固体发酵生产香菇菌丝体及其应用成果通过鉴定

利用豆渣液体发酵香菇菌丝体的研究以豆渣为主要原料，应用正交试验法对香菇液体发酵最佳培养基和发酵条件进行了研究。

结果表明，香菇液体发酵最佳培养基配方为葡萄糖2%，MgSO40.05%，豆渣9%，KH2PO4 0.10%，并用洗渣水替代水配料;适宜的发酵条件为发酵时间6 d，装液量80 mL/250 mL三角瓶，发酵温度25 ℃。

豆渣；香菇；液体发酵S646.120.4A香菇（Lentinus edodes）是世界上著名的食用菌，隶属于担子菌亚门(Basidiomycotina)，伞菌目(Agaricales)，口蘑科（Tricholomataceae）,香菇属（Lentinus），是一种味道鲜美，营养价值和药用价值很高的食用菌。

香菇蛋白质中含有18种氨基酸，脂肪中含有大量的亚麻油酸，灰粉中含有大量钙、铁、锰等矿物质。

香菇多糖具有独特的药理功能，经常食用可预防佝偻病，防止肝硬化，化痰理气，对贫血具有一定疗效，且无任何毒副作用[1]。

近年来，随着市场对香菇多糖需求量的增大，利用液体深层发酵培养香菇菌丝体的研究逐渐增多，但以豆渣为主料液体深层培养香菇菌丝体的研究尚未见报道。

为此，笔者利用豆渣及洗渣水，应用正交试验法对香菇液体发酵最佳培养基及发酵条件进行筛选研究，旨在二次利用豆粉生产的下脚料—豆渣，同时为香菇液体发酵寻求一种新的原料，节约粮食资源。

1 材料与方法1.1材料1.1.1菌种香菇（L109）由佳木斯大学生命科学学院微生物实验室保存。

1.1.2培养基改良PDA培养基：马铃薯20 g（煮汁），麸皮5 g（煮汁），葡萄糖2 g，琼脂2 g，水100 mL，121 ℃下灭菌20 min。

种子培养基：麸皮5 g（煮汁），葡萄糖2 g，洗渣水100 mL，0.1 MPa灭菌15 min。

发酵培养基：洗渣水100 mL，MgSO4、葡萄糖、KH2PO4和豆渣的配量经正交试验确定，0.1 MPa灭菌15 min。

科技成果——香菇多糖液体发酵制备技术
技术开发单位
中国科学院天津工业生物技术研究所
适用范围
食品工业领域
成果简介
目前菌多糖主要是从食用菌子实体中提取，其生产依赖食用菌栽培生产，并且提取工艺会造成环境污染；并且这种方法获得多糖价格高，如多糖含量在30%的食用菌多糖价格约为400-600元/公斤，严重制约了菌多糖在诸多领域应用推广。

本项目筛选培育了高产多糖的食用香菇菌种，建立食用菌多糖液体发酵制备技术。

本项目通过筛选获得了发酵产香菇多糖优势菌种，建立了食用菌液体发酵技术，在最适发酵条件下，其产胞外多糖和菌丝体多糖总产率达到10g/L以上，多糖分子量分布及多糖结构与子实体提取多糖一致，其中7KDa左右的低分子量香菇多糖含量较子实体含量高，具有较强的免疫活性；与子实体多糖提取法比较，本项目生产香菇多糖周期短、成本约降低40%以上，具有较好工业化生产潜力。

效益分析
本项目与传统与热水浸提工艺相比，降低了能耗，有效缩短提取时间，降低提取温度，经济效益显著。

此外，本项目的整体工艺操作对仪器设备要求低，具有“投资小，收率大”的特点，适合中小型企业的发展。

菌中之秀---香菇
09级应用化学
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目录流程图
香菇简介 香菇多糖含量测定 香菇多糖组成的测 定 结束
营养成分及药用价 值
香菇多糖提取方法 及比较
香菇多糖结构的鉴 定
营养成分及药用价 值
香菇多糖的应用
香菇多糖的纯化
主要参考文献
地理分布
香菇多糖的生物活 性
香菇多糖纯度鉴定
市场分布
香菇多糖简介
香菇多糖的脱色
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5.7.2主要的仪器分析方法主要有

高分辨率的核磁共振技术[7] 快速原子轰击质谱技术 电喷雾质谱 基质辅助激光解吸飞行时间质谱 串联质谱技术及各种色质联用技术[8] 紫外分光光度法 红外光谱法[9] 气相色谱法[10] 液相色谱法[11] 电泳法[12] 比旋光度法等
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4. 微波法提取香菇多糖
微波提取法是一种新型提取法，由于溶剂及细胞液吸收微波能， 微波射线辐射于溶剂并透过细胞壁内部时，细胞内部温度升高压力 增大，当压力超过细胞的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部 的多糖就从细胞中释放出来； 5. 超声波提取法 香菇多糖的超声波(20KHz一50MHz)提取一利用超声波的空化作 用分散破坏植物组织，加速植物多糖成分的浸出提取；另外超声波 产生的机械振动、乳化和击碎效应 等也能加速多糖成分的扩散释放 并充分与溶剂混合，提高香菇多糖的得率； 6.深层发酵培养提取法 目前，香菇多糖主要从香菇子实体中提取。人工培养香菇子实体， 生产周期长达半年以上，而深层培养发酵法获得香菇菌丝体和香菇 多糖，生产周期将缩短至一周左右；一般从鲜香菇中提取多糖，得 率为6.9％左右，从干香菇中提取多糖，得率是6.72％左右，差异不 大；而香菇菌丝体的多糖得率却明显高于香菇子实体，达7.3％左右。 因此在工业生产中，此法很具竞争优势；

产漆酶细菌筛选鉴定及固体发酵条件研究
产漆酶细菌是一类具有重要应用价值的菌种，能够分解淀粉类和纤维素类物质，具有广泛的应用前景。

本研究旨在通过筛选和鉴定，找到高效产漆酶的细菌菌株，并研究其固体发酵条件。

我们从土壤和水样品中收集多个潜在的产漆酶细菌菌株。

这些菌株被分离、纯化并保存以备后续的实验使用。

然后，我们使用碘碟法进行最初的筛选，通过菌株在含有淀粉或纤维素的培养基上形成明显溶解区来判断其分解能力。

筛选出的阳性菌株被进一步培养、扩增和鉴定。

鉴定的流程主要包括形态学观察、生化试验和分子生物学鉴定。

形态学观察包括菌落形态、细胞形态、孢子形态等。

生化试验主要包括氧化酶试验、淀粉分解酶试验、纤维素分解酶试验等。

分子生物学鉴定则主要通过16S rRNA序列分析来确定菌株的分类地位。

通过以上的筛选和鉴定过程，我们最终确定了一株高效产漆酶的细菌菌株。

接下来，我们进行了固体发酵条件的研究。

我们对产漆酶细菌的最适发酵基质进行了选择和优化。

我们评价了不同基质如淀粉、纤维素、豆饼等对产漆酶产量的影响，并通过响应曲面法确定了最佳基质比例。

然后，我们研究了发酵温度、pH值、初始菌液浓度、培养基添加剂等参数对产漆酶产量的影响，并进行了优化。

我们对优化后的固体发酵条件进行了验证和比较。

通过对产漆酶产量、酶活力和底物降解效率的测试，我们确定了最佳的固体发酵条件。