固醇氧化酶法:利用脂肪样品中的胆固醇通过酶催化反应生成可测定的产物,通过测量产物的浓度来定量脂肪。
3.紫外吸收法:利用脂肪样品中的化学结构特性,通过紫外光谱测量脂肪的吸光度来定量脂肪的含量。
4.气相色谱法:通过气相色谱仪将样品中的脂肪分离,并通过检测器测定脂肪的浓度。
蛋白质的检测方法:1.低里氏法:利用低里氏试剂与蛋白质发生反应,形成可测定的复合物,通过测量复合物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
2.高效液相色谱法:利用高效液相色谱仪将样品中的蛋白质分离,并通过检测器测定蛋白质的浓度。
3.毛细管电泳法:将样品中的蛋白质在电场作用下在毛细管中分离,根据蛋白质的电荷、大小和形状的差异来测定蛋白质的浓度。
4.射流显色法:利用射流试剂将蛋白质样品中的蛋白胺基酸与试剂反应生成有色产物,通过测量产物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
需要注意的是,以上方法中的每一种都有其适用范围和局限性,具体选择方法时需根据实验要求、样本特性和实验设备等因素进行合理选择。
此外,还可结合多种方法进行确认和校准以提高检测结果的准确性和可靠性。
实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质学习目标:初步掌握鉴定生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的基本方法,尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。
重点、难点:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质知识链接:了解同种生物组织中有机物含量的差异和不同生物组织间有机物含量的差异,为本章第一节及第四节的学习打下基础。
学习过程实验原理:1、某些化学试剂能使生物组织中的有机化合物产生特定的_____________________________________2、糖类中的还原糖,如:________________与_________________发生作用,生成________________3、脂肪可以被_____________________染成橘黄色,或被__________________ 染成红色4、蛋白质与__________________发生作用,产生_______________反应5、淀粉遇_____________蓝色实验过程:一、还原糖的检测和观察1、制备生物组织样液(1)_________________(洗净、去皮、切块)取5克放入研钵中。
(2)____________________________(加少许Si02和5ml水)(3)_____________(将漏斗插入试管,漏斗上垫一层纱布)(4)_____________(组织样液备用)2、还原糖的检测和观察(1)试管+2ml__________________________________(2)加_______________1ml振荡(溶液呈蓝色)(3)_______________(将试管放入盛有50—600C温水的大烧杯中加热约2min)(4)观察颜色变化二、脂肪的检测和观察1、制备生物组织实验材料:花生种子(浸泡3-4小时)、作徙手切片、取极薄的一片移至载玻片中央。
2、_____:滴2—3滴苏丹Ⅲ染液,染色3min(苏丹Ⅳ染色1min)3、______:吸取剩余染液,并滴1-2滴50%酒精溶液,洗取浮色4、______:吸取酒精,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖波片。
藏躲市安详阳光实验学校考点03 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质高考频度:★★★☆☆难易程度:★★★☆☆1.实验原理2.实验步骤考向一糖类、脂肪和蛋白质的检测原理与操作1.关于生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验,下列叙述正确的是A.还原糖、脂肪的鉴定通常分别使用双缩脲试剂、重铬酸钾试剂B.鉴定还原糖、蛋白质都需要进行水浴加热C.用于配制斐林试剂的NaOH溶液是无色的D.脂肪、蛋白质鉴定时分别可见橘黄色颗粒、砖红色沉淀【参考答案】C【试题解析】还原糖、脂肪的鉴定通常分别使用斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂,A错误;鉴定蛋白质不需要进行水浴加热,B错误;NaOH溶液是无色的,C正确;蛋白质鉴定时出现紫色,D错误。
技法提炼利用“一同三不同”区分斐林试剂与双缩脲试剂:“一同”是指都含有NaOH和CuSO4两种成分,且NaOH溶液的质量浓度都为0.1 g/mL。
“三不同”分别指:(1)使用原理不同。
斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液,双缩脲试剂的实质是碱性环境中的Cu2+。
(2)使用方法不同。
鉴定还原糖时将甲、乙两液等量混匀后立即使用;鉴定蛋白质时先加A液1 mL摇匀,然后加B液4滴,振荡摇匀。
(3)CuSO4溶液的浓度不同。
斐林试剂中CuSO4溶液的质量浓度为0.05 g/mL,双缩脲试剂中CuSO4溶液的质量浓度为0.01 g/mL。
2.下列关于“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”实验操作步骤的叙述中,正确的是A.用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定B.若要检测植物体中是否含有脂肪,一定需要用显微镜观察C.鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂(甲液和乙液等量混合均匀再加入) D.用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,需水浴加热2 min才能看到紫色【答案】C【解析】斐林试剂甲液和双缩脲试剂A液的成分及浓度都相同,斐林试剂乙液和双缩脲试剂B液的成分相同但浓度不同,因此用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液不能直接用于蛋白质的鉴定,A错误;鉴定脂肪时,可将植物组织制成匀浆后检测,不需要使用显微镜,B错误;鉴定可溶性还原糖时,斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀再加入,C正确;用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,不需要水浴加热,D错误。
生物实验报告生物实验报告(精选9篇)在人们素养不断提高的今天,我们使用报告的情况越来越多,报告中提到的所有信息应该是准确无误的。
那么你真正懂得怎么写好报告吗?下面是小编整理的生物实验报告,欢迎大家分享。
生物实验报告篇1一、实验目的初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
二、实验原理1、还原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。
它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基),因此叫做还原糖。
蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基,因此叫做非还原性糖,不具有还原性。
本实验中,用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否,而不能鉴定非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。
Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
其反应式如下:CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
2、蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。
双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01g/mL(B)的硫酸铜溶液。
在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
3、脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色,被苏丹Ⅳ染成红色三、实验过程(见书P18)四、实验用品(见书P18)五、注意1、关于鉴定还原糖的实验,在加热试管中的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部,并放入盛开水的大烧杯中加热。
