2014年高考生物专题复习——PCR技术
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高三生物PCR技术复习试题一、知识回顾聚合酶链反应法(PCR法):PCR技术可模拟细胞核内DNA复制的天然过程,可在3~4h内使目的基因扩增上百万倍,达到肉眼可见的量,不需要放射性同位素标记就能分析、检测基因,大大提高了基因检测的灵敏度。
具体过程:首先,把DNA加热,使双链分开;然后将人工合成的一段单链核苷酸即DNA引物,黏附到DNA单股螺旋上;之后按照引物就能够复制出DNA来,重复放大50次后就可以制成10亿个基因。
在PCR放大过程中的关键是利用耐热DNA聚合酶使少量的DNA在短期内即能扩增数百万倍,便于分析、检测。
二、试题精练1、PCR技术是一种DNA的扩增技术。
在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。
据此判断不合理的是A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋D.CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一2、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。
下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:()A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、A TP、四种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高3、下列有关PCR技术的叙述,不正确的是:()A.PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等C.PCR技术需在体内进行D.PCR技术是利用碱基互补配对的原则4、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥5、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A.640 B.8100 C.600 D.86406、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。
高三生物PCR技术复习试题一、知识回顾聚合酶链反应法(PCR法):PCR技术可模拟细胞核内DNA复制得天然过程,可在3~4h内使目得基因扩增上百万倍,达到肉眼可见得量,不需要放射性同位素标记就能分析、检测基因,大大提高了基因检测得灵敏度。
具体过程:首先,把DNA加热,使双链分开;然后将人工合成得一段单链核苷酸即DNA引物,黏附到DNA单股螺旋上;之后按照引物就能够复制出DNA来,重复放大50次后就可以制成10亿个基因。
在PCR放大过程中得关键就是利用耐热DNA聚合酶使少量得DNA在短期内即能扩增数百万倍,便于分析、检测。
二、试题精练1、PCR技术就是一种DNA得扩增技术。
在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP 可以实现DNA得扩增。
据此判断不合理得就是A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成得原料B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温得方法破坏氢键,使模板DNA解旋D.CTP水解脱去两个磷酸基后就是组成RNA得基本单位之一2、多聚酶链式反应(PCR)就是一种体外迅速扩增DNA片段得技术。
PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新得脱氧核苷酸链)。
下列有关PCR过程得叙述中不正确得就是:()A.变性过程中破坏得就是DNA分子内碱基对之间得氢键,也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链得结合就是依靠碱基互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、A TP、四种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶得最适温度较高3、下列有关PCR技术得叙述,不正确得就是:()A.PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等C.PCR技术需在体内进行D.PCR技术就是利用碱基互补配对得原则4、PCR技术扩增DNA,需要得条件就是( )①目得基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥5、在基因工程中,把选出得目得基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸得个数至少应就是A.640 B.8100 C.600 D.86406、对禽流感得确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸得碱基异同。
2014年普通高等学校招生全国统一考试理科综合生物试题(北京卷)一、选择题1.蓝细菌(蓝藻)与酵母菌的相同之处是()A.都有拟核B. 均能进行有氧呼吸C. 都有线粒体D.均能进行光合作用2.在我国北方,游泳爱好者冬泳入水后,身体立即发生一系列生理反应,以维持体温恒定。
此时,机体不会发生的反应是()A.兴奋中枢神经系统,加强肌肉收缩B.通过反射活动引起皮肤毛细血管收缩C. 通过神经调节减少汗腺分泌D.抑制垂体活动导致甲状腺激素分泌减少3.比较生物膜和人工膜(双层磷脂)对多种物质的通透性.结果如右图,据此不能得出的推论是()A.生物膜上存在着协助H2O通过的物质B.生物膜对K+、Na+、Cl-的通透具有选择性C.离子以易化(协助)扩散方式通过人工膜D.分子的大小影响其通过人工膜的扩散速率4.为控制野兔种群数量,澳洲引入一种主要由蚊子传播的兔病毒。
引入初期强毒性病毒比例最高,兔被强毒性病毒感染后很快死亡,致兔种群数量大幅下降。
兔被中毒性病毒感染后可存活一段时间,几年后中毒性病毒比例最高,兔种群数量维持在低水平。
由此无法推断出()A.病毒感染对兔种群的抗性具有选择作用B.毒性过强不利于维持病毒与兔的寄生关系C.中毒性病毒比例升高是因为兔抗病毒能力下降所致D.蚁子在兔和病毒之间的协同(共同)进化中发挥了作用5. 在25℃的实验条件下可顺利完成的是()A.光合色素的提取与分离B. 用斐林(本尼迪特)试剂鉴定还原糖C.大鼠神经细胞的培养D.制备用于植物组织培养的固体培养基二、非选择题29. (18分)为研究赤霉素(GA5)和生长素(IAA)对植物生长的影响,切取菟丝子茎顶端2.5cm长的部分(茎芽)。
