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一例犬伪狂犬病的病例报告
JIANGXI AGRICULTURE14一例犬伪狂犬病的病例报告文／赵 培1 牛亚乐2 赵小利2 刘 洋3 张 才2（１．辽宁省动物疫病预防控制中心 １１０１６４；２．河南科技大学 动物科技学院 ４７１００３；３．辽宁爱普罗斯饲料有限公司 １１０１６４）摘 要 伪狂犬病通常发病突然，死亡率高达100%。
随着伪狂犬病的日益增多，会给养殖业造成重大的经济损失。
基于此，针对一例伪狂犬病的病例，对伪狂犬病进行分析探讨。
关键词 伪狂犬病；剖检；诊断伪狂犬病（Pseudo Rabies）也称阿氏病，该病是由伪狂犬病病毒引起而导致犬、猫等家畜和野生动物发病的一种急性传染病，发热、奇痒（猪例外）及神经症状是该病的主要特征[1，2]。
该病发病突然，死亡率达100%。
该病的发生日益增多，给犬养殖业造成了重大损失。
鉴于此，现以近期接诊的伪狂犬病病例，将具体情况报告如下。
１ 病例简介患犬是一只2岁的雪纳瑞犬，雌性。
该犬病初时精神沉郁，蜷缩到角落，活动减少，对周围事物表现冷漠，不时变换体位，凝视和舔舐皮肤，不久痒觉增加，常撕咬发病局部皮肤，随后无故狂吠，流涎，呼吸急迫，反复多次在其他物体上蹭磨面部或者抓挠颈部面部。
２ 临床检查病犬来医院就医后，经临床检查发现，病犬体温40.2 ℃，耳尖、爪子有抓伤，并伴有神经症状，吞咽困难、流涎、呼吸急促等症状。
然后看到角弓反张，不久后倒地抽搐、口吐白沫，呼吸困难，间歇抽搐，很快死亡。
经问诊得知，病犬有食生猪肉的历史。
初步怀疑为犬伪狂犬病。
３ 病理剖检为进一步了解其病理变化，对其进行剖检。
剖检可见，脑膜充血水肿，大脑切面湿润；肝表面有黄白色渗出物；脾脏出现凝固性坏死灶；肺脏有明显的出血、水肿、淤血等现象；肾脏柔软肿胀，表面小点出血。
４ ＰＣＲ诊断为进一步确诊，从病死犬脑组织中抽提核酸，经PCR 扩增后，取5 μL PCR 产物做1% EB 染色的琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下系统拍照。
病料可扩增出条带约200 bp 的PRV 病毒基因，由此可知伪狂犬脑病毒核酸呈阳性，即可确诊该犬患了犬伪狂犬病。
猪伪狂犬抗体检测报告
猪伪狂犬抗体检测报告检测单位：XXX检测中心
受检单位：XXX猪场
样本编号：XXX
检测时间：20XX年XX月XX日
检测结果：
猪伪狂犬抗体检测值：XXX IU/mL
诊断结果：检测结果符合猪伪狂犬抗体标准。
说明：
1. 本次检测采用ELISA法进行。
2. 检测结果基于该猪场提供的血清样本。
本次检测仅针对猪伪狂犬抗体进行，不涉及其他疫病。
3. 抗体检测值的具体含义：
<0.50 IU/mL：阴性
≥0.50 IU/mL：阳性，但无法判断是否患病
≥1.0 IU/mL：阳性，疑似患病
≥2.0 IU/mL：阳性，确诊为患病
4. 此次检测结果仅对本次检测提供的样本有效。
如有其他病情发生，需要重新进行抗体检测。
5. 猪伪狂犬是一种严重的猪类传染病，会对猪场产生巨大的经济损失。
及时进行抗体检测是预防和控制该病的重要手段之一。
本检测报告仅作为参考，如有需要，请联系检测单位进行具体咨询和建议。
伪狂犬检测报告
伪狂犬检测报告伪狂犬检测报告一例猪伪狂犬病毒病的诊治报告龙源期刊网 .cn一例猪伪狂犬病毒病的诊治报告作者：覃国喜来源：《中国动物保健》2014年第09期猪伪狂犬病的致病源为I型疱疹病毒，是一种急性传染病。
多会引起母猪的繁殖障碍，仔猪的急性死亡，侵害多种组织器官的恶心疾病。
怀孕母猪感染该猪伪狂犬病毒后，可导致母猪流产，临床上常见的流产的胎儿有死胎、木乃伊胎及弱仔等；对已顺利降生、母原抗体不高的仔猪可造成大批急性死亡，临床常见的症状有呕吐、震颤、腹泻及运动失调等临床症状；耐受猪易产生免疫抑制，增加了猪只感染其它疾病的风险，影响仔猪生长发育。
研究表明，发病的猪、潜伏感染排毒的猪为本病重要传染源。
除此之外，实验动物中兔、小鼠、大鼠、豚鼠等也是猪伪狂犬病毒的贮存宿主，引起该病的发生与流行。
笔者将成功治疗的一例猪伪狂犬病诊疗过程记叙如下，旨在为广大兽医工作者提供借鉴。
1 发病情况介绍广西某猪场，存栏猪1 000余头。
4月5日，猪场内出现新生仔猪大量死亡，新生仔猪出生第一天表现正常，第二天开始发病，体温41℃以上，精神极度萎顿，身体发抖，运动不协调，死亡高峰期出现在发病后的3～5 d内。
明显的神经症状是该病的主要临床症状，一旦发病，1～2 d内死亡。
新生仔猪的发病死亡率可达100%。
断奶仔猪也有发病，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等，死亡率在10%。
怀孕母猪发生流产、产木乃伊胎儿。
2 病例变化及实验室检测对病死猪及濒死猪进行了解剖，眼观病变主要有肾脏有针尖状出血点，脑膜明显充血，有些在肝、脾等脏器常可见灰白色坏死病灶。
脑、脾、肝等器官取样进行实验室的细菌学和猪伪狂犬病毒（PRV）、猪乙型脑炎病毒（JEV）、猪细小病毒（PPV）、猪蓝耳病病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）的检测。
无菌采取病料后直接涂片、革兰氏染色、镜检后未发现有细菌；同时对病料在血琼脂平板培养，37℃培养24 h未见有细菌增殖，排除了该病由细菌引起。
黄牛伪狂犬病的诊断报告
临 床 兽 医
中国畜牧兽 医文摘 ２ ０ １ ７ 年
３ ３ 卷
第１ 期
黄牛伪狂犬病 Leabharlann 诊 断报 告 柳 永全 （ 山东省栖霞市蛇 窝泊 畜牧兽 医工作站 ，山东栖霞 ２ ６ ５ ３ １ ３ ）
