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两种叶绿素提取方法的比较作者：徐新娟李勇超张尚攀沈琦张振国来源：《湖北农业科学》2013年第21期摘要：以5种植物叶片为试验材料，采用分光光度法研究了4种提取溶剂及两种提取方法对植物叶片叶绿素提取量的影响。
结果表明，两种提取方法中，丙酮与乙醇的混合溶剂提取整体上好于丙酮、乙醇单独提取的效果；浸提法中，浸提时间为18 h和24 h效果较好，且浸提时间的增加降低了提取溶剂的影响。
生产上采用混合溶剂提取时，浸提18 h是较为理想的选择。
关键词：叶绿素；提取方法；比较分析中图分类号：Q244；TS202.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）21-5303-02Comparative Analysis of Two Extraction Methods of ChlorophyllXU Xin-juan，LI Yong-chao，ZHANG Shang-pan，SHEN Qi，ZHANG Zhen-guo（Henan Institute of Science and Technology， Xinxiang 453003，Henan，China）Abstract： With five plant leaves as the experimental material， the effects of four extraction solvents and two extraction methods on chlorophyll content were studied by spectrophotometry. The results showed that the extraction efficiencies of chlorophyll using mixed solvent were better than using acetone or ethanol alone. The results were better with the extraction time 18 h and 24 h，respectively， and the effect of extraction solvent was reduced with increasing extraction time. In production， extraction time of 18 h is an ideal choice with mixed solvent as extraction solvent.Key words： chlorophyll； extraction methods； comparative analysis植物叶片叶绿素含量与光合作用关系密切，叶绿素含量的测定无论是在生理上还是在选育品种以及抗性研究等方面都很有必要性。
树木叶片叶绿素含量三种测定方法的比较马宗琪;崔静;王秀;刁润洁;傅雁春;杨文;王修顺;邱念伟【期刊名称】《林业科技》【年(卷),期】2016(0)5【摘要】丙酮浸提法测定油松和杨树叶片叶绿素含量比丙酮研磨提取法和二甲基亚砜-丙酮两步快速提取法偏低10%～30%；叶绿素 a/b 比也存在一定差异。
而对于小麦和油菜三种方法测定结果基本一致。
树木叶片叶绿素含量结果偏低的主要原因是丙酮浸提后的叶片材料中仍有少量褐色(杨树)或浅黄色物质(油松)。
上述残余材料中的色素在65℃下用二甲基亚砜再次浸提，或者常温下用二甲基亚砜进行研磨提取，测定吸光度发现上述残余材料中的色素对叶绿素 a 和 b 的吸光度具有显著干扰，导致吸光度增大，测定结果偏高。
丙酮浸提法不会将干扰物质溶出，或者溶出较少，叶绿素含量测定最为准确，适合含有次生有色物质的树木叶片的叶绿素含量测定。
%Our results in this paper showed that chlorophyll content of Pinus trees and Populus trees determined by direct extraction method with acetone was lower 10%~30% than that of the grinding method with acetone or two-step extraction with dimethyl sulfoxide (DMSO) and acetone. The ratio of chlorophyll a to chlorophyll b also had obvious variability among the three methods. However, there was no obvious difference among three method in chlorophyll content of wheat and rape. Small amount of brown substance in Populus trees leaves and yellow substance in