启动子与增强子
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1.启动子:启动子是基因转录起始所必须的一段DNA序列,是基因表达调控的上游顺式作用元件之一2.增强子:能强化转录起始的序列为增强子或强化子,与启动子一起都可视为基因表达调控中的顺式作用元件。
无论位于靶基因的上游、下游或内部都可以发挥作用。
3.抗终止因子:抗终止因子是指能在特定位点阻止转录终止的一类蛋白。
这些蛋白与RNA聚合酶的核心酶结合,使RNA能越过终止子,继续转录DNA。
4.上游启动子元件:TATA区上游的保守序列称为上游启动子元件,它们决定转录产物产率高低。
5.帽子结构:通过倒扣GTP和特殊的甲基化修饰而加在真核mRNA5′端的特殊结构,可保护mRNA的稳定,形似帽子而得名。
6.顺式作用元件:是指对基因表达有调节作用的DNA序列,如启动子、增强子等。
其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因。
7.反式作用因子:是指远离受影响的基因之外的基因所编码的产物,又称为转录因子(本质是蛋白质)。
有特异性和非特异性之分。
8.结构基因和调节基因结构基因:编码功能各异的蛋白质或RNA的特异DNA序列。
调节基因:编码那些参与基因表达调控的RNA和蛋白质(即调控RNA和调控蛋白)的特异DNA序列。
9.组成蛋白和调节蛋白组成蛋白:细胞内有许多种蛋白质的含量几乎不受外界环境的影响,这些蛋白质称为组成蛋白。
调节蛋白:是一类特殊的蛋白质,是调节基因的产物,它们可以影响一种或多种基因的表达。
有两种类型的调节蛋白,即起正调节作用的激活蛋白和起负调节作用的阻遏蛋白。
10.异染色质:细胞间期核内染色质压缩程度较高,碱性染料着色较深的区域。
着丝粒、端粒、次缢痕, DNA主要是高度重复序列,没有基因活性。
11.核小体:核小体是染色体的基本组成单位,它是由DNA和组蛋白构成的,组蛋白H3、H4、H2B、H2A各两份,组成了蛋白质八聚体的核心结构,大约200bp的DNA盘绕在蛋白质八聚体的外面,相邻两个核小体之间结合了1分子的H1组蛋白。
基因治疗中的基因启动子与增强子设计与构建基因治疗是一种利用基因工程技术来治疗疾病的方法。
在基因治疗中,基因的表达调控是至关重要的一步。
基因的表达需要一个启动子来启动基因的转录,同时增强子的作用可以提高基因的表达水平。
合理设计和构建基因启动子和增强子对于基因治疗的成功至关重要。
基因启动子是调控基因表达的关键元素之一,它们位于基因的上游区域,可以结合转录因子,通过调节转录以实现基因表达控制。
在基因治疗中,设计和选择适当的启动子非常重要。
主要的原则是选择能够实现高水平和特异性基因表达的启动子。
一些常用的启动子包括CMV启动子、EF1α启动子和hEF1α启动子等。
CMV启动子广泛应用于基因治疗领域,因为它具有高度活性和广谱的转录活性。
EF1α启动子和hEF1α启动子具有相似的特性,能在多种细胞系中实现高表达。
根据实际需求,选择适合的启动子非常重要。
增强子是另一种在基因治疗中常用的基因调控元素,它可以增强启动子对转录因子的结合,提高基因转录和表达水平。
增强子通常位于启动子的上游或下游区域,并与启动子通过调节染色质结构密切合作。
在基因治疗中,增加基因的表达水平非常重要,因此增强子的设计与构建十分重要。
为了设计和构建适当的基因启动子和增强子,下面是一些建议:首先,了解目标细胞和目标基因的特性。
了解目标细胞的生长环境、代谢活性、表达系统等特点,以便选择适当的启动子和增强子。
同时,了解目标基因在不同组织和细胞系中的表达水平和特异性,以便选择适合的启动子和增强子。
其次,选择适当的启动子和增强子。
根据目标基因和目标细胞的特性,选择合适的启动子和增强子。
在选择启动子时,考虑到其活性和特异性,以及在不同细胞系和组织中的表达特点。
在选择增强子时,考虑到其对启动子的增强效应和在目标细胞中的可操作性。
在设计和构建基因启动子和增强子时,需要注意以下几点:1. 启动子和增强子的序列设计:根据特定的需求,可以通过计算机辅助设计工具来优化启动子和增强子的序列,提高其活性和特异性。
真核生物转录元件组成及其分类
真核生物转录元件是指在基因转录过程中与RNA聚合酶和调控因子结合的特定DNA序列,用于调控基因的转录。
它们包括启动子、增强子、沉默区和辅助区等。
1. 启动子:启动子位于基因的转录起始点上游,这是RNA聚合酶与DNA结合的起点。
启动子中一般包含TATA盒子和CAAT盒子等特定DNA序列,它们可以吸引转录因子与RNA聚合酶II结合并激活基因的转录。
2. 增强子:增强子位于启动子上游,它们可以增强启动子的活性,从而提高转录速率。
增强子一般由多个转录因子结合而成,它们可以通过相互作用来协同作用,实现调控基因的转录。
3. 沉默区:沉默区位于基因的转录起始点下游,它们可以阻止RNA聚合酶的结合,从而抑制基因的转录。
沉默区一般包括转录终止位点和多个转录抑制因子结合的DNA序列。
4. 辅助区:辅助区分布在基因的远端、内含子和外显子中,它们可以调节基因的表达水平和组织特异性。
辅助区包括增强子和增强子类似物,它们可以通过转录因子结合来调控基因的转录。
根据其作用和位置的不同,转录元件可以分为启动元件、增强元件和沉默元件等。
启动元件包括启动子和促进元件,主要用于启动基因的转录。
增强元件包括增强子和增强子类似物,主要用于增强基因的表达。
沉默元件包括沉默区和抑制元件,主要用于抑制基因的转录。
