小柴胡汤与四物汤合煎改善血虚小鼠造血机能的实验研究_陈钢

收稿日期:2001 01 20基金项目:国家自然科学基金资助项目No.39770887药理四物汤对环磷酰胺所致血虚证小鼠造血细胞作用的研究马增春,高 月,刘永学,谭洪玲,路晓钦,张 立(军事医学科学院放射医学研究所,北京 100850)摘要:探讨四物汤治疗环磷酰胺所致小鼠血虚证的作用机理。

腹腔注射环磷酰胺制成小鼠血虚证模型;测定小鼠外周血象;骨髓细胞集落形成;CD34+细胞在骨髓有核细胞中的比例;小鼠胸腺指数。

结果表明四物汤具有明显促进骨髓造血和增强免疫的作用,并可升高血虚证小鼠的外周血象。

四物汤增强免疫、促进造血可能是四物汤治疗小鼠血虚证的机理之一。

关键词:四物汤;血虚证;环磷酰胺;造血;CD34+中图分类号:R285 5 文献标识码:B 文章编号:1005 9903(2001) 05 0013 03Effects of Siwu Tang on Medullary Hematopoiesis in Mice of BloodDeficiency Induced by C yclophosphamideMA Zeng chun ,G AO Yue ,LIU Yong xue ,TAN Hong ling ,LU Xiao qin ,Z HANG Li(Instutute o f Radiation Medicine ,Beijing 100850,China )Abstract :To study the effects of Siwu Tang on the mice of blood deficienc y induced by cyclophosphamide,we e m ployed the methods of circulating blood cells detec tion by microcellc ounter,flo w c ytometric enumeration of CD34+himato poietic stem and progenitor cells by double fluorescent labeling.The results showed Siwu Tang promoted the recovery of stem and progenitor cells and circulating WBC on the blood deficient mice,and enhanced immune function.proliferative effect of Siwu Tang on bone marrow may play a key role in improvement of hematopoiesis with Siwu Tang treating blood deficient mice.Key words :Si w u Tang;blood deficiency;c yclophospha mide;hematopoiesis;CD34+血虚证是中医临床常见的证候群之一,制作血虚证动物模型的常用方法有射线照射、药物诱发和放血等。

小鼠血虚证造模方法的比较及四物汤的反证分子生物实验研究部分2002207122 岑川第四组摘要：目的：观察和比较乙酰苯肼和环磷酰胺两种不同造小鼠血虚模型方法的差异性和检查同一基因在不同动物模型中的表达差异以及四物汤治疗的效果。

实验方法：通过正常组、乙酰苯肼组、环磷酰胺组、四物汤组这四组组织切片的观察比较来评价血虚造模方法，及通过RT-PCR法来检测肝组织同一基因的表达差异。

结果：环磷酰胺和乙酰苯肼均有造血虚的作用，四物汤促进血虚证小鼠肝组织基因的表达可能是其生血作用的机制之一。

关键词：血虚环磷酰胺乙酰苯肼四物汤RT-PCR法基因表达近年来,随着对血虚证研究的不断深入,对血虚证动物模型的研究也有新的进展。

尽管动物模型在当前还不能准确反映人体血虚证的全部实质,但作为替代实验对象,已在血虚证发病机制探讨及中药治疗研究等方面发挥了重要作用。

乙酰苯肼和环磷酰胺造模都是血虚造模常用的发法，但由于机制不同，所以有各自不同的特点。

一实验器材和实验方法75%乙醇、氯仿、异丙醇、Trizol、RNAsin(40Ｕ/u)、DNTP（10mＭ）、EB（2mg/ml）、5*TBE、琼脂糖、上下游引物、随机引物（100ug／ul）、20，200，1000u移液枪、电动匀浆机及匀浆管、冷冻式离心机、离心管、电泳仪、PCR仪、剪、镊等正常小鼠组、环磷酰胺造模小鼠组、乙酰苯肼造模小鼠组、四物汤治疗小鼠组各十只煎药：四物汤（生地. 白芍. 当归. 川芎各3g) ,共煎成药汁130ml灌胃给药：治疗组小鼠每天给药四物汤一次，共七天。

