下载文档原格式
苹果梨在F-MAP贮藏保鲜过程中品质的变化张雪;金永杰;李范洙;朴炯雨;张先【摘要】为探索适合于苹果梨保鲜的先进贮藏技术,以苹果梨为试验材料,对F-MAP包装的苹果梨贮藏品质进行了研究.结果表明:苹果梨果实在F-MAP贮藏过程中的可溶性固形物、总酸、淀粉、酚类物质等含量呈下降趋势,但其含量均高于对照的纸箱包装和聚乙烯袋包装组,并在贮藏约4个月后差异呈显著性.F-MAP贮藏的苹果梨果实的PPO活性和POD活性呈先上升后下降的趋势,其中,PPO活性低于对照,POD活性高于对照.研究结果表明本试验处理的F-MAP有利于苹果梨保鲜,而且效果随贮藏时间的延长更加明显.【期刊名称】《延边大学农学学报》【年(卷),期】2015(037)001【总页数】6页(P12-17)【关键词】苹果梨;F-MAP;贮藏保鲜;品质;变化【作者】张雪;金永杰;李范洙;朴炯雨;张先【作者单位】延边大学农学院;延吉园艺有限公司吉林延吉133000;延边大学农学院;韩国食品研究院,韩国首尔120162;延边大学农学院【正文语种】中文【中图分类】S661.2F-MAP(Functional-modified atmosphere packaging)技术是近年来逐渐兴起的一种保鲜技术，它利用功能性塑料薄膜包装贮藏果蔬，主要将线性低密度聚乙烯树脂和沸石等多孔性无机物质混合并添加一些吸附剂、抗菌剂等，通过改善气体透过性来降低果实的水分蒸腾和呼吸作用，进而减少果实营养物质的损耗，吸收或分解果实释放出来的乙烯气体，还可以让果实的病原微生物生长繁殖与生理代谢受到抑制[1-3]。
同时，采用表面活性剂处理薄膜内层，可使薄膜起到防止或减少结露的作用，从而延长果实贮藏寿命[3-6]。
Hyung woo Park等[3-4]进行了F-MAP对富士苹果及柑橘等果实保鲜效果的试验，并得到了很好的效果。
苹果梨酸甜可口，品质优良，是延边地区一大支柱产业，但以鲜销和鲜食为主。
不同贮藏温度下李果实的品质比较万璇，林欣，彭俊森，张琴，罗登灿，董晓庆*（贵州大学农学院，贵州贵阳 550000）摘要：为探究‘蜂糖李’和‘空心李’适宜采后贮藏温度，将两种李果实贮藏于0、2、4 ℃下进行外观及内在相关品质指标测定。
研究结果表明低温有助于维持李果实较高硬度、减弱呼吸作用从而维持品质；其中‘蜂糖李’在4 ℃下可溶性固形物迅速积累且呼吸速率飙升，颜色由绿转黄后失去商品价值，而0、2 ℃较好的抑制‘蜂糖李’呼吸速率延缓营养物质的消耗，但2 ℃下果实失重明显且贮藏前期超氧化物歧化酶活性显著低于0 ℃，0 ℃有利于李果实保持较好色泽并延迟硬度下降、抑制失重率、可溶性固形物含量上升等；‘空心李’在贮藏过程中，三个温度均延缓果实硬度下降且可溶性固形物含量较为稳定，但0 ℃比2、4 ℃更好的维持果实硬度、减缓失重率、呼吸速率的上升、以及丙二醛和过氧化氢的积累，且0 ℃下果实色泽保持良好，而2、4 ℃贮藏后期果实丧失特有色泽。
综上所述，0 ℃贮藏有利于维持‘蜂糖李’和‘空心李’外观及内在品质，从而延长货架期。
关键词：李；温度；保鲜；抗氧化；品质文章编号：1673-9078(2024)04-142-155 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2024.4.0213Physiological Comparison of Plum Fruit Quality at Different StorageTemperaturesW AN Xuan, LIN Xin, PENG Junsen, ZHANG Qin, LUO Dengcan, DONG Xiaoqin*(College of Agronomy, Guizhou University, Guiyang 550000, China)Abstract: To explore the suitable postharvest storage temperatures of two plum fruits, “FTL” and “KXL”, their appearance and intrinsic quality indices were measured at 0, 2, and 4 ℃. The results showed that low temperatures could contribute to the maintenance of plum fruit hardness to a greater extent while concurrently mitigating respiration, thus maintaining overall fruit quality. Among them, the soluble solids of “FTL” accumulated rapidly at 4 ℃ and the respiration rate increased. The color turned from green to yellow, resulting in a loss of market value. However, temperatures of 0 and2 ℃ effectively inhibited the respiration rate of “FTL” and delayed the consumption of nutrients, but the weight loss of thefruit was pronounced at 2 ℃, superoxide dismutase activity at the early storage stage was significantly lower than that at 0 ℃, which was conducive to maintaining favorable color and delaying the decrease in hardness, inhibiting the weight loss rate, and increasing the content of soluble solids. During the storage process of “KXL”, the decrease in fruit hardness and the soluble solid content was relatively stable at all three temperatures, but 0 ℃ was more favorable than 2 and 4 ℃ for maintaining fruit hardness, slowing down the weight loss rate, increasing the respiration rate, and accumulating malondialdehyde and hydrogen 引文格式：万璇,林欣,彭俊森,等.