Pinus trees leaves were the main causes resulting in the low chlorophyll content determined by direct extraction method. The residualsubstance in above plant material were extracted with DMSO at 65℃ or extracted with DMSO by grinding method, and their absorbance at 663.6 nm, 646.6 nm were measured. The absorbance results showed that the residual substance in leaves had obvious interference on the absorbance of chlorophyll a and chlorophyll b, which results in an increase of chlorophyll absorbance and measured results. The colored secondary substances could not be extracted by direct extraction method with acetone, or little be extracted. So the measured results of chlorophyll content by direct extraction method with acetone is the most accurate method among the three methods. Chlorophyll content of tree leaves with colored secondary substances should be determined using birect extraction method.【总页数】4页(P42-45)【作者】马宗琪;崔静;王秀;刁润洁;傅雁春;杨文;王修顺;邱念伟【作者单位】曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜 273165;曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜 273165;曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜273165;曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜 273165;曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜 273165;曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜 273165;曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜 273165;曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜 273165【正文语种】中文【中图分类】S718.43;Q945.11【相关文献】1.葡萄叶片叶绿素含量测定方法比较 [J], 潘静;韩蕾;;2.柿树叶片叶绿素含量测定方法比较研究 [J], 刘遵春;冯爱英;扈惠灵3.葡萄叶片叶绿素含量测定方法比较 [J], 潘静;韩蕾4.柿树叶片叶绿素含量测定方法比较研究 [J], 刘遵春;冯爱英;扈惠灵;5.SO_2污染对树木叶片中可溶性糖及叶绿素含量的影响 [J], 童贯和因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
叶绿素的不同提取法的提取效果比较中国农业仪器网更新时间：2010-9-28 15:34:23阅读23次叶绿素的不同提取法的提取效果比较叶片中叶绿素分子结构与人体内的血液分子相似，非常易溶入红细胞中，能抑制细菌、排出毒素，有“绿色血液”之称。
同时叶绿素含量的测量能让我们了解植物缺氮的情况，叶绿素又是影响植物光合作用的重要因素，叶绿素的测量可以使用专业的测量仪器来进行快速的测量，比如使用便携式叶绿素测定仪来进行测量，同时叶绿素还可以使用常规的方法来进行，先对叶片进行提取在进行测量，不过在进行叶片提取的时候，提取方法不同还是会影响结果的。
叶绿素的提取方法有三种，分别为研磨法、浸提法、冷冻浸提法对于叶绿素a、b提取结果表现一致，以冷冻浸提法提取效果最好，其次为研磨法，再次为浸提法。
浸提法提取效果最差，一方面可能提取不完全，也可能在提取的过程中叶绿素有分解，相对冷冻浸提法，由于经过了冷冻过程破碎了细胞，提取完全而且提取过程快减少了叶绿素分解，效果最好。
研磨法在研磨、过滤等操作的过程中有损失，而且提取时间过程长造成弱光下叶绿素的分解，效果不及冷冻浸提法。