前两天每次每只小鼠给药1ml，后五天每次每只小鼠给药0.5ml，其余３组小鼠后四天每只加灌0.5ml生理盐水。

RNA 提取1.取各组实验组任一只小鼠肝组织50-100mg,剪碎，加入1mlTorizol液，快速电动匀浆2.22度，静置5min3.加入氯仿0.2ml,颠倒15s4.22度，静置3min5.离心：4度，15000转/分* 15min6.取上清液0.5ml( 含提取的RNA）7.加入适量异丙醇，混匀8.22度，静置10min9.离心：4度，15000转/分* 10min10.弃上清液11.加入1ml4度75%乙醇（提纯RNA，释放异丙醇）12．离心：４度，10000转／分*５min13．弃上清液，真空干燥５min14．用25ul水溶解，－７０度保存反转录５＊ｂｕｆｆｅｒ ４μlＤＮＴＰ（１０ｍＭ） ２μl随机引物（１００ｕｇ／μl） １μlＤＴＴ（１００ｍＭ） １μlＲＮＡｓｉｎ（４０Ｕ／μl） １μl总ＲＮＡ（２ｕｇ）水 至１８μl６５度，５分钟，冰上，加ＲＮＡｓｉｎ１μl，Ｍ－ＭＬＶ１μl。

四物汤及其各单药对辐射小鼠骨髓造血的调节作用高月;马增春;陈鹏;邱成斌;谭洪玲;路晓钦【期刊名称】《中药新药与临床药理》【年(卷),期】2001(12)5【摘要】目的：研究四物汤及其各单药对射线诱发小鼠血虚证骨髓造血的调节作用。

方法：采用３．５或５．５Ｇｙ～（６０）Ｃｏγ射线全身一次性照射，制成血虚证模型小鼠，在不同时间点观察四物汤及单药对ＮＦＳ－６０细胞、外周血象、造血祖细胞集落培养及骨髓细胞凋亡的影响。

结果：四物汤、地黄、当归能升高辐射小鼠外周血中的白细胞，增加造血祖细胞集落数，刺激ＮＦＳ－６０细胞增殖；白芍则降低外周血象、抑制ＮＦＳ—６０细胞增殖；川芎能增加造血细胞集落数，抑制骨髓细胞凋亡。

结论：四物汤及各单药作用的靶点和强度不同，其变化规律符合中医的君臣佐使理论。

【总页数】4页(P336-339)【关键词】四物汤;药理学;血虚;疾病模型;中药【作者】高月;马增春;陈鹏;邱成斌;谭洪玲;路晓钦【作者单位】军事医学科学院放射医学研究所;江西宜春市中医院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.四物汤及其单药对血虚证小鼠造血的改善作用及其机制初探 [J], 路晓钦;高月;谭洪玲;刘永学;马增春2.rhG-CSF大剂量单次给药对非清髓骨髓移植小鼠造血功能重建的影响 [J], 王俊可;韩阿如娜;王丽梅;余祖胤;徐铁柱;杨超;善亚君;崔宇;柳晓兰3.四物汤配方颗粒与四物汤对骨髓抑制小鼠造血损伤恢复作用的比较研究 [J], 陈志伟;祝彼得;许惠玉;刘曾敏;陈杏花;秦建4.四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血功能调控的实验研究 [J], 陈志伟;许惠玉;刘曾敏;祝彼得5.四物汤及各单味药的含药血清对粒系-巨系造血祖细胞集落(CFU-GM)的影响 [J], 卢兖伟;袁久荣;孙兆贵;王磊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

血虚动物造模方法及四物汤的补血作用研究胡怡芳[摘要]：对近二十年来的血虚动物模型制作方法进行概述，主要集中在60Coγ射线造模法，化学药物造模，放血法，免疫介导法及复合造模法，各种方法均有优缺点，很难找出一种最有效的方法，只能根据研究的需要选择最合适的方法，应不断改进和研究，以找到最接近临床的造模方法。

四物汤是临床最常用的补血方，具补血调血功能，近年来，国内外很多学者应用现代科学方法对去进行了多方面的研究。

[关键词]：血虚证，造模法，动物模型，四物汤[引言]：随着科学技术的日益发展，实验动物学已经成为现代科学的重要组成部分，每一项重大科研成果的取得都与实验动物的应用密不可分。

同时中医药的研究也在不断发展，用现代科学方法研究中医基础理论的方法越来越受到重视，除了从临床对人体的直接研究，实验动物的应用也越来越广泛，中医证候模型建立的研究也越来越趋于成熟，现就中医血虚动物造模方法及四物汤的补血效果概述如下：[正文]：一.血虚动物造模方法：1．60Coγ射线造模法通过60Coγ射线照射动物全身，使动物造血干细胞减少，白细胞数量下降和骨髓损伤。

多选用C57BL/6J和昆明种小鼠，多为雌性，体重多在18~22g，多为全身一次性照射，距离为4m，剂量为3.5Gy，剂量率在1.27~1.701之间，时间160s左右。