不同贮藏温度下李果实的品质比较[J] .现代食品科技,2024,40(4):142-155.WAN Xuan, LIN Xin, PENG Junsen, et al. Physiological comparison of plum fruit quality at different storage temperatures [J] . Modern Food Science and Technology, 2024, 40(4): 142-155.收稿日期：2023-02-24基金项目：贵州省科技厅项目（黔科合支撑[2022]重点018号）；国家自然科学基金项目（31960620）作者简介：万璇（2001-），女，硕士研究生，研究方向：果蔬采后生理与贮藏保鲜，E-mail：通讯作者：董晓庆（1980-），女，博士，副教授，研究方向：果蔬采后生理与分子生物学，E-mail：142李（Prunus salicina Lindl.）属于蔷薇科（Rosaceae）李属（Prunus）植物，多年生落叶果树，在中国栽培历史长达3 000余年，李果实外形靓丽、清脆可口，富含矿物质、维生素、膳食纤维及抗氧化物质[1,2] 。
果蔬采后生理学实验大纲
果蔬中可滴定酸含量的测定实验
果蔬中Vc含量的测定实验
果蔬中过氧化氢酶活性的测定实验
果蔬中多酚氧化酶活性的测定实验
果蔬呼吸速率的测定实验
果蔬叶绿素的测定实验
果蔬中胡萝卜素和番茄红素的测定实验
果蔬中含糖量的测定实验
食品科学学院果蔬采后生理及贮运实验室
总面积152.74 平方米，实验仪器设备 32台件，总价值 26.04 万元，为两门课程开设12个实验，实验项目如下：
果蔬细胞膜渗透率的测定实验
果蔬一般物理化学性状的测定实验
果蔬组织冰点的测定实验
果蔬贮藏环境中CO2和O2浓度的测定实验
葡萄贮藏期间SO2残留量的测定实验
果蔬的催熟实验
果蔬中乙烯含量的测定实验
21。
多酚氧化酶活性测定一、引言食品的褐变主要分为酶促褐变和非酶褐变，多酚氧化酶是引起果蔬褐变的主要酶之一，学习它的活性测定对于果蔬加工采取合理的护色措施具有指导意义。
多酚氧化酶的活性测定有多种方法，出于一般实验室的条件相对不是很先进，本试验选用了一种较简单的方法,但这种方法仍然可以训练学生掌握测定酶活性的基本要点和技能。
二、原理邻苯二酚在多酚氧化酶催化下受O2作用生成邻苯二醌，邻苯二醌能够被抗坏血酸还原，如抗坏血酸充足，少量邻苯二酚可反复不断地发生氧化还原。
由于该酶最适pH为6，因此这一过程在pH6时最快。
把分析对象配成pH6左右的样液，在抗坏血酸和邻苯二酚存在时，于20℃下振荡2min，这时抗坏血酸被氧化。
精确的经过2min后加入偏磷酸以终止反应。
用碘量法（以碘酸钾为基准试剂）进行滴定，测得剩余的抗坏血酸。
由得到的数据求出被氧化的抗坏血酸量，并计算出酶活性，并以1g分析物质1min 内氧化抗坏血酸的微克分子数表示之。
所有上述过程的主要反应式如下：酶邻苯二酚邻苯二醌邻苯二醌+抗坏血酸邻苯二酚+脱氢抗坏血酸KIO3+5KI+6HCl→6KCl+3H2O+3I23I2+3Vc→3-脱氢Vc+6HI三、材料和设备苹果；马铃薯。
研钵；烧杯；50毫升量瓶；250毫升三角瓶；秒表；滴定管；温度计。
四、试剂1．0.2邻苯二酚溶液：用粗天平称0.2克邻苯二酚，溶解于蒸馏水，稀释到100 毫升，（准备用的前1-2天配制）。
贮于棕色玻璃瓶中，放在冷凉处。
2．0.01N碘酸钾溶液：用分析天平精确称取0.3566克KIO2（预先在102℃烘2 小时，在干燥皿中冷却备用），用蒸馏水溶解于1升的容量瓶中，加5毫升1N的NaOH溶液（此时加碱是为了使KIO3和KI在该试剂中暂不反应）和2克KI，溶解，用蒸馏水稀释到刻度，混匀，保存于棕色瓶中。
3．pH6.4的磷酸缓冲液，称取KH2PO4盐5.44克溶解到无碳酸的水中，加10毫升1N的NaOH溶液，用无碳酸的水稀释至200毫升，保存于磨口玻璃瓶中。
多酚氧化酶的分离纯化、蛋白质含量、活性测定及电泳博哥(中山大学化学与化学工程学院，广州510275)摘要多酚氧化酶与植物组织培养的酶促褐变以及果蔬品质密切相关。
本实验选取蘑菇、茄子、马铃薯为实验材料，提取PPO的粗酶液，再通过考马斯亮兰法法测定蛋白质含量，并采用邻苯二酚、L-多巴为底物，测定PPO活性，最后，进行了聚丙烯酰胺凝胶电泳。
结果显示，马铃薯酶液中PPO含量最多为15766 μmol·L-1，其次是蘑菇为13931 μmol·L-1，茄子酶液PPO最少，含量为4061μmol·L-1。
但是，以邻苯二酚或多巴为底物时，茄子的比活力最高，蘑菇与马铃薯酶液的比活力相近。
聚丙烯酰胺凝胶电泳显示，茄子酶液中存在较多同工酶，蘑菇与马铃薯则较少。
关键词多酚氧化酶考马斯亮兰法聚丙烯酰胺凝胶电泳1引言多酚氧化酶(polyphenoloxidase，PPO，EC.1.10.3.1)是植物体内普遍存在的一类铜结合酶。
多酚氧化酶的共同特征是能够通过分子氧氧化酚或多酚形成对应的醌。
在广义上，多酚氧化酶可分为三大类：单酚单氧化酶(酪氨酸酶tyrosinase,EC.1.14.18.1)、双酚氧化酶(儿茶酚氧化酶catechol oxidse,EC.1.10.3.2)和漆酶(laccase,EC.1.10.3.1)。
在这三大类多酚氧化酶中，儿茶酚酶主要分布在植物中，微生物中的多酚氧化酶主要包括漆酶和酪氨酸酶。
