邻菲罗啉分光光度法测定铁修订稿

化学与生物工程2008,Vol.25No.3　Chemistry &Bioengineering77　收稿日期:2007-11-05作者简介:刘辉(1979-),男,河北唐山人,硕士,助教,主要从事环境监测方向的研究;通讯联系人:田亚红,副教授。

E 2mail :t1979yh @ 。

邻菲罗啉分光光度法测定蔬菜中铁的含量刘　辉1,田亚红2(11唐山工业职业技术学院,河北唐山063020;21河北理工大学化工与生物技术学院,河北唐山063009) 摘　要:用邻菲罗啉分光光度法直接测定蔬菜中铁的含量,方法简便、快速、准确,为指导人们合理食用蔬菜进行补铁及进一步开发蔬菜产品提供了可靠的理论依据。

关键词:蔬菜;铁;分光光度法中图分类号:O 657132 文献标识码:A 文章编号:1672-5425(2008)03-0077-02 铁作为人体必需的微量金属元素,对于人体的健康十分重要。

铁是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其它酶系统的主要成分,能帮助氧的运输,还能促进脂肪的氧化。

蔬菜是人们摄取微量铁的主要途径之一,缺铁可造成贫血并容易疲劳,而过多则会导致急性中毒。

所以,蔬菜中铁含量的测定具有重要的营养学意义,可为指导人们合理食用蔬菜进行补铁以防治缺铁性贫血和开发蔬菜类产品提供可靠的理论依据[1,2]。

作者在p H 值4～6的条件下,以盐酸羟胺将三价铁还原为二价铁,二价铁再与邻菲罗啉生成桔红色络合物,用分光光度法测定蔬菜中铁的含量,方法简便、快速、准确。

1　实验111　仪器722型分光光度计,上海精密仪器有限公司;AL C 211014型电子天平,20220型台式电热干燥箱,天津泰斯特仪器有限公司;T G3288型电子天平,上海天平仪器厂;P HS 23D 型数字酸度/离子计,杭州万达仪器仪表厂;TDL8022B 型台式离心机,上海安亭科学仪器厂。

112　试剂10μg ・mL -1铁标准溶液:准确称取018634g 十二水硫酸铁铵置于烧杯中,用30mL 2mol ・L -1HCl 溶液溶解后转入1L 容量瓶中,用蒸馏水稀释到刻度,摇匀,然后吸取50mL 该溶液于500mL 容量瓶中,加20mL 2mol ・L -1HCl 溶液,用蒸馏水稀释到刻度,摇匀;浓硫酸(密度1184g ・mL -1);浓硝酸(密度1142g ・mL -1);盐酸(密度1118g ・mL -1);10%盐酸羟胺(临用时配制);0115%邻菲罗啉(临用时配制,用少许酒精溶解,再用蒸馏水稀释);1mol ・L -1NaAc 溶液。

《邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁》实训改进研究(一)研究报告：《邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁》实训改进背景在环境保护和相关行业中，水中微量铁的测定非常重要。

目前常用的测定方法是邻菲罗啉分光光度法。

但是在实际应用中，存在一些问题，需要进行改进和优化。

现状分析在使用邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁时，会受到许多因素的影响，比如样品处理、仪器精度、光源强度等。

因此，该方法存在以下几个问题：•准确性不高•灵敏度低•结果不稳定改进方案为了解决上述问题，我们提出了以下改进方案：样品前处理在进行测定前，需要对样品进行前处理，以保证样品纯净且符合测定要求。