黄 牛 伪狂 犬病 是 由病毒 引 起 的家 畜 急性 传染 病 。其 特 征 是发 外 界 刺激 能 引起 强 烈 的痉 挛发 作 ，这样 的痉 挛 频频 发 作 ，最 后 衰 热 、奇 痒及 脑脊 髓炎 症状 的表 现 ，本 地某 村发 病３ 例 ，治疗无 效 ， 竭 而死 亡 。从发 病 到死亡 约４ ８ ｈ 左右。 全 部死 亡 ，经过 现 场调 查 ，临床 症状 和 动物 接 种试 验 ，诊 断 为 牛 ４ 剖 检 变 化 伪 狂犬 病 ，现将 情况 报告 如下 ： 尸体 均 为 侧 卧 ，尸 僵 不 全 ，眼 球 下 陷 ，可 视 黏膜 发绀 ，发 １ 病原 痒 部 的皮 肤 局部 脱 毛 ，出血 ，增 厚 呈污 红 紫色 ，切开 后 皮下 结 缔 该 病 原是 伪 狂犬 病 病毒 ，属 于疱 疹 病毒 ，病毒 能 于鸡 胚 上 生 组 织 呈 黄色 胶样 浸 润 ，并 有 黄色 清 亮液 体 流 出。胸 腔 浆 膜有 散 在 长 ，能 于多 种 哺乳 动物 细 胞上 生 长 繁殖 ，产 生 核 内包 涵 体 。病 毒 的小 点 出血 ，咽喉 部黏 膜 轻度 水 肿 ，呼 吸道 黏 膜采 血 或 出血 ，并 对 外 界环 境抵 抗 力很 强 ，于 ８ ℃存活 ４ ６ ｄ ，在 ０ ． ５ ％石 灰乳 或０ ． ５ ％苏 有 多 量泡 沫 状 的淡 红 色黏 液 。肺 脏 间质 气肿 ，肺 门淋 巴结肿 大 ， 打 中ｌ ｍ ｉ ｎ ，在０ ． ５ ％盐酸 或硫 酸 中３ ｍ ｉ ｎ 被破 坏 。 呈树枝状坏死 。心包 腔有 多量 淡黄色清亮液体 积存 ，心肥大扩 张 ，心外 膜 下 有 出血斑 点 ，心 内外 膜形 成 明显 的 条状 出 血 。腹 腔 ２ 发病情 况 该 村 共有 黄 牛 １ ２ 头 ，其 中发 病 的一 户有 ３ 头母 牛 ，２ 头公 牛 ， 有 多 量 的黄 色 透 明液体 ；肝 稍肿 ，呈土 黄 色 ，有大 小 不 等 的 出血 从３ 月２ 号开 始 ，有 一 头母 牛 发病 ，相距 ３ ｄ ，同槽 另一 头 母牛 和 仔 斑点 ；胆囊胀满黄绿色胆汁 ，脾脏稍肿大 ，呈紫褐色，并有大量 公 牛 相 继 发病 ，病 牛 症 状 基本 相 同 ，病程 均 在 ２～３ ｄ 死 亡 。据 调 出血 点 ，切 面 干燥 ；肾脏 略 肿 大呈 灰黄 红 色 ，切 面湿 润 ，膀 胱 多 查 ，病 畜 栏舍 ，东 邻粮 仓 ，家 鼠较多 ，仅 东墙 根就 有 鼠洞４ 处 ，棚 数 充 满 尿液 ；第 四 胃黏膜 层 有广 泛 性 的坏 死 、出血 ，其 他 三 胃干 内经 常发 现家 鼠，我们认 为 家 鼠可能 是传 播本 病 的主要 因 素 。 燥 ，粪 如糠 麸 ；头 部 的脑 血 管扩 张 充血 ，脑脊 液 增 多 ，呈淡 红 黄 色 ，脑实 质松 软多 汁 ，有弥 散性 出血 小点 。 ３ 临 床 症 状 在观 察 检查 病 牛 中 ，病 的发 生 与发 展 过程 基 本是 一 致 的 ，病 ５ 实验室诊断 程 大致 分 为前 兆期 、发 痒期 、兴 奋期 和痉 挛期 四个 阶段 。 根据 发 病 牛 的典 型病 程 与表 现 特征 性 的奇 痒 病症 ，临床 诊 断 ３ ． １ 前 兆期 并不 困难 ，为 了进 一 步诊 断 ，除作 细 菌学 检查 ，还做 实 验 动物 的 此期 病 牛 的体 温 升高 到４ ０ ℃ 以上 ，精 神 稍差 ，弓腰 、烦 躁 不 接种 试验 。 安 ，食 欲有 不 同程 度 的减 退 ，病 牛 频频 怒 责 ，两 腿叉 开 ，呈排 尿 ５ ． １ 细菌 学 检 查 姿势 ，但 很少 有尿 排 出 。此 期持 续 约 ｌ Ｏ ｂ 左右。 取病 牛 的 耳尖 血 ，以及 死后 的心血 抹 片 和脑 、脾 、淋 巴结 等 ３ ． ２ 发 痒 期 触 片 ， 以革兰 氏染 色 镜 检未 查 见李 氏杆菌 ，并将 上 述病 料 通 过琼 病 牛 发 生 明显 的奇 痒 表 现 为本 病 的 特 有 症 状 。此 时 体 温 仍 脂培 养 ，也未 培养 出病原 菌 。 高 ，饮 食废 绝 ，反 刍停 止 ，在 面颊 、颈侧 和 尾根 部 皮肤 上 出 现发 ５ ． ２ 家 兔 接种 试 验 痒 症 状 ，表 现 用 舌 舔 、嘴 啃 或 在 槽 边 、木 桩 上 摩 擦 痒 部 造 成 局 将 三份 由延脑 ，肺 门淋 巴结 、脾脏 和生 理盐 水 制成 的 １ ：５ 混 部皮 肤 脱 毛 、发 红 、发 热和 肿胀 。随 病程 延 长发 痒 症状 渐 进 性加 悬 液 ，并 以每 毫 升 加入 青 霉 素 ８ ０ ０ 万 单 位 和链 霉 素 １ ０ ０ ０ 万 单 位进 重 ，不 停地 在 外 物上 摩 擦 ，用 舌舔 、角 搔 、蹄扒 ，并且 人 工 用力 行 处 理后 ，给 ３ 只家 兔 进 行 皮 下接 种 ，随 后 进行 测 量 体 温 和 临床 制 止亦 无效 果 ，痒部 肿 胀逐 渐 扩 大 ，表 面呈 鲜红 色 ，水 肿 出血 ， 观 察 ，体 温在 ｌ Ｏ ｂ 左 右 开始 上 升 ，７ ２— ８ ４ ｈ 开 始 出现 典 型 的奇 痒症 口唇 附有 泡 沫状 唾液 。此 期持 续约 １ ０ —１ ５ ｈ 。 状 ，接 种 家兔 表 现骚 动 不安 ，不 断地 用 嘴 啃或脚 抓 接种 部 位 ，使 ３ ． ３ 兴 奋 期 被 毛脱 落 ，皮 肤 红 肿 出血 ，剧 痒后 随之 出现 间歇 性 的 痉挛 ，精神 病 牛精 神 紧 张 ，体 温仍 在 ３ ９ ℃～ ４ Ｏ ℃左 右 ，心 跳 快而 有 力 ， 倦 怠 ，有 时 发 出痛 苦 的尖 叫声 ，口流 清 涎 ， 四肢 麻 痹 ，脊 柱 僵 严 重 的全 身反 应 取 代 了发痒 症 状 ，表 现 阵发 性 的兴 奋 不安 ，有 时 硬 ，反 复数 次痉 挛后 ，体 温下 降 ，迅 速死亡 。 