现在大部分文献所说的多酚氧化酶一般是儿茶酚氧化酶和漆酶的统称。
多酚氧化酶与植物组织培养的酶促褐变以及果蔬品质密切相关。
因此，研究多酚氧化酶（酪氨酸酶）的抑制，对防止水果、蔬菜的褐变，化妆品中的皮肤增白，以及因酪氨酸酶催化产生黑色素引起的疾病（黄褐斑等色素沉着性皮肤病等），具有非常重要的治疗意义。
本实验选取蘑菇、茄子、马铃薯为实验材料，通过组织细胞破碎匀浆、过滤、离心、硫酸铵沉淀、透析等步骤获得PPO的粗酶液。
新鲜瓜类蔬菜中抗氧化物（总多酚）含量的测定一、实验目的瓜类蔬菜中的抗氧化物是一种重要成分，对人们的有防衰老减压的作用，抗氧化物含量也是评价蔬菜品质的重要指标之一。
本实验以目前广州菜市场的多种瓜类蔬菜为研究对象，测定其抗氧化物的含量。
二、实验材料与方法1实验材料材料：常见的瓜类蔬菜（黄瓜、丝瓜、节瓜、苦瓜、南瓜、白瓜）容器：100ml容量瓶数个、分光光度计，10ml离心管，离心机，250ml容量瓶试剂：50%丙酮（若果没有，改用70%乙醇或蒸馏水）、没食子酸、FC试剂，7.5%的Na2CO3溶液2实验方法2.1.提取液与测试液制备：称取各类鲜瓜肉1 g ，加入10ml的50%的丙酮（如果没有丙酮，可以加入10ml70%的乙醇，下同，若果没有乙醇，改用蒸馏水）研磨,洗入10ml离心瓶,4000r/min离心20min，取上清液1ml于100ml容量瓶用50%丙酮定容，备用。
2.2样品的测定：取1ml测试液，加入依次加入5.0ml的FC试剂，摇匀，反应3-8min内，加入4ml 7.5%的Na2CO3溶液，加水定容到刻度、摇匀。
室温下放置120min。
用10mm比色皿，在765nm波长条件下用分光光度计测定吸光度（A）。
2.3没食子酸工作溶液：称取0.001g 一水合没食子酸, 用50%的丙酮溶解、定容至100 mL, 此溶液质量浓度为1 000 mg/L。
分别吸取此溶液0.0、1.0、2.0 、3.0、4.0、5.0 mL至100 mL 容量瓶中, 用50%丙酮定容，此时所得一水合没食子酸标准溶液的质量浓度分别为0.0、10、20、30、40、50 mg/L。
备用。
2.4没食子酸标准曲线制作：取每个浓度没食子酸1ml，依次加入5.0ml的FC试剂，摇匀，反应3-8min内，加入4ml 7.5%的Na2CO3，溶液，加水定容到刻度、摇匀。
室温下放置120min。
用10mm比色皿，在765nm波长条件下用分光光度计测定吸光度（A）。
真空冷冻干燥桑葚果工艺参数优化李娇娇;郜海燕;陈杭君;房祥军【摘要】以新鲜桑葚果实为材料,研究桑葚果真空冷冻干燥工艺技术,以期获得最佳的加工工艺和参数,为脱水浆果产品工业化生产提供参考.通过单因素和正交试验设计,以复水比作为考查指标,研究了真空度、干燥时间以及处理量3个因素对真空冷冻干燥桑葚果品质的影响.结果表明,3个因素中干燥时间对果实品质影响最大,处理量次之,真空度最小,得出真空度40 Pa、干燥时间21 h、处理量为90 g时为最佳工艺条件.在此干燥工艺条件下,果实复水性最好,色泽L*,a*,b*保持率都在80％以上,且抗氧化活性物质维生素C、花色苷、总酚与新鲜果相比损失较小,保留率分别为82.38％,91.79％和87.50％.真空冷冻干燥是一种适合于果蔬的干燥方式,产品在色香味与营养成分等方面都保持较好.【期刊名称】《浙江农业学报》【年(卷),期】2015(027)006【总页数】6页(P1067-1072)【关键词】桑葚果;真空冷冻干燥;真空度;干燥时间;处理量【作者】李娇娇;郜海燕;陈杭君;房祥军【作者单位】安徽农业大学茶与食品科技学院,安徽合肥230036;浙江省农业科学院食品科学研究所浙江省果蔬保鲜与加工技术研究重点实验室,浙江杭州310021;浙江省农业科学院食品科学研究所浙江省果蔬保鲜与加工技术研究重点实验室,浙江杭州310021;浙江省农业科学院食品科学研究所浙江省果蔬保鲜与加工技术研究重点实验室,浙江杭州310021;浙江省农业科学院食品科学研究所浙江省果蔬保鲜与加工技术研究重点实验室,浙江杭州310021【正文语种】中文【中图分类】S663.9;TS255.42桑葚果营养价值丰富，含有丰富的维生素C(VC)、铁、钙等矿物元素以及多种氨基酸，还富含红色素[1]、花色苷以及白藜芦醇[2]等功能成分，具有补肝益肾、滋阴养血、降低血糖、清除自由基、防止血管硬化[3]等作用，被誉为“第三代水果”，也被国家卫生部列为药食两用水果[4]。
包装工程第45卷第7期·96·PACKAGING ENGINEERING2024年4月轻度失水对软枣猕猴桃机械伤和品质的影响于昕玉1，王庆萱1，王金燕1，魏宝东1，程顺昌1*，孙阳2*，李斌1（1.沈阳农业大学食品学院，沈阳110866；2.辽宁省经济林研究所，辽宁大连116031）摘要：目的探究轻度失水对软枣猕猴桃果实机械伤和品质的影响。
方法以软枣猕猴桃为材料，通过比较失水对运输模拟振动后果实机械伤的影响，以不失水模拟运输振动为对照，测定了处理后软枣猕猴桃果实贮藏过程中感官品质、营养品质、膜脂过氧化和活性氧代谢的变化情况。
结果与对照组相比，4%轻度失水处理有利于保持果实感官品质，使其腐烂率降低了10%、总酚含量提高了18.2%，抑制了其组织内丙二醛（MDA）含量和相对电导率的升高，保持贮藏过程中过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性。
结论4%轻度失水可能是通过降低了果实硬度从而降低腐烂率，保持较高活性氧清除能力，抑制成熟进程，从而利于缓解软枣猕猴桃果实采后运输机械伤发生，保持果实品质。