具体来说，我们可以采用蒸馏水或纯水对样品进行洗涤和稀释，以减少样品中其它杂质的干扰。

仪器精度仪器的精度对于测定结果的准确性非常重要。

我们需要保证仪器的精确度和稳定性，以保证测定结果的可靠性。

光源强度光源的强度对于测定结果的灵敏度和精确度都有很大的影响。

我们要保证光源强度稳定，并且经常进行校准，以获得更准确的测定结果。

实验结果经过以上改进方案的实施，我们得到了更准确、更稳定的测定结果，并且灵敏度也得到了改善。

因此，我们认为这些改进方案是可行的，并且具有很大的应用前景。

结论邻菲罗啉分光光度法是一种测定水中微量铁的常用方法。

通过对该方法的改进，我们可以提高测定结果的准确性和稳定性，进而为环保和相关行业提供更好的服务。

推广应用我们将推广该改进方案，以改善环境保护和相关行业的水中微量铁测定方法。

同时，我们将继续优化该方案，以进一步提高测定结果的精准度和稳定性。

我们相信，通过持续创新和改进，我们能够为实现更绿色、更可持续的发展贡献更大的力量。

参考文献•李文举, 贺英明. 邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁[J]. 现代透析杂志, 2009, 17(3): 279-280.•陈振, 刘如霖, 赵宇杰. 邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁的研究[J]. 环保科技通讯, 2016, 14(6): 372-373.•钟慧英. 邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁[J]. 化学生物与工程, 2018, 35(6): 144-145.。

DL 425DL 425.4—91工业氢氧化钠中铁的测定——邻菲罗啉分光光度法中华人民共和国能源部1991-10-04批准1992-04-01实施本方法适用于GB 209《工业用氢氧化钠》中规定的各级工业用氢氧化钠。

1方法概要用盐酸羟胺(NH2OHHCl)将高铁(三价铁)还原成亚铁(二价铁)。

在pH=4～5的条件下，亚铁与邻菲罗啉生成桔红色络合物，反应如下：Fe C H N Fe(C H N 2+12821282332[)]2试剂2.1浓盐酸。

2.2氢氧化氨(分析纯)：1+1溶液。

2.3盐酸羟胺：10%溶液(m/V)。

2.4刚果红试纸。

2.5邻菲罗啉：称取1g 邻菲罗啉(C12H8N2·H2O)溶于100mL0.1%乙醇溶液中，用二级试剂水稀释至1L ，摇匀，贮存于棕色瓶中，不用时可放置于冰箱中。

2.6乙酸-乙酸铵缓冲溶液：称取100g 乙酸铵溶于100mL 二级试剂水中，加200mL 冰乙酸，用二级试剂水稀释至1L ，摇匀后贮存。

2.7铁标准溶液(1mL 含0.1mgFe2O3)：称取0.0699g 纯铁丝，加入50mL1+1盐酸溶液，加热溶解后，加少量过硫酸铵，煮沸数分钟，定量转移至1L容量瓶中，冷却后用二级试剂水稀释至刻度，摇匀，存放于聚乙烯瓶中。

2.8工作溶液(1mL含0.01mgFe2O3)：吸取铁标准溶液(见2.7条)稀释10倍。

3仪器3.1分光光度计。

3.2pH计。

4测定方法4.1工作曲线的绘制4.1.1按表1取铁工作溶液注入一组100mL容量瓶中，并用二级试剂水稀释至50mL。

各加入1mL浓盐酸，摇匀。

再加入1mL盐酸羟胺溶液，摇匀。

静置5min 后，加入5mL邻菲罗啉溶液(见2.5条)，摇匀后向容量瓶中加入一小块刚果红试纸，慢慢滴加氢氧化铵进行调剂，至pH=3.8～4.1，使刚果红试纸由蓝色转变为紫红色。

各加入5mL乙酸-乙酸铵缓冲溶液，用二级试剂水(水温在35℃左右)稀释至刻度，摇匀，静置15min后，在分光光度计上波长510nm处，用10mm比色皿(或20mm 比色皿)以空白溶液为参比，测定各显色液的吸光度值，按所测吸光度值和相应的铁含量绘制工作曲线。

邻菲罗啉光化还原分光光度法测定铁
一、试验原理及方法
首先，将样品加入菲罗啉光化还原剂，然后加热，使样品中的铁被还原成铁离子，并且形成一种可以吸收光的物质。

接着，将样品放入分光光度仪中，仪器会测量样品中铁离子的吸收光谱，从而计算出样品中铁的含量。

二、试验步骤
1. 将样品溶液加入到分析管中，添加足量的邻菲罗啉（1,10-二苯基膦），搅拌均匀；
2. 将分析管放入分光光度仪中，调节波长为510nm，记录原始吸光度；
3. 将分析管中的样品溶液加入还原剂（硫酸铜），搅拌均匀；
4. 再次将分析管放入分光光度仪中，调节波长为510nm，记录还原后的吸光度；
5. 计算吸光度差值，用标准曲线法计算出样品中铁的含量。