狂 暴 ，有 时兴 奋 与 沉郁 交替 。兴奋 时 ，有时 向前 直 冲 ，遇 障 碍物 ６ 小结 不 避 ；狂 暴 时 ，不 断 哞 叫 ， 以头 抵 物 ，头 颈 歪 斜 ，后 肢 瞪 直 ， （ １ ）根据 临床 观察 和特 有 的奇痒 症状 及 实验 室诊 断 ，均能 确 无 目的地 转 圈与 乱 冲 ，直 到跌 倒 为止 ，倒后 尚能起 立 ；兴 奋 与 狂 诊 为牛 伪 狂犬病 ，并 且 能与牛 狂犬 病 相 区别 。 暴 发作 后 ，病 牛 常 暂时 沉郁 ，呆 立不 动 ，但 一 有 响动 则 又兴 奋 不 （ ２） 病 鼠是引 起 牛发 病 的 主要 原 因 ，这３ 头 牛在 同 一个 棚 饮 安 。此 期持 续约 １ ０ ～１ ５ ｈ 。 食 ，另 一个 棚 的２ 头 牛则 没有 发病 ，病 牛 的局 部皮肤 炎 症渗 出物 和 ３ ． ４ 痉 挛 期 唾液 等分 泌 物 可能 带病 毒 ，而传 染 给健 康 牛 。因此 ，接 触传 染 是 病 牛体 况 逐 渐恶 化 ，肌 肉震 颤 ，站 立不 稳 ，倒 地 侧 卧全 身 出 发 病 的条件 。 汗 ，体 温 开 始下 降 ，心 跳 减速 ，腹式 呼 吸 明显 ，四肢 伸展 ，口沫 （ ３）牛伪 狂犬 病 发 病 迅 速 ，致 死 率 高 ，在 目前 无 有 效 的治 增 多 。痉 挛 发作 时 ，角 弓反 张 ，眼皮 频 频 眨动 ，有时 睁 圆 ，嘴 内 疗措施下，对其他健康牛及时应用牛伪狂犬病氢氧化铝甲醛灭活 空 嚼 、磨 牙 、哀 鸣 ，四肢 前后 划 动 ，蹄 着地 处 可 刨成 一 深坑 ，缓 苗 ，效果 安 全 有效 ，同 时采 取隔 离 饲养 ，对病 牛 污染 的场地 、用 解 时显 得 疲 劳 ，叫 声无 力 ，眼半 闭 ，但 视力 反 射 正常 ，对 轻 微 的 具 等用 ４ ％火 碱进 行彻 底 消毒 ，可 以有效 减小 该病 的 传染 。
中国畜牧兽 医文摘 ２ ０ １ ７ 年
３ ３ 卷
第１ 期
黄牛伪狂犬病 Leabharlann 诊 断报 告 柳 永全 （ 山东省栖霞市蛇 窝泊 畜牧兽 医工作站 ，山东栖霞 ２ ６ ５ ３ １ ３ ）
黄 牛 伪狂 犬病 是 由病毒 引 起 的家 畜 急性 传染 病 。其 特 征 是发 外 界 刺激 能 引起 强 烈 的痉 挛发 作 ，这样 的痉 挛 频频 发 作 ，最 后 衰 热 、奇 痒及 脑脊 髓炎 症状 的表 现 ，本 地某 村发 病３ 例 ，治疗无 效 ， 竭 而死 亡 。从发 病 到死亡 约４ ８ ｈ 左右。 全 部死 亡 ，经过 现 场调 查 ，临床 症状 和 动物 接 种试 验 ，诊 断 为 牛 ４ 剖 检 变 化 伪 狂犬 病 ，现将 情况 报告 如下 ： 尸体 均 为 侧 卧 ，尸 僵 不 全 ，眼 球 下 陷 ，可 视 黏膜 发绀 ，发 １ 病原 痒 部 的皮 肤 局部 脱 毛 ，出血 ，增 厚 呈污 红 紫色 ，切开 后 皮下 结 缔 该 病 原是 伪 狂犬 病 病毒 ，属 于疱 疹 病毒 ，病毒 能 于鸡 胚 上 生 组 织 呈 黄色 胶样 浸 润 ，并 有 黄色 清 亮液 体 流 出。胸 腔 浆 膜有 散 在 长 ，能 于多 种 哺乳 动物 细 胞上 生 长 繁殖 ，产 生 核 内包 涵 体 。病 毒 的小 点 出血 ，咽喉 部黏 膜 轻度 水 肿 ，呼 吸道 黏 膜采 血 或 出血 ，并 对 外 界环 境抵 抗 力很 强 ，于 ８ ℃存活 ４ ６ ｄ ，在 ０ ． ５ ％石 灰乳 或０ ． ５ ％苏 有 多 量泡 沫 状 的淡 红 色黏 液 。肺 脏 间质 气肿 ，肺 门淋 巴结肿 大 ， 打 中ｌ ｍ ｉ ｎ ，在０ ． ５ ％盐酸 或硫 酸 中３ ｍ ｉ ｎ 被破 坏 。 呈树枝状坏死 。心包 腔有 多量 淡黄色清亮液体 积存 ，心肥大扩 张 ，心外 膜 下 有 出血斑 点 ，心 内外 膜形 成 明显 的 条状 出 血 。腹 腔 ２ 发病情 况 该 村 共有 黄 牛 １ ２ 头 ，其 中发 病 的一 户有 ３ 头母 牛 ，２ 头公 牛 ， 有 多 量 的黄 色 透 明液体 ；肝 稍肿 ，呈土 黄 色 ，有大 小 不 等 的 出血 从３ 月２ 号开 始 ，有 一 头母 牛 发病 ，相距 ３ ｄ ，同槽 另一 头 母牛 和 仔 斑点 ；胆囊胀满黄绿色胆汁 ，脾脏稍肿大 ，呈紫褐色，并有大量 公 牛 相 继 发病 ，病 牛 症 状 基本 相 同 ，病程 均 在 ２～３ ｄ 死 亡 。据 调 出血 点 ，切 面 干燥 ；肾脏 略 肿 大呈 灰黄 红 色 ，切 面湿 润 ，膀 胱 多 查 ，病 畜 栏舍 ，东 邻粮 仓 ，家 鼠较多 ，仅 东墙 根就 有 鼠洞４ 处 ，棚 数 充 满 尿液 ；第 四 胃黏膜 层 有广 泛 性 的坏 死 、出血 ，其 他 三 胃干 内经 常发 现家 鼠，我们认 为 家 鼠可能 是传 播本 病 的主要 因 素 。 燥 ，粪 如糠 麸 ；头 部 的脑 血 管扩 张 充血 ，脑脊 液 增 多 ，呈淡 红 黄 色 ，脑实 质松 软多 汁 ，有弥 散性 出血 小点 。 ３ 临 床 症 状 在观 察 检查 病 牛 中 ，病 的发 生 与发 展 过程 基 本是 一 致 的 ，病 ５ 实验室诊断 程 大致 分 为前 兆期 、发 痒期 、兴 奋期 和痉 挛期 四个 阶段 。 根据 发 病 牛 的典 型病 程 与表 现 特征 性 的奇 痒 病症 ，临床 诊 断 ３ ． １ 前 兆期 并不 困难 ，为 了进 一 步诊 断 ，除作 细 菌学 检查 ，还做 实 验 动物 的 此期 病 牛 的体 温 升高 到４ ０ ℃ 以上 ，精 神 稍差 ，弓腰 、烦 躁 不 接种 试验 。 