禁食抑制炎症的机制

间歇性禁食对减重和糖脂代谢作用的研究进展一、I F 的种类1. 隔日禁食（alternate day fasting，ADF）ADF，即每隔一日完全禁食。

ADF 是目前研究最多，最为流行，也最具有代表性的IF 方案。

根据禁食日是否摄入热量，ADF 又可分为完全禁食（complete alternate-day fasting，CADF）和改良禁食（modified alternate-day fasting，MADF）两种。

与CADF 方案下禁食日受试者不摄入任何含有热量的食物不同，MADF 方案下，禁食日受试者摄入的热量控制在平日的25% 以内即可。

相较于CADF，MADF 方案目前应用更为广泛。

MADF 的禁食时间一般在30 h 和40 h 之间。

若受试者于星期一（第一个摄食日）的24 时摄取最后一餐，星期三（第二个摄食日）的6 时摄取下一餐，则禁食时间为30 h；而受试者若于星期一（第一个摄食日）的17 时摄取最后一餐，星期三（第二个摄食日）9 时摄取下一餐，则禁食时间为40 h。

ADF 的持续周数不同，对人体代谢的影响不尽相同。

4 周的严格ADF （即使处于非禁食日）已被证明可在减轻健康中年人体质量（4.5%）的同时，减少其体内脂肪量（特别是躯干脂肪），改善其脂肪与肌肉的比例，降低其心血管疾病生物标志物水平，并提升其血清β- 羟丁酸水平。

CAI 等发现，在对非酒精性脂肪肝患者进行为期12 周的ADF 干预后，其血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）水平均明显减低。

而更为长期的ADF （>6 个月）可使健康中年人的细胞黏附分子（ICAM-1）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和代谢调节器三碘甲状腺原氨酸（FT3）水平降低，且低水平的FT3 并不会导致甲状腺功能受损。

上述结果均说明ADF 可作为治疗超重/ 肥胖及相关代谢性疾病的有效措施。

2. 周期性禁食（periodic fasting，PF）PF，即一段时期内或每周禁食1~2 d；禁食日限制能量摄入在平日的20%~25% 水平，其余时间可以自由摄食。

断食疗法的研究现状及前景展望能量摄入过多是肥胖发生的核心原因，因此，限制能量摄入是减重治疗的关键因素之一。

目前主流减重方式(包括减重手术、减重药物和生活方式干预)的减重机制中均涉及食物摄入的减少。

研究证明机体在食物供给不足的状态下，也可发生多种促代谢改善的生理变化。

因此，研究饥饿状态所导致的多种代谢获益对于治疗肥胖及相关代谢疾病意义重大。

断食疗法(fasting)作为生活方式干预的一种形式，是指机体在一段时间内不摄入或仅摄入极少能量的治疗方法，断食时长可持续12 h 至3周不等。

相较于药物及手术减重存在安全性风险及患者接受度不高等缺点，断食疗法门槛低，可作为减重首选干预治疗方法之一，具有花费低、并发症少的天然优势。

研究证明，断食疗法还具有促进胰岛β细胞再生和独立于体重降低以外的改善糖代谢、调节脂代谢及改善心脑血管疾病预后的作用，使其在防治代谢性疾病方面出现了新的研究前景。

另外，断食疗法在降低肿瘤发生率、延缓衰老等领域也可产生获益。

因此，本文拟就断食疗法的方法种类和其在减轻体重、改善糖代谢等方面的作用及机制进行综述。

一、断食疗法的种类饮食干预主要包括饮食结构及饮食热量干预，后者又分为2种形式。

一种是持续热量限制(continuousenergy restriction)，指在干预过程中每日摄入的热量均减少20%～40%，但每日保证进食的次数[2]。

另一种则是断食疗法，常以间歇性断食(intermittent fasting)的形式应用于临床研究与实践中[2,6]。

间歇性断食是指在断食干预期间仅摄入极低甚至不摄入能量，而在非断食干预期可恢复正常饮食，并进行多次循环。

其中断食干预的持续时间从12 h到长达3周不等。

断食期间的能量摄入也各有差别，从绝对的禁食禁水到可允许摄入日常需要能量的20%～25%不等[8]。

因此，断食疗法衍生出各种不同形式，其中研究最多的包括隔日断食法、时间限制饮食法和宗教相关的断食饮食等。

蛋白质在减少炎症反应中的作用炎症反应是机体对于损伤和感染的一种自我保护反应，但过度或持续的炎症反应可能导致组织损伤和疾病的发展。

研究表明，蛋白质在调节炎症反应中起着至关重要的作用。

本文将探讨蛋白质在减少炎症反应中的作用，并讨论其中的机制和研究进展。

一、蛋白质对于炎症反应的调节1.1 细胞因子的调节细胞因子在炎症反应中发挥关键作用，包括炎症介质（如肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β等）和抗炎因子（如白细胞介素-10等）。

蛋白质通过调节细胞因子的产生和释放，来抑制炎症反应。

例如，一些蛋白质可以通过干扰转录和转录后调控来抑制炎症介质的合成，同时促进抗炎因子的产生。

1.2 免疫细胞的调节免疫细胞在炎症反应中起到重要作用，包括巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等。