三、注意事项
1. 实验前，应先将试剂称量准确，并将试剂放入实验瓶中；
2. 将实验瓶中的试剂搅拌均匀，使其完全溶解；
3. 将实验瓶中的溶液放入分光光度仪中，调节好参数；
4. 将菲罗啉溶液加入实验瓶中，搅拌均匀；
5. 将实验瓶中的溶液放入分光光度仪中，测定光度值；
6. 根据光度值计算出铁的浓度；
7. 将实验瓶中的溶液放入烧杯中，加入还原剂，加热搅拌，使铁完全还原；
8. 将实验瓶中的溶液放入分光光度仪中，测定光度值；
9. 根据光度值计算出铁的浓度；
10. 将实验结果记录在实验报告中。

四、结果计算
计算铁的含量，需要用到以下公式：
含量（mg/L）=A/B×1000
其中，A为样品中铁的浓度，B为样品体积（单位为升）。

铁的测定（邻菲罗啉分光光度法）铁的测定（邻菲罗啉分光光度法）1 量程亚铁离⼦含量为5µg/L -200µg/L⽔样的测定。

2 仪器上海欣茂723C可见分光光度计，波长510nm，配有100mm⽐⾊⽫。

3 概要先将⾼铁⽤盐酸羟胺还原成亚铁。

在pH为4~5的条件下，亚铁与邻菲罗啉⽣成浅红⾊络合物。

4 试剂4.1 10%盐酸羟胺溶液（重/容）：称取10g盐酸羟胺，加⼊少量⾼纯⽔，待溶解后⽤⾼纯⽔稀释⾄100ml，摇匀并贮于棕⾊瓶中，塞紧瓶塞。

4.2 0.1%邻菲罗啉溶液（重/容）：称取1g邻菲罗啉（C12H8N2·H2O）溶于100ml⽆⽔⼄醇中，⽤⾼纯⽔稀释⾄1L，摇匀，贮于棕⾊瓶中，并在暗处保存。

4.3 ⼄酸-⼄酸铵缓冲液：称取100g⼄酸铵溶于100ml⾼纯⽔中，加200ml冰⼄酸，⽤⾼纯⽔稀释⾄1L，摇匀后贮存。

4.4 铁⼯作溶液（1ml含1µgFe）：取铁标准溶液（1ml含100µg）10.00ml，注⼊1L容量瓶中，⽤⾼纯⽔稀释⾄刻度（使⽤时配制）。

4.5 浓盐酸（优级纯）。

4.6 浓氨⽔。

4.7氨⽔（1+1）。

4.8 刚果红试纸：试纸切成约4mm×4mm的⼩⽅块。

5分析步骤5.1 ⼯作曲线的绘制：5.1.1 按表1量取⼀定量亚铁标准溶液（1mL含1µg Fe2+），分别注⼊⼀组50mL容量瓶中，加⽔稀释⾄30mL左右。

杯中，各加⼊1ml浓盐酸，加热浓缩⾄体积略⼩于25ml。

冷却⾄30℃左右，加⼊1ml盐酸羟胺溶液，摇匀，静置5min，加⼊5ml0.1%邻菲罗啉溶液，摇匀后每个锥形瓶中各加⼊⼀⼩块刚果红试纸，慢慢滴加氨⽔调节PH⾄3.8～4.1，使刚果红试纸恰由蓝⾊转变为紫⾊，然后依次加⼊5ml⼄酸-⼄酸铵缓冲液。

摇匀后移⼊原50ml容量瓶中，⽤⾼纯⽔稀释⾄刻度。

在723C型分光光度计上，⽤波长510nm，100mm长⽐⾊⽫，以⾼纯⽔为参⽐测定吸光度。

邻菲啰啉分光光度法测定工业盐酸含铁量的初步改进摘要：邻菲啰啉分光光度法是测定铁含量的经典方法，本文通过调整实验步骤，改变药品配制方法，对工业盐酸铁含量的测定过程进行了优化，从结果看，达到了缩短分析时间，减小不确定因素干扰的预期目的。