安 ，食 欲有 不 同程 度 的减 退 ，病 牛 频频 怒 责 ，两 腿叉 开 ，呈排 尿 ５ ． １ 细菌 学 检 查 姿势 ，但 很少 有尿 排 出 。此 期持 续 约 ｌ Ｏ ｂ 左右。 取病 牛 的 耳尖 血 ，以及 死后 的心血 抹 片 和脑 、脾 、淋 巴结 等 ３ ． ２ 发 痒 期 触 片 ， 以革兰 氏染 色 镜 检未 查 见李 氏杆菌 ，并将 上 述病 料 通 过琼 病 牛 发 生 明显 的奇 痒 表 现 为本 病 的 特 有 症 状 。此 时 体 温 仍 脂培 养 ，也未 培养 出病原 菌 。 高 ，饮 食废 绝 ，反 刍停 止 ，在 面颊 、颈侧 和 尾根 部 皮肤 上 出 现发 ５ ． ２ 家 兔 接种 试 验 痒 症 状 ，表 现 用 舌 舔 、嘴 啃 或 在 槽 边 、木 桩 上 摩 擦 痒 部 造 成 局 将 三份 由延脑 ，肺 门淋 巴结 、脾脏 和生 理盐 水 制成 的 １ ：５ 混 部皮 肤 脱 毛 、发 红 、发 热和 肿胀 。随 病程 延 长发 痒 症状 渐 进 性加 悬 液 ，并 以每 毫 升 加入 青 霉 素 ８ ０ ０ 万 单 位 和链 霉 素 １ ０ ０ ０ 万 单 位进 重 ，不 停地 在 外 物上 摩 擦 ，用 舌舔 、角 搔 、蹄扒 ，并且 人 工 用力 行 处 理后 ，给 ３ 只家 兔 进 行 皮 下接 种 ，随 后 进行 测 量 体 温 和 临床 制 止亦 无效 果 ，痒部 肿 胀逐 渐 扩 大 ，表 面呈 鲜红 色 ，水 肿 出血 ， 观 察 ，体 温在 ｌ Ｏ ｂ 左 右 开始 上 升 ，７ ２— ８ ４ ｈ 开 始 出现 典 型 的奇 痒症 口唇 附有 泡 沫状 唾液 。此 期持 续约 １ ０ —１ ５ ｈ 。 状 ，接 种 家兔 表 现骚 动 不安 ，不 断地 用 嘴 啃或脚 抓 接种 部 位 ，使 ３ ． ３ 兴 奋 期 被 毛脱 落 ，皮 肤 红 肿 出血 ，剧 痒后 随之 出现 间歇 性 的 痉挛 ，精神 病 牛精 神 紧 张 ，体 温仍 在 ３ ９ ℃～ ４ Ｏ ℃左 右 ，心 跳 快而 有 力 ， 倦 怠 ，有 时 发 出痛 苦 的尖 叫声 ，口流 清 涎 ， 四肢 麻 痹 ，脊 柱 僵 严 重 的全 身反 应 取 代 了发痒 症 状 ，表 现 阵发 性 的兴 奋 不安 ，有 时 硬 ，反 复数 次痉 挛后 ，体 温下 降 ，迅 速死亡 。 狂 暴 ，有 时兴 奋 与 沉郁 交替 。兴奋 时 ，有时 向前 直 冲 ，遇 障 碍物 ６ 小结 不 避 ；狂 暴 时 ，不 断 哞 叫 ， 以头 抵 物 ，头 颈 歪 斜 ，后 肢 瞪 直 ， （ １ ）根据 临床 观察 和特 有 的奇痒 症状 及 实验 室诊 断 ，均能 确 无 目的地 转 圈与 乱 冲 ，直 到跌 倒 为止 ，倒后 尚能起 立 ；兴 奋 与 狂 诊 为牛 伪 狂犬病 ，并 且 能与牛 狂犬 病 相 区别 。 暴 发作 后 ，病 牛 常 暂时 沉郁 ，呆 立不 动 ，但 一 有 响动 则 又兴 奋 不 （ ２） 病 鼠是引 起 牛发 病 的 主要 原 因 ，这３ 头 牛在 同 一个 棚 饮 安 。此 期持 续约 １ ０ ～１ ５ ｈ 。 食 ，另 一个 棚 的２ 头 牛则 没有 发病 ，病 牛 的局 部皮肤 炎 症渗 出物 和 ３ ． ４ 痉 挛 期 唾液 等分 泌 物 可能 带病 毒 ，而传 染 给健 康 牛 。因此 ，接 触传 染 是 病 牛体 况 逐 渐恶 化 ，肌 肉震 颤 ，站 立不 稳 ，倒 地 侧 卧全 身 出 发 病 的条件 。 汗 ，体 温 开 始下 降 ，心 跳 减速 ，腹式 呼 吸 明显 ，四肢 伸展 ，口沫 （ ３）牛伪 狂犬 病 发 病 迅 速 ，致 死 率 高 ，在 目前 无 有 效 的治 增 多 。痉 挛 发作 时 ，角 弓反 张 ，眼皮 频 频 眨动 ，有时 睁 圆 ，嘴 内 疗措施下，对其他健康牛及时应用牛伪狂犬病氢氧化铝甲醛灭活 空 嚼 、磨 牙 、哀 鸣 ，四肢 前后 划 动 ，蹄 着地 处 可 刨成 一 深坑 ，缓 苗 ，效果 安 全 有效 ，同 时采 取隔 离 饲养 ，对病 牛 污染 的场地 、用 解 时显 得 疲 劳 ，叫 声无 力 ，眼半 闭 ，但 视力 反 射 正常 ，对 轻 微 的 具 等用 ４ ％火 碱进 行彻 底 消毒 ，可 以有效 减小 该病 的 传染 。
猪伪狂犬病的诊治报告
经 详 细 问诊 调 查 ，该 场 母 猪 配种 前 均 免 疫 猪 瘟 、 丹 毒 、 肺 疫 三 种 疫 苗 。饲 料 均 来 自正 规 厂 猪 猪 家， 玉米 、 豆粕 未 见发 霉腐 败现 象 ， 且 近期 也 从 未 并 投 喂任何食 物 ， 可排 除 中毒 的可 能 。
本病传染迅速 ， 发病率 、 死亡率高 ， 造成严重 的 经 济 损 失 ， 带毒 猪 只 长期 带 毒 排 毒 ， 为 本 病 的 且 成 主要传 染 源 ， 猪 场带 来 较大 的经济 损 失 。牡 丹 江 给 地 区是 猪 伪 狂犬 病 的流 行 区域 ， 大 小 猪场 对 本病 各
６ 防治 措施
因本病 尚无有 效 药 物治 疗 ， 以建 议该 养 猪 户 所
对送 检 ３只病 死仔 猪 病 理 解 剖 ，可 见 被 毛粗
乱 ， 体 消 瘦 ， 桃 体 水 肿 ， 头 水 肿 出血 ， 脏 水 机 扁 喉 肺
淘汰发病的仔猪 ，将为发病母猪和未感染猪隔离 ， 并对猪场 进行彻 底的消毒 ， 连续一周 ， 防止疾病传 播 ； 尚未 感 染 的怀 孕母 猪 及 仔猪 紧 急注 射 伪 狂犬 对
养 猪
猪伪狂犬病 的诊治报告
张 学栋 邢 琨 陈元波 王 宪涛 ， ， ，