《人类细胞系中远程增强子—启动子相互作用的识别研究》篇一人类细胞系中远程增强子-启动子相互作用的识别研究一、引言在生物医学领域,基因表达调控机制一直是研究的热点。
其中,增强子与启动子之间的相互作用是基因表达调控的关键环节之一。
近年来,随着生物信息学和基因组学的发展,人类细胞系中远程增强子-启动子相互作用的识别研究逐渐成为研究热点。
本文旨在探讨人类细胞系中远程增强子-启动子相互作用的识别研究,以期为进一步了解基因表达调控机制提供理论基础。
二、背景知识介绍增强子是一种顺式作用元件,可以远程调控基因的表达。
它通过与特定蛋白质的结合,改变基因的表达水平。
启动子是另一个重要的顺式作用元件,它控制基因的转录起始。
增强子与启动子之间的相互作用对基因的表达具有重要影响。
然而,由于它们的相互作用受到多种因素的影响,如细胞类型、环境条件等,因此识别它们之间的相互作用一直是研究的难点。
三、研究方法本研究采用生物信息学和基因组学的方法,结合实验验证,对人类细胞系中远程增强子-启动子相互作用的识别进行研究。
首先,我们利用高通量测序技术获取了人类细胞系中增强子和启动子的分布信息。
然后,我们利用生物信息学软件分析这些数据,预测增强子与启动子之间的相互作用。
最后,我们通过实验验证预测结果的准确性。
四、研究结果1. 数据获取与分析:我们利用高通量测序技术获取了人类细胞系中增强子和启动子的分布信息。
通过生物信息学软件的分析,我们发现增强子与启动子之间存在多种相互作用模式。
2. 相互作用模式:我们发现增强子与启动子之间的相互作用受到多种因素的影响,如细胞类型、环境条件等。
在不同的细胞类型中,增强子与启动子之间的相互作用模式存在差异。
此外,我们还发现增强子与启动子之间的距离、序列特征等因素也会影响它们之间的相互作用。
3. 实验验证:为了验证预测结果的准确性,我们进行了实验验证。
通过荧光素酶报告实验和染色体免疫沉淀测序等技术,我们证实了部分预测结果的准确性。
基因作用元件坐标基因作用元件坐标是指基因组中的特定区域,通过该区域内的序列可以调控基因的表达。
这些作用元件可以是启动子、增强子、转录因子结合位点等,它们在基因调控网络中起着重要的作用。
启动子启动子是基因的调控区域之一,位于基因的上游区域。
启动子通过与转录因子结合,促使转录的开始。
启动子通常包含有TATA盒、CAAT盒和GC盒等次要序列 motif。
启动子的作用元件坐标通常通过相对于基因起始位点的距离来表示。
例如,启动子位于基因起始位点的上游1000碱基对应的坐标是-1000。
增强子增强子是一种能够提高基因转录水平的DNA序列。
增强子位于基因组中的特定区域,通常位于基因的上游或下游区域。
增强子和转录因子相互作用,增强基因的转录活性。
增强子的作用元件坐标也是相对于基因起始位点的距离来表示的。
例如,增强子位于基因起始位点的上游2000碱基对应的坐标是-2000。
转录因子结合位点转录因子结合位点是转录因子与DNA相互作用的位置。
转录因子能够结合在特定的DNA序列上,从而调控基因的表达。
转录因子结合位点的坐标通常以物种的基因组坐标系为准。
例如,在人类基因组中,可以使用hg19或hg38作为基因组坐标系。
转录因子结合位点的具体坐标可以使用基因组浏览器等工具进行查询和分析。
基因调控网络基因调控网络是指多个基因之间通过基因作用元件实现交互作用的网络。
在这个网络中,启动子、增强子和转录因子结合位点等作用元件通过相互作用,调控着基因的表达。
基因调控网络可以通过实验数据和计算模型进行建立和研究。
研究基因调控网络有助于理解基因调控的机制,揭示基因调控与疾病等生物过程之间的关系。
总结基因作用元件坐标在基因调控中起着重要的作用,它们通过与转录因子结合,调控基因的表达。
启动子、增强子和转录因子结合位点的坐标可以通过相对于基因起始位点的距离来表示。
基因调控网络是基因作用元件相互作用的结果,对于理解基因调控机制具有重要意义。
分析增强子和启动子的区别在基因组学研究中,增强子(enhancer)和启动子(promoter)是两个重要的概念。
它们都是调控基因表达的元件,但在功能和位置上有着明显的区别。
本文将从不同的角度分析增强子和启动子的区别。
1. 定义•增强子:增强子是一种DNA序列,位于基因或远离基因的染色质上,并能够调控靠近或远离它的基因的表达。
增强子通常能够与启动子和转录因子相互作用,增加或提高靶基因的表达水平。
•启动子:启动子是一种DNA序列,位于基因的上游区域(5’末端),与转录因子及RNA聚合酶结合,开始基因的转录过程。
2. 位置增强子和启动子在基因上的位置有明显的差异。
•增强子:增强子通常位于远离基因的位置(上游或下游数千个碱基对),可以通过DNA环路与靠近的启动子相互作用,调节基因的表达。
增强子的作用与距离基因的远近无关,并可以作用于多个基因。
•启动子:启动子通常位于基因的上游区域(上游200至1000个碱基对),与转录因子和RNA聚合酶结合,开始基因转录过程。
3. 功能增强子和启动子在基因调控中发挥不同的作用。
•增强子:增强子能够增加或提高靶基因的表达水平,使该基因在特定条件下更活跃。
增强子通过与启动子和转录因子相互作用,改变染色质构象和调节转录因子的结合,从而影响基因表达。
•启动子:启动子是基因转录的起始点,能够与RNA聚合酶和转录因子结合,开始基因转录过程。
启动子的功能是启动基因的表达,其活性决定了该基因的转录水平。
4. 结构增强子和启动子在结构上也存在差异。
•增强子:增强子通常是几百个碱基对长的DNA序列,具有丰富的转录结合位点和转录因子结合位点。
增强子并不直接参与基因转录,而是通过与启动子区域相互作用来影响基因的表达。
•启动子:启动子通常包括核心启动子和调控序列。