一些蛋白质可以调节免疫细胞的活性和功能，从而减少炎症反应。

例如，某些蛋白质可以抑制巨噬细胞的活性，阻断炎症介质的产生和释放；其他蛋白质可以促进免疫细胞的抗炎活性，增强其对炎症的清除能力。

二、蛋白质在减少炎症反应中的机制2.1 转录调控蛋白质可以通过作用于转录因子，调控与炎症相关基因的表达。

一些蛋白质可以与转录因子结合，抑制其转录活性，从而抑制炎症反应相关基因的转录。

另一些蛋白质则能够促进转录因子的活性，增强抗炎基因的表达。

2.2 蛋白质相互作用蛋白质还可以通过与其他蛋白质的相互作用，发挥调节炎症反应的作用。

例如，一些蛋白质可以与炎症介质相互作用，阻断其信号传导通路；其他蛋白质可以与转录因子或其他调节蛋白结合，影响其活性和功能。

三、蛋白质在减少炎症反应中的研究进展近年来，人们对于蛋白质在减少炎症反应中的作用进行了广泛的研究。

通过体内和体外实验，研究人员发现了许多具有抗炎作用的蛋白质，并阐明了其作用机制。

一些研究还发现，蛋白质的异常表达与炎症性疾病的发生和发展密切相关。

因此，进一步研究蛋白质调节炎症反应的机制，对于炎症性疾病的防治具有重要意义。

四、总结蛋白质在调节炎症反应中发挥重要作用。

药理学研究中的抗炎机制炎症是机体对于感染、损伤或刺激等外界因素的一种生理反应。

这种自我保护性的反应，旨在清除病原体、修复受损组织。

然而，炎症反应也会引发疾病进展、病理损伤以及组织功能障碍。

因此，探索抗炎机制并发展相应的治疗手段，是药理学研究的重要课题之一。

本篇文章将介绍药理学研究中常见的抗炎机制，并探讨相关药物的应用。

一、抗炎机制之炎症介质调节炎症反应的关键步骤之一是炎症介质的释放和调节。

炎症介质包括细胞因子、化学介质和激素等，它们在炎症过程中发挥着重要作用。

药理学研究通过干预炎症介质的合成、释放和功能，来调节炎症反应的强度和持续时间。

例如，非甾体抗炎药（NSAIDs）通过抑制前列腺素合成酶（COX）来减少前列腺素的产生，从而达到抗炎镇痛的效果。

二、抗炎机制之细胞信号通路调节细胞信号通路在炎症反应中发挥着极其重要的作用。

药理学研究通过调节细胞信号传导通路中的关键分子，来影响炎症反应的发生和发展。

例如，抗风湿药物甲氨蝶呤能够通过抑制关节滑膜细胞中的核因子-κB（NF-κB）信号通路，减少炎症介质的产生和释放。

而糖皮质激素则通过抑制炎症信号通路中的第二信使磷酸肌酸激酶（MAPK）、丝裂原激活蛋白激酶（MAPKs）等，来发挥抗炎作用。

三、抗炎机制之抗氧化应激氧化应激是炎症反应中的一个重要环节。

由于炎症反应中会产生大量的活性氧，导致细胞内氧化应激状态的增加，从而损伤细胞结构和功能。

药理学研究发现，一些抗氧化剂可以通过清除自由基和稳定氧化还原平衡，发挥抗炎作用。

例如，维生素C、维生素E等天然抗氧化剂被广泛应用于炎症相关疾病的治疗。

四、抗炎机制之细胞免疫调节细胞免疫调节在炎症反应中发挥着重要作用。

一些药物通过调节免疫细胞的活性和功能，来控制炎症反应的进程。

例如，免疫抑制剂环孢素A能够抑制T细胞的激活和增殖，从而减少炎症介质的产生。

而生物制剂白介素-1受体拮抗剂通过阻断炎症介质白介素-1与其受体的结合，来抑制炎症反应。

2024术前禁食禁饮与围手术期意外低体温及其相关性的研究进展(全文)围手术期意外低体温(inadvertent perioperative hypothermia,IPH)是指接受手术的患者从麻醉诱导前1h开始，术前、术中和术后24h内，由于围手术期非医疗日的导致患者核心体温低于36°C的一种临床现象，可导致多种临床不良事件。

已有研究表明，即使轻度低体温也会导致手术切口感染、心血管不良事件和凝血功能下降的发生率增高，术后恢复时间延长及病死率上升。

目前认为IPH在临床上的影响因素很多，包括患者、手术、环境等方面，禁食禁饮时间过长亦与IPH的发生有关。

日前，多数择期手术患者术前禁食禁饮时间均超过指南推荐的“6-4-2”h,不仅给患者带来了一系列身心不适，甚至还会造成生理功能紊乱，导致低体温、低血压等。

但术前禁食禁饮时间延长如何对患者的围手术期体温产生影响,目前仍无定论，需要进一步研究。

本文将对IPH、术前禁食禁饮及二者相关性进行综述，为进一步优化成年人围手术期体温管理提供新思路。

1IPHIPH是手术患者中最常见的不良事件之一。

由于手术类型及体温检测方法的不同，临床研究中报道的IPH发生率差异较大，从全^关节置换术的13.1%到结直肠手术的83.2%不等。

自2017年第1版《围术期患者低体温防治专家共识》发布以来，麻醉医师和外科医师对围手术期低体温的认识已得到显著提升。

1.1IPH发生机制生理条件下，核心（头部和躯干）体温受机体严格调控，能够在一定范围内保持稳定，而以四肢为主的外周则起到缓冲作用。

但非生理状态（如麻醉状态）下几乎所有未予保温的患者均会发生不同程度的低体温。

麻醉期间发生的低体温具有其特征性，可分为再分布期、缓慢线性下降期和平台期。

再分布期多为麻醉诱导后1h,这一阶段由于麻醉药物扩张血管，抑制体温调节中枢及自主体温调节反应，降低寒战阈值，且基础代谢率下降、骨骼肌松弛导致产热减少，使得热量由核心重新分布至外周，是术中低体温的主要原因。

mTOR信号通路调控机制解析及疾病治疗策略mTOR（mammalian target of rapamycin）是一种高度保守的蛋白激酶，在细胞内起到重要的信号传导作用。