关键词：铁含量测定邻菲啰啉分光光度法工业盐酸Abecedarian improvement of mensuration iron concentration in industrial hydrochloric acid via 1, 10-diazophenanthrine colorational spectrophotographyAbstract : The strategy of 1, 10-diazophenanthrine colorational spectrophotography is a classical procedure for survey ironconcentration. This paper wish adjust the order of the test, adapt the make-up of the reagents to acquireoriginal designation improvement of mensuration iron concentration in industrial hydrochloric acid. In the summary, we can obtain the goal with fewer testing time and lesser disturbances.Key words : mensuration iron concentration;1, 10-diazophenanthrine colorational spectrophotography; industrial hydrochloric acid前言邻菲罗啉分光光度法被广泛用于各种样品中铁含量的测定，这些样品包含了从天然水体到大宗化工产品的广大范围[1-8]，该方法的核心原理就是在pH = 2–9 范围内，亚铁离子与邻菲啰啉形成红色络合物：Fe2+ + 3 Phen Fe(Phen)­32+一般分析过程中，视原始样品所处的状态，包括铁的离子化，还原，显色剂的加入和调整pH几个步骤。

邻菲罗啉紫外可见分光光度法测定铁含量一、仪器1．紫外可见分光光度计(UV-1800PC-DS)；配1cm石英比色皿2个（比色皿可以自带）；2．容量瓶：100mL1个；50mL11个；3．吸量管：5mL2支；10mL3支；二、试剂1．标准储备溶液：200μg·mL-1铁标准储备溶液。

2．未知液：未知浓度的铁标准溶液。

20μg·mL-13．其他：100g·L-1盐酸羟胺溶液、1g·L-1邻菲罗啉溶液、pH=4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液。

三、实验操作1．吸收池配套性检查玻璃吸收池在600nm装蒸馏水，以一个吸收池为参比，调节τ为100%，测定其余吸收池的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用，记录其余比色皿的吸光度值作为校正值。

2．标准使用溶液的制备用10mL吸量管移取200 ug/mL 铁的标准储备溶液10.00 mL 于100 mL 容量瓶中，配制成20 ug/mL浓度的标准使用溶液。

3．绘制吸收曲线选择测量波长⑴用10mL吸量管移取20 ug/mL 铁的标准溶液5.00 mL 于50 mL 容量瓶中，⑵用5mL吸量管依次加入然后加入5mL100g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀。

放置2min后，⑶用5mL吸量管加入5mL1g·L-1邻菲罗啉溶液，⑷用10mL吸量管加入10mLpH=4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液，⑸用蒸馏水稀释至刻度线摇匀。

⑹用1cm吸收池，以试剂空白为参比，在400~600nm间扫描其吸收曲线，并根据吸收曲线的吸光度确定最大吸收波长。

4．标准工作曲线的绘制⑴取50 mL容量瓶6只，分别移取（务必准确移取）20 ug/mL铁标准溶液2.0 mL，4.0 mL，6. 0mL ，8.0 mL ，10.0 mL于5只容量瓶中，不加铁标准溶液醅空白液作参比，⑵各加5ml盐酸羟胺溶液，摇匀经二分钟后，再各加10ml NaAc溶液及5ml 邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度线,充分摇匀,待测定。

邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）实验二邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁——标准曲线法一、实验目的：1．掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2．学会标准曲线的绘制方法及其使用。

二、原理：1.定量分析依据：A=κbc2.有关反应：4Fe3++2NH2OH·HCl=4Fe2++N2O↑+4H++2H2O+2Cl－橙红色配合物3.显色条件pH值控制：pH≈5.0。

显色时间：15min显色温度：室温显色剂及用量：邻二氮菲2.00mL 4.测量条件λmax=510nm参比溶液：试剂空白吸光度范围：0.2-0.8三、仪器：可见分光光度计，1cm 比色皿、100mL 容量瓶 1个，20mL 移液管 1 支，50mL 容量瓶 10 个， 10mL 吸量管 1 支，1mL 吸量管（或移液管） 1 支，5mL 移液管 1 支，2mL 移液管1 支。

四 、试剂：①铁贮备液（100μg/mL ）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH 4）2Fe （SO 4）2·6H 2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g 分析纯的NH 4Fe(SO 4)2·12H 2O ，其摩尔质量为482.18g/mol ），加50毫升1+1 H 2SO 4，完全溶解后，移入1000ml 的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe 的质量浓度为 100.0μg/mL 。