叶绿素含量在提取过程中会造成一定的误差，而且测量的时间花费比较的久，同时在进行测量的时候必须将叶片采集下来之后才能进行测量，对植株造成一定的影响，也不方便在室外进行操作，而使用手持叶绿素仪就可以避免以上的问题，操作快捷，方便在室外进行操作，同时有时无损伤的进行测量。
比较了不同有机溶剂直接浸提法和Arnon法从冷冻处理前后的玉米叶片中提取叶绿素的效率。
结果表明:在室温(10℃)下浸提和冷冻处理后浸提,丙酮和乙醇(甲醇)的混合液比同类含水的提取液要好,其中丙酮∶乙醇为11∶提取液提取叶绿素快而完全,表现最好;丙酮∶乙醇∶水为4.54∶.51∶提取液最慢,丙酮∶甲醇∶水为 4.54∶.51∶提取液提取量最少;冷冻处理后叶绿素效率明显提高,其中丙酮∶乙醇为11∶提取液提取速度加快最明显。
叶绿素含量的测定方法
以下是 8 条关于叶绿素含量测定方法：
1. 嘿，你知道吗，分光光度法就可以测定叶绿素含量哦！就像用魔法镜一样，能把叶绿素的秘密都照出来。
比如说，在实验室里，小明拿着样本放在分光光度计前，专注地操作着，那认真的样子，简直酷毙啦！
2. 还有一种方法叫荧光分析法呢！哇哦，这就像是给叶绿素装上了信号灯，一测就知道它的情况啦！想象一下，小红在那里调试着仪器，期待着结果，那心情肯定很激动呀！
3. 说起来，高效液相色谱法也是很厉害的哟！这不就是给叶绿素来个精准的“体检”嘛！记得有一次，小王看着色谱图出来，脸上露出了惊喜的表情，嘿，肯定是发现了什么有趣的结果！
4. 重量法也能行呀！这就像称一称叶绿素有多重一样。
就像那次和小李一起做实验，看着天平上的数字，我们都在猜叶绿素到底有多少呢！
5. 浸提法也不错呢！感觉就像是给叶绿素泡个舒服的“澡”，然后就能知道它在里面的情况。
那次和朋友们一起用这个方法，大家边做边讨论，可有意思了！
6. 哇塞，难道你不知道还有纸层析法呀！这简直就是给叶绿素来一次奇妙的“旅行”嘛！上次看到老师熟练地操作着，那技术，真牛！
7. 原子吸收光谱法也能测定哦！这是不是跟找宝藏一样神奇呀！就像我们有一次好奇地看着仪器，在想它怎么就能找到叶绿素的秘密呢。
8. 近红外光谱法也很管用呢！想想看，就像是给叶绿素照了个特别的“照片”。
我记得有一次和同学一起用这个方法，大家都觉得好新奇呀！
总之呀，这些方法都各有各的奇妙之处，都能帮助我们了解叶绿素含量呢！。
植物生理实验教学中叶绿素提取方法比较徐敏;刘君;阿衣古力·阿布都瓦依提【摘要】针对叶绿素定量提取植物生理本科实验教学中存在的问题,该文以菠菜和油菜为实验材料,比较了研磨法与浸泡提取法两种方法,以及浸提法中不同浸提液、浸提时间对叶绿素提取效果的影响.结果显示,研磨法耗时虽然最短,但其操作琐碎复杂,容易造成叶绿素流失,结果可重复性差;叶绿素的浸泡提取法中以二甲基亚砜溶液为提取剂,操作简便,提取时间合理,且提取的叶绿素稳定,适合应用于叶绿素含量测定的实验教学.【期刊名称】《实验科学与技术》【年(卷),期】2018(016)004【总页数】5页(P129-133)【关键词】油菜;菠菜;叶绿素;植物生理【作者】徐敏;刘君;阿衣古力·阿布都瓦依提【作者单位】新疆农业大学林学与园艺学院,新疆乌鲁木齐 830052;新疆农业大学林学与园艺学院,新疆乌鲁木齐 830052;新疆农业大学林学与园艺学院,新疆乌鲁木齐 830052【正文语种】中文【中图分类】G642.0;Q946叶绿素是植物生长发育的重要生理指标之一，其含量与植物光合速率、营养状况、光合作用等密切相关，叶绿素含量的测定无论是在生理上还是在品种选育及植物抗性方面的研究都是必测指标[1-2]。
叶绿素含量的测定实验是各农业类高等院校大农学相关专业必修课程“植物生理学”实验中的重要组成部分，实验内容涵盖叶绿素的提取、分离、理化性质及定量测定，在叶绿素的定量测定实验内容教学过程中，存在的问题较多，叶绿素含量因提取液和提取时间的不同而存在差异。
在实验教学中，采用超市购买的菠菜和油菜作为实验材料，须提前以80%丙酮进行浸泡8～12 h才可将叶绿素完全提取出来。
在这个过程中存在一些问题，如学生不能亲自动手进行叶绿素提取操作，丙酮不易购买，实验准备量大等。
在叶绿素提取过程中则存在浸提不彻底、浸提时间长且不稳定和叶绿素含量定量测定重复性差等问题。
针对以上叶绿素实验教学中存在的问题，本文就实验课中常用实验材料菠菜和油菜从提取方法、提取时间以及浸泡提取剂3个方面进行了研究，找到了在有限的教学学时操作便捷、重复性高、提取效果好的方法，为叶绿素的提取、开发利用和植物生理叶绿素实验教学提供了理论支持[3]。
不同蔬菜叶的叶绿素含量差异的研究学生：王艳萍褚立婷刘慧敏指导老师：张小冰摘要叶绿素存在于各种果蔬等绿色植物中，而且不同的蔬菜中含量不同，叶绿素分a、b 两种，两者都易溶于乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂。
本实验采取分光光度计测定法【1】测定植物组织中叶绿素a，叶绿素b及总叶绿素含量，方便且直观。
选取的材料是芹菜、白菜、小油菜，结果显示小油菜中叶绿素含量最高，其次是芹菜，最少的是白菜。
所以我们在平时的饮食中多吃一些小油菜，更加有益于健康。