关键词：软枣猕猴桃；失水；机械伤；贮藏品质中图分类号：TB485.3 文献标志码：A 文章编号：1001-3563(2024)07-0096-08DOI：10.19554/ki.1001-3563.2024.07.013Effects of Light Water Loss on Mechanical Injury and Quality of Actinidia argutaYU Xinyu1, WANG Qingxuan1, WANG Jinyan1, WEI Baodong1,CHENG Shunchang1*, SUN Yang2*, LI Bin1(1. College of Food Science, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China;2. Liaoning Economic Forest Research Institute, Liaoning Dalian 116031, China)ABSTRACT: The work aims to explore the effects of light water loss on mechanical injury and quality of Actinidia arguta. The changes in sensory quality, nutritional quality, membrane lipid peroxidation and reactive oxygen metabolism of Actinidia arguta during storage were determined by comparing the effect of water loss on mechanical injury of fruit under simulated transportation vibration with the fruit under simulated transportation vibration without water loss as a control. Compared with the control group, the 4% light water loss treatment was beneficial in maintaining fruit sensory quality, reducing decay rate by 10% and increasing the total phenolic content by 18.2%. Water loss also inhibited the increase of malondialdehyde (MDA) content, and relative conductivity and maintained the activities of catalase (CAT), peroxidase (POD) and ascorbate peroxidase (APX) during storage. The 4% light water loss may have reduced the rate of decay by decreasing fruit hardness, maintaining a high scavenging capacity of reactive oxygen species and inhibiting the ripening process, thus facilitating the alleviation of mechanical injury occurrence in postharvest transportation of Actinidia arguta and maintaining fruit quality.KEY WORDS: Actinidia arguta; light water loss; mechanical injury; storage quality收稿日期：2023-05-30基金项目：辽宁省教育厅科学研究经费项目（LSNJC202010）；辽宁省“揭榜挂帅”科技项目（2021JH1/10400036）；辽宁省经济林研究所联合创新项目第45卷第7期于昕玉，等：轻度失水对软枣猕猴桃机械伤和品质的影响·97·软枣猕猴桃（Actinidia arguta），别名软枣子，属猕猴桃科、猕猴桃属大型落叶藤本植物[1]。
园艺学报 2011，38（2）：281–287 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@ 1–甲基环丙烯对番茄冷害的影响解 静，罗自生*（浙江大学食品科技系，杭州 310029）摘 要：为探讨1–甲基环丙烯（1-MCP）处理对番茄果实低温贮藏期间冷害和抗病性的影响，以绿熟期的‘浙杂205’番茄为试材，用1 μL · L-1的1-MCP在20 ℃下处理番茄果实6 h，然后将其置于3 ℃冷藏14 d后转入20 ℃后熟16 d。
结果发现，1-MCP处理加重了冷藏番茄后熟期间的冷害，但是延缓了硬度和可滴定酸度的下降，推迟了番茄红素的增加和乙烯峰的出现，诱导了多酚氧化酶和过氧化物酶活性，同时降低了几丁质酶和β–1,3–葡聚糖酶的活性。
虽然1 μL · L-1的1-MCP处理延缓了冷藏番茄果实的后熟，却加重了番茄后熟期间冷害和病害的发生，不适合在番茄冷藏中应用。
关键词：番茄；贮藏；1-MCP；冷害；抗病性中图分类号：S 641.2 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）02-0281-07Effect of 1-Methylcyclopropene on Chilling Injury of Tomato FruitXIE Jing and LUO Zi-sheng*（Department of Food Science and Technology，Zhejiang University，Hangzhou 310029，China）Abstract：In order to determine the effectiveness of 1-methylcyclopropene（1-MCP）on chilling injury and disease resistance of tomato fruit after cold storage. Green mature‘Zheza 205’tomato fruit was treated by 1 µL · L-1 1-MCP before being stored at 3 ℃ for 14 days then ripen at 20 ℃ for 16 days. The quality and physiology of tomato fruit were investigated. 