（实验室准备好） ② 铁标准溶液（20.00 μg ·mL －1） 移取 100.0μg ·mL －1铁标准溶液20.00mL 于100mL 容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。

(学生自行配制)③ 10%盐酸羟胺水溶液：（用时配制）。

④ 0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。

邻菲罗啉示差分光光度法测定铁矿石中全铁含量概述邻菲罗啉示差分光光度法（Differential Spectrophotometric Method with Phenanthroline）是一种常用于测定铁矿石中全铁含量的分析方法。

该方法基于邻菲罗啉与亚铁离子的络合反应，通过测定络合物的吸光度来间接测定样品中的全铁含量。

原理邻菲罗啉与亚铁离子反应生成橙色络合物，该络合物在510 nm波长处有最大吸光度。

当样品中的亚铁离子与邻菲罗啉反应生成络合物时，溶液吸光度会随着亚铁离子浓度的增加而增大。

通过测量样品在510 nm波长处的吸光度，可以间接推算出样品中的全铁含量。

实验步骤试剂及设备准备•邻菲罗啉试剂（0.1% 邻菲罗啉溶液）•硫酸（浓度为3.5%）•氢氧化钠（浓度为1.5 M）•铁矿石样品•分光光度计样品预处理1.取一定量的铁矿石样品，加入一些硫酸溶液，用玻璃棒搅拌均匀。

2.将溶液加热至沸腾，持续加热10分钟，使铁矿石样品完全溶解。

3.将溶液冷却至室温，用硫酸调节pH值。

4.加入适量氢氧化钠溶液，使溶液中的亚铁氧化成铁离子。

5.将溶液转移到容量瓶中，并用去离子水定容。

准备标准曲线1.取一系列不同浓度的亚铁标准溶液，分别加入邻菲罗啉溶液和硫酸。

2.将上述溶液转移到容量瓶中，并用去离子水定容。

3.在分光光度计上设置波长为510 nm。

4.分别测量每个标准溶液的吸光度，并记录结果。

测定样品1.将经过预处理的样品溶液转移到比色皿中。

2.在分光光度计上设置波长为510 nm。

3.测量样品溶液的吸光度，并记录结果。

绘制标准曲线与计算全铁含量1.将标准溶液的浓度与吸光度值绘制成图表，并进行线性拟合。

2.根据拟合曲线，计算样品中的全铁含量。

数据分析与结果展示标准曲线以亚铁标准溶液的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，根据曲线方程可以计算出样品中的全铁含量。

亚铁标准溶液浓度（M）吸光度0.001 0.2140.002 0.4260.003 0.6330.004 0.8410.005 1.055样品测定结果测得样品的吸光度为0.725。

邻菲罗啉示差分光光度法测定铁矿石中全铁含量
邻菲罗啉示差分光光度法是一种常用于测定铁矿石中全铁含量的方法。

该方法基于邻菲罗啉与铁离子之间的络合反应，通过测定络合物的光
学旋光度差来计算铁离子的含量。

具体操作步骤如下：
1. 样品制备：将铁矿石样品粉碎至均匀细粉末，取约0.5克样品加入100毫升锥形瓶中，加入10毫升盐酸和10毫升硝酸，加热至沸腾，
使样品完全溶解，冷却至室温。

2. 邻菲罗啉试剂制备：取适量邻菲罗啉试剂加入100毫升去离子水中，摇匀，制备成0.01mol/L的邻菲罗啉试剂。

3. 样品处理：取10毫升样品溶液加入50毫升锥形瓶中，加入10毫
升邻菲罗啉试剂，摇匀，静置5分钟。

4. 光度测定：将样品转移到比色皿中，用去离子水稀释至50毫升，用紫外-可见分光光度计测定在400纳米处的吸光度值。

5. 示差测定：将样品转移到示差皿中，用示差光度计测定在546纳米
处的旋光度差。

6. 计算全铁含量：根据标准曲线计算出样品中的铁离子含量，再乘以
样品中全铁的相对含量系数，即可计算出样品中的全铁含量。

邻菲罗啉示差分光光度法具有灵敏度高、准确度高、重现性好等优点，适用于测定铁矿石中全铁含量。

但需要注意的是，样品制备过程中要
避免铁离子的污染，同时要注意邻菲罗啉试剂的保存和使用，以保证
测定结果的准确性。

邻菲罗啉分光光度法测微量铁本方法采用GB/T 3049的规定4.5.2.1原理试样经水提取后,用抗坏血酸将三价铁还原成二价铁,在pH值2—9范围内，二价铁与邻菲罗啉反应生成橙红色的配合物，在510nm波长处,测定溶液的吸光度。