Abstract Chlorophyll exists in all kinds of fruits and vegetables such as green plants, and different content of different vegetables, chlorophyll a, b two, both soluble in ethanol, acetone, ether and other organic solvents. This experiment adopted spectrophotometer assay determination of chlorophyll in plant tissue. A, chlorophyll b and total chlorophyll content, convenient and intuitive. Selection of material is small celery, cabbage, rape, results show that the small rape chlorophyll content in the highest, followed by the celery, is the least amount of cabbage. So we in the usual diet to eat more a few small rape, more conducive to health关键词蔬菜；叶绿素含量；分光光度计1引言1.1叶绿体色素的医疗作用叶绿体色素包括叶绿素a，叶绿素b，叶黄素，胡萝卜素，叶绿体色素不仅是一类与光合作用有关的最重要的色素，同时还具有很多医疗作用，概括起来有：1.1.1消炎、抗溃疡作用现代医学发现，叶绿素可促进溃疡伤口肉芽新生加速伤口愈合。
叶绿素含量测定仪对叶绿素含量的测定
有相关资料表明，叶绿素是高等植物和其它所有能进行光合作用的生物体含有的一类绿色色素。
而植物叶片中的叶绿素含量则能够反映植物本身的状况，一般而言，叶绿素含量高的植物，作物光合作用就会增强，各种物质的合成能力也会增强，促使养分吸收加快，作物生长迅速，膨果快；于此同时，叶绿素含量的高低也能客观地反映植物抗病性的强弱。
因此，在植物生理研究中，测叶绿素含量对于试验研究来说具有非常重要的意义。
那么，测叶绿素的仪器叫什么呢？叶绿素含量测定仪。
叶绿素含量测定仪是一款专门用来检测叶绿素含量的仪器，该仪器的检测原理是通过测量叶片在两种波长范围内的透光系数来确定叶片当前叶绿素的相对数量，也就是在叶绿素选择吸收特定波长光的两个波长区域，根据叶片透射光的量来计算测量值。
叶绿素含量测定仪的测量方法很简单，操作人员只需要手持叶绿素含量测定仪，将叶片插入仪器的感应部位，然后合上测量探头即可。
这种测量方法还有一大好处就是，不会对叶片造成损伤，可以实现无损快速测量，尤其是在作物的生长过程中全程对特定的叶片进行监测，可以得到更科学的分析结果。
在文章开头我们也明确的提到，叶绿素含量的检测具有重要的意义，它可以反映植物的健康状况，比如说叶绿素含量少，我们可以了解到植物的病变，因为植物一旦产生病害会出现叶黄的现象，也就是病害会致使叶绿素解体，出现黄化的现象。
而使用托普云农TYS-B叶绿素含量测定仪测定叶绿素的含量，可以及时了解植物的生长情况，并且也可以通过测量叶绿素的含量反应植物真实的硝基需求量，从而有利于合理的施加氮肥，提高氮的利用率，并可保护环境。
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较蔬菜叶绿素是一种绿色植物色素，是植物中进行光合作用的关键物质。
叶绿素具有很高的营养价值和医疗价值，被广泛用于食品添加剂、医药、保健品等领域。
提取蔬菜叶绿素的方法及其效果对于相关领域的研究和应用具有重要意义。
本文将比较不同的蔬菜叶绿素提取方法，分析其优缺点，探讨其适用范围及应用前景。
一、酒精提取法酒精提取是一种常见的蔬菜叶绿素提取方法。
其步骤主要包括采集新鲜蔬菜，去除杂质，切碎成细碎颗粒，加入适量的95%酒精，浸泡一段时间，然后过滤、蒸发、干燥即可得到叶绿素。
酒精提取法的优点在于操作简单、成本低廉、回收率高。
其适用范围广，适用于各类蔬菜叶绿素的提取。
酒精提取得到的叶绿素纯度较高，有较好的稳定性和溶解性。
酒精提取法也存在一些缺点，比如易受氧化、不易保存，对原料的选择有一定要求，不适用于所有类型的蔬菜叶绿素提取。
二、超声波提取法超声波提取法是一种新兴的蔬菜叶绿素提取方法。
其原理是利用超声波的机械作用、热效应、化学效应等多种效应对蔬菜细胞壁进行破碎，加速溶剂对蔬菜叶绿素的渗透和提取。
超声波提取法的优点在于提取效率高、时间短、操作简便、无需添加任何化学药剂，可以避免破坏蔬菜叶绿素的天然结构和性质。
超声波提取还可以避免对环境的污染，对于一些对环境友好的产品具有一定的竞争优势。
超声波提取法也存在一些局限性，比如设备成本相对较高，因此适用范围受到一定限制。
超声波提取也可能对植物细胞造成一定的损伤，进而影响提取得到的叶绿素的纯度和品质。
三、超临界流体提取法超临界流体提取法利用超临界流体对蔬菜叶绿素进行提取。