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液,在加热条件下,Cu2+被还原成Cu2O,形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合,现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液:准确称取1.0g葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml,配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理:准确称取待测样品0.1g,用蒸馏水溶解并定容至10ml,配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤:a. 取一支试管,加入1ml斐林试剂;b. 取另一支试管,加入1ml样品溶液;c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟;d. 观察颜色变化,记录结果。
5. 结果处理:a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照;b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果:样品溶液加入斐林试剂后,加热至沸腾,观察到样品溶液变为浅蓝色,随后逐渐变为棕色,最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析:根据实验结果,样品溶液中加入斐林试剂后,发生了还原反应,生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖,且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中,样品溶液加热至沸腾时,需保持沸腾状态2分钟,以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中,样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀,说明还原糖在加热条件下,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
还原糖鉴定的步骤
在生物化学和食品科学中,还原糖鉴定是一个重要的实验过程。
这个过程用于确定样品中是否含有可还原性糖,例如葡萄糖、果糖等。
以下是还原糖鉴定的一般步骤:
1. 准备样本:首先,你需要准备一个包含可能含有还原糖的样本。
这可以是任何你想测试的食物或液体。
2. 配制试剂:还原糖鉴定的主要试剂是本尼迪特试剂,它由硫酸铜和酒石酸钾钠混合而成。
这种试剂会在遇到还原糖时发生颜色变化。
3. 加入样本:将你想要测试的样本加入到配制好的本尼迪特试剂中。
确保样本充分与试剂混合。
4. 加热反应:将混合了样本和试剂的试管放入沸水中加热约5分钟。
在此过程中,如果有还原糖存在,那么它会与本尼迪特试剂发生反应,生成红色的氧化亚铜沉淀。
5. 观察结果:从热水中取出试管,让其冷却至室温。
然后,通过观察试管中的溶液颜色变化来判断是否存在还原糖。
如果溶液变为砖红色,那么就说明样本中含有还原糖。
6. 记录和分析结果:最后一步是记录你的观察结果,并对数据进行分析。
你可以根据颜色变化的程度来大致估计还原糖的含量。
1.检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质2.用显微镜观察多种多样的细胞3.观察线粒体和叶绿体4.通过模拟实验探究膜的透性5.观察植物细胞的质壁分离和复原6.探究影响酶活性的因素7.叶绿体色素的提取和分离8.探究酵母菌的呼吸方式9.观察细胞的有丝分裂10.观察细胞的减数分裂11.调查常见的人类遗传病12.植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用13.探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化14.土壤中动物类群丰富度的研究15.探究酶在洗涤方面的作用16.酵母细胞的固定化技术17.腐乳的制作18.果酒和果醋的制作19.蛋白质的提取和分离20.DNA的粗提取与鉴定实验一检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O 沉淀。
如:葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 ___加热_______ 葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O,即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。
淀粉遇碘变蓝色。
3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。
)三.实验材料提示:低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。
问(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?提示:如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。
因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。
问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?提示:不行。
《生物化学》实验指导书适用专业:生物科学、食品科学、生物工程、农学、园艺、环境科学孝感学院生命科学与技术学院生物化学实验细则为了保证生物化学实验的顺利进行,培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能,特制定以下实验细则,请同学们严格遵守。
1. 实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。
2. 严格按照生物化学实验分组,分批进入实验室,不得迟到。
非本实验组的同学不准进入实验室。
3. 进入实验室必须穿实验服。
各位同学进入各自实验小组实验台后,保持安静,不得大声喧哗和嬉戏,不得无故离开本实验台随便走动。
绝对禁止用实验仪器或药物嬉耍。
4. 实验中应保持实验台的整洁,废液倒入废液桶中,用过的滤纸放入垃圾桶中,禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。
5. 实验中要注意节约药品与试剂,爱护仪器,使用前应了解使用方法,使用时要严格遵守操作规程,不得擅自移动实验仪器。
否则,因非实验性损坏,由损坏者赔还。
6. 使用水、火、电时,要做到人在使用,人走关水、断电、熄火。
7. 做完实验要清洗仪器、器皿,并放回原位,擦净桌面。
8. 实验后,要及时完成实验报告。
目录实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法...............................1实验二油脂酸价的测定............................................................5实验三蛋白质的提取及浓度测定¬(紫外吸收法)........................................7实验四淀粉酶活力的测定...........................................................9实验五酶的激活和抑制作用......................................................13实验六氨基酸的分离鉴定――纸层析法............................................14实验七基因组DNA的快速提取---碘化钾法........................................16实验八琼脂糖凝胶电泳技术――DNA样品检测.....................................18实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法一、目的与要求掌握还原糖和总糖测定的基本原理,学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。