它能够感知营养状态、能源供应和环境压力，进而调控细胞生长、代谢和增殖。

mTOR信号通路异常与多种疾病如癌症、肥胖症、糖尿病、自身免疫疾病等密切相关。

因此，解析mTOR信号通路的调控机制，并开发相应的疾病治疗策略，对于促进健康和治疗疾病具有重要意义。

mTOR信号通路的调控机制是一个复杂的过程。

它主要通过两个复合物mTORC1和mTORC2发挥作用。

mTORC1是mTOR的一个复合物，由mTOR、Raptor和其他蛋白质组成。

mTORC1主要调控细胞代谢和生长过程，包括蛋白质合成、自噬、核苷酸合成等。

mTORC1的活化受到许多信号的调控，其中最重要的是脂质信号、胰岛素/IGF-1信号和氨基酸信号。

mTORC2则主要参与细胞内多种信号通路的调控，如AKT信号通路等。

mTOR信号通路在癌症中扮演着重要的角色。

癌细胞的异常增殖和代谢依赖于mTOR信号通路的过度活化。

因此，抑制mTOR信号通路已成为癌症治疗研究的重要方向。

目前，已有多种mTOR抑制剂被用于临床治疗，如雷帕霉素（rapamycin）及其衍生物。

这些药物能够选择性地抑制mTORC1的活性，从而抑制癌细胞的生长。

然而，单一的mTOR抑制剂在一些肿瘤治疗中效果并不显著，因此研究人员正在寻找新的组合治疗策略。

近年来，研究发现mTOR通路与免疫调节密切相关。

mTOR信号通路在免疫细胞中起到重要的调控作用，影响免疫细胞的功能和代谢。

因此，调控mTOR信号通路有望成为治疗自身免疫疾病的新策略。

例如，一些mTOR抑制剂已被用于治疗类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等自身免疫疾病。

此外，mTOR信号通路还参与肥胖症和糖尿病等代谢性疾病的发生和发展，因此调控mTOR信号通路也有望成为治疗这些疾病的新途径。

低炎症性饮食注意什么低炎症性饮食是指通过饮食方式减少体内发炎反应的一种方法。

炎症反应在一定程度上是机体对外界刺激的正常反应，但长期的慢性炎症可能会导致许多慢性疾病的发生和发展，如心血管疾病、糖尿病、癌症等。

因此，通过改善饮食习惯来减少体内慢性炎症的发生，对维持身体健康是非常重要的。

下面将介绍一些低炎症性饮食的注意事项。

1. 增加蔬菜和水果的摄入：蔬菜和水果富含纤维、维生素、抗氧化剂等营养素，有助于减少体内炎症反应。

建议每天摄入五份以上的蔬菜和水果，尽量选择深色的蔬菜和水果，如紫色的葡萄、蓝莓、黑莓，以及绿色的菠菜、苦菊等。

2. 增加鱼类和植物性蛋白的摄入：鱼类富含omega-3脂肪酸，具有抗炎作用。

同时，植物性蛋白也有助于减少炎症反应。

建议每周至少吃两次含有omega-3脂肪酸的鱼类，如三文鱼、鳕鱼等；同时增加植物性蛋白的摄入，如豆类、豆制品、坚果等。

3. 减少饱和脂肪酸和反式脂肪酸的摄入：饱和脂肪酸和反式脂肪酸是促进炎症反应的因素，而且会增加患心脑血管疾病的风险。

因此，在低炎症性饮食中，应减少摄入高脂肪肉类、奶制品、黄油、糕点等含有饱和脂肪酸和反式脂肪酸的食物。

4. 选择低糖和低盐食物：过高的糖摄入会导致体内炎症反应增加，而高盐饮食则易导致水肿和体内炎症反应。

因此，应该尽量选择低糖和低盐的食物，少摄入糖果、甜点、加工食品等高糖和高盐食物。

5. 多摄入含有抗氧化剂的食物：抗氧化剂可以减少体内自由基的产生，减少炎症反应。

建议多摄入富含维生素C、维生素E、β-胡萝卜素等抗氧化剂的食物，如橙子、柠檬、蓝莓、坚果等。

6. 少摄入加工食品和饮料：加工食品和饮料中常含有高糖、高盐、反式脂肪酸、添加剂等不良成分，容易导致体内炎症反应的增加。

因此，在低炎症性饮食中，应尽量避免或少摄入加工食品和饮料。

总结起来，低炎症性饮食的核心原则是多摄入富含蔬菜、水果、鱼类等健康食品，减少饱和脂肪酸、反式脂肪酸、高糖、高盐等不健康食品的摄入。

论著 厚朴麻黄汤通过调节小鼠肺泡巨噬细胞ＪＡＫ２水平抑制气道炎症张川林㊀陈可强㊀朱烨芳㊀林凤耀ʌ摘要ɔ㊀目的㊀探讨厚朴麻黄汤抑制小鼠肺泡巨噬细胞中ＪＡＫ２激酶活化ꎬ从而抑制过敏性哮喘气道炎症反应的机制ꎮ方法㊀内毒素(ＬＰＳ)刺激小鼠肺泡巨噬细胞ꎬ并予厚朴麻黄汤含药血清干预处理ꎬ实时荧光定量ＰＣＲ检测细胞中ＪＡＫ２ｍＲＮＡ表达水平的变化ꎬＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测细胞中磷酸化的ＪＡＫ２蛋白表达的变化ꎮ结果㊀(１)ＬＰＳ组较空白对照组㊁血清对照组ＪＡＫ２ｍＲＮＡ表达明显增强ꎬ差异具有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎻ(２)含药血清组ＪＡＫ２ｍＲＮＡ表达下调ꎬ较ＬＰＳ组差异有统计学意义ꎻ(３)ＬＰＳ组小鼠肺泡巨噬细胞磷酸化的ＪＡＫ２蛋白表达水平高于空白对照组及血清对照组ꎻ含药血清组磷酸化的ＪＡＫ２蛋白表达水平一定程度上被抑制ꎮ结论㊀ＬＰＳ刺激小鼠肺泡巨噬细胞中ＪＡＫ２基因表达ꎬ并能一定程度上活化其蛋白表达水平ꎬ厚朴麻黄汤能一定程度上抑制该基因表达ꎬ同时下调其蛋白表达水平ꎬ这可能是厚朴麻黄汤抑制过敏性哮喘气道非特异性炎症反应的重要机制ꎮʌ关键词ɔ㊀厚朴麻黄汤ꎻ㊀肺泡巨噬细胞ꎻ㊀ＪＡＫ２[中图分类号]Ｒ５６２.