超临界流体具有高扩散性、低粘度、可调密度等优点，对于蔬菜叶绿素有较好的溶解能力和选择性，因此被广泛应用于蔬菜叶绿素的提取。
超临界流体提取法的优点在于提取效率高、溶剂用量小、温和条件下提取、对提取物几乎没有残留，避免了传统有机溶剂法中对蔬菜叶绿素的破坏。
超临界流体提取法也有利于对蔬菜叶绿素的纯化和分离。
叶绿素含量测定仪的原理叶绿素是一种储存在植物叶片中的绿色色素，它们在光合作用中起着重要的作用。
叶绿素含量测定仪是一种用来测量叶片中叶绿素含量的仪器，它的工作原理可以简单地分为两个步骤：提取和测量。
首先，提取叶绿素。
这个步骤的目的是将叶片中的叶绿素分离出来，使其与溶剂发生相互作用，从而溶解在溶液中。
一种常用的提取方法是醇提法。
在这个方法中，将取得的叶片样本加入醇溶液中，同时进行搅拌和加热，使叶绿素溶解于醇中。
醇具有良好的溶解性，能够很好地溶解叶绿素而不影响其结构和性质。
接下来，测量叶绿素。
这个步骤的目的是通过光学方法测量提取液中叶绿素的浓度。
这个步骤通常使用分光光度计来完成，因为分光光度计可以测量溶液中特定波长的光的吸光度。
在测量之前，需要用一种溶剂将提取液稀释到适当的浓度范围。
这是为了确保溶液的光密度适中，不会过于稠密或稀薄而影响测量结果。
稀释液的选择通常是一种无色且透明的溶液，如乙醇或去离子水。
测量时，将稀释液中的提取液样品置于分光光度计的样品池中，选择适当的波长以测量样品中叶绿素的吸光度。
通常，叶绿素具有最大吸收的波长在430 nm和660 nm之间。
根据比尔-朗伯定律，吸光度与浓度成正比。
因此，可以通过测量样品的吸光度并与已知浓度的叶绿素标准溶液进行比较，计算出叶绿素的浓度。
此外，还可以使用不同波长的光进行多波长读数。
根据叶绿素的吸收光谱，不同波长的光在叶绿素中的吸光度不同，因此通过多波长读数可以更准确地确定叶绿素的浓度。
总结起来，叶绿素含量测定仪的工作原理是通过将叶绿素从叶片中提取出来，并使用分光光度计测量其吸光度来确定叶绿素的浓度。
这种测定方法非常简单和方便，因此被广泛地应用于农学、生物学和环境科学等领域的研究中。
玉米叶绿素含量测定方法研究1. 502叶绿素含量测定仪的使用仪器调零：打开电源后，不放样品，按下探测头，听到一声响后，屏幕显示N0，表明调零完成。
每次测量前都需要进行调零。
叶片测量：将叶片放入测量头部，然后轻轻按压指压台，听到一声响后，测量结果会出现在屏幕上并自动保存。
力度控制：在测量时，力度要适中，过大可能会导致叶片破碎，过小可能导致无法测得数据。
多次测量：对于同一株植被的不同叶片，可以进行多次测量，然后取平均值作为该株植被的叶片叶绿素含量，以提高结果精度。
避免重新定标：在对同一株植被的测定过程中，不要进行定标操作，否则会丢失前期测定的数据。
结果精度：当测量结果大于50时，SPAD502叶绿素仪的精度可能会下降。
通过使用SPAD502叶绿素仪，可以方便快捷地测定植物叶片的叶绿素含量，为农业科研和生产提供有价值的数据。
2. 活体测定方法和步骤描述如何处理数据以获得叶绿素含量，包括使用的计算公式或模型。
列出在实验过程中需要特别注意的环节，如避免光照变化、保持叶片活体状态等。
1. 原理和步骤玉米叶绿素含量的测定基于叶绿素对特定波长的光吸收特性。
叶绿素主要吸收蓝光(约450 nm)和红光(约650 nm)。
通过测定样品在特定波长下的吸光度，可以计算出叶绿素的浓度。
本实验采用分光光度法，这是一种准确、重现性好的测量方法。
称取0克混合叶片，放入预冷的研钵中，加入少量石英砂和碳酸钙（防止色素降解）。
将匀浆转移到50 mL离心管中，用乙醇冲洗研钵，合并至离心管。
使用分光光度计，在波长650 nm和750 nm处分别测定上清液的吸光度。
[ 叶绿素含量 (mggFW) (A_{650} 24A_{750}) 85 ]( A_{650} ) 和 ( A_{750} ) 分别是样品在650 nm和750 nm 处的吸光度。
2. 数据处理和计算公式数据采集方法：简要描述如何从玉米叶片中提取叶绿素数据，包括使用的仪器和设备。
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较蔬菜叶绿素是一种重要的天然色素，具有保健和治疗作用。
提取蔬菜叶绿素可以采用不同的方法，每种方法都有其优缺点。
本文将对几种常见的蔬菜叶绿素提取方法进行比较分析。
1. 传统提取方法：传统提取方法是最常用的蔬菜叶绿素提取方法之一。
该方法主要通过机械破碎、浸泡和过滤等步骤来提取叶绿素。
优点是操作简单，成本较低，适用范围广。
传统提取方法提取效率低，不易控制提取过程，有些蔬菜中的叶绿素含量较低，提取量较少。
2. 超声波辅助提取方法：超声波辅助提取方法是利用超声波的作用对蔬菜进行辅助提取。
超声波能够破坏细胞壁，促进叶绿素的释放。
这种方法操作简便，提取效率较高，提取时间较短。
超声波辅助提取方法需要使用专用设备，成本较高，对仪器的要求较高。
3. 超临界流体提取方法：超临界流体提取方法是利用超临界流体的特殊性质对蔬菜进行提取。
超临界流体是介于气体和液体之间的一种状态，在此状态下，其密度和溶解能力都较大。