核心启动子是一个短序列(通常为几十个碱基对),与RNA聚合酶结合,直接参与基因的转录过程。
调控序列位于核心启动子上游,包含转录因子结合位点和其他调控元件,可以进一步影响启动子的活性和基因的表达。
转录因子启动子和增强子的分子机制研究转录因子是调控基因表达的重要分子,一般是一类可以结合到DNA上的蛋白质。
转录因子通过与基因的启动子和增强子结合,激活或抑制基因的转录活性,从而影响基因表达。
近年来,对转录因子启动子和增强子的分子机制研究取得了一系列重要进展。
一、转录因子启动子的结构和功能转录因子启动子是位于基因转录起始位点上游的DNA序列,通常为1000个碱基对以内。
启动子区域通常被RNA聚合酶所识别和结合,然后引发基因转录。
在此过程中,转录因子作为调节因子与启动子区域相互作用,决定了是否可以转录该基因。
现有的研究表明,启动子区域的核苷酸序列、化学修饰和三维结构等因素,对转录因子的结合、招募和调节起到重要作用。
此外,启动子上的一些功能模块,例如转录起始位点、增强子和响应元素等,也可以影响该区域的特异性和调节能力。
二、转录因子增强子的结构和功能转录因子增强子是一个短DNA序列,通常包含50-1000个碱基对。
增强子位于基因转录起始位点上游不定距离的位置,其作用是增强自身相邻基因的转录水平。
与启动子不同,增强子不一定与RNA聚合酶直接结合,但通过转录因子的中介作用,能够提高相邻基因的表达量。
增强子的结构越来越被认为是多层次、复杂和高度调控的。
研究证实,增强子中包含了多个转录因子结合位点和调控序列,而且这些位点的位置、数量和相互作用关系对增强子的调节能力有着决定性影响。
除此之外,增强子的化学修饰和染色质结构等也可以影响其调控特性。
三、转录因子启动子和增强子的复杂调控网络转录因子启动子和增强子是调控基因转录的关键分子,但它们的机制是复杂、多样和有机互动的。
研究表明,启动子和增强子之间可以通过三维染色质构象等方式相互作用,这种相互作用可以影响基因调控的效率和特异性。
此外,增强子之间也可以相互调控,而且这些调控关系可能是时间、空间和特异性相关的。
这些相互作用构成了一个庞大而分层的调控网络,通过不同层次的信号传递、修饰和调节等机制,影响基因表达的时空分布和调控精度。
cacgta顺式作用元件
顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等,它们的作用是参与基因表达的调控。
这些元件本身并不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,要与反式作用因子相互作用而起作用。
例如,增强子就是远离转录起始点、决定组织特异性表达、增强启动子转录活性的特异DNA序列,其发挥作用的方式与方向、距离无关。
增强子与启动子非常相似:都是由若干组件组成,有些组件既可在增强子、又可在启动子出现。
从功能方面讲,没有增强子存在,启动子通常不能表现活性;没有启动子,增强子也无法发挥作用。
增强子和启动子有时分隔很远,有时连续或交错覆盖。
此外,真核基因启动子是原核启动序列的同义语。
真核启动子是指RNA聚合酶及转录起始点周围的一组转录控制组件,每个启动子包括至少一个转录起始点以及一个以上的功能组件,转录调节因子即通过这些机能组件对转录起始发挥作用。
在这些调节组件中最具典型意义的就是TATA盒子,它的共有序列是TATAAA。
TATA盒子通常位于转录起始点上游-25至-30区域,控制转录的准确性和频率。
如需更多关于“cacgta顺式作用元件”的信息,建议查阅相关资料或咨询遗传学专家。
启动子-增强子环三维结构-概述说明以及解释1.引言1.1 概述引言部分是文章开头的部分,用来引入读者对主题的背景和重要性。
概述部分应该对启动子-增强子环三维结构做一个简要的概括和说明。
以下是一个可能的内容:概述:启动子和增强子是调控基因表达的两个关键元素,在基因调控网络中发挥着重要的作用。
近年来,随着对基因调控机制的深入研究,研究人员开始关注启动子和增强子之间的相互作用及其在基因表达中的功能。
启动子-增强子环三维结构是指启动子与附近的增强子在三维空间中相互接触形成的复杂结构。
这种环状结构在调控基因表达中起着至关重要的作用。
启动子通常位于基因的上游区域,它能够结合转录因子和RNA聚合酶等调节因子,使基因转录开始。
而增强子则可以进一步增强启动子的活性,从而促进基因的高效表达。
传统上,对于启动子和增强子的研究主要集中在它们的序列特征和功能上,但近年来的研究表明,启动子-增强子相互作用在基因调控中发挥着至关重要的作用。
通过结构生物学技术和基因组学方法的发展,我们能够更深入地了解启动子-增强子的相互作用和结构特征。
这些研究揭示了启动子-增强子环的复杂三维结构,并揭示了它们在调控基因表达中的功能。
启动子-增强子环的形成是通过染色质重塑和DNA环绕来实现的,这种环状结构有助于增强启动子和增强子之间的物理接触,从而增强其调控效果。
此外,启动子-增强子环的形成还与转录因子的空间布局和染色质状态密切相关。
本文的目的是系统性地概述启动子-增强子环的三维结构,探讨其在基因调控过程中的重要性,并展望其未来研究的方向。
通过对启动子-增强子环的深入理解,我们将能够更好地把握基因调控的机制,并为疾病治疗和基因工程等领域提供新的思路和策略。
接下来,我们将首先介绍启动子和增强子的定义及其功能,然后重点探讨启动子-增强子相互作用的重要性。
最后,我们将总结启动子-增强子的重要性,并展望其在未来研究中的发展方向。