２５㊀[文献标识码]Ａ㊀ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００２－１２５６.２０１９.２４.００２㊀㊀支气管哮喘是肺泡巨噬细胞㊁气道嗜酸性细胞㊁肥大细胞㊁Ｔ细胞等多种炎性细胞及细胞因子介导的慢性非特异性气道炎症性疾病ꎬ以气道高反应性(ＡＨＲ)㊁黏液高分泌为特点ꎮ气道炎症是所有类型哮喘的共同病理特征ꎬ而肺泡巨噬细胞是支气管哮喘气道局部炎症的主要始动细胞ꎮＪＡＫｓ激酶(ｊａｎｕｓｐｒｏｔｅｉｎｔｙｒｏｓｉｎｋｉｎａｓｅｓ)在哮喘慢性气道炎症炎症反应中起重要作用ꎮ多数细胞因子ꎬ如ＩＬ－６㊁ＩＬ－１０㊁ＩＦＮ－ｒ㊁磷脂酶Ａ２㊁细胞间黏附因子－１㊁诱导型一氧化氮合酶等ꎬ均可通过细胞内ＪＡＫｓ传递信息ꎬ引起靶细胞反应[１－３]ꎮ在传统中医中ꎬ支气管哮喘属 哮病 范畴ꎬ其中寒包热哮是重要的证型之一ꎮ厚朴麻黄汤为治疗寒包热哮型哮病的经典方剂ꎬ临床研究发现[４]该方能够改善哮病患者的临床症状及体征ꎬ但机制尚未明确ꎮ本实验通过厚朴麻黄汤干预ＬＰＳ刺激小鼠肺泡巨噬细胞ꎬ检测细胞中ＪＡＫ２基因及磷酸化的蛋白表达水平ꎬ探讨全厚朴麻黄汤通过下调小鼠肺泡巨噬细胞ＪＡＫ２抑制气道炎症的机制ꎮ现报道如下ꎮ一㊁材料与方法１.试剂与仪器:１６４０培养液(购自ＨｙＣｌｏｎｅ公司)㊁胎牛血清(购自ＨｙＣｌｏｎｅ公司)㊁ＬＰＳ(购自Ｓｉｇｍａ公司)㊁ｐ－ＪＡＫ２抗体(购自ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司)㊁㊀㊀基金项目:福建省自然科学基金项目(２０１７Ｊ０１３０４)福建省教育厅基金项目(ＪＡＴ１６０２３３)㊀㊀作者单位:３５００００福建福州ꎬ福建中医药大学附属第二人民医院㊀㊀通信作者:张川林ꎬＥｍａｉｌ:５２５５６２７５７＠ｑｑ.ｃｏｍ二抗(购自北京中杉金桥生物技术有限公司㊁发光液(购自北京中杉金桥生物技术有限公司)㊁聚合酶链反应(ＰＣＲ)试剂盒(购买自ＴａｋａＲａ公司)㊁蛋白提取试剂盒(购自碧云天公司)㊁ＳＤＡ－ＰＡＧＥ凝胶配置试剂盒(购自碧云天公司)㊁ＭＨ－Ｓ细胞株(购买自美国典型菌种保藏中心)ꎮ２.血清制备:厚朴麻黄汤(厚朴９克㊁麻黄１２克㊁石膏９克㊁杏仁１０克㊁半夏１０克㊁干姜６克㊁细辛６克㊁小麦３０克㊁五味子６克)ꎬ将诸药加水１０００ｍｌꎬ浸泡３０ｍｉｎꎬ先煮小麦ꎬ煮熟后去渣留汤加入其余诸药ꎬ武火煎煮至药液沸腾(１５ｍｉｎ)ꎬ文火煎煮６０ｍｉｎꎮ同法煎煮第２遍ꎬ将２次滤渣的药液混合ꎬ文火煎煮浓缩至１００ｍｌꎬ放置冷却至室温ꎬ移入加盖试剂瓶ꎬ放入４ħ冰箱中保存ꎮ原药材出自福建省药材公司ꎬ由福建中医药大学附属第二人民医院制剂科加工ꎮ清洁级小鼠共２０只ꎬ采购自福建省闽侯县吴氏实验动物贸易有限公司(合格证号:５００９２４１０)ꎬ以福建中医药研究院动物实验中心鼠类实验室进行动物实验ꎬ清洁级ꎮ动物使用与福建省医学实验动物管理委员会管理条例相符合ꎮ无中药干预组１０只小鼠ꎬ予１ｍｌ/只/天生理盐水溶液灌胃７天ꎮ中药干预组１０只小鼠ꎬ予１ｍｌ/只/天中药浓缩液灌胃７天ꎮ在第７天ꎬ小鼠经历１２小时禁食后ꎬ采用完整的每日剂量灌胃１次ꎮ在给药后１小时后ꎬ通过腹腔内注射戊巴比妥钠(０.２ｍｌ/１００ｇ)麻醉大鼠ꎮ在常规消毒后ꎬ用负压采取管收集腹主动脉血(约５ｍｌ)ꎮ然后将血液样品置于３７ħ的水浴中１５分钟ꎬ并以４００ˑｇ离心１５分钟ꎮ将血清通过０.２２μｍ滤膜过滤ꎬ将细胞移至新的Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中并在－２０ħ储存备用ꎮ３.方法:细胞培养与刺激:１％冰醋酸计数细胞小鼠肺泡巨噬细胞ＭＨ－Ｓ后用１６４０培养液调整细胞浓度为１ˑ１０６个/ｍｌꎮ将细胞液放入２４孔板中ꎬ０.５ｍｌ/孔ꎬ３７ħꎬ５％ＣＯ２培养箱中孵育２ｈꎬ待细胞贴壁后弃去上清ꎬ用无血清的冷ＲＰＭＩ１６４０冲洗掉未贴壁的细胞ꎮ细胞分组及处理:将小鼠肺泡巨噬细胞随机分为４组ꎬ空白对照组㊁ＬＰＳ组㊁血清对照组㊁含药血清组ꎬ每组设３个复孔ꎮ对照组不做任何处理ꎻＬＰＳ组给予０.１μｇ/ｍｌＬＰＳ处理４８ｈꎻ空白血清对照组先予无中药血清预处理１ｈ后ꎬ再予０.１μｇ/ｍｌＬＰＳ共同处理４８ｈꎻ含药血清组先予含药血清预处理１ｈ后ꎬ再予０.１μｇ/ｍｌＬＰＳ共同处理４８ｈꎮ４.观察指标和测定方法:(１)实时荧光定量ＰＣＲ检测:总ＲＮＡ的提取:使用Ｔｒｉｚｏｌ进行ＲＮＡ提取ꎻ反转录:使用反转录试剂盒进行操作ꎬ总反应体积２０μｌꎬ反应时间１５ｍｉｎꎻ定量ＰＣＲ:使用ＳＹＢＲＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑＩＩ试剂盒在进行实时定量ＰＣＲꎬ反应体积１０μｌꎮＪＡＫ２引物:上游:ＧＣＴＡＣＣＡＧＡＴＧＧＡＡＡＣＴＧＴＧＣＧꎻ下游:ＧＣＣＴＣＴＧＴＡＡＴＧＴＴＧＧＴＧＡＧＡＴＣꎮ(２)Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ＪＡＫ２蛋白水平:蛋白提取及浓度测定:吸净培养液ꎬ预冷的ＰＢＳ洗两遍ꎬ加入蛋白裂解液裂解后ꎬ１２０００ｒ/ｍｉｎ离心５ｍｉｎ取上清ꎬ使用ＢＣＡ蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度ꎻＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳及转膜:配置凝胶ꎬ将蛋白样品与上样缓冲液混合后ꎬ上样ꎬ电泳９０ｍｉｎꎬ转移至ＰＶＤＦ膜上ꎻＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ条带检测:ＰＶＤＦ膜用脱脂牛奶封闭后ꎬ加入一抗ꎬ４ħ孵育过夜ꎬＴＢＳＴ洗后ꎬ加入二抗ꎬ室温孵育２ｈꎬ增强型化学发光试剂(ＥＣＬ)显色ꎬ凝胶成像系统观察ꎮ５.