1-MCP treatment not only promoted chilling injury and disease index，but also increased the activities of polyphenol oxidase and peroxidase. 1-MCP treatment retarded the peak of ethylene and the increase of lycopene，maintained higher content of titratable acidity and firmness. The activities of chitinase and β-1,3-glucanase were also inhibited by 1-MCP treatment. This study indicated that 1 µL · L-1 1-MCP delayed tomato fruit ripen，but promoted chilling injury and disease incidence，and showed that it could not be considered for commercial use in tomato fruit after cold storage.Key words：tomato；storage；1-methylcyclopropene；chilling injury；disease resistance果实冷害的发生和乙烯密切相关（Ciardi et al.，1997；Ben-Amor et al.，1999）。
工艺技术Process Technologydoi:10.16736/41-1434/ts.2021.04.034壳聚糖处理对鲜切金秋梨的防褐变效果研究Study on Anti-browning Effect of Chitosan Treatment on Fresh-Cut Jinqiu Pear◎ 李 丽，潘仕玉（凯里学院，贵州 凯里 556011）LI Li, PAN Shiyu(Kaili University, Kaili 556011, China)摘 要：本文以金秋梨为试验材料，研究1%的壳聚糖溶液浸泡处理对鲜切金秋梨的防褐变效果。
试验中用壳聚糖对鲜切金秋梨进行处理，晾干后用保鲜膜包裹，置于4℃下贮藏，每2 d测定维生素含量、总酚含量、多酚氧化酶（PPO）和过氧化物酶（POD）活性，贮藏末期（12 d），对褐变指数进行测定。
结果表明，壳聚糖处理能够延缓金秋梨贮藏过程中维生素和总酚含量的下降，抑制多酚氧化酶（PPO）和过氧化物酶（POD）活性，降低褐变指数（对照组褐变指数是壳聚糖处理组的1.9倍），起到有防褐变的效果。
壳聚糖防褐变效果的研究，为生物保鲜剂的研发提供了参考。
关键词：金秋梨；壳聚糖；防褐变Abstract：In this paper, Jinqiu pear was used as the test material to study the anti-browning effect of 1% chitosan solution on fresh-cut Jinqiu pear. In the experiment, fresh-cut Jinqiu pears were treated with chitosan, dried and wrapped in plastic wrap, and stored at 4℃. The vitamin content, total phenol content, PPO and POD activity were measured every 2 days, and browning was prevented at the end of storage. The index is measured. The results show that chitosan treatment can delay the decrease of vitamin and total phenol content during storage of Jinqiu pear, inhibit PPO and POD activity, and reduce browning index (the browning index of the control group is 1.9 times that of the chitosan treatment group), to have the effect of preventing browning. The research on the anti-browning effect of chitosan provides a reference for the research and development of biological preservatives.Keywords：Jinqiu pear; chitosan; anti-browning中图分类号：TS255.3鲜切果蔬是指将新鲜果蔬原料经过分级、整理、挑选、清洗、整修、去皮、切分和包装等一系列步骤，制成供人们立即食用的一种新式果蔬加工产品。
曹建康《果蔬采后生理生化实验指导》中关于多酚氧化酶活性、过氧化物酶活性、总酚含量和丙二醛含量的测定方法1.多酚氧化酶（PPO）提取及活力测定1.1基本原理：多酚氧化酶（PPO）是一种以铜为辅基的酶，能催化多种简单酚类物质氧化形成醌类化合物，醌类化合物进一步聚合形成呈褐色、棕色或黑色的聚合物。
在后熟衰老过程或采后的贮藏加工过程中，果蔬出现褐变与组织中的多酚氧化酶活性密切相关。
多酚氧化酶催化邻苯二酚氧化物形成的产物在420nm处有最大光吸收峰。
因此，可以用比色法测定多酚氧化酶的活性。