1.2文章结构1.2 文章结构本文主要包括以下几个部分内容:1. 引言:对启动子-增强子环三维结构的概述和背景进行介绍,明确研究的目的和意义。
枯藤老树昏鸦,小桥流水人家,古道西风瘦马。
夕阳西下,断肠人在天涯。
第三章第二节启动子与增强子教学目标:教学重、难点:教学内容:一、原核生物启动子1 启动子:是一段位于结构基因5 '端上游区的DNA 序列,在转录起始之前被RNA 聚合酶结合的DNA部位称为启动子;启动子的结构影响它与RNA 聚合酶的亲和力,决定基因表达强度。
转录单元:是一段从启动子开始到终止子(terminator )结束的DNA 序列,RNA 聚合酶从转录起点开始沿着模板前进,直到终止子为止,转录出一条RNA 链;在细菌中,一个转录单元可以是一个基因,也可以是几个基因。
2 转录起点:指与新生RNA 链第一个核苷酸相对应DNA 链上的碱基,研究证实通常为一个嘌呤。
上游:常把起点前面,即5 '末端的序列称为(upstream )上游;下游:起点后面即3 '末端的序列称为下游(downstream )。
在描述碱基的位置时,起点为+1 ,下游方向依次为+2 ,+3 ……,上游方向依次为-1 ,-2 ,-3 ……。
3 启动子结构:Pribnow框:在起始点上游,几乎在所有启动子都存在一个6 bp富含A/T区域TATAAT。
通常位于-18位到-9位,称为Pribnow框。
该区域是RNA聚合酶牢固结合位点,RNA聚合酶结合后,这一富含A/T的DNA双链解开。
Sextama框:位于-35区附近有一TTGACA序列,是RNA聚合酶中的σ因子识别位点。
以上这两个位点对于转录起始都是非常重要的。
σ因子识别-35区并与之结合。
由于RNA聚合酶分子覆盖面积能达到70bp,因此酶分子上的一个合适部位能接触-10区。
酶分子一旦与-10区结合以后,就从识别位点上解离下来。
此外,-35序列的重要性还在于在很大程度上决定了启动子的强度。
-10 区和-35 区的最佳距离:在原核生物中,-35 区和-10 区的距离大约是16 ~19bp ,小于15bp 或大于20bp 都会降低启动子的活性;保持启动子这两段序列以及它们之间的距离是十分重要的,否则就会改变它所控制的基因表达水平。
《人类细胞系中远程增强子—启动子相互作用的识别研究》篇一人类细胞系中远程增强子-启动子相互作用的识别研究一、引言在生命科学的众多领域中,对基因表达调控机制的研究一直占据着重要地位。
增强子与启动子之间的相互作用是调控基因表达的关键因素之一。
本文将探讨人类细胞系中远程增强子-启动子相互作用的识别研究,揭示其背后的分子机制及在生物学领域的应用价值。
二、增强子与启动子的基本概念及作用增强子是一种非编码的DNA序列,可以增强与其关联的基因的表达水平。
它不直接与RNA聚合酶结合启动转录,而是通过与特定的蛋白质因子相互作用来调节基因的表达。
而启动子是位于基因上游的一段DNA序列,能够与RNA聚合酶结合并启动转录过程。
三、远程增强子-启动子相互作用的重要性基因的表达受多种因素的影响,包括转录因子的结合、染色体构象等。
远程增强子-启动子相互作用作为一种重要的调控机制,可以跨越较大的基因距离来调控基因的表达。
因此,识别和解析这种相互作用对于理解基因表达调控机制具有重要意义。
四、远程增强子-启动子相互作用的识别方法1. 实验方法:通过使用基因敲除、荧光报告基因等技术手段,验证增强子与启动子之间的相互作用关系。
此外,利用染色质免疫共沉淀(ChIP)等技术可以检测特定蛋白质与DNA的结合情况,从而揭示增强子与启动子之间的相互作用。
2. 计算方法:随着生物信息学和计算生物学的发展,越来越多的计算方法被用于识别远程增强子-启动子相互作用。
例如,基于序列分析的方法可以预测潜在的增强子与启动子区域;基于机器学习的方法可以通过分析基因表达数据和组学数据来识别相互作用关系。
五、远程增强子-启动子相互作用的分子机制远程增强子-启动子相互作用涉及多种蛋白质因子和复杂的分子机制。
这些蛋白质因子包括转录因子、染色质重塑复合物等,它们通过与DNA序列的结合和相互作用来调节基因的表达。
此外,染色体的三维构象也影响着这种相互作用的发生和效果。
六、研究进展及挑战目前,关于远程增强子-启动子相互作用的研究已经取得了一定的进展,但仍面临诸多挑战。
真核生物转录元件组成及其分类转录是生物体内重要的基因表达过程之一,转录的实现需要转录因子与特定序列的转录元件相互作用。
转录元件是指基因座的某些区域,它们能够调节基因的转录水平。
而真核生物中的转录元件包括启动子、增强子、沉默子和辅助子等,它们的结构和功能不同,但都在转录过程中发挥着重要的作用。
1. 启动子启动子是真核生物转录起始位点上游的区域,通常包括TATA盒和转录起始位点。
TATA盒是启动子中最常见的转录元件,它在真核生物中非常保守,其序列为TATAAA或TATAA,它是RNA聚合酶II 与转录因子TFIID的结合位点,起到定位RNA聚合酶的作用。
除了TATA盒之外,启动子中还包括CCAAT盒、GC盒、Inr序列等,它们也与转录因子有着不同的相互作用,共同调控基因的转录水平。
2. 增强子增强子是真核生物DNA序列中能够增强基因转录的元件,它们位于启动子上游的区域,与转录因子和共激活因子相互作用,增强基因的转录水平。
增强子的长度通常为数百到数千个碱基对,其序列可以是高度多样化的,但通常包含一些保守的结构域,如核转录因子结合位点和组蛋白修饰位点等。
增强子可以调节基因转录的时空特异性,其活性可以受到多种因素的调控,如激素、细胞因子、生长因子等。
3. 沉默子沉默子是真核生物DNA序列中能够抑制基因转录的元件,它们位于基因的内部或外部,可以通过DNA甲基化、组蛋白修饰、DNA 序列的物理隔离等多种机制实现基因的沉默。