统计学处理:使用ＳＰＳＳ１８.０统计软件进行数据分析ꎬ计量资料以(ｘʃｓ)表示ꎬ数据比较采用配对组间单因素方差分析ꎬ两两比较采用ｔ检验ꎬ检验水准为α＝０.０５ꎮ二㊁结果ＰＣＲ结果:ＬＰＳ组较空白对照组㊁血清对照组ＪＡＫ２ｍＲＮＡ表达明显增强ꎬ差异有统计学意义ꎻ含药血清组ＪＡＫ２ｍＲＮＡ表达下调ꎬ较ＬＰＳ组差异有统计学意义ꎮ见图１㊁表１ꎮ图１㊀各组小鼠肺泡巨噬细胞ＪＡＫ２ｍＲＮＡ表达丰度表１㊀各组小鼠肺泡巨噬细胞ＪＡＫ２ｍＲＮＡ表达丰度组别Ｃт＿ＧＡＰＤＨＣтＭｅａｎＣт＿ＩｎｏｓＣтＭｅａｎΔＣтΔΔＣｔ２＾－ΔΔＣｔ空白对照组１７.６５１７.２３２６.９２２６.５４９.３００１ＬＰＳ组㊀㊀１８.５４１７.３０２４.２８２３.６４６.３４－２.９７７.８２血清对照组１８.０５１７.２０２６.２４２６.５６９.３６０.０６０.９６含药血清组１８.５３１７.６７２５.７１２５.３８７.７１－１.５９３.０２㊀㊀２.Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测:ＬＰＳ组小鼠肺泡巨噬细胞ＪＡＫ２蛋白表达水平高于空白对照组及血清对照组ꎻ含药血清组ＪＡＫ２蛋白表达水平一定程度上被抑制ꎮ见图２㊁表２ꎮ图２㊀各组小鼠肺泡巨噬细胞中ＪＡＫ２磷酸化的蛋白表达水平表２㊀ｐ－ＪＡＫ２Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测相对表达量样品名称空白对照组ＬＰＳ组血清对照组含药血清组第一次统计结果１.４７０９８２１.７５１３９２１.４９８４５８１.２８５７３第二次统计结果１.３９２３９４１.７３５６７３１.５３４８１９１.２９１８５第三次统计结果１.３６６３３８１.６９１１９５１.４９６７２３１.２４２６４５平均数ʃ标准差１.４１０ʃ０.０５４１.７２６ʃ０.０３１１.５１０ʃ０.０２２１.２７３ʃ０.０２７㊀㊀讨论㊀支气管哮喘是一种慢性非特异性气道炎症反应性疾病ꎬ它是由多种炎症细胞及细胞因子共同参与ꎮ其中肺泡巨噬细胞在气道慢性炎症反应中其关键作用ꎬ是主要始动细胞ꎮ它是主要的居留性吞噬细胞ꎬ广泛分布于气管 肺泡表面肺内ꎬ与ｓＩｇＡ及呼吸道上皮构成了肺的第一道防御屏障ꎮ肺泡巨噬细胞能够释放趋化因子ꎬ从而激活淋巴细胞㊁嗜酸性粒细胞ꎬ并且诱导它们发生迁移粘附㊁建立化学趋化梯度ꎮ肺泡巨噬细胞被激活后所释放的ＩＬ－１０㊁ＩＬ－１２㊁ＩＬ－１８㊁转化生长因子ＴＧＦ－β１㊁Ｍ－ＣＳＦ㊁ＧＭ－ＣＳ等调节性细胞因子ꎮ这些因子对淋巴细胞及单核＼巨噬细胞的活化和分泌具有重要作用ꎮ肺泡巨噬细胞还能释放包括一氧化氮㊁半胱氨酰白三烯等炎症介质ꎬ它们是支气管哮喘发病过程中的重要炎症介质ꎬ对气道组织具有多重作用ꎮ因此支气管哮喘发病时肺泡巨噬细胞的异常增加㊁激活及所产生的生物效应是导致疾病病理生理发生发展的基础ꎮ随着近年来许多细胞因子和生长因子的信号转导机制的研究ꎬＪＡＫ蛋白酪氨酸激酶在支气管哮喘等非特异性慢性气道炎症中的作用被逐渐阐明ꎮ宋伦等学者既往研究表明ꎬＪＡＫ激酶存在于多种炎症细胞中ꎬ其通常是以与细胞因子受体偶联的方式存在的ꎮＪＡＫｓ在结合靶细胞后可导致相应受体发生二聚化或寡聚化ꎬ进而使与受体偶联的ＪＡＫｓ激酶之间发生相互聚集ꎬ再通过磷酸化作用而活化发挥相应的应答反应ꎮＪＡＫ２并不具有特异性ꎬ可参与多种细胞因子的信号转导ꎬ包括ＩＬ－２㊁ＩＬ－４㊁ＩＬ－７㊁ＩＬ－５㊁ＩＦＮ－ｒ等ꎬ涉及Ｔｈ１㊁Ｔｈ２的细胞因子[５]ꎮＪＡＫ激酶相关的信号通路广泛地参与了各种细胞因子的信号转导过程ꎬ在哮喘发生过程中可影响免疫细胞活化㊁增殖㊁分化及细胞因子分泌效应[６]ꎮ本研究发现:ＬＰＳ刺激下小鼠肺泡巨噬细胞ＪＡＫ２基因及磷酸化的蛋白表达水平增强ꎮ中药厚朴麻黄汤干预后能够一定程度上抑制ＪＡＫ２基因表达㊁下调磷酸化ＪＡＫ２蛋白水平ꎮ说明厚朴麻黄汤能够下调小鼠肺泡巨噬细胞中ＪＡＫ２的表达ꎬ从而抑制过敏性哮喘气道炎症反应的机制ꎮ但是厚朴麻黄汤对ＪＡＫｓ其它亚型的调控作用以及下游因子的影响有待进一步研究发现ꎮ参㊀考㊀文㊀献[１]㊀ＪｅｅＹꎬＫｉｍＧꎬＴａｎｕｍａＮꎬｅｔａｌ.ＳＴＡＴｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍｄｕｒｉｎｇａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓｉｎＬｅｗｉｓｒａｔｓ[Ｊ].ＪＮｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌꎬ２００１ꎬ１１４:４０￣４７. [２]㊀ＳａｔｒｉｏｔｏｍｏＩꎬＢｏｗｅｎＫＫꎬＶｅｍｕｇａｎｔｉＲ.ＪＡＫ２ａｎｄＳＴＡＴ３ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏｎｅｕｒｏｎａｌｄａｍａｇｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇｔｒａｎｓｉｅｎｔｆｏｃａｌｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａ[Ｊ].