研究生课程-分子生物学-专题篇3.专题篇第十九章基因诊断基因诊断：以DNA或RNA为诊断材料，通过检查基因的存在，结构缺陷或表达异常，对人体状态和疾病作出诊断的方法和过程。
基本原理：检测DNA或RNA的结构变化与否、量的多少及表达功能是否正常，确定受检者是否存在基因水平的异常变化，以此作为疾病诊断的依据。
意义：不仅能对疾病作出早期和确切诊断，而且能确定个体对疾病的易感性及疾病的分期、分型、疗效监测、预后判断等。
第一节基因诊断的技术方法一、常用的分子生物学技术（一）核酸分子杂交包括Southern blot; Northern blot; dot blot; in situ hybridization等（二）聚合酶链式反应（PCR）常与其他技术联合应用（三）单链构象多态性检测（SSCP；single strand conformationpolymorphism）是一种基于单链DNA构象差别来检测点突变的方法，常与PCR 联用，称PCR-SSCP. PCR产物变性后，经聚丙烯酰胺凝胶电泳，正常基因和变异基因的迁移位置不同，借此可分析确定致病基因的存在。
（四）限制酶酶谱分析限制性片段长度多态性（RFLP；restrict fraction length polymorphinsm）（五）DNA序列测定是进行基因突变检测最直接、最准确的方法，不仅可确定突变的位置，而且可确定突变的性质。
（六）DNA芯片技术实际上是一种快速、敏感、高效、自动化的核酸杂交技术二、基因诊断的基本方法特点:1：特异性强检测特异性高达100%2.早期诊断3.灵敏度高检测灵敏度达毫微微克(fg)水平4.取样方便任一有核细胞均可作为检测样品（一）基因突变的诊断1、点突变的诊断（1）已知的点突变可采用PCR/ASO（等位基因特异性寡核苷酸；allele specificoligonucleotide）探针法检测。
（2）未知的突变PCR-SSCP；DNA序列测定；DNA芯片技术；等2、少数核苷酸缺少或插入探针法3、大片段丢失或插入PCR；多重PCR（因为常规PCR扩增2kb 以上的片段比较困难）4、基因重排（染色体易位）PCR；原位杂交（包括FISH）；5、基因扩增Southern blot（先用酶切，再作blot）（二）多态性分析1、RFLP分析（1）限制酶酶谱直接分析法（2）RFLP间接分析法2、DNA重复序列多态性分析（三）基因表达异常的诊断1、mRNA相对定量分析（1）斑点或狭缝杂交（2）RT-PCR2、mRNA绝对定量分析RT-PCR/竞争性PCR3、mRNA长度分析Northern blot（四）外源DNA检测血清学等方法不够灵敏或特异，考虑用核酸分子杂交或PCR等技术，应用基因特异性探针或合成特异的寡核苷酸引物来检测。
《分子生物学课程》教案2007～2008学年第 1 学期授课专业：生物技术课程名称：分子生物学主讲教师：何宁佳查幸福赵爱春课程说明一、课程名称：分子生物学二、总课时数：45三、先修课程：基因工程原理四、使用教材：PC Turner, AG McLennan, AD Bates&MRH White, 《Instant notes in Molecular Biology》, 科学出版社，2004年1月第八次印刷五、教学参考书：1 PC特纳、AG麦克伦南、AD贝茨、MRH怀特，《分子生物学-现代生物学精要速览中文版》，科学出版社，2004年8月第七次印刷。
2 朱玉贤，李毅编著《现代分子生物学》，第二版，高等教育出版社，2004年1月第3次印刷。
六、考核方式：理论课采用闭卷考试的方法，总成绩，平时成绩30%，中期考试10%，期末考试60%七、教案编写说明：教案又称课时授课计划,是任课教师的教学实施方案。
任课教师应遵循专业教学计划制订的培养目标，以教学大纲为依据，在熟悉教材、了解学生的基础上，结合教学实践经验，提前编写设计好每门课程每个章、节或主题的全部教学活动。
教案可以按每堂课（指同一主题连续1~2节课）设计编写。
教案编写说明如下：1、编号：按施教的顺序标明序号。
2、教学课型表示所授课程的类型，请在相应课型栏内选择打“√”。
3、题目：标明章、节或主题。
4、教学内容：是授课的核心。
将授课的内容按逻辑层次，有序设计编排，必要时标以“*”、“#”“？”符号分别表示重点、难点或疑点。
5、教学方式既教学方法，如讲授、讨论、示教、指导等。
教学手段指教科书、板书、多媒体、模型、标本、挂图、音像等教学工具。
6、讨论、思考题和作业：提出若干问题以供讨论，或作为课后复习时思考，亦可要求学生作为作业来完成，以供考核之用。
7、参考书目：列出参考书籍、有关资料。
8、日期的填写系指本堂课授课的时间。
课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案课时教案。