通过调整超临界流体的温度和压力等参数，可以实现对叶绿素的选择性提取。
这种方法提取效率高，提取速度快，提取物中有害物质较少。
超临界流体设备成本高，操作过程对设备的稳定性要求高。
4. 液液萃取法：液液萃取法是将蔬菜样品与有机溶剂相混合，并通过搅拌或振荡等方式，使叶绿素从水相转移到有机相的一种提取方法。
这种方法操作简单，不需要特殊设备，提取效率较高。
有机溶剂对环境污染较大，需要注意处理废液的问题。
通过对不同提取方法的比较，可以看出每种方法都有其优点和局限性。
综合考虑提取效率、成本、操作简易度、对设备的要求以及环境影响等因素，选择适合自己实验条件和目的的提取方法是非常重要的。
可以根据具体的实验需求，结合不同的方法进行优化和改进，以提高叶绿素的提取效率和纯度。
常用作物生理指标测定方法作物生理指标是衡量作物生长发育和生理功能的重要参数，对于研究作物生理特性、生长速度、抗逆性能以及优化农业管理具有重要价值。
下面是一些常用的作物生理指标测定方法：1.叶绿素含量测定：叶绿素是作物光合作用的重要生化指标，常用的方法包括醋酸镁法、乙醇法和非破坏性叶绿素测定仪等。
2.叶片相对含水量测定：叶片相对含水量是反映植物水分状况的指标，常用的方法包括重量法、酒精浸泡法等。
3.叶片相对电导率测定：叶片相对电导率是反映作物膜系统完整性的指标，常用的方法包括浸泡法和浸渍法。
4. 叶片蛋白质含量测定：叶片蛋白质含量是反映植物生长和抗逆性的指标，常用的方法包括Lowry法、Bradford法和Biuret法等。
5.叶片活性氧含量测定：活性氧对植物生长和逆境抗性具有重要影响，常用的方法包括过氧化氢测定法、超氧化物歧化酶测定法和丙二醛含量测定法等。
6.叶片抗氧化酶活性测定：抗氧化酶是植物抵御氧化应激的重要酶系，常用的方法包括超氧化物歧化酶活性测定法、过氧化氢酶活性测定法和过氧化物酶活性测定法等。
7.土壤水分含量测定：土壤水分含量是影响作物生长和产量的重要因素，常用的方法包括烘干法、容量法和驻挠仪测定法等。
8.根系活力测定：根系活力是作物吸收水分和养分的重要指标，常用的方法包括三苯四氮唑蓝法和碘化钠法等。
9.气孔导度测定：气孔导度是作物水分调节和碳代谢的重要参数，常用的方法包括气体交换仪测定法和树脂浸泡法等。
10.叶盘蒸腾速率测定：叶盘蒸腾速率是反映作物水分蒸腾能力的指标，常用的方法包括测定叶盘失重法和石蜡浸渍法等。
以上是一些常用的作物生理指标测定方法，这些方法提供了了解作物生长发育和生理功能的重要信息，为作物生理机制的深入研究和农业管理的优化提供了依据。
同时，为提高作物抗逆性能和增加农业产量提供了重要的支持。
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较蔬菜叶绿素是植物中一种重要的天然色素，具有多种生物活性和药理活性。
通过提取蔬菜叶绿素可以用于食品添加剂、食品着色剂、医用药物、抗氧化剂等领域。
本文将详细介绍几种常见的蔬菜叶绿素提取方法，并对其进行比较。
1. 热水提取法热水提取法是常见的蔬菜叶绿素提取方法之一，简便易行。
具体操作步骤为将蔬菜样品切碎后用沸水浸泡一定时间，然后通过离心分离得到叶绿素提取液。
该方法的优点是操作简单，提取效率高，但叶绿素的纯度较低，需要进行进一步的纯化步骤。
2. 酒精提取法酒精提取法是一种常用的叶绿素提取方法，具有提取效率高、操作简单、成本低等优点。
可以通过将蔬菜样品与适量的酒精溶液混合，然后搅拌并过滤得到蔬菜叶绿素提取液。
该方法适用于多种蔬菜叶绿素的提取，但在操作过程中需注意保持环境温度不过高，否则会对叶绿素的稳定性造成影响。
3. 超声波提取法超声波提取法是一种新兴的蔬菜叶绿素提取方法，具有高效、快速、无污染等特点。
该方法通过利用超声波的高频振动作用，使蔬菜细胞壁破裂，从而释放出叶绿素。
具体操作步骤为将蔬菜样品与适量的溶剂混合，然后通过超声波处理，最后通过离心分离得到提取液。
超声波提取法能够在较短的时间内获得较高纯度的叶绿素，但设备成本较高，操作要求较高。
4. 硅胶柱层析法硅胶柱层析法是一种经典的蔬菜叶绿素纯化方法，适用于蔬菜叶绿素提取液的精制。
该方法通过将提取液注入硅胶柱，然后通过溶剂渗透使不同组分分离，最后得到高纯度的叶绿素。
该方法的优点是纯化效果好，但操作复杂，需耗费较多时间。
几种常见的蔬菜叶绿素提取方法各有优点和适用场景。
热水提取法简单方便，适用于大规模提取；酒精提取法成本低，适用范围广；超声波提取法高效快速，但设备成本较高；硅胶柱层析法能够获得高纯度的叶绿素。
根据实际需要，可以选择适合的叶绿素提取方法。
植物组织叶绿素含量的测定——浸提比色法叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中，并在植物细胞中与蛋白质结合成叶绿体。
当植物细胞死亡后，叶绿素即游离出来，游离的叶绿素很不稳定，对光、热等较为敏感。
在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素，在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。