ＪＮｅｕｒｏｃｈｅｍꎬ２００６ꎬ９８(５):１３５３￣１３６８. [３]㊀ＤｒｏｎａｄｕｌａＮꎬＬｉｕＺꎬＷａｎｇＣꎬｅｔａｌ.ＳＴＡＴ３－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃｙｔｏｓｏｌｉｃｐｈｐｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｔｈｒｏｍｂｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｍｏｔｉｌｉｔｙ[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２００５ꎬ２８０:３１１２￣３１２０.[４]㊀张川林ꎬ李希ꎬ严桂珍.厚朴麻黄汤治疗支气管哮喘急性发作６４例[Ｊ].福建中医药ꎬ２０１６ꎬ４７(１):６５￣６６.[５]㊀宋伦.ＪＡＫ－ＳＴＡＴ信号转导途径研究新进展[Ｊ].免疫学杂志ꎬ２０００ꎬ１６(１):６８￣７１.[６]㊀王乐明.ＪＡＫ/ＳＴＡＴ６通路的靶向阻断与支气管哮喘治疗的进展[Ｊ].国际内科学杂志ꎬ２００９ꎬ３６(１０):６１４￣６１７.(收稿日期:２０１９￣１０￣１４)(本文编辑:卜明)外伤性硬膜下积液部位㊁时间与抑郁评估分析许亚军㊀王强㊀戴晓英㊀苏莉㊀张婷㊀朱旭阳㊀洪亮ʌ摘要ɔ㊀目的㊀探讨外伤性硬膜下积液部位㊁时间与抑郁的关系ꎮ方法㊀对１４３例单纯性外伤性硬膜下积液被鉴定人(研究组)与１００名对照组成员进行汉密尔顿抑郁量表(ＨａｍｉｌｔｏｎＤｅｐｒｅｓｓｉｏｎＳｃａｌｅꎬＨＡＭＤ)测量ꎬ研究组依据性别㊁年龄㊁教育文化程度㊁积液部位㊁损伤脑区以及积液时间进行细化分组ꎬ分析研究组与对照组的ＨＡＭＤ评分差异以及研究组性别㊁年龄㊁教育程度㊁积液部位㊁损伤脑区㊁积液时间对ＨＡＭＤ评分的影响ꎮ结果㊀(１)外伤性硬膜下积液被鉴定人ＨＡＭＤ评分与对照组的差异有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎻ(２)外伤性硬膜下积液ＨＡＭＤ评分在性别上差异无统计学意义(Ｐ＝０.１６３)ꎻ在年龄上的差异有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎻ在教育程度上的差异无统计学意义(Ｐ＝０.９４３)ꎮ(３)外伤性硬膜下积液ＨＡＭＤ评分在积液部位㊁损伤脑区和积液时间上差异均有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎻ(４)外伤性硬膜下积液ＨＡＭＤ评分与积液部位㊁积液时间存在正相关(ｒ＝０.２４５ꎬｒ＝０.２６５)ꎮ结论㊀外伤性硬膜下积液可引起一定程度的抑郁情绪ꎬ其抑郁情绪主要与积液部位㊁积液时间相关ꎬ在鉴定中应当注意抑郁情绪的严重程度与积液部位㊁时间的匹配性ꎮʌ关键词ɔ㊀外伤性硬膜下积液ꎻ㊀ＨＡＭＤꎻ㊀抑郁ꎻ㊀颅脑损伤部位[中图分类号]Ｒ６５１.１５㊀[文献标识码]Ａ㊀ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００２－１２５６.２０１９.２４.００３Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｒａｕｍａｔｉｃｓｕｂｄｕｒａｌｅｆｆｕｓｉｏｎｌｏｃａｔｉｏｎａｎｄｔｉｍｅａｎｄｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ㊀ＸＵＹａ－ｊｕｎ.㊀ＳｃｈｏｏｌｏｆｆｏｒｅｎｓｉｃｍｅｄｉｃｉｎｅꎬＷａｎｎａｎｍｅｄｉｃａｌｃｏｌｌｅｇｅꎬＷｕｈｕꎬ２４１００２ꎬＣｈｉｎａ.ʌＡｂｓｔｒａｃｔɔ㊀Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｌｏｃａｔｉｏｎａｎｄｔｉｍｅｏｆｔｒａｕｍａｔｉｃｓｕｂｄｕｒａｌｅｆｆｕｓｉｏｎａｎｄｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ａｔｏｔａｌｏｆ１４３ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｉｍｐｌｅｔｒａｕｍａｔｉｃｓｕｂｄｕｒａｌｅｆｆｕｓｉｏｎａｎｄ１００ｃｏｎｔｒｏｌｓｕｂｊｅｃｔｓｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｗｉｔｈＨａｍｉｌｔｏｎＤｅｐｒｅｓｓｉｏｎｓｃａｌｅ(ＨａｍｉｌｔｏｎＤｅｐｒｅｓｓｉｏｎＳｃａｌｅꎬＨＡＭＤ).Ｔｈｅｓｔｕｄｙｇｒｏｕｐ㊀㊀基金项目:２０１７年安徽省高等学校省级质量工程重大教学研究项目(２０１７ｊｙｘｍ０２５８)ꎻ２０１８年度安徽高校人文社会科学研究重点项目(Ｋ２０１８Ａ０２０５)㊀㊀作者单位:２４１００２安徽芜湖ꎬ皖南医学院心理学教研室(许亚军㊁张婷)ꎻ皖南医学院附属弋矶山医院ꎬ安徽芜湖２４１００１(戴晓英)ꎻ３.皖南医学院法医学院ꎬ安徽芜湖２４１００２(许亚军㊁王强㊁朱旭阳㊁苏莉㊁洪亮)ꎮ㊀㊀通信作者:洪亮ꎬＥｍａｉｌ:４１９８３７９３７＠１６３.ｃｏｍ。