[1-5] 刘永学等[6]对经不同剂量（2.5、5.5、7.5Gy）γ射线照射后，小鼠出现不同程度的血虚症作了研究，照后各剂量组小鼠的骨髓和脾脏细胞均出现了典型的凋亡变化，细胞凋亡越明显，小鼠血虚症越严重，但造血细胞凋亡出现的时间与血虚症的程度无关，无论照射剂量大小，调亡都发生在血虚症出现的早期。

2.化学药物造模2．1乙酰苯肼（APH）：APH为强氧化剂，较专一的对红血球有缓慢的进行性氧化损伤作用，尤其是干扰了红血球内的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，促进血红蛋白变形而形成海氏小体，使红血球易于崩解，最终造成机体的溶血性贫血。

zone by administration by gavage every rat for once every day to prepare the model for8weeks，and at the same time Liuwei Dihuang Wan was taken at dose of15g/kg，25g/kg and35g/kg by administration by gavage while model building．It was detected the levels of fasting blood glucose（FBG），fasting insulin and adiponectin in serum by ELISA，and the insulin sensitivity index（ISI）and insulin resistance（HO-MA-IR）index were calculated after eighth weeks．Results：Compared with model group，Liuweidihuamg Wan could loss the level of FBG （all P＜0．01），elevate the level of adiponectin（all P＜0．01），regulate elevated insulin to normal level（all P＜0．01）．And ISI and HO-MA-IR index were of significant difference（all P＜0．01）as compared with model group．Conclusion：It is demonstrated that Liuweidihuang Wan can regulate blood glucose，adiponectin，insulin to normal level，raise insulin sensitivity and drop HOMA-IR while these were at patho-logical state，which suggested that Liuweidihuang Wan can treated T2DM．Key words Liuweidihuang Wan（六味地黄丸）；type2diabetes mellitus；adiponectin；insulin；insulin resistance四物汤及其活性单体对血虚证小鼠的补血作用*郭平1，王升启2（1山东中医药大学，济南250355；2军事医学科学院，北京100850）摘要目的：研究四物汤及其活性单体芍药苷和川芎嗪对辐射致血虚证小鼠的补血作用。

血虚证小鼠造模及四物汤治疗实验——中药制备及分子生物学指标检测程韵 2002207120 02中基摘要：本次实验是要比较乙酰苯肼和环磷酰胺制造的小鼠血虚证模型的效果，并且用四物汤治疗乙酰苯肼造模组，来证明四物汤疗效并反证乙酰苯肼造血虚效果。