【． １黑龙 江农 业经 济职 业 学院 ，牡丹 江 １ ７ ０ ；２黑龙 江省 宁安 市 畜牧兽 医局 ，宁安 ５０ ０ ． １７ ０ ５ ４ ０）
ＤＯ ｌ ０ ３ ６ ／ ． ： ．９ ９Ｊ Ｉ １ ＳＳＮ． ６ － ０ ７．０ ．７．６ １ ７１ ６ ２ ２ １ ０ ０ ３ １
猪 伪狂犬病是 由伪 狂犬 病病毒引起 的一种急 性传染病 ， 以母猪的流产 、 死胎 和仔猪 的神经症状 为主 要特 征 。该 病 在 我 国各 地都 有 发生 ， 年来 发 近 病 出现增 多 的趋 势 ，对养 猪业 的危 害 日益 加 重 ， 应 引起广 大养殖 户 的足 够重 视 。 １ 发 病情 况
崇明县部分规模猪场猪伪狂犬病免疫抗体监测报告
性； ０ ． ６ ＜Ｓ ／ Ｎ≤ ０ ． ７为 可 疑 。
据此 次 抗体 检 测结 果 ， 将对未达到 １ ０ ０ ％阳性 率 的
猪场 采 取 补 免 等 措 施 ， 以进 一 步 提 高 猪 群 的 免 疫 抗体 阳性 率 。
・
３ ２ ・
《 上 海 畜牧兽 医通讯 》 ２ ０ １ ５年 第 ５期
崇 明 县 部 分 规 模 猪 场 猪 伪 狂 犬 病 免疫 抗 体 监 测 报 告
薛 高飞 施 蔡 培
（上 海市 崇 明县动 物疫病 预 防控制 中心 ２ ０ ２ １ ５ ０） 猪伪 狂 犬病 （ Ｐ Ｒ） 是 由猪 伪 狂犬 病 毒 （ Ｐ Ｒ Ｖ） 引 起 的猪 的急性 传染 病 。该 病 在 猪 中呈 暴 发 性 流 行 ， 引起 妊娠 母猪 流产 、 死胎 ， 公猪不育， 新 生仔 猪 大 量 死亡 ， 育肥 猪 呼吸 困难 、 生 长停 滞 等 ， 是危 害 全 球 养 猪业 的重 大传染 病 之一 。近年来 ， 猪 伪 狂犬 病 （ Ｐ Ｒ） 成 为严 重 危 害 我 国 中 小 规 模 猪 场 的 重 要 传 染 病 。 崇 明作为 养殖 大县 ， 全 年 出栏 生 猪 约 ３ １万 头 ， 为了 减少 猪群 损 失 ， 防止 猪 群 发 生 猪 伪 狂 犬 病 ， 崇 明 的 部分 规模 猪 场免 疫 了猪 伪 狂 犬 病 活 疫 苗 。为 了 摸
１ ． ２ ． １ 免疫 程序 ： 伪 狂犬 病 活疫 苗 实 行 自愿 接 种 免疫 原 则 。 根 据 农 业 部 《 猪病 免疫推 荐方案 》 （ 试
狂 犬病 活 疫 苗 。我 们 此 次 对 猪 伪 狂 犬 病 活 疫 苗 免 疫２ １ ｄ 后 的猪 群进 行 采血 检 测 。从 检 测 结 果 可 以 看出 ， 猪 群 伪 狂犬 病 病 毒 抗 体 阳性 率 在 ７ ５ ～
据此 次 抗体 检 测结 果 ， 将对未达到 １ ０ ０ ％阳性 率 的
猪场 采 取 补 免 等 措 施 ， 以进 一 步 提 高 猪 群 的 免 疫 抗体 阳性 率 。
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３ ２ ・
《 上 海 畜牧兽 医通讯 》 ２ ０ １ ５年 第 ５期
崇 明 县 部 分 规 模 猪 场 猪 伪 狂 犬 病 免疫 抗 体 监 测 报 告
薛 高飞 施 蔡 培
（上 海市 崇 明县动 物疫病 预 防控制 中心 ２ ０ ２ １ ５ ０） 猪伪 狂 犬病 （ Ｐ Ｒ） 是 由猪 伪 狂犬 病 毒 （ Ｐ Ｒ Ｖ） 引 起 的猪 的急性 传染 病 。该 病 在 猪 中呈 暴 发 性 流 行 ， 引起 妊娠 母猪 流产 、 死胎 ， 公猪不育， 新 生仔 猪 大 量 死亡 ， 育肥 猪 呼吸 困难 、 生 长停 滞 等 ， 是危 害 全 球 养 猪业 的重 大传染 病 之一 。近年来 ， 猪 伪 狂犬 病 （ Ｐ Ｒ） 成 为严 重 危 害 我 国 中 小 规 模 猪 场 的 重 要 传 染 病 。 崇 明作为 养殖 大县 ， 全 年 出栏 生 猪 约 ３ １万 头 ， 为了 减少 猪群 损 失 ， 防止 猪 群 发 生 猪 伪 狂 犬 病 ， 崇 明 的 部分 规模 猪 场免 疫 了猪 伪 狂 犬 病 活 疫 苗 。为 了 摸
１ ． ２ ． １ 免疫 程序 ： 伪 狂犬 病 活疫 苗 实 行 自愿 接 种 免疫 原 则 。 根 据 农 业 部 《 猪病 免疫推 荐方案 》 （ 试
狂 犬病 活 疫 苗 。我 们 此 次 对 猪 伪 狂 犬 病 活 疫 苗 免 疫２ １ ｄ 后 的猪 群进 行 采血 检 测 。从 检 测 结 果 可 以 看出 ， 猪 群 伪 狂犬 病 病 毒 抗 体 阳性 率 在 ７ ５ ～
伪狂犬病检测方法样本
十一、伪狂犬病检测方法伪狂犬病病毒分离鉴定1 材料准备DMEM培养基、 BHK-21细胞、新生犊牛血清、青霉素、链霉素溶液、培养箱、倒置显微镜。
溶液配制见附录0.22ul微孔滤膜、细胞培养瓶、 CO2A(标准的附录)2 操作步骤2.1病料的采集对于刚死亡或活体送检并处死的动物, 无菌采取肝、脾、肺、肾及其脑组织, 特别是三叉神经节、嗅球, 4℃送实验室检测。
2.2样品处理待检组织在灭菌乳钵内剪碎, 加入灭菌玻璃砂研磨, 用灭菌生理盐水或DME培养基制成1: 5乳剂, —70℃重复冻融后, 经3000rpm离心30分钟后, 取上清液经0.22μm微孔滤膜过滤后, 加入青链霉素溶液至最终浓度为100U/mL, —70℃保存作为接种材料。
2.3 病料接种将病料滤液接种已长成单层的BHK-21细胞, 接种量为培养基量的10%, 37℃恒温箱中吸附1小时后, 加入含10%新生犊牛血清( 经过56℃水浴灭活30分钟, 过滤除菌, 无支原体) 的DMEM培养基, 置37℃温箱中培养。
2.4观察结果接种后24—48小时, BHK-21细胞应出现典型的细胞病变效应( Cyto pathogenic effect, CPE) , 表现为细胞变圆, 脱落。