DOI: 10.3969/j.issn.0253-9802.2023.04.005研究论著SIRT1介导间歇性禁食改善高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织线粒体功能和炎症状态邓小杰 王甜 徐芬 梁华【摘要】目的探讨间歇性禁食对高脂饮食诱导的肥胖小鼠白色脂肪组织线粒体功能和炎症状态的影响以及沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）在其中的作用。

方法将5~6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为普通自由饮食组（CD组）、高脂自由饮食组（HFD组）和高脂间歇性禁食组（HFD-IF组，隔日禁食24 h），每组各5只，喂养12周。

用HE染色观察各组小鼠白色脂肪组织情况，并检测白色脂肪SIRT1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）、叉头转录因子1（FOXO1）、线粒体功能和炎症相关基因的表达情况。

在小鼠尾静脉注射腺相关病毒（AAV）-shSIRT1敲减SIRT1表达，分别给予小鼠高脂自由饮食和高脂间歇性禁食，检测上述指标。

结果 HE染色结果显示HFD-IF组脂肪细胞体积减小。

蛋白免疫印迹结果显示高脂自由饮食时脂肪组织SIRT1、p-AMPK、FOXO1蛋白表达均下调，间歇性禁食后均上调（P均< 0.05）。

定量PCR结果显示HFD组线粒体功能基因Tfam、Nrf1、Pgc-1a表达下调（P均< 0.001），炎症基因TNF-α、单核细胞趋化蛋白1、生长因子样模体黏液样激素样受体表达均上调（P均< 0.01），间歇性禁食后线粒体功能相关基因均上调（P均< 0.05），炎症相关基因均下调（P均< 0.05）。