沉默子的序列和结构比较多样化,在某些情况下,同一个基因的沉默子可以是多个不同的序列。
沉默子的发现为基因沉默机制的研究提供了新的途径。
4. 辅助子辅助子是真核生物中一类调节基因转录的元件,它们位于启动子或增强子中,可以增强或抑制启动子或增强子的活性。
辅助子的序列和结构也比较多样化,不同的辅助子可以调控不同的基因,甚至同一个基因的不同辅助子也可以调控不同的转录特异性。
辅助子与启动子、增强子的相互作用可以形成复杂的调控网络,共同调控基因的表达。
启动子和增强子是基因调控的重要元件,它们在调控基因表达中扮演着关键的角色。
本文将深入探讨启动子和增强子的概念、结构和相互作用的机制。
启动子和增强子相互作用什么是启动子和增强子启动子的定义和功能•启动子位于基因的上游区域,在转录起始位点附近,一般由一系列特定序列组成。
•启动子是基因转录的起点,它与转录因子的结合使得转录酶能够结合并开始转录过程。
增强子的定义和功能•增强子位于启动子附近的DNA序列,可以远离转录起始位点。
•增强子可以调节基因表达水平,使得启动子的转录效率增加。
启动子和增强子的结构差异启动子的结构•启动子一般包含TATA盒、CAAT盒和GC盒等保守序列。
•TATA盒位于转录起始位点上游,是转录因子结合的重要区域。
•CAAT盒位于TATA盒上游,也可以结合转录因子调控基因转录。
•GC盒则通常位于启动子的下游区域。
增强子的结构•增强子一般由多个转录因子结合位点组成。
•这些结合位点中的DNA序列可以是不规则的,没有严格保守的序列。
三维基因组结构的影响•三维基因组结构中的染色体折叠可以使得启动子和增强子之间产生空间上的靠近。
•这种靠近为启动子和增强子之间的相互作用提供了可能性。
转录因子的介导•转录因子可以与启动子和增强子的序列特异性结合。
•当转录因子结合在增强子上时,可以通过DNA环路与启动子相互作用。
•这种增强子与启动子的相互作用可以促进转录因子的结合,增强基因表达。
长程相互作用•通过染色质构象的调节,增强子可以与远离的启动子产生相互作用。
•长程相互作用可以调节启动子的活性,影响基因的转录水平。
启动子和增强子的研究方法DNA染色质免疫共沉淀(ChIP)1.转录因子与DNA结合的检测方法。
2.利用特定抗体将转录因子与DNA结合的区域富集,然后进行测序或PCR分析。
Hi-C技术1.用于研究染色质的三维结构。
2.可以发现启动子和增强子之间的空间靠近关系。
CRISPR-Cas9技术1.用于研究启动子和增强子的相互作用及其功能。
增强子和启动子的相互作用增强子和启动子的相互作用,这个话题听起来有点高深,但其实就像是个小故事。
想象一下,一个乐队的演出,增强子就像是乐队的音响设备,而启动子则是指挥。
没有指挥,乐队的乐器虽然都在,却没有人带动节奏。
指挥可不能缺少,毕竟他负责让每一个音符都能和谐地响起。
增强子则负责让声音更大、更好。
要是没有它,乐队再怎么努力,效果也差强人意。
想象一下,一个小小的增强子,可能就是那种特别劲爆的音响,能把你从椅子上震起来,简直太给力了。
好吧,咱们把这个乐队的比喻放一放,来聊聊它们的真正职责。
增强子可不是简单的“开关”,它就像个小助手,能让启动子发挥得更出色。
启动子负责启动基因的转录,但要想让这个过程进行得顺利,增强子就是必不可少的好帮手。
想象一下,在一个晚会上,启动子穿着礼服,优雅地走到舞台,准备开始表演。
这时,增强子就在后台默默地调整着音响,确保每一个音符都能传到每一个角落。
没有增强子的助力,启动子就算再有风度,也难免显得有些冷清。
说到相互作用,这就好比两个好朋友,彼此之间有着微妙的默契。
增强子和启动子之间的关系就像是兄弟般的情谊。
增强子通过结合转录因子,提升启动子的活性,确保基因能顺利被表达。
这种互动简直像是在跳舞,增加了基因表达的节奏感。
启动子就像舞者,而增强子则是那种能够让舞蹈更加绚丽的灯光。
它们的配合,让整个过程显得生动有趣。
有趣的是,增强子并不局限于离启动子很近的地方。
它们可以在基因组的不同位置相互作用,像是在一个大舞台上,调皮地穿梭,时而靠近,时而远离。
这种灵活的关系让基因的表达变得更加多样化。
想想看,如果每一次的演出都能根据观众的反馈进行调整,那该多好啊!增强子就是那种能够不断适应、不断改变的灵活角色。
而且增强子和启动子的结合并不是一成不变的。
随着时间的推移,细胞的需求也在不断变化。
增强子可能会根据环境的变化,调整与启动子的结合方式,就像是乐队会根据现场观众的反应来调整曲目。
这种动态的互动关系,让整个基因表达的过程充满了可能性。
增强子:能够大幅度增强基因转录效率的调控序列,可远距离作用于同一条DNA链的启动子,位于相邻启动子的上游或下游都能起作用。
沉默子(silencer):抑制基因表达的调控序列。
基因扩增:某些基因的拷贝数专一性增加的现象,它使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要,是基因活性调控的一种方式。
信号肽:真核细胞的分泌蛋白一般在N端含约20个氨基酸残基的信号肽,含高度疏水的氨基酸,信号肽的C端含有信号肽酶识别的位点。
多聚核糖体:一条mRNA分子与一定数目的核糖体结合而成,形成的念珠状结构,可以提高翻译效率。
SD序列:核糖体结合位点中富含嘌呤的序列,一致序列为AGGAGGU,能被核糖体16SrRNA 识别并结合,从而起始翻译。
启动子(promoter):RNA聚合酶识别和结合的DNA序列,能起始mRNA的合成。
泛素(ubiquitin):参与蛋白质降解的蛋白质小分子,真核生物中广泛存在,序列高度保守。