如第一次接种不出现CPE, 应将细胞培养物冻融后盲传三代, 如仍无CPE, 则判为伪狂犬病病毒阴性。
2.5病毒的鉴定将出现CPE的细胞培养物重复冻融后, 用聚合酶链式反应、荧光抗体试验等两种方法中任一方法作进一步鉴定。
伪狂犬病聚合酶链式反应1 材料准备:待检组织、组织匀浆器、蛋白酶K, 十二烷基磺酸钠( SDS) , 苯酚、氯仿, 异戊醇( 分析纯) 、 TEN缓冲液。
溶液配制见附录C(标准的附录)引物: 扩增伪狂犬病病毒基因中434—651bp之间217bp基因片段, 由上海生物工程公司合成。
序列为, 上游引物P1: 5’-CAGGAGGACGAGCTGGGGCT-3’,下游引物P2: 5’-GTCCACGCCC-CGCTTGAAGCT-3仪器设备有: 凝胶电泳紫外线检测仪, PCR扩增仪, 电泳仪2操作步骤:2．1 样品的采集: 对于病死或扑杀动物, 取脑组织; 对于待检活猪, 用已灭菌的棉签, 伸入猪鼻腔中, 采取鼻粘液, 即为鼻拭子, 冷藏条件送实验室检测。
一起猪伪狂犬病暴发的报告
猪伪 狂犬 病 的临床 诊断 主要 是依 靠 临床 症状 及死猪 剖 解所 见 诊 断 ， 脑脊 液 、 其 脑膜 、 组织 的变 化及 妊 娠母 脑 猪子 宫 内膜 变化具 有诊 断意 义 ，立 即采取措 施 对 降低死
对病死猪进行大体剖解 ， 未发现特征性病变 ， 但见鼻
腔 内有卡 他 性或 化脓 性 分泌 物 ， 咽喉 黏膜 水 肿 ， 肺充 血 、
雹 晦 ＿ ７
次， 间隔 ４ ６ ￣ 周加 强 １ ， 次 能取得较 好 的免 疫效 果 。 （ 作者联 系 地址 ： 浙江省 象山县畜牧兽 医站 邮编 ：１７０ ３５０ ）
２ 动物接种试验。 ４日龄哺乳死猪及 ３ ． 将 ５日龄断乳
死猪脑 组织 分别 捣碎 ， 成 １％ 右悬 液 ， 心后 取上 清 制 ０左 离 液， 分别接 种 两只健 康家 兔 ， 家兔 接种 后 出现 精神 萎 观察
神经症 状 。 病后 ３ ７ 发 — 天大批 哺乳仔 猪相继 死亡 ， 断乳仔
猪临床症 状与 哺乳猪 相 同 ， 但病 程较 哺乳猪稍 长 。妊娠母
猪出现 咳嗽 、 气急等 呼 吸道 症状 ， 生流 产 、 胎 。 并发 死 其他 成年猪症 状较轻 ， 以呼 吸道 症状 为主 。
３ ．大 体 剖 解
且 死 亡率常 高达 ９ ％以上 。本病 可经消 化道 、 ０ 呼吸 道 、 生 殖 道等 多种途径 传播 。 鼠是易 感动 物 ， 毒可 长期保存 于 病 鼠体 内 ， 因此 ， 鼠是 防制本 病及 其他 急性 传染 病 发生 的 灭
重要 途径 。
状， 随后出现焦躁不安 、 呜叫 、 步态不稳 ， 全身肌肉痉挛等
发生。
四 、 结 小
胎及呼吸系统症状。现将一起规模猪场暴发伪狂犬病的
青海省海东地区猪伪狂犬病监测报告
青海省海东地区猪伪狂犬病监测报告
李岳林
【期刊名称】《青海畜牧兽医杂志》
【年(卷),期】2005(035)003
【摘要】伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的家畜及野生动物的急性传染病。
其特征
为发热、奇痒(猪无痒觉)及脑脊髓炎症状，大猪多为隐性感染，孕猪引起流产、死胎或木乃伊胎，影响其繁殖能力。
仔猪有兴奋、转圈、视力障碍、痉挛等神经症状，死亡率高达90％以上。
为调查了解青海省海东地区猪只感染伪狂犬病的状况，我
们于2004年6—7月，在海东地区5个县(乐都、平安、民和、互助、化隆)采集
血样进行了检测，现报告如下。
【总页数】1页(P30)
【作者】李岳林
【作者单位】青海省乐都县畜牧兽医技术服务中心,810700
【正文语种】中文
【中图分类】S828
【相关文献】
1.青海省海东地区基本实现消除碘缺乏病目标自评报告 [J], 巴国文;陈胜
2.崇明县部分规模猪场猪伪狂犬病免疫抗体监测报告 [J], 薛高飞;施蔡培
3.猪伪狂犬病免疫抗体监测报告 [J], 姚学军
4.猪伪狂犬病病原学监测分析报告 [J], 石丽娟
5.青海省海东地区2000年碘缺乏病监测报告 [J], 马孝翠;周琳;孟献亚;熊传龙;安永清;李勇;刘小蓉;蔡生花;魏生英;陈黎林;杨佩珍;曹慧萍
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一起猪伪狂犬病诊治的报告
的猪表现症状不 同， 具体表现为各种神经症状 ， 有的 两后腿后伸 ， 两前腿支撑身体 向前爬行 ， 有 的侧卧呈
角 弓反张姿势 ， 四肢作不 自主的游泳样滑动 ， 有的开 始 为 肌 肉震 颤 ， 唾液 分 泌增 多 ， 眼球震 颤 。有 的呼 吸 困难 ， 呈犬坐姿势 ， 有的猪转圈、 呕吐、 咳嗽、 打喷嚏。
４ 诊 断
养殖技术顾 问 ２ ０ １ ４ ． １
乳使仔猪获得免疫 ， 免受伪狂犬病毒的攻击 ， 从而抑 制伪狂犬病毒在 中枢神经系统的复制。
６ 讨论
据资料 ，猪是患伪狂犬病后唯一可 以存活的物 种， 同时猪也称为伪狂犬病毒 的贮存宿主 ， 在适 当条
Байду номын сангаас
３ 剖检 变化
共剖检 ６ 头病死猪， 其共同的病理变化如下 。病
猪心包积液 ， 右心室扩张 ， 心肌瘫 软无 力 ， 充满大量 血凝块和未凝 固的血液 。胸腔积液 ，肺重量 明显增
母猪 １ ２ 头， 所产仔猪 １ ３ ２ 头均已断奶 ， 没有发病 。其 余７ ６头均为外购。猪群已接种猪瘟 、 猪丹毒 、 肺疫 、 蓝耳病 、圆环病毒疫苗 ，母猪还接种过伪狂犬病疫
苗， 自家仔猪 和外购猪未接种伪狂犬病疫苗。圈舍通 风 良好 ， 舍温 ２ ４ ℃， 湿度 ４ ８ ％， 密度偏高 ， 不同年龄的