敲减SIRT1后，HFD-IF组的上述指标上调或下降的趋势均有所减弱甚至消失（P均< 0.05）。

结论 SIRT1通过改善小鼠内脏白色脂肪组织线粒体功能和炎症状态从而介导间歇性禁食改善高脂喂养诱导的肥胖。

【关键词】间歇性禁食；沉默信息调节因子2相关酶1；高脂饮食；白色脂肪SIRT1-mediated intermittent fasting improves adipose tissue mitochondrial function and inflammation in high-fat diet-induced obese mice Deng Xiaojie△， Wang Tian， Xu Fen， Liang Hua.△Department of Endocrinology and Metabolism， the Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University，Guangzhou 510630，ChinaCorresponding author， Liang Hua， E-mail:******************【Abstract】Objective To investigate the role of SIRT1 in the e ff ect of intermittent fasting on mitochondrial function and inflammation in white adipose tissue（WAT） of obese mice induced by high-fat diet. Methods Male C57BL/6 mice aged 5-6 weeks were randomly divided into the control diet （CD） group （n = 5）， high‐fat diet （HFD） group （n = 5） and high-fat diet intermittent fasting （HFD-IF， alternate-day fasting 24 h） group （n = 5） and fed for 12 weeks. The pathological changes of WAT were observed by HE staining. The expression levels of SIRT1， p-AMPK， FOXO1 and mitochondrial function， inflammation-related genes in WAT of each group were detected. AAV-shSIRT1 virus was delivered by tail-vein injection into mice to knockdown SIRT1. HFD and HFD-IF were given. The parameters above were determined. Results HE staining indicated that the adipose cell volume was decreased in the HFD-IF group. Western blot showed that the expression levels of SIRT1， p-AMPK and FOXO1 in adipose tissues were signi fi cantly down-regulated in the HFD mice （all P < 0.05）， which were signi fi cantly up-regulated after intermittent fasting （all P < 0.05）. qPCR revealed that the expression levels of mitochondrial functional genes， including Tfam， Nrf1 and Pgc-1a were dramatically down-regulated in the HFD group （all P < 0.001）， whereas those of inflammatory markers， such as TNF-α，MCP-1 and F4/80， was signi fi cantly up-regulated （all P < 0.01）. After intermittent fasting， the expression levels of genes related to mitochondrial function were up-regulated （all P < 0.05）， whereas those of inflammatory markers were down-regulated （all P < 0.05）. After knockdown of SIRT1， the trend of up-regulating or down-regulating the expression levels of these parameters was weakened or even absent in the HFD-IF group （all P < 0.05）. Conclusion SIRT1 mediates intermittent fasting in improving high-fat diet-induced obesity via ameliorating adipose tissue mitochondrial function and inflammation.【Key words】 Intermittent fasting； SIRT1； High-fat diet； White adipose tissue基金项目：广东省自然科学基金（2020A1515010226，2022A1515012577）作者单位：510630 广州，中山大学附属第三医院内分泌与代谢病学科（邓小杰，王甜，徐芬，梁华）；528399 顺德，南方医科大学顺德医院（佛山市顺德区第一人民医院）内分泌与代谢科（梁华）通信作者，梁华，E-mail:******************肥胖是全球重大的公共健康问题［1］。

酮体的名词解释酮体（ketone bodies），是人体脂肪分解产生的一种代谢产物，也是一种高效的能量供应来源。

在人体当中，酮体主要包括乙酰乙酸（AcAc）、β-羟基丁酸（β-Hydroxybutyrate，简称β-HB）和丙酮（acetone）。

这些化合物在能量需求较高或血糖供应不足时，特别是长时间禁食、剧烈运动或低碳水化合物饮食状态下，会被肝脏合成并释放至血液中，供给全身各组织细胞。

酮体作为一种生物学现象，早在1920年代就被科学界注意到。

当时医生们发现，酮体水平在糖尿病和饥饿状态中升高，这促使他们开始研究酮体的代谢过程与生理效应。

经过多年的研究，科学家们逐渐揭示了酮体代谢的机制和它们在人体中的重要功能。

首先，酮体是一种替代能源。

在长时间禁食或低碳水化合物饮食的情况下，酮体成为肌肉和脑细胞的主要能量来源。

正常情况下，脑细胞主要靠葡萄糖供能，而在酮体生成过程中，肝脏会释放β-HB进入血液，供给脑部细胞使用，从而维持脑的正常功能。

其次，酮体还具有抗氧化和抗炎作用。

研究表明，酮体能够抑制细胞内自由基的产生，减少氧化损伤。

此外，它们还可以抑制炎症反应，减少炎性细胞因子的释放，从而发挥抗炎作用。

这些功能使得酮体在一些疾病如糖尿病、肥胖症及神经退行性疾病的治疗中具有潜在的应用价值。

此外，酮体还能够影响身体的代谢状态。

当酮体水平升高时，人体的胰岛素水平相对降低。

而胰岛素是一种调节葡萄糖和脂肪代谢的关键激素。

因此，酮体生成可以通过抑制胰岛素的分泌来调节血糖和血脂的水平，从而有助于控制糖尿病和肥胖等代谢性疾病。

最后，近年来的研究显示，酮体还可能对大脑健康具有保护作用。

有研究发现，酮体能够改善神经元的能量供应、维持神经系统的稳定性，并对阿尔茨海默病等神经退行性疾病具有一定的预防和治疗潜力。

总的来说，酮体不仅是一种生物代谢产物，也是一种重要的能量供应源。

它们在人体的能量平衡、抗氧化、抗炎、代谢调节和大脑健康等方面发挥着重要作用。