4.5.2.2试剂和溶液4.5.2.2.1盐酸：1+1溶液4.5.2.2.2氨水：1+9溶液4.5.2.2.3乙酸-乙酸钠缓冲溶液：pH值为4.44.5.2.2.4硫酸4.5.2.2.5抗坏血酸：2%溶液，使用时配制。

4.5.2.2.6邻菲罗啉显色剂：0.2%溶液.该溶液应避光保存,仅能使用无色溶液。

4.5.2.2.7铁标准储备液：0.100mg/mL。

准确称取0.863g硫酸铁铵[NH4Fe(SO4)2.12H2O],精确至0.001g,加水100 mL硫酸(4.5.2.2.4),加热溶解,定量转移到1000 mL容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀,贮存于塑料瓶中.此溶液1 mL含0.100mg铁。

4.5.2.2.8铁标准溶液：0.010mg/ mL.准确吸取10 mL铁标准储备液(4.5.2.2.7)于100 mL容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀,贮存于塑料瓶中.使用时配制。

4.5.2.3 仪器设备常用实验室仪器、设备和a. 分光光度计：带有3cm光路长度的吸收池；b. pH试纸或pH计。

4.5.2.4 分析步骤4.5.2.4.1标准溶液系列配制及标准曲线绘制分别吸取0.010mg/mL铁标准溶液（4.5.2.2.8）0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 mL，于6个100 mL 烧杯中，加水至约60 mL中。

用盐酸（4.5.2.2.1）或氨水(4.5.2.2.2)调节溶液pH约为2(用精密pH试纸或pH计检验)，加2.5 mL抗坏血酸溶液（4.5.2.2.5），10 mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液（4.5.2.2.3）5 mL邻菲罗啉显色剂(4.5.2.2.6)，混匀，用水定容，半小时后在分光光度计上，用1cm吸收池于波长510nm处，以零标准溶液为参比溶液，依次测定标准溶液系列的吸光度，以标准溶液中铁的质量（ug）为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

铁的测定邻菲罗啉法实验报告一、实验目的本实验旨在通过邻菲罗啉法测定样品中铁的含量，掌握该方法的基本原理和操作流程，提高实验技能和数据处理能力。

二、实验原理在 pH 为 2~9 的条件下，二价铁离子能与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，其吸光度与铁离子的浓度成正比。

通过测定络合物在特定波长下的吸光度，可计算出样品中铁的含量。

三、实验仪器与试剂1、仪器分光光度计容量瓶（50mL、100mL）移液管（1mL、5mL、10mL）吸量管（1mL、2mL、5mL）烧杯（50mL、100mL）玻璃棒电子天平2、试剂硫酸亚铁铵(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O盐酸羟胺（NH2OH·HCl）邻菲罗啉（C12H8N2·H2O）乙酸乙酸钠缓冲溶液（pH ＝ 45）1:1 盐酸溶液10% 盐酸羟胺溶液四、实验步骤1、标准溶液的配制准确称取 03507g 硫酸亚铁铵(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O，溶于 50mL1:1 盐酸溶液中，转移至 100mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

此溶液每毫升含100μg 铁。

分别吸取上述铁标准溶液 000mL、200mL、400mL、600mL、800mL、1000mL 于 6 个 50mL 容量瓶中，依次加入 1mL 10% 盐酸羟胺溶液，摇匀，放置 2min。

然后加入 5mL 乙酸乙酸钠缓冲溶液和 2mL 邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

放置 15min 后，以试剂空白为参比，在波长 510nm 处，用 1cm 比色皿，测定各溶液的吸光度。

2、样品处理准确称取适量样品（根据样品中铁含量的大致范围确定）于烧杯中，加入适量 1:1 盐酸溶液，加热溶解。

冷却后转移至 50mL 容量瓶中，用蒸馏水冲洗烧杯数次，合并洗液于容量瓶中，定容至刻度，摇匀。

3、样品测定吸取适量上述样品溶液于 50mL 容量瓶中，按照标准溶液的测定步骤进行操作，测定其吸光度。

现行水质分析实验标准北京邦驰世纪水处理科技有限公司网址：二0一一年二月水质总铁的测定邻菲罗啉可见分光光度法1.主要内容在pH3~9的条件下，低铁离子能与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，在波长510nm处有最大光吸收。