组成性剪接:内含子有序的或组成性的从mRNA前体中被剪接的过程。
可变剪接(变位剪接,选择性剪接):同一基因的转录产物由于不同的剪接方式形成不同mRNA的过程。
snoRNA:小核仁RNA,参与rRNA的甲基化和假尿苷酸化修饰.群体感应:细菌根据细胞密度变化进行基因表达调控的一种生理行为。
分子伴侣(chaperone):能够帮助其它蛋白正确折叠和组装的蛋白,自身并不包含在正确折叠的蛋白质中。
氨酰tRNA合成酶:催化氨基酸与对应的tRNA结合的特异性酶,一种aa对应一种酶。
RNA编辑:在mRNA水平上改变遗传信息的过程,有碱基的突变、缺失或添加,在转录后或期间发生。
σ因子:原核生物RNA聚合酶的一种亚基,帮助RNA聚合酶识别并结合在DNA启动子上,在RNA合成的起始中具有关键作用。
锌指结构:由一个锌离子和两个半胱氨酸及两个组氨酸残基共同形成的指状结构域。
亮氨酸拉链(Leucine-zipper ):在α螺旋中,平均每7个氨基酸就出现一个Leu,Leu出现螺旋的疏水一侧。
基因调控中的启动子和增强子的研究进展近年来,基因调控是生物学研究的热门话题之一。
在细胞内,基因的启动和调节是通过一系列复杂的关系网络进行的。
而其中,启动子和增强子是非常重要的两种调节元件。
本文将从启动子和增强子的概念、结构及作用机制等方面来介绍它们在基因调控中的研究进展。
一、启动子的概念和结构启动子是调控基因转录的重要序列元件,它通常位于基因组 DNA 序列的上游区域。
启动子的主要功能是促进 RNA 聚合酶和转录因子的结合,从而启动基因的转录过程。
在启动子中,最重要的元件是所谓的 TATA box,在这个区域内,RNA 聚合酶可以较为容易地开启 DNA 的双链结构,进而进行基因转录。
启动子的结构非常复杂,它通常包括一些共同的序列元件,如 TATA box、CAAT box 和 GC box 等,同时还含有一些变异的序列元件,这些变异元件可能与一些特定的基因或组织类型相关联。
此外,启动子的配置主要通过 DNA 上结构、形态和化学修饰的改变来实现。
例如,在某些基因中,启动子的空间布局可以独立地影响基因的表达水平。
二、增强子的概念和结构与启动子有着类似的功能,在基因调控中另一个 non-coding 的重要元件是增强子。
增强子是一种特殊的 DNA 序列,它可以调控受体蛋白质的结合,从而影响基因的表达。
与启动子不同,增强子并不与转录因子直接相互作用。
相反,它能够与某些调节蛋白质结合,并调节其与启动子及受体蛋白质的作用。
与启动子相比,增强子的结构和配置更加多样和灵活。
其中最主要的元件是一些DNA 结合蛋白,它们可以通过特定的DNA 序列结合并界定增强子的作用范围。
三、启动子和增强子的作用机制启动子和增强子所起的作用机制,可以用“构成调控因子复合物”来概括。
具体来说,启动子上的 TATA box 和转录因子结合,可以启动RNA聚合酶并实现转录过程。
同时,一些“转录增强因子”(TF)通过与增强子上的 DNA 序列结合来,招募多种调节蛋白集合,并改变某些基因的可及性和表达水平。
基因启动子序列中的调控元件尽管基因序列被看作是基因表达的重要组成部分,但它并不能完全决定基因表达的水平和模式。
相反,基因启动子序列中的调控元件扮演着至关重要的角色,这些元件包括启动子、增强子、沉默子等各种调节序列。
这些序列通过相互作用来控制基因表达的水平和模式。
在本文中,我们将探讨基因启动子序列中的各种调控元件及其作用。
一、启动子启动子是基因启动的重要元素之一。
它位于基因序列的5'端,是RNA聚合酶和调控转录因子结合的区域。
调控转录因子的结合促进RNA聚合酶的结合和启动物质的合成,从而启动基因的表达。
同时,启动子序列的长度、序列特征和化学修饰也会对基因表达产生重要的影响。
二、增强子增强子是调节基因表达的一种调节序列。
它位于基因启动子的上游区域,可以增强基因的转录和表达。
增强子与启动子之间存在着协同作用。
增强子与调控转录因子的结合能够改变活性区域的结构和三维构象,从而影响基因表达的背景水平和调节模式。
与启动子不同,增强子具有高度的多样性和数量上的分散性,因此,它们更容易被进化和调节。
三、沉默子沉默子在基因转录和表达中发挥着负向调节的作用。
它们位于基因序列的上游和下游区域,与启动子和增强子相似。
沉默子可以阻止调控转录因子结合到DNA上,从而抑制基因的表达。
沉默子的主要类型包括转录抑制因子、组蛋白修饰、DNA甲基化等。
这些沉默元素作用于基因表达的负面调控,已经成为前沿研究的热点。
四、其他类型的调控元件除了上述的调控元件,还有其他类型的元素,它们在基因转录和表达中发挥不同的作用。
例如,启动子近端参考序列(PEP)和启动子远端参考序列(SEP)对于RNA聚合酶的起始和终止位置有很大的影响。
同时,基础转录因子(TFIID)和介导转录因子(TAF)与RNA聚合酶间大量的相互作用,推进了基因的表达。
其他调控元件还包括剪接因子、RNA干扰元件等。
五、结论基因启动子序列中的调控元件对于基因的表达和多样性发挥着非常重要的作用。
第三章第二节启动子与增强子教学目标:教学重、难点:教学内容:一、原核生物启动子1 启动子:是一段位于结构基因 5 '端上游区的 DNA 序列,在转录起始之前被 RNA 聚合酶结合的 DNA部位称为启动子;启动子的结构影响它与 RNA 聚合酶的亲和力,决定基因表达强度。
转录单元:是一段从启动子开始到终止子( terminator )结束的 DNA 序列, RNA 聚合酶从转录起点开始沿着模板前进,直到终止子为止,转录出一条 RNA 链;在细菌中,一个转录单元可以是一个基因,也可以是几个基因。