置于培养液中无菌培养(图分为三组,分别培养至第1、8、15天,每组再用适宜浓度的激素处理30天,测量茎芽长度。
结果见图2:(1)植物激素是植物细胞之间传递________的分子。
(2)本实验中,试管用滤膜封口是为了在不影响________通过的情况下起到________的作用。
高三生物PCR技术复习试题一、知识回顾聚合酶链反应法(PCR法):PCR技术可模拟细胞核内DNA复制的天然过程,可在3~4h内使目的基因扩增上百万倍,达到肉眼可见的量,不需要放射性同位素标记就能分析、检测基因,大大提高了基因检测的灵敏度。
具体过程:首先,把DNA加热,使双链分开;然后将人工合成的一段单链核苷酸即DNA引物,黏附到DNA单股螺旋上;之后按照引物就能够复制出DNA来,重复放大50次后就可以制成10亿个基因。
在PCR放大过程中的关键是利用耐热DNA聚合酶使少量的DNA在短期内即能扩增数百万倍,便于分析、检测。
二、试题精练1、PCR技术是一种DNA的扩增技术。
在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。
据此判断不合理的是A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋D.CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一2、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。
下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:()A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、A TP、四种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高3、下列有关PCR技术的叙述,不正确的是:()A.PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等C.PCR技术需在体内进行D.PCR技术是利用碱基互补配对的原则4、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥5、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A.640 B.8100 C.600 D.86406、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。
聚合酶链反应法(PCR法):PCR技术可模拟细胞核内DNA复制的天然过程,可在3〜4h内使目的基因扩增上百万倍,达到肉眼可见的量,不需要放射性同位素标记就能分析、检测基因,大大提高了基因检测的灵敏度。
具体过程:首先,把DNA加热,使双链分开;然后将人工合成的一段单链核苷酸即DNA引物,黏附到DNA单股螺旋上;之后按照引物就能够复制出DNA来,重复放大50次后就可以制成10亿个基因。
在PCR放大过程中的关键是利用耐热DNA聚合酶使少量的DNA在短期内即能扩增数百万倍,便于分析、检测。
二、试题精练1、PCR技术是一种DNA的扩增技术。
在一定条件下,加入模板DNA DNA聚合酶、dATR dCTP dGTP dTTP可以实现DNA的扩增。
据此判断不合理的是A. dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料B. dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C. DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋D. CTP水解脱去两个磷酸基后是组成R NA的基本单位之一2、多聚酶链式反应(PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历下述三十多次循环:95C 下使模板DNA变性、解链T 55 C下复性(引物与DNA模板链结合)72C下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。
下列有关PCF 过程的叙述中不正确的是:()A. 变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B•复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C. 延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP四种核糖核苷酸D. PCR与细胞内DNA M制相比所需要酶的最适温度较高3、下列有关PCR技术的叙述,不正确的是:()A. PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段B. PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等C. PCR技术需在体内进行D. PCR技术是利用碱基互补配对的原则4、PCR技术扩增DNA需要的条件是()①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D①②③⑥5、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCF仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A. 640B. 8100C. 600D. 86406、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。
1.PCR原理(1)细胞内DNA复制条件条件组分作用模板DNA的两条单链提供复制的模板原料四种脱氧核苷酸合成DNA子链的原料酶解旋酶DNA聚合酶打开DNA双螺旋催化合成DNA子链能量 ATP 为解螺旋和合成子链供能引物RNA 为DNA聚合酶提供合成的3’端起点(2)细胞内DNA复制过程①DNA的两条链是反向平行的,通常将DNA的羟基末端称为3’端,而磷酸基团的末端称为5’端。
DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3’端延伸DNA链,因此,DNA复制需要引物。
DNA的合成方向总是从子链的5’端向3’端延伸。
②在DNA的复制过程中,复制的前提是双链解开。
在体外可通过控制温度来实现。
在80~100 ℃的温度范围内,DNA的双螺旋结构将解体,双链分开,这个过程称为变性。
PCR利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合。