加， 表 面清亮呈 暗紫红色 ， 肺间质 明显增宽 ， 切面流 出大量带泡沫的液体 。肾脏颜色变深 ， 特别是髓质部 颜色更深 ， 皮质部有小米粒大小的 白色梗死灶。全身
淋 巴结肿胀 ， 肠系膜淋 巴结 和肺 门淋 巴结肿胀 明显 ，
其 中前者呈现大理石样外观。鼻腔黏膜明显充血 ， 呈 紫红色 ， 内有脓性分泌物。脑膜充血 、 脑 回变平 。 其他 的病理变化为 ， １ 头病猪两侧尖 叶、 Ｃ ， ｎ ｆ 及
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伪狂犬检测报告一例猪伪狂犬病毒病的诊治报告龙源期刊网.cn一例猪伪狂犬病毒病的诊治报告作者：覃国喜来源：《中国动物保健》2014年第09期猪伪狂犬病的致病源为I型疱疹病毒，是一种急性传染病。
多会引起母猪的繁殖障碍，仔猪的急性死亡，侵害多种组织器官的恶心疾病。
怀孕母猪感染该猪伪狂犬病毒后，可导致母猪流产，临床上常见的流产的胎儿有死胎、木乃伊胎及弱仔等；对已顺利降生、母原抗体不高的仔猪可造成大批急性死亡，临床常见的症状有呕吐、震颤、腹泻及运动失调等临床症状；耐受猪易产生免疫抑制，增加了猪只感染其它疾病的风险，影响仔猪生长发育。
研究表明，发病的猪、潜伏感染排毒的猪为本病重要传染源。
除此之外，实验动物中兔、小鼠、大鼠、豚鼠等也是猪伪狂犬病毒的贮存宿主，引起该病的发生与流行。
笔者将成功治疗的一例猪伪狂犬病诊疗过程记叙如下，旨在为广大兽医工作者提供借鉴。
1 发病情况介绍广西某猪场，存栏猪1 000余头。
4月5日，猪场内出现新生仔猪大量死亡，新生仔猪出生第一天表现正常，第二天开始发病，体温41℃以上，精神极度萎顿，身体发抖，运动不协调，死亡高峰期出现在发病后的3～5 d内。
明显的神经症状是该病的主要临床症状，一旦发病，1～2 d内死亡。
新生仔猪的发病死亡率可达100%。
断奶仔猪也有发病，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等，死亡率在10%。
怀孕母猪发生流产、产木乃伊胎儿。
2 病例变化及实验室检测对病死猪及濒死猪进行了解剖，眼观病变主要有肾脏有针尖状出血点，脑膜明显充血，有些在肝、脾等脏器常可见灰白色坏死病灶。
脑、脾、肝等器官取样进行实验室的细菌学和猪伪狂犬病毒（PRV）、猪乙型脑炎病毒（JEV）、猪细小病毒（PPV）、猪蓝耳病病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）的检测。
无菌采取病料后直接涂片、革兰氏染色、镜检后未发现有细菌；同时对病料在血琼脂平板培养，37℃培养24 h未见有细菌增殖，排除了该病由细菌引起。
对所采取的病料进行RCR/RT-PCR检测，在病猪的脑组织中检测到PRV的核酸物质（见图1），而在其他组织均为检测到PPV、JEV、PRRSV、CSFV等病毒的核酸物质。
3 诊断结果根据疾病的临诊症状，流行病学及实验室检测结果，确定该猪场发生了由PRV病毒引起的猪伪狂犬病毒。
4 治疗及预防措施篇二：猪伪狂犬病野毒抗体不同检测单位的比对试验龙源期刊网.cn猪伪狂犬病野毒抗体不同检测单位的比对试验作者：孙华宋忠旭曾德芳等来源：《湖北农业科学》2013年第24期摘要：在种猪群伪狂犬病野毒（gE）抗体监测的第一阶段，进行了不同检测单位的比对试验。
对来自71个个体间隔1周的两次血清样本进行检测，2个检测机构之间的gE抗体阳性符合率分别为35.71%、45.45%，总体检测符合率分别为87.32%、91.55%；2个检测机构各自的gE抗体阳性符合率分别为40.00%、75.00%，总体检测符合率分别为87.32%、97.18%。
表明在猪群进行伪狂犬病野毒感染鉴定的初期，有必要对检测单位进行筛选。
关键词：伪狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）；野毒抗体；对比试验中图分类号：S828 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）24-6124-02伪狂犬病是由伪狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的多种动物共患传染病，以发热、奇痒（猪除外）及脑脊髓炎为主要症状[1]。
猪感染伪狂犬病毒后主要表现为母猪流产、死胎等繁殖障碍[2]，哺乳仔猪尖叫、腹泻和转圈、大量发病死亡，保育猪神经症状，育肥猪呼吸道症状、生长发育缓慢。
猪伪狂犬病对养猪生产的影响很大，给中国的养猪业特别是集约化养猪造成了巨大经济损失[3]。
国家生猪产业技术体系疫病控制研究室“十二五”重点任务“伪狂犬病、猪瘟净化与蓝耳病综合防控”中要求，在伪狂犬病净化任务结束时，参与试验的种猪场（或生产线）应全部为野毒gpI （gE）抗体阴性。
根除和净化措施分为普查、强化免疫控制、检测淘汰、全群清群与引种、监测认证与维持等5个阶段，在实施过程中，检测结果将影响净化的具体方案和实施细节。
本研究在种猪群伪狂犬病野毒感染状况监测的第一阶段，进行了猪伪狂犬病野毒抗体不同检测单位检测结果的比(转载于: 写论文网:伪狂犬检测报告)对试验，现将试验情况及建议报告如下，以供养猪生产中猪群伪狂犬病等疾病检测、净化时参考。
1 材料与方法1.1 试验动物与试剂试验猪为湖北省农业科学院实验原种猪育种场基础母猪520头，种公猪19头，自繁自养。
gE基因缺失弱毒疫苗（K-61株自然缺失基因苗），德国柏林格茵格翰公司。
后备猪在70日龄和配种前各免疫1次，种母猪每年普免3次，普免时避免在分娩前7 d内接种，以减少接种应激对分娩的影响，并在母猪分娩后补免；公猪采用集中普免的方式，每年免疫3次。