2 转录起点:指与新生 RNA 链第一个核苷酸相对应 DNA 链上的碱基,研究证实通常为一个嘌呤。
上游:常把起点前面,即 5 '末端的序列称为( upstream )上游;下游:起点后面即 3 '末端的序列称为下游( downstream )。
在描述碱基的位置时,起点为+ 1 ,下游方向依次为+ 2 ,+ 3 ……,上游方向依次为- 1 ,- 2 ,- 3 ……。
3 启动子结构:Pribnow框:在起始点上游,几乎在所有启动子都存在一个6 bp富含A/T区域TATAAT。
通常位于-18位到-9位,称为Pribnow框。
该区域是RNA聚合酶牢固结合位点,RNA聚合酶结合后,这一富含A/T的DNA双链解开。
Sextama框:位于-35区附近有一TTGACA序列,是RNA聚合酶中的σ因子识别位点。
以上这两个位点对于转录起始都是非常重要的。
σ因子识别-35区并与之结合。
由于RNA聚合酶分子覆盖面积能达到70bp,因此酶分子上的一个合适部位能接触-10区。
酶分子一旦与-10区结合以后,就从识别位点上解离下来。
此外,-35序列的重要性还在于在很大程度上决定了启动子的强度。
- 10 区和- 35 区的最佳距离:在原核生物中,- 35 区和- 10 区的距离大约是 16 ~ 19bp ,小于 15bp 或大于 20bp 都会降低启动子的活性;保持启动子这两段序列以及它们之间的距离是十分重要的,否则就会改变它所控制的基因表达水平。
第三章第二节启动子与增强子教学目标:教学重、难点:教学内容:一、原核生物启动子1 启动子:是一段位于结构基因5 '端上游区的DNA 序列,在转录起始之前被RNA 聚合酶结合的DNA部位称为启动子;启动子的结构影响它与RNA 聚合酶的亲和力,决定基因表达强度。
转录单元:是一段从启动子开始到终止子(terminator )结束的DNA 序列,RNA 聚合酶从转录起点开始沿着模板前进,直到终止子为止,转录出一条RNA 链;在细菌中,一个转录单元可以是一个基因,也可以是几个基因。
2 转录起点:指与新生RNA 链第一个核苷酸相对应DNA 链上的碱基,研究证实通常为一个嘌呤。
上游:常把起点前面,即5 '末端的序列称为(upstream )上游;下游:起点后面即3 '末端的序列称为下游(downstream )。
在描述碱基的位置时,起点为+1 ,下游方向依次为+2 ,+3 ……,上游方向依次为-1 ,-2 ,-3 ……。
3 启动子结构:Pribnow框:在起始点上游,几乎在所有启动子都存在一个6 bp富含A/T区域TATAAT。
通常位于-18位到-9位,称为Pribnow框。
该区域是RNA聚合酶牢固结合位点,RNA聚合酶结合后,这一富含A/T的DNA双链解开。
Sextama框:位于-35区附近有一TTGACA序列,是RNA聚合酶中的σ因子识别位点。
以上这两个位点对于转录起始都是非常重要的。
σ因子识别-35区并与之结合。
由于RNA聚合酶分子覆盖面积能达到70bp,因此酶分子上的一个合适部位能接触-10区。
酶分子一旦与-10区结合以后,就从识别位点上解离下来。
此外,-35序列的重要性还在于在很大程度上决定了启动子的强度。
-10 区和-35 区的最佳距离:在原核生物中,-35 区和-10 区的距离大约是16 ~19bp ,小于15bp 或大于20bp 都会降低启动子的活性;保持启动子这两段序列以及它们之间的距离是十分重要的,否则就会改变它所控制的基因表达水平。
在细菌中常见两种启动子突变:下降突变:如果把Pribnow 其从TATAAT 变成AATAAT ,就会大大降低其结构基因的转录水平;上升突变::即增加Pribnow 区共同序列的同一性。
突变后的-10 区和-35 区越接近共同序列,转录的RNA 就越多;越远离共同序列,转录的RNA 就越少。
例如,在乳糖操纵子的启动子中,将其 Pribnow 区从 TATGTT 变成 TATATT ,就会提高启动子的效率,提高乳糖操纵子基因的转录水4 启动子区的识别一般认为, RNA 聚合酶并不直接识别碱基对本身,而是通过氢键互补的方式加以识别。
在启动子区 DNA 双螺旋结构中,腺嘌呤分子上的 N6 、鸟嘌呤分子上的 N2 、胞嘧啶分子上的 N4 都是氢键供体,而腺嘌呤分子上的 N7 、 N3 ,胸腺嘧啶分子上的 O4 、 O2 ,鸟嘌呤分子上的 N7 、 O6 、 N3 和胞嘧啶分子上的 O2 都是氢键受体。
由于它们分别处于 DNA 双螺旋的大沟和小沟内,因此都具有特定方位,而酶分子中也有处于特定空间构象的氢键受体与供体,当它们与启动子中对应的分子在一定距离内互补时,就形成氢键,相互结合。
这种氢键互补学说较为圆满地解释了启动子功能既受 DNA 序列的影响,又受其构象影响这一事实。
二、真核生物启动子真核生物启动子有三类,分别由RNA 聚合酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ进行转录。
类别Ⅰ(class Ⅰ)启动子:只控制rRNA 前体基因的转录,转录产物经切割和加工后生成各种成熟rRNA 。
类别Ⅰ启动子由两部分保守序列组成:核心启动子(core promoter ):位于转录起点附近,从-45至+20;上游控制元件(upstream control element ,UCE ):位于-180至-107;RNA 聚合酶Ⅰ对其转录需要2种因子参与:UBF1:一条M 为97000的多肽链,结合在上述两部分的富含GC 区;1个TBP ,即TATA 结合蛋白(TATA-binding protein ,TBP );SL1:一个四聚体蛋白,含有 3个不同的转录辅助因子TAF Ⅰ;在SL1因子介导下RNA 聚合酶Ⅰ结合在转录起点上并开始转录。