高等植物中叶绿素有两种：叶绿素a和叶绿素b，两者均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。
分光光度法测定叶绿素含量，就是利用叶绿素a和b吸收光谱的不同，测定各特定峰值波长下的光密度，再根据色素分子在该波长下的消光系数计算出浓度。
取植物从上往下数、第二个完全发育的叶子的中部和尖端，放入密封袋，于4℃的冰箱短暂保存，测量相对叶绿素含量。
1. 去除叶片的主叶脉，剪成1mm左右，称取新鲜样品0.1g于25mL刻度管中，加入10mL 95%的乙醇溶液，在黑暗中浸提过夜，直到组织完全漂白；2. 用95%乙醇溶液将提取物(上清液)稀释至15mL(浓度较大时需要稀释，一般0.2g的样品需定容至25mL)，叶绿素测试液倒入光径1cm的比色杯内，以95%乙醇为空白对照，使用紫外分光光度计在波长665nm、649nm和470nm下测定吸光度；3. 计算公式。
95%乙醇计算公式：C a (mg·L-1) = 13.95A665 - 6.88A649C b (mg·L-1) = 24.96A649 - 7.32A665C T (mg·L-1) = C a + C b = 18.16A649 + 6.63A665C x + c (mg·L-1) = (1000A470 - 2.05C a - 114.8C b)/24580%丙酮Arnon计算公式：C a (mg·L-1) = 12.7A663 - 2.69A645C b (mg·L-1) = 22.9A645 - 4.68A663C T (mg·L-1) = C a + C b = 20.21A645 + 8.02A66380%丙酮Lichtenthaler修正公式：C a (mg·L-1) = 12.21A663 - 2.81A646C b (mg·L-1) = 20.13A646 - 5.03A663C T (mg·L-1) = C a + C b = 17.32A646 + 7.81A663C x + c (mg·L-1) = (1000A470 - 3.27C a - 104C b)/229色素含量(mg·g-1) = (C×V×N)/m × 1000式中：C为色素浓度(mg·L-1)；A为不同波长下的吸光值；V为提取液体积；N为稀释倍数；m为样品质量(g)。
叶片中叶绿素含量大小的比较方案一、引言叶绿素是植物中最重要的光合色素之一，它们在光合作用过程中起着关键作用。
叶片中叶绿素含量的大小直接影响着植物的光合效率和生长发育。
比较叶片中叶绿素含量的大小对于了解植物的健康状态和适应能力具有重要意义。
本文将提供一个全面详细的方案，以比较不同植物叶片中叶绿素含量的大小。
二、实验材料和方法1. 实验材料：- 不同种类的植物（至少选择3种不同类型的植物）- 酒精- 丙酮- 蒸馏水- 乙醚- 研钵和研杵- 显微镜- 滴定管和移液管- 叶片切割器或剪刀2. 实验步骤：步骤1：收集不同种类植物的新鲜健康叶片，并将其洗净。
步骤2：将每种植物的叶片分别放入标记好的试管中。
步骤3：加入适量的酒精，用研杵将叶片捣碎，使叶绿素溶解在酒精中。
步骤4：将溶液过滤，并收集过滤液。
步骤5：将过滤液分成两份，分别加入丙酮和蒸馏水，使叶绿素从酒精中转移到丙酮和蒸馏水中。
步骤6：用乙醚提取丙酮中的叶绿素，并收集提取液。
步骤7：将提取液放置在显微镜下观察，记录不同植物叶片中叶绿素的颜色和数量。
三、结果分析根据观察到的显微镜图像和记录的数据，可以进行以下方面的结果分析：1. 叶绿素含量比较：- 比较不同植物叶片中叶绿素的颜色深浅以及数量多少。
颜色越深、数量越多表示叶片中叶绿素含量越高。
2. 不同植物间的差异：- 对比不同种类植物之间叶绿素含量的差异。
通过比较不同植物叶片中叶绿素的颜色和数量，可以了解不同植物对光合作用的适应能力。
3. 植物内部结构与叶绿素含量的关系：- 观察不同植物叶片的细胞结构，比较其与叶绿素含量的关系。
可以观察叶片中气孔的密度和大小，以及细胞壁的厚度等因素与叶绿素含量之间的相关性。
四、讨论和结论1. 结果讨论：- 分析不同植物叶片中叶绿素含量差异的原因。
可能影响叶绿素含量差异的因素包括光照强度、温度、水分等环境因素以及植物自身遗传特性等。
2. 结论：- 根据实验结果得出不同植物叶片中叶绿素含量大小的比较结论。
玉米叶片叶绿素快速浸提方法研究
李得孝;侯万伟;员海燕
【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2006(034)011
【摘要】以玉米叶片为材料,研究了体积分数80%丙酮、体积分数95%乙醇、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙醇-丙酮(体积比1∶1)混合液4种浸提液,不同光温条件和不同样品预处理方式对叶绿素浸提的影响.结果表明,浸提液以乙醇-丙酮混合液效果最好,避光和50 ℃的提取温度有利于叶绿素提取;样品冷冻处理不利于叶绿素a的提取,而有利于叶绿素b的提取,总叶绿素以鲜样提取为宜.在大样本试验中浸提叶片叶绿素较适宜的方法是:将新鲜(或冷冻)玉米叶片放入50 ℃丙酮-乙醇混合液(体积比1∶1)中避光提取1.5 h.