本组实验以RT-PCR 方法检验小鼠肝细胞白蛋白和葡萄糖醛酸酶基因表达的改变；并观察肝、胃、小肠组织切片的病理改变。

小鼠肝细胞白蛋白组电泳结果亮度显示：四物汤治疗组＞乙酰苯肼造模组＞环磷酰胺造模组＞正常对照组，葡萄糖醛酸酶组电泳结果亮度显示除正常组稍亮外其他各组均不明显。

四物汤对乙酰苯肼造模组小鼠的基因表达有部分影响。

组织切片观察除了肝组织在四物汤治疗组水肿有一定程度减轻，其它组织无明显变化。

关键词：血虚证模型乙酰苯肼环磷酰胺四物汤 RT-PCR引言：血虚证是中医的基础病证,主要表现为营血亏损。

而血虚证动物模型是阐明血虚证的本质和病理生理,以及中药治疗血虚证的机理的不可缺少的途径。

血虚证动物模型的造模方法有60 Co γ射线造模法、化学药物造模法、病因造模法和免疫介导造模法，其中化学药物造模法可选用乙酰苯肼或环磷酰胺来造模。

此次实验选取乙酰苯肼和环磷酰胺进行造模，并对乙酰苯肼造模组进行四物汤治疗，观察各组小鼠的病理，生理，生化和分子生物学指标，比较两种造模方法的效果。

本组在此次实验中的任务主要是中药制备及以RT-PCR方法检验小鼠肝细胞白蛋白和葡萄糖醛酸酶基因表达的改变情况。

一．材料与方法：（一）动物及处理：实验选用昆明种雄性小鼠40只（平均体重约25g）。

随机分成四组：正常组、乙酰苯肼组、环磷酰胺组和四物汤组。

每组10只，分笼饲养于内铺垫料的塑料笼，每组1笼。

每天自食足量普通颗粒饲料。

（二）中药制备及给药：生地、白芍、当归、川芎各20g（上海中医药大学综合实验室采购），冷水浸半小时，煎取药汁后按照所需药物浓度比例浓缩为670ml。

取100ml药物放置于动物房冷藏，每日灌胃给药。

朱力军,路晓钦,谭洪玲,肖成荣,高月(军事医学科学院放射医学研究所,北京100850)摘要:[目的]探讨四物汤及其两味药组方治疗血虚证小鼠的补血作用机制。

[方法]采用60Co 射线全身照射制成实验性小鼠血虚证模型,测定外周血象、CD34+细胞、细胞周期、NFS60细胞增殖以及造血干祖细胞的增殖情况。

[结果]1)四物汤在各指标上都优于其两味药组方;(2)两味药组方中,当归相关组对CFU -E,CFU -M ix,CFU -GM 的促进作用较好,且有升高白细胞的作用;而地黄相关组对CFU -E 有增殖作用;白芍相关组能明显促进NFS 60细胞的增殖;川芎相关组增加CD34抗原表达,并促进细胞由G 0/1期向S 期转化,其作用和所含的川芎嗪有关。

[结论]四物汤全方优于两味药组方,各组方的作用靶点和作用强度各有异同。

关键词:四物汤;血虚证;CD34+细胞;NFS 60细胞中图分类号:R285 5文献标识码:B文章编号:1672-1519(2003)04-0058-04四物汤及两味中药组方对 射线照射所致血虚证小鼠作用机制的研究血虚证是中医临床常见的证候,而四物汤临床上主要用于补血、活血、调经,是中药方剂中的经典名方,也是治疗血虚证的常用药。

本实验室已成功的通过 射线照射,制成了实验性血虚证小鼠模型,并对四物汤及其单药、3味药组方进行了系统的观测[1-3]。

本研究着重对全方及两味药组方对该血虚证小鼠的作用机制进行了深入探讨。

1实验材料1.1动物C57BL/6J 小鼠120只,6~8周龄,体质量(20 2)g ,雌性;由军事医学科学院实验动物中心提供,常规饲养。

1.2主要试剂与仪器FITC 标记的大鼠抗小鼠CD34抗体及对照抗体;流式细胞仪(美国FACS Cabiur); 剂量辐射检测控制仪(军事医学科学院QT -3型优质OCL);s y sm ex 820自动血球计数仪。

1.3药物制备四物汤按 太平惠民和剂局方 规定的剂量称取组成,熟地黄30g ,当归20g ,白芍20g ,川芎12g ,共计82g /d 。

四物汤对血虚大鼠血管内皮损伤的干预作用的开题报告
一、研究背景
四物汤是一种传统中药方，由当归、熟地黄、白芍、川芎组成，常用于治疗血虚证。

研究表明，四物汤具有调节免疫功能、调节血流、改善微循环等多种作用。

有研究证明，四物汤能够改善血管内皮功能，从而保护心血管系统健康。

然而，目前对于四物汤对血管内皮损伤的干预作用的研究还比较有限。

二、研究目的
本研究旨在探究四物汤对血虚大鼠血管内皮损伤的干预作用及其机制。

三、研究内容
1.建立血虚大鼠模型。

2.将血虚大鼠随机分为四物汤组和对照组，给予相应处理。

3.分别检测四物汤组和对照组血管内皮功能的变化，包括血浆一氧化氮水平、血管内皮细胞增殖、凋亡等指标。

4.采用Western blotting和RT-PCR技术检测四物汤组和对照组内皮细胞相关蛋白和基因的表达，以探究其机制。

四、研究意义
本研究对于探究四物汤对血管内皮损伤的干预作用，以及其机制具有重要的理论和应用价值。

为进一步明确四物汤的药理作用和临床应用奠定基础。

四物汤配方颗粒与传统饮片煎剂治疗血虚症患者疗效观察张岳【摘要】Objective:To compare clinical effects of formula granules and traditional sliced of Siwu decoction in treatment of blood deficiency. Methods:83 patients with blood deficiency were divided into treatment group(42 cases)and control group (41cases). The treatment group was treated with formula granules of Siwu decoction,while the control group was given the traditional sliced of Siwu decoction. The medicines were used twice a day at the morning and night with a dose of medicine at the right amount. The treatment lasted three weeks. No other treatments or drugs were used during the treatment. The efficacies of two groups were ob-served and compared. Results:After the treatment,in the treatment group,8 patients were cured,20 patients were effective and 13 patients were improved with a total effective rate of 97. 62% ;in control group,10 patients were cured,19 patients were effective and 11 patients were improved with the total effective rate of 97. 56% ;and the differences were not significant(P>0. 05). Conclusions:In the treatment of blood deficiency,the formula granules and traditional sliced of Siwu decoction have the similar effects.%目的：对比四物汤的配方颗粒与传统饮片煎剂治疗血虚症患者的临床疗效。