类别Ⅱ(class Ⅱ)启动子:类别Ⅱ启动子涉及众多编码蛋白质的基因表达的控制。
该类启动子包含4类控制元件:基本启动子(basal promoter ):序列为中心在-25至-30左右的7 bp 保守区,TATAAAA/T ,称为TATA框或Goldberg-Hogness 框。
与RNA 聚合酶的定位有关,DNA 双链在此解开并决定转录的起点位置。
失去TATA 框,转录将在许多位点上开始。
起始子(initiator ):转录起点位置处的一保守序列,共有序列为:P y P y ANT(A)P y P y P y 为嘧啶碱(C 或T ),N 为任意碱基,A 为转录的起点。
DNA 在此解开并起始转录。
上游元件(upstream factor ):普遍存在的上游元件有CAAT 框、GC 框和八聚体(octamer )框等。
CAAT+1框的共有序列是GCCAATCT,GC框的共有序列为GGGCGG和CCGCCC,八聚体框含有8bp,共有序列为A TGCAAA T;应答元件(response element):诱导调节产生的转录激活因子与靶基因上的应答元件结合。
如热休克效应元件HSE的共有序列是CNNGAANNTCCNNG,可被热休克因子HSF识别和作用;血清效应元件SRE的共有序列CCATA TTAGG,可被血清效应因子SRF识别和作用。
参与RNA聚合酶Ⅱ转录起始的各类因子数目很大,可分为3类:通用因子(general factor):作用于基本启动子上的辅助因子称为通用(转录)因子(GTF),或基本转录因子(basal transcription),为任何细胞类别Ⅱ启动子起始转录所必需,以TFⅡⅩ来表示,其中Ⅹ按发现先后次序用英文字母定名,如TFⅡA、TFⅡD、TFⅡH。
上游因子(upstream factor):或转录辅助因子(transcription ancillary factor),是指识别上游元件的转录因子。
可诱导因子(inducible factor):在真核生物中,与细胞类型和发育阶段相关的基因表达,主要通过转录因子的重新合成来进行调节的,是长期的过程。
对外界刺激的快速反应则主要通过转录激活物(transcription activator)的可诱导调节。
这些诱导的转录激活因子与靶基因上所谓应答元件相结合。
类别Ⅲ(class Ⅲ)启动子:类别Ⅲ启动子为RNA聚合酶Ⅲ所识别,他涉及一些小分子RNA的转录。
RNA聚合酶Ⅲ的启动子有3种类型结构:类型1基因内启动子:如5S rRNA基因的启动子,位于转录起点下游,即在基因内部,是下游启动子,有两个框架序列,被3种辅助因子所识别。
5S rRNA基因的启动子包括框架A(boxA)、中间元件(intermediate element)和框架C(box C)3个元件组成。
TFⅢA结合在框架A上,然后促使TFⅢC结合,后者结合导致TFⅢB结合到转录起点附近,并引导RNA聚合酶Ⅲ结合在起点上。
TFⅢB使RNA聚合酶Ⅲ正确定位,起“定位因子”(positioning factor)作用。
类型2基因内启动子:如tRNA基因的启动子,有两个控制元件,分别为框架A和框架B。
TFⅢC结合框架B,其结合区域包括框架A和框架B,然后导致TFⅢB结合到转录起点附近,并引导RNA聚合酶Ⅲ结合在起点上。
上游启动子:如snRNA基因的启动子,位于转录起点上游。
有3个上游元件:OCT(八聚体基序octamer motif)、PSE(邻近序列元件proximal sequence element)、TATA元件。
在RNA聚合酶Ⅲ的上游启动子中,只有靠近起点存在TATA元件,就能起始转录。
然而PSE和OCT元件的存在将会增加转录效率。
三、增强子及其功能增强子( enhancer ):能强化转录起始的序列称为增强子或强化子(1)在 SV40 的转录单元上存在增强子,它位于转录起始位点上游约 200bp 处,为两段 72bp 的重复序列,它们不是启动子的一部分,但能增强或促进转录的起始,除去这两段序列会大大降低这些基因的转录水平,若保留其中一段或将其取出插在 DNA 分子的任何部位,就能保持基因的正常转录;除 SV40 外,还在反转录病毒基因、免疫球蛋白基因、胰岛素基因、胰麋蛋白酶基因等许多基因的启动子区中陆续发现了增强子的存在。
增强子很可能通过影响染色质DNA- 蛋白质结构或改变超螺旋的密度而改变模板的整体结构,从而使得 RNA 聚合酶更容易与模板 DNA相结合,起始基因转录。
(2)增强子的作用特点:①增强效应非常明显;②增强子提高同一条 DNA 链上基因转录效率,可以远距离作用,通常可距离1 ~ 4kb 、个别情况下离开所调控的基因 30kb 仍能发挥作用,而且在基因的上游或下游都能起作用;③增强子作用与其序列的正反方向无关,将增强子方向倒置依然能起作用;④增强子要有启动子才能发挥作用,没有启动子存在,增强子不能表现活性;⑤但增强子对启动子没有严格的专一性,同一增强子可以影响不同类型启动子的转录;⑥增强子必须与特定的蛋白质因子结合后才能发挥增强转录的作用;⑦增强子一般具有组织或细胞特异性;⑧大多为重复序列。
沉默子最早在酵母中发现,以后在 T 淋巴细胞的T 抗原受体基因的转录和重排中证实这种负调控顺式元件的存在。
目前对这种在基因转录降低或关闭中起作用的序列研究还不多,但从已有例子看到:沉默子的作用可不受序列方向的影响,也能远距离发挥作用,并可对异源基因的表达起作用。