【总页数】3页(P65-67)
【作者】李得孝;侯万伟;员海燕
【作者单位】西北农林科技大学,农学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,农学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,农学院,陕西,杨凌,712100
【正文语种】中文
【中图分类】Q94-33;S513
【相关文献】
1.不同溶剂浸提枣树叶片叶绿素效果的研究 [J], 胡秉芬;黄华梨;季元祖;赵晓芳;戚建莉;张露荷;张广忠
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叶绿素仪与浸提法测定玉米叶绿素含量的比较
2010-11-17 9:05:34 本站阅读129次
[中国种子检验仪器网 ]
对叶绿素的研究一直是人们极其关注的课题。
叶绿素含量测定方法主要有分光光度法和活体叶绿素仪法两大类,后来又发展了光声光谱法。
但是,用手持叶绿素仪
或光谱分析仪测得的是色素相对含量指标,并且不同种类植物叶片中的色素指标与实际叶绿素含量之间的关系方程式不同,即不能用一种关系来转换不同植物的色素含量。
在日常实验中普遍采用分光光度法,用的较多的是Arnon法。
Arnon法需要把植物材料研磨,经过过滤或离心长,在操除渣、移液、定容、比色等过程,工作量大,提取时间作过程中误差较大,且易受光氧化的破坏,不适于对田间大量样品的测定和大量叶绿素的提取,并且也不适合大批量样本的应急检测。
后来又提出了丙酮乙醇混合液浸提法,证明利用混合液进行叶绿素浸提的可行性。
进一步研究后发现,混合液法比传统Arnon法提取叶绿素效率高,稳定性好。
选材：剪取叶片,洗净后弃除叶柄和中脉,然后用纱布或吸水纸将叶片表面的水分
吸干。
为了试验的精确度更高,我们在取样时仅取每片叶的中间部位,并用SPAD-502测定其叶绿素相对含量值,使其偏差保持在(-5,+5)之间,超出范围者弃掉。
把挑选的叶片剪成小于2mm碎条,混匀。
分两份,一份在室温(25℃)下,立即用研磨法(80%丙酮,95%乙醇)和直接浸提法(8种提取液)提取叶绿素;另一份每次用千分之一天平精准称取(200 mg,称取24份;1 g,称取6份),分别装袋,密封好,储放到冰箱中备用。
为增加不同测定方法之间可比性,样品在冷冻前称量分装好。
浸提法:分别于容量瓶中加入15mL提取液,把叶片剪成宽度小于2mm的细丝或小块,混匀,分别准确称取200mg放入盛有提取液的容量瓶中,封口,置于黑暗条件下直接浸提。
研磨法每个处理重复3次。
室温试验时,按8种提取液分8组,每组12个50mL的容量瓶,分别按照上述方法加入叶片和各浸提液,并计时,在室温黑暗条件下直接浸提叶绿素,并不时摇动。
分别于10h、13h、16h和48h时,每组各取出3个容量瓶,定容至50mL后在645nm和663nm波长下测定吸光度值。
取出冷冻20h的
叶片按照如上方法和程序或研磨或浸提。
每个处理3个重复,浸提在50℃水浴中
进行,用肉眼观察叶组织完全变白,即说明浸提完全,取出冷却后定容,在645 nm和663 nm波长下测定吸光度值。
叶绿素仪：现在市面上最流行的莫过于SPAD502。
SPAD502是有日本柯尼卡美能达研制生产的，SPAD502通过测量叶子对两个波长段里的吸收率，来评估当前叶子中的叶绿素的相对含量。
该仪器拥有小巧的机身，仅200g的重量，可以方
便地装入口袋并带到现场进行测量，因此又叫做手持叶绿素仪。
叶绿素仪操作也非常方便，你只需将叶片插入并合上测量探头即可，无需将叶片剪下，这样就可
以在作物的生长过程中全程对特定的叶片进行监测，从而得到更科学的分析结果。
因此，叶绿素能够对叶片进行无损测定，保护了叶片本身。
这两种方法各有优势，浸提法提取时受很多试剂的影响，因此在使用试剂时一定要谨慎，另外，浸提法测定时如果采用冷冻处理，可以缩短浸提时间，但是其测定值会变低。
而用SPAD502测定则操作简单，结果精确，但是该仪器价格昂贵。