篇三：伪狂犬病检测方法十一、伪狂犬病检测方法伪狂犬病病毒分离鉴定1 材料准备DMEM培养基、BHK-21细胞、新生犊牛血清、青霉素、链霉素溶液、0.22ul微孔滤膜、细胞培养瓶、CO2培养箱、倒置显微镜。
溶液配制见附录A(标准的附录)2 操作步骤2.1 病料的采集对于刚死亡或活体送检并处死的动物，无菌采取肝、脾、肺、肾及其脑组织，尤其是三叉神经节、嗅球，4℃送实验室检测。
2.2 样品处理待检组织在灭菌乳钵内剪碎，加入灭菌玻璃砂研磨，用灭菌生理盐水或DME培养基制成1：5乳剂，—70℃反复冻融后，经3000rpm离心30分钟后，取上清液经0.22μm微孔滤膜过滤后，加入青链霉素溶液至最终浓度为100U/mL，—70℃保存作为接种材料。
2.3 病料接种将病料滤液接种已长成单层的BHK-21细胞，接种量为培养基量的10%，37℃恒温箱中吸附1小时后，加入含10%新生犊牛血清（经过56℃水浴灭活30分钟，过滤除菌，无支原体）的DMEM培养基，置37℃温箱中培养。
2.4 观察结果接种后24—48小时，BHK-21细胞应出现典型的细胞病变效应（Cyto pathogenic effect, CPE），表现为细胞变圆，脱落。
如第一次接种不出现CPE，应将细胞培养物冻融后盲传三代，如仍无CPE，则判为伪狂犬病病毒阴性。
2.5 病毒的鉴定将出现CPE的细胞培养物反复冻融后，用聚合酶链式反应、荧光抗体试验等两种方法中任一方法作进一步鉴定。
伪狂犬病聚合酶链式反应1 材料准备:待检组织、组织匀浆器、蛋白酶K，十二烷基磺酸钠（SDS），苯酚、氯仿，异戊醇（分析纯）、TEN缓冲液。
溶液配制见附录C(标准的附录)引物：扩增伪狂犬病病毒基因中434—651bp之间217bp基因片段，由上海生物工程公司合成。
序列为，上游引物P1：5’-CAGGAGGACGAGCTGGGGCT-3’，下游引物P2：5’-GTCCACGCCC-CGCTTGAAGCT-3仪器设备有：凝胶电泳紫外线检测仪，PCR扩增仪，电泳仪2操作步骤：2．1 样品的采集：对于病死或扑杀动物，取脑组织；对于待检活猪，用已灭菌的棉签，伸入猪鼻腔中，采取鼻粘液，即为鼻拭子，冷藏条件送实验室检测。
2.2 样品处理所采病料经组织研磨器充分研磨，按1:5用TEN 缓冲液悬浮收集于离心管内，-70℃反复冻融3次，7000r/min离心5min，如样品为鼻试子，则加入2ml TEN缓冲液，充分挤压，取出棉签，7000rpm，离心5分钟，取上清液。
取上清液472.5μl,加入25μl 10％SDS和2.5μl的20mg/ml 蛋白酶K，50℃水浴摇床上放置2h后加入等量的饱和酚500μl，涡旋20s。
离心取上清液，加等量的酚：氯仿：异戍醇（25:24:1）抽提一次，再用氯仿：异戍醇（24：1）抽提一次，最后用乙醇沉淀，真空抽干后加入20μl双蒸水溶解，-20℃贮存备用。
2.3. PCR的操作程序先将制备的模板DNA置100℃水浴10分钟作变性处理，，然后立即放于冰浴中。
PCR反应体系为：总体积25μl，含有50m ?mol/L KCl,10m mol/L Tris-HCl（pH 9.0），0.1％Triton X-100?，?100?μmol/L dNTPs，0.35μmol/L引物，2 m mol/L MgCl2，及0.5U Taq酶，1μl模板DNA。
常用的反应体系组成如下10×缓冲液2.5 μl15mM MgCl22.5 μldNTPs 2.0 μl引物各2.0μlTaq聚合酶1.0μlDNA模板2.0μl灭菌去离子水11.0μl矿物油约20μl扩増条件为:94℃变性3分钟，进入循环，94℃60秒，65℃60秒，72℃60秒，40个循环后72℃延伸5分钟。
2.4PCR产物的检测PCR扩增产物在1％的琼脂糖凝胶上电泳，溴化乙锭染色，在紫外光下观察结果。
为进一步进行PCR扩增产物的特异性鉴定，可取PCR产物用SalI酶切，酶切产物在2％琼脂糖凝胶上电泳，EB染色，在紫外光下观察并与标准分子量比较，可见产生的140bp和77bp两个片段。
伪狂犬病荧光抗体试验1材料准备：碳酸盐缓冲甘油、磷酸盐缓冲液、丙酮（分析纯），伪狂犬病荧光抗体、冰冻切片机，荧光显微镜。
溶液配制见附录D(标准的附录)2操作步骤2．1样品采集扑杀可疑动物，取大脑、淋巴结、扁桃体迅速送检实验室，如不能及时送出，必须冻结保存，避免腐败、自溶。
本法也可用于对疑似伪狂犬病病毒的培养物进行鉴定。
2．2 切片制备将样品组织块切成1cm ×1cm的面，不经任何固定处理，直接贴于冰冻切片托上，进行切片，切片厚度要求5—7um，将切片展贴于0.8mm×1mm厚的洁净载玻片上。
2．3固定：将切片置纯丙酮中固定15分钟，取出立即放入0.01mol/L，pH7.2的磷酸盐缓冲液中，轻轻漂洗3—4次，取出，自然干燥后尽快进行荧光抗体染色。
2．4 染色将伪狂犬病荧光抗体滴加于切片表面，置温盒内于37℃作用30分钟，取出后放入磷酸盐缓冲液中充分漂洗，再用0.5moL/L，pH9.0—9.5碳酸盐缓冲甘油封固盖片（0.1mm厚），染色后应尽快镜检，必要时可放置低温待检。
2．5 观察将染色后的切片标本置激发光为蓝紫光或紫外光的荧光显微镜下观察。
2．6判定：于荧光显微镜视野中，见细胞中出现明亮的黄绿色荧光，判为伪狂犬病病毒感染阳性。
伪狂犬病微量中和试验（固定病毒，稀释血清法）1 材料准备0. 25%胰酶（配制见附录B）、BHK-21细胞,多道可调微量移液器, ,96孔细胞培养板,CO2培养箱, 倒置显微镜。
2 操作步骤2.1 病毒半数组织细胞感染量（TCID50）的测定：2.1.1 病毒培养和收获将伪狂犬病毒接种于长成单层的BHK-21细胞，接种量为液体培养基量的10%,37℃培养，待出现病变后，冻融，收获病毒。