1.2实验试剂和仪器：a.仪器及用具：研钵、高速冷冻离心机、分光光度仪、计时器、移液器、离心管、试管、容量瓶（100mL、1000mL）b．试剂1）0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液母液A（200mmol/L醋酸溶液）：量取11.55mL冰醋酸，加蒸馏水稀释至1000mL。
母液B（200mmol/L醋酸钠溶液）：称取16.4g无水醋酸钠（或称取27.2g三水合乙酸钠），用蒸馏水溶解、定容至1000mL。
取68mL母液A和432mL母液B混合后，调节pH至5.5，加蒸馏水稀释至1000mL。
2）提取缓冲液（含1mmol PEG、4% PVPP和1% Triton X-100）称取340mg PEG 6000（聚乙二醇6000）、4%PVPP（聚乙烯吡咯烷酮，polyvinyl-polypyrrolidone），取1mL Triton X-100，用0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液溶解、稀释至100mL。
3）50mmol/L邻苯二酚溶液取275mg邻苯二酚，用0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液溶解、稀释至50mL。
1.3实验步骤1）酶液制备称取5.0g果蔬组织样品，置于研钵中，加入5.0mL提取缓冲液，在冰浴条件下研磨成匀浆，于4℃、12000×g离心30min，收集上清液即为酶提取液，低温保存备用。
不同厚度保鲜袋对寒富苹果保鲜效果影响姜溪雨;贾文韬;孙诗雨;朱莹;程顺昌;魏宝东【摘要】[目的]初步确定适合‘寒富’苹果低温贮藏的保鲜袋厚度.[方法]以采自沈阳地区的‘寒富’苹果为试材,在低温[(0±1)℃]下,用不同(0.01、0.02、0.04 mm)保鲜袋处理‘寒富’苹果,分别对果实硬度相关生理指标进行测定.[结果]各处理的果实硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、还原糖含量、总糖含量和总酚含量都随着冷藏期的延长而下降,冷藏240 d时,0.02 mm保鲜袋处理果实的上述指标均为最高,分别为6.0 kg· cm-2、11.9％、0.075％、9.8％、10.2％和0.35OD280·g-1FW,与其他处理相比,除可滴定酸差异达显著水平,其他指标均达极显著水平.用0.02 mm保鲜袋处理果实冷藏期间呼吸强度低于0.01 mm保鲜袋处理和0.04 mm保鲜袋处理,且显著减少了丙二醛积累[结论]用0.02 mm保鲜袋处理对于延缓果实的后熟衰老具有一定作用.【期刊名称】《园艺与种苗》【年(卷),期】2016(000)010【总页数】4页(P15-18)【关键词】寒富苹果;保鲜袋;品质;贮藏【作者】姜溪雨;贾文韬;孙诗雨;朱莹;程顺昌;魏宝东【作者单位】辽宁省沈阳市沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161;辽宁省沈阳市沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161;辽宁省沈阳市沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161;辽宁省沈阳市沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161;辽宁省沈阳市沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161;辽宁省沈阳市沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161;辽宁省沈阳市沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161【正文语种】中文【中图分类】S661.1寒富苹果是沈阳农业大学培育的抗寒优质苹果新品种。
随着寒富苹果的栽培面积扩大，产量增加，产地以外的各地对该品种的需求量也不断上升，对贮藏运输技术的要求也进一步提高。
植物体内多酚氧化酶活性的测定一、目的通过实验，掌握植物体内多酚氧化酶活性的测定方法。
二、原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在有氧的条件下，能使一元酚和二元酚氧化产生醌。
用分光光度法在525nm波长下测其吸光度，即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。
反应式如下：多酚氧化酶邻苯二酚（儿茶酚）＋1∕2 O2 ——————→ 邻醌＋H2O三、材料、仪器及试剂1. 材料：马铃薯块茎等2. 仪器：UV－1206或UV－1240分光光度计；离心机；恒温水浴；研钵或匀浆机；试管；移液管；纱布袋等。
3. 试剂：聚乙烯吡咯烷酮（PVP）；0.01mol·L－1 pH 6.5磷酸缓冲液；0.1m mol·L－1pH6.5磷酸缓冲液；0.05 mol·L－1 pH5.5磷酸缓冲液；30%饱和度硫酸铵；0.1 mol·L－1儿茶酚；20％三氯乙酸。
四、实验步骤1. 粗酶液的制备称取马铃薯块茎5g于研钵中，加入0.5g 不溶性聚乙烯吡咯烷酮（事先用蒸馏水浸洗，然后过滤以除去杂质）和100ml 0.1mol·L－1pH6.5磷酸缓冲液,磨成匀浆，用几层纱布袋过滤，滤液加入30%饱和度硫酸铵，离心除沉淀，上清液再加硫酸铵使达60％饱和度，离心收集沉淀。
将所得沉淀溶于2～3ml 0.01mol·L－1 pH6.5磷酸缓冲液中，即为粗制酶液。
2. 活性酶的测定在试管中加入3.9ml 0.05 mol·L－1 pH5.5磷酸缓冲液，1.0ml 0.1 mol·L－1儿茶酚在37℃恒温水浴中保温10min ，然后加入0.5ml酶液（可视酶活性增减用量），迅速摇匀，倒入比色杯内，于525nm波长处以时间扫描方式，在1～2min内测定吸光度变化（A）值。
五、酶活性的计算以每min内A525值变化0.01为1个酶活力单位，按下式计算多酚氧化酶的活力和比活性。