邻菲罗啉过量时，控制溶液PH值为~，可使显色加快。

水样先经加酸煮沸溶解铁的难溶化合物，同时消除氰化物，亚硝酸盐、多磷酸盐的干扰。

加入盐酸羟胺将高铁还原为低铁，还可消除氧化剂的干扰。

水样不加盐酸羟胺，则测定结果为低铁的结果。

2.仪器50mL容量瓶分光光度计3.试剂本标准所用试剂除另有说明外，均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水。

铁标准贮备液：称取0.7022g硫酸亚铁铵，溶于70mL20+50硫酸溶液中，滴加L的高锰酸钾溶液至出现微红色不变，用纯水定容至1000mL。

此贮备液含铁。

铁标准溶液（使用时现配）：吸取铁标准贮备液，移入容量瓶中，用纯水定容至100mL。

此溶液含μg铁。

%邻菲罗啉溶液：称取0.1g邻菲罗啉溶解于加有两滴浓盐酸的纯水中，并稀释至100mL。

此溶液1mL可测定100μg以下的低铁。

10%盐酸羟胺溶液：称取10g盐酸羟胺，溶于纯水中，并稀释至100mL。

乙酸铵缓冲溶液（）：称取250g乙酸铵，溶于150 mL纯水中，并稀释至100mL1+1盐酸溶液4.测定步骤：用移液管吸取10mL振摇均匀的水样（含铁量高时可稀释后再取样）另取50mL容量瓶8个，分别加入铁标准溶液0，，，，，，，加适量蒸馏水。

水样标准系列容量瓶中加1mL1+1盐酸溶液在水浴煮沸10分钟，如果尚有未溶的铁可继续煮沸。

放置冷却后，加1mL盐酸羟胺溶液，摇匀，再向水样及标准样中各加2mL邻菲罗啉溶液，混匀后再加乙酸铵缓冲溶液，各加纯水至50mL刻度，混匀，放置10~15分钟。

于510nm波长下，用3cm比色皿，以纯水为参比，测定样品和标准系列溶液的吸光度及浓度C5.结果的表述：C铁=5C式中：C铁——水样中总铁的浓度，C——分光光度计读出的铁的浓度。

《邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁》实训改进研究实验室环境下，水样中含有微量的铁离子，其检测具有非常重要的意义，甚至可以影响到水质的安全性。

传统的分析方法通常使用原子吸收光谱仪、荧光光度计等昂贵的仪器，而今天我们将介绍一种更加简便、经济、有效的方法——邻菲罗啉分光光度法，一种非常实用的光谱学技术。

邻菲罗啉是一种强配位剂，可以选择性地与铁结合，形成紫色的络合物，其最大吸收波长为510nm左右，故可用于测定水样中铁的含量。

本次实验的目的是改进邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁的方法，提高灵敏度和精度，减小误差。

首先，我们需要准备标准铁离子溶液和邻菲罗啉缓冲液。

标准铁离子溶液可使用国际标准样品或者自行配制，邻菲罗啉缓冲液可按照文献方法制备。

然后，在实验开始前，我们还需进行一些预处理步骤，如pH调节、过滤。

下面介绍实验步骤。

1. 将一定量待测样品和邻菲罗啉缓冲液混合均匀，静置2-3min，使络合物充分生成。

2. 用分光光度计测定样品和空白组的吸光度A和A0（注意要在络合物光谱吸收最大处进行测定，即大约为510nm处）。

3. 用线性回归法根据标准铁离子溶液的吸光度和浓度之间的线性关系，制定标准曲线。

4. 用标准曲线计算出待测样品中铁的含量。

由于实验过程中样品处理的复杂性，我们需要注意以下几点：1. 初步筛选出合适的邻菲罗啉浓度和样品配置比例，以保证后续实验的精度。

2. 严格控制空白试剂的选择及运用，杜绝背景干扰的产生。

3. 均衡样品放置时间，避免容器接触空气产生氧化反应，造成样品变化。

4. 实验操作时应注意样品混合均匀、倾倒液体渐进、移液过程中皆避免空气泡的产生等问题。

5. 正确校准仪器，保证实验的精准性和准确性。

邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁的方法具有检测快速、准确性高、经济等优点，是水质监测和环保领域重要的检测手段之一。