由于PCR过程的温度高,导致DNA聚合酶失活,后来耐高温的DNA聚合酶的发现和应用,大大增加了PCR的效率。
③PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行,需提供:DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引物,四种脱氧核苷酸,耐热的DNA聚合酶,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
2.PCR的反应过程PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。
从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应,并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合,进行DNA的延伸,这样,DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列,使这段固定长度的序列成指数扩增。
3.实验操作(1)PCR反应体系:缓冲液、DNA模板,四种脱氧核苷酸原料、热稳定的DNA聚合酶、两种RNA引物、水。
(2)实验操作步骤①按照PCR反应体系配方配制反应液;②将PCR反应体系50μL用微量移液器转移到微量离心管(0.5 mL)中;③将微量离心管放到PCR仪中;④设置PCR仪的工作参数;⑤DNA在PCR仪中大量扩增。
高三生物PCR技术复习试题一、知识回顾聚合酶链反应法(PCR法):PCR技术可模拟细胞核内DNA复制的天然过程,可在3~4h内使目的基因扩增上百万倍,达到肉眼可见的量,不需要放射性同位素标记就能分析、检测基因,大大提高了基因检测的灵敏度。
具体过程:首先,把DNA加热,使双链分开;然后将人工合成的一段单链核苷酸即DNA引物,黏附到DNA单股螺旋上;之后按照引物就能够复制出DNA来,重复放大50次后就可以制成10亿个基因。
在PCR放大过程中的关键是利用耐热DNA聚合酶使少量的DNA在短期内即能扩增数百万倍,便于分析、检测。
二、试题精练1、PCR技术是一种DNA的扩增技术。
在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。
据此判断不合理的是A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋D.CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一2、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。
下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:()A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、A TP、四种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高3、下列有关PCR技术的叙述,不正确的是:()A.PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等C.PCR技术需在体内进行D.PCR技术是利用碱基互补配对的原则4、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥5、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A.640 B.8100 C.600 D.86406、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。
高中生物pcr技术知识点PCR技术作为分子生物学中的重要工具,在高中生物教学中也占有一席之地。
本文将从PCR技术的原理、步骤、应用以及注意事项等方面进行介绍。
一、PCR技术的原理PCR技术的核心是聚合酶链式反应,简称PCR。
PCR技术利用DNA聚合酶在高温下对DNA模板进行反复扩增,从而从极少量的DNA样本中扩增出足够多的目标序列,以便于后续检测和分析。
PCR反应主要由三步组成:变性、退火和延伸。
变性可以使DNA 双链解开成两条单链,退火可以使引物与模板DNA结合,延伸可以使引物在模板上逐渐合成新链。
二、PCR技术的步骤PCR技术主要包括反应体系的准备、PCR反应、PCR产物检测和分析四个步骤。
1. 反应体系的准备PCR反应需要准备PCR反应体系,反应体系包括PCR模板DNA、引物、dNTPs、聚合酶、缓冲液、水等多个组分。
其中,PCR模板DNA是PCR反应的起点,引物是PCR反应的关键,dNTPs是PCR反应的原料,聚合酶是PCR反应的催化剂,缓冲液是PCR反应的稳定剂,水是PCR反应的溶剂。
2. PCR反应PCR反应是PCR技术的核心步骤,PCR反应需要按照一定的温度和时间进行。
PCR反应一般包括变性、退火和延伸三个阶段。
变性阶段一般在94-98℃进行,可以使DNA双链解开成两条单链;退火阶段一般在50-60℃进行,可以使引物与模板DNA结合;延伸阶段一般在72℃进行,可以使引物在模板上逐渐合成新链。
3. PCR产物检测和分析PCR产物检测和分析是PCR技术的重要步骤,PCR产物的检测和分析一般包括凝胶电泳、荧光定量、序列分析等多个方面。
凝胶电泳是PCR产物检测和分析的基础,可以将PCR产物按照大小进行分离;荧光定量可以对PCR产物进行定量分析;序列分析可以对PCR产物进行序列测定和分析。
三、PCR技术的应用PCR技术在分子生物学、医学、环境科学、食品检测等多个领域都有广泛的应用。
在分子生物学领域,PCR技术可以用于基因克隆、基因检测、基因表达等多个方面;在医学领域,PCR技术可以用于病原菌检测、基因诊断、药物筛选等多个方面;在环境科学领域,PCR技术可以用于微生物检测、水质检测、土壤检测等多个方面;在食品检测领域,PCR技术可以用于食品安全检测、品种鉴定等多个方面。
pcr扩增技术高中生物
pcr是聚合酶链式反应,是一种用于放大扩增特定的"DNA"片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊"DNA"复制,"PCR"的最大特点,是能将微量的"DNA"大幅增加;聚合酶链式反应是利用"DNA"在体外九十五摄氏度高温时变性会变成单链,低温时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至"DNA"聚合酶最适反应温度,"DNA"聚合酶沿着磷酸到五碳糖的方向合成互补链,基于聚合酶制造的"PCR"仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。