A 酶提取液总量（ml）酶活力（0.01A·min－1）＝———————×———————————0.01×反应时间测定时酶液用量（ml）A 酶提取液总量（ml）酶的比活性(0.01A·g－1Fw·min)＝—————————×——————————0.01×W×反应时间测定时酶液用量（ml）公式中：A —为反应时间内吸光度的变化值；W为样品鲜重（g）。
一、实验目的1掌握分光光度法测定多酚氧化酶活性的一般原理及操作技术方法。
2了解酶的活性与植物组织褐变以及生理活动之间的关系。
二、实验原理马铃薯不耐储藏，在加工过程中去皮切分后非常容易发生酶促褐变，使外观品质和营养价值大为降低，制约着马铃薯的开发利用。
酶促褐变是马铃薯加工产业必须解决的难题。
其中多酚氧化酶是导致马铃薯等果蔬发生酶促褐变的重要酶类。
多酚氧化酶活性大小直接影响酶促褐变程度。
多酚氧化酶（polyphenoloxidase, PPO）又称酪氨酸酶、儿茶酚酶、酚酶等.是自然界中分布极广的一种含铜氧化酶•普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中。
植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与02氧化形成醌，使组织形成褐变.以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。
研究多酚氧化酶的特性对食品的加工与保藏工艺有非常重要的意义。
因此，检测食品中多酚氧化酶具有重要意义。
多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在一定的温度、pH条件下，有氧存在时，能使催化邻苯二酚氧化生成有色物质，单位时间内有色物质在410 nm处的吸光度与酶活性强弱成正相关，在分光光度计410nm处使反应体系的0D值产生变化，通过0D值的变化确定PPO的酶活大小。
多酚氧化酶邻苯二酚（儿茶酚）+ 1 / 2O2 -------------------------------- 邻醌+ H2O三、试验材料、试剂及试验用品1. 材料：马铃薯块茎。
2. 仪器：分光光度计；离心机；恒温水浴；研钵；试管；移液管；容量瓶3 .试剂：0.1mmol/L 磷酸缓冲液（pH=7.0）；0.01mol/L 邻苯二酚；0.1mol/L 磷酸氢二钠；0.1mol/L 磷酸二氢钠；10mmol/L柠檬酸；10mmol/L抗坏血酸；10mmol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA ）；10mmol/L 亚硫酸钠四、实验方法：1•多酚氧化酶的提取取0.5g马铃薯块茎样品，加入预冷的磷酸缓冲液（pH7.0）3ml，研磨匀浆，转移到离心管中，再用7mL磷酸缓冲液冲洗研钵，合并提取液，在4C下离心（8000r/min）5min,取上清液为多酚氧化酶提取液，并量取粗酶液体积。
曹建康《果蔬采后生理生化实验指导》中关于多酚氧化酶活性、过氧化物酶活性、总酚含量和丙二醛含量的测定方法1.多酚氧化酶（PPO）提取及活力测定1.1基本原理：多酚氧化酶（PPO）是一种以铜为辅基的酶，能催化多种简单酚类物质氧化形成醌类化合物，醌类化合物进一步聚合形成呈褐色、棕色或黑色的聚合物。
在后熟衰老过程或采后的贮藏加工过程中，果蔬出现褐变与组织中的多酚氧化酶活性密切相关。
多酚氧化酶催化邻苯二酚氧化物形成的产物在420nm处有最大光吸收峰。
因此，可以用比色法测定多酚氧化酶的活性。
1.2实验试剂和仪器：a.仪器及用具：研钵、高速冷冻离心机、分光光度仪、计时器、移液器、离心管、试管、容量瓶（100mL、1000mL）b．试剂1）0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液母液A（200mmol/L醋酸溶液）：量取11.55mL冰醋酸，加蒸馏水稀释至1000mL。
母液B（200mmol/L醋酸钠溶液）：称取16.4g无水醋酸钠（或称取27.2g三水合乙酸钠），用蒸馏水溶解、定容至1000mL。
取68mL母液A和432mL母液B混合后，调节pH至5.5，加蒸馏水稀释至1000mL。
2）提取缓冲液（含1mmol PEG、4% PVPP和1% Triton X-100）称取340mg PEG 6000（聚乙二醇6000）、4%PVPP（聚乙烯吡咯烷酮，polyvinyl-polypyrrolidone），取1mL Triton X-100，用0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液溶解、稀释至100mL。
3）50mmol/L邻苯二酚溶液取275mg邻苯二酚，用0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液溶解、稀释至50mL。
1.3实验步骤1）酶液制备称取5.0g果蔬组织样品，置于研钵中，加入5.0mL提取缓冲液，在冰浴条件下研磨成匀浆，于4℃、12000×g离心30min，收集上清液即为酶提取液，低温保存备用。
2）活性测定取一支试管，加入4.0mL 50mmol/L、pH5.5的乙酸-乙酸钠缓冲液（2.0mL 0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液加蒸馏水稀释4.0mL）和1.0mL 50mmol/L邻苯二酚溶液，最后加入100μL 酶提取液，同时立即开始计时。
将反应混合液倒入比色杯中，置于分光光度计样品室中。
以蒸馏水为参比，在反应15s时开始记录反应体系在波长420nm处吸光度值，作为初始值，然后每隔1min记录一次，连续测定，至少获取6个点的数据。
重复三次。
1.4数据处理：记录反应体系在420nm处的吸光值，制作OD420值随时间变化曲线，根据曲线的初始线性部分（从时间I到时间F）计算每分钟吸光度值变化ΔOD420。
ΔOD420=OD420F−OD420It F−t I式中ΔOD420——每分钟反应混合液吸光度变化值；OD420F——反应混合液吸光度终止值；OD420I——反应混合液吸光度初始值；t F——反应终止时间，min；t I——反应初始时间，min。