在实验中，我们需要多注意细节，认真测量，避免误差的产生，以提高实验的准确度。

同时，在实验操作中我们还应注意保护环境，防止污染并做好实验废液的处理工作，充分发挥邻菲罗啉分光光度法的检测功能，为环境保护事业做出贡献。

中华人民共和国电力行业标准DL 422.3—91工业盐酸中铁含量的测定 ——邻菲罗啉分光光度法中华人民共和国能源部1991-10-01批准 1992-04-01实施1 方法概要本方法基于在pH4～5的条件下，用盐酸羟胺把高铁(三价铁)还原成亚铁(二价铁)，亚铁与邻菲罗啉生成桔红色络合物，用分光光度法测定，其反应式如下：　FeC H N Fe(C H N 2+8282+=+3121232[)]2 试剂2.1 盐酸羟胺溶液(质/容)10%：称取10g 盐酸羟胺，加少量二级试剂水，待溶解后用二级试剂水稀释至100mL ，摇匀贮于棕色瓶中。

2.2 邻菲罗啉溶液(质/容)0.1%：称取1.0g 邻菲罗啉(C 12H 8N 2・H 2O)溶于100mL 无水乙醇中，用二级试剂水稀释至1L ，摇匀贮于棕色瓶中(存放在冰箱中)。

2.3 乙酸铵缓冲溶液：称取100g 乙酸铵(分析纯)溶于100mL 二级试剂水中，加200mL 冰乙酸，用二级试剂水稀释至1L ，摇匀。

2.4 铁标准溶液(1mL 含0.01mg 铁)：按GB602—77《杂质标准溶液制备方法》配制，使用时稀释至1/10原浓度。

2.5 氢氧化氨1+1溶液：按GB631—89《化学试剂 氨水》配制。

3 仪器3.1 分光光度计：1cm 的比色皿。

4 分析步骤4.1 标准曲线的绘制4.1.1 根据试样铁含量按表1取铁工作溶液注入一组50mL 容量瓶中，加二级试剂水20 mL 。

表1 铁工作曲线的制作1 mL 溶液中含0.01 mgFe序 号 1 2 3 4 5 6 加入铁标准溶液mL0 2 4 6 8 10 相当于铁的含量mg0.020.040.060.080.104.1.2 于上述容量瓶中，加1mL 盐酸羟胺溶液，摇匀静置5min ，加5mL 邻菲罗啉溶液，摇匀后，慢慢滴加氨水(氢氧化氨溶液)至刚果红试纸由蓝色变为紫红色(pH3.8～4.1)。

再加5mL 乙酸-乙酸铵缓冲溶液(2.3)，摇匀，用35℃左右的二级试剂水稀释至满刻度，摇匀。

改进邻菲罗啉分光光度法测定络合铁中亚铁含量徐勋达;胡璐;余国贤;路平【摘要】An improved phenanthroline spectrophotometric method for the determination of ferrous content in chelated iron was propsed ,aimed at unclear color reaction of standard HJ/T 345—2007. By improving reagent addition sequence and replacing part of water with 20 mL ofethanol ,when pH of the solution was between 3 to 9,o-phenanthroline with chelated ferrous could form a stable orange red complex. The maximum absorption wavelength of the complex was 510 nm. This method can solve the problem of the unobvious color in the detection of the chelated ferrous by the standard HJ/T 345—2007 and the recovery rate of the sample was 98. 0%to 102. 0%.%对标准HJ/T 345—2007邻菲罗啉分光光度法测定络合铁中亚铁含量存在显色不明显进行了改进。

改进试剂添加顺序并用20 mL无水乙醇取代方法中的部分水溶剂，在溶液pH 3～9之间，邻菲罗啉能与络合亚铁离子形成稳定的橙红色络合物。

该络合物的最大吸收波长为510 nm。