以每克果蔬样品（鲜重）每分钟吸光度变化值增加1为1个活性单位，单位是ΔOD420/min·g。
计算公式：U=ΔOD420×VV s×m式中V——样品提取液总体积，mL；V S——测定时所取样品提取液体积，mL；m——样品质量，g。
2.过氧化物酶（POD）提取及活力测定2.1实验试剂和仪器a．仪器及用具研钵、高速冷冻离心机、分光光度仪、计时器、移液器、离心管、试管、容量瓶（50mL、100mL 、1000mL）。
b．试剂1）0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液母液A（200mmol/L醋酸溶液）：量取11.55mL冰醋酸，加蒸馏水稀释至1000mL。
母液B（200mmol/L醋酸钠溶液）：称取16.4g无水醋酸钠（或称取27.2g三水合乙酸钠），用蒸馏水溶解、定容至1000mL。
取68mL母液A和432mL母液B混合后，调节pH至5.5，加蒸馏水稀释至1000mL。
2）提取缓冲液（含1mmol PEG、4% PVPP和1% Triton X-100）称取340mg PEG 6000（聚乙二醇6000）、4%PVPP（聚乙烯吡咯烷酮，polyvinyl-polypyrrolidone），取1mL Triton X-100，用0.1mol/L、pH5.5乙酸-乙酸钠缓冲液溶解、稀释至100mL。
3）25mmol/L愈创木酚溶液取320μL愈创木酚，用50mmol/L、pH5.5乙酸缓冲液稀释至100mL。
4）0.5mol/L H2O2溶液取1.42mL 30% H2O2溶液（30% H2O2溶液的浓度约为17.6mol/L），用50mmol/L、pH5.5乙酸缓冲液稀释至50mL，现用现配，避光保存。
2.2实验步骤1）酶液制备称取5.0g果蔬组织样品，置于研钵中，加入5.0mL提取缓冲液，在冰浴条件下研磨成匀浆，于4℃、12000×g离心30min，收集上清液即为酶提取液，低温保存备用。
2）活性测定取一支试管，加入3.0mL 25mmol/L（1.5mL 0.5mol/L H2O2溶液加蒸馏水稀释至3.0mL）愈创木酚溶液和0.5mL酶提取液，再加入200μL 0.5mol/L H2O2溶液迅速混合启动反应，同时立即开始计时。
将反应混合液倒入比色杯中，置于分光光度计样品室中。
以蒸馏水为参比，在反应15s时开始记录反应体系在波长470nm处吸光度值，作为初始值，然后每隔1min记录一次，连续测定，至少获取6个点的数据。
重复三次。
3.总酚含量测定参照曹建康《果蔬采后生理生化实验指导》中关于总酚的测定，单位：mg/100g。
此方法仅能判断测定样品之间总酚、类黄酮和花青素的相对含量。
如果需要测定准确含量，需要与标准曲线进行比较。
可以用不同浓度的没食子酸制作标准曲线，计算总酚物质含量，用μmol/g m F表示。
1.仪器及用具研钵、具塞刻度试管（20mL）、滤纸、漏斗、移液器、紫外可见分光光度计。
2.试剂1%（体积分数）盐酸-甲醇溶液。
取0.1mL浓盐酸（分析纯），加入到99mL甲醇中，摇匀，于4℃预冷。
3.实验步骤1）提取称取2.0g果肉组织，加入少许经预冷的1% HCl-甲醇溶液，在冰浴条件下研磨均匀后，转入20mL刻度试管中。
用1% HCl-甲醇溶液冲洗研钵，一并转移到试管中，定容至刻度，混匀，于4℃避光提取20min，期间摇动数次，然后过滤，收集滤液待用。
2）测定以1% HCl-甲醇溶液作为空白参比调零，取滤液分别于波长280nm、325nm、600nm和530nm 处测定溶液的吸光度值，重复三次。
实验结果与计算4.丙二醛（MDA）测定4.1实验基本原理果蔬组织在后熟衰老过程中，遭受病害、冷害或其他伤害等逆境胁迫时，细胞中产生的超氧阴离子自由基和羟基自由基，能诱导膜脂中不饱和脂肪酸发生过氧化作用，产生脂质自由基。
脂质自由基可以进一步诱导膜脂的过氧化作用，导致细胞膜透性增加，细胞受到损伤或死亡。
丙二醛（MDA）是膜脂过氧化作用的主要产物之一，通常利用它的含量作为脂质过氧化指标，反应膜脂过氧化程度反应细胞膜脂过氧化程度，并且含量越高，表明果蔬越衰老加剧。
丙二醛可以与蛋白质、核酸反应，改变这些大分子的构型，或使之产生交联反应，从而丧失生物功能。
MDA还可以使纤维素分子间的桥键松弛，或抑制蛋白质的合成。
因此，MDA的积累能对果蔬细胞质膜和细胞器造成一定的伤害。
根据相关反应原理，用下列公式消除由蔗糖引起的误差，c(μmol/L)=6.45×（OD532-OD600）-0.56×OD450式中OD450、OD532、OD600——分别代表450nm、532nm、600nm波长处的吸光度值。
运用上式可直接求得果蔬组织提取液中的MDA浓度，从而进一步计算出果蔬组织中MDA 的含量。
4.2实验试剂和仪器a．仪器及用具研钵、试管、移液器、恒温水浴锅、离心机、分光光度计、电子天平、离心管。
b．试剂1）100g/L三氯乙酸（TCA）溶液取10g三氯乙酸，用蒸馏水溶解、稀释至100mL。
2）6.7g/L硫代巴比妥酸（TBA）溶液称取0.67g硫代巴比妥酸，用100mL 0.05mol/L NaOH溶液溶解。
4.3实验步骤1）称取1.0g果蔬样品，加入5.0mL 100g/L TCA溶液，研磨匀浆后，于4℃、10000×g离心20min，收集上清液，低温保存备用。
2）取2.0mL上清液（对照空白管中加入2.0mL 100g/L TCA溶液代替提取液），加入2.0mL 0.67% TBA，混合后在沸水浴中煮沸20min，取出冷却后再离心一次。
分别测定上清液在450nm、532nm和600nm波长处的吸光度值。
重复三次。
4.4数据处理根据溶液的吸光度值，按照前面的公式计算出反应混合液中丙二醛含量，再按照下式计算出每克果蔬样品（鲜重）中丙二醛的含量，以μmol/g m F表示。
计算公式：（μmol/g m F）丙二醛含量=c×VV S×m×1000式中c——反应混合液中丙二醛浓度，μmol/L；V——样品提取液总体积，mL；V S——测定时所取样品提取液体积，mL；m——样品质量，g。
