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目的: 规范人工牛黄检验的操作。
适用范围: 人工牛黄的检验。
责任: 检验室检验人员按本规程操作，检验室主任对本规程的有效执行承担监督检查责任。
程序：本品为贝斯素、胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇、无机盐等配制而成。
1.性状：本品为黄色疏松的粉末，味苦，微甘。
2.鉴别：2.1仪器及用具：干燥、超声波清洗仪、分析天平、玻璃层析缸、显色喷瓶、硅胶G薄层板、点样器、量瓶、刻度吸管等。
2.2试剂及试液：硫酸、硝酸、甲醇、异辛烷－正丁醚－冰醋酸（8：5：5）、10%磷钼酸乙醇液、冰醋酸－甲苯－水（10：7.5：0.3）、正丁醇－冰醋酸－乙醇－水（4：2：1：1）、1%茚三酮乙醇液。
2.3测定法2.3.1 鉴别（1）取本品适量，分为二份，置点滴板上，一份加硫酸，数分钟后，显污绿色，另一份加硝酸即显红色。
2.3.2 鉴别（2）取本品加甲醇制成每1ml中含10mg的溶液超声处理，使充分提取后，取上清液，作为供试品溶液。
另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照《薄层色谱法标准操作规程》（SOP-QC-082-00）试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷－正丁醚－冰醋酸（8：5：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸的乙醇溶液，于105℃烘约5分钟。
供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.3.3 鉴别（3）（2）项下的供试品溶液，另取贝斯素对照品约30mg于10ml量瓶中，加甲醇适量超声处理便充分提取后，用甲醇稀释至刻度，静置使澄清，取上清液作为对照品溶液，照《薄层色谱法标准操作规程》（SOP-QC-082-00）试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各8μl，分别点于一硅胶G薄层板上，以甲苯－冰醋酸－水（10：7.5：0.3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸的乙醇溶液，于105℃烘约5分钟。
xxxxxxxxxxxxx有限公司成品质量标准及检验操作规程
1 品名：
1.1 中文名：硫黄制硫磺
1.2 汉语拼音：Liuhuang Zhiliuhuang
2 代码：
3 取样文件编号：
4 检验方法文件编号
5 依据：《中国药典》（2020年版一部）。
6 质量标准：
7 检验操作规程：
7.1 试剂与试药：乙醇、氢氧化钾、盐酸、甲基橙指示液。
7.2 仪器与用具：电子天平、水浴锅。
7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。
7.4 鉴别：本品燃烧时易熔融，火焰为蓝色，并有二氧化硫的刺激性臭气。
7.5 含量测定：取本品细粉约0.2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入乙醇制氢氧化钾滴定液（0.5mol/L）50ml，加水10ml，置水浴中加热使溶解，并挥去乙醇（直至无气泡、无醇臭）。
加水40ml，于瓶颈插入一小漏斗，微沸10分钟，冷却，小心滴加过氧化氢试液5ml，摇匀，置沸水浴中加热10分钟，冷却至室温，用水冲洗漏斗及瓶内壁，加人甲基橙指示液2滴，用盐
酸滴定液（0.5mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。
每lml乙醇制氢氧化钾滴定液（0.5mol/L）相当于8.015mg的硫（S）。
本品含硫（S）不得少于98. 5%。
2015年版中国药典微生物限度检查方法验证方案人工牛黄甲硝卩坐胶囊微生物限度检查方法验证方案下表用于记录修订/变更主要内容及历史。
1.概述2.验证冃的和范I韦I3.组织及职责4.验证进度计划表5.验证所需要的仪器设备及相关文件的确认6.验证所需要的菌种、培养基、检验样品的确认7.验证项冃和验证方法7.1试验菌株7.2需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌总数检查方法验证的菌液制备7.3需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌总数检查方法验证■■常规倾注平皿法7.4需氧菌总数检查方法验证一离心沉淀■薄膜过滤法7.5控制菌检查方法验证一离心沉淀■薄膜过滤法&偏差与漏项控制9.验证报告会审1.概述我公司生产品种人工牛黄甲硝哇胶囊，产品微生物限度检查项目为需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、以及大肠埃希菌检查和沙门菌检查。
参照《中国药典》2015版四部附录1105：微生物计数法，以及1106：控制菌检查法的规定，本公司对该产品的微生物限度检查方法予以验证。
通过验证以确认所采用的微生物限度检查方法适用。
人工牛黄屮硝卩坐胶囊处方中含有甲硝呼、人工牛黄以及常用辅料成分，文献资料介绍屮硝卩坐对细菌有抑菌特性，对霉菌和酵母菌无抑菌活性。
屮硝畔在水中微溶，可以通过离心沉淀•薄膜过滤法去除其对微生物生长的影响。
本验证方案通过试验菌株的回收率测试，首先确认常规倾注平皿法是否适用于木品的微生物限度检查；如常规倾注平皿法不适用，则进一步验证可去除供试晶抑菌物质的离心沉淀•薄膜过滤法是否适用于本晶的微生物限度检查。
本验证方案根据样晶特性制定微生物限度检查方法和检验条件，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。
2.验证目的和范围验证该产品的微生物限度检查方法的适用性，对其有效性进行评价，保证检验结果的可靠性。
本验证方案采用3批按GMP要求组织生产的人工牛黄甲硝呼胶囊，进行微生物限度检查方法的验证。
3.组织及职责3.1验证方案和验证报告的起草、审核、批准验证方案曲质量部QC组负责起草，出质量部审核，最终出质量负责人批准。
目的：为检验人工牛黄规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。
范围：适用于人工牛黄的检验。
职责：检验室主任、检验员。
规程：1 性状：本品为黄色疏松的粉末；味苦，微甘。
2 鉴别：2.1 试剂与仪器2.1.1 硫酸 2.1.2 硝酸2.1.3 甲醇 2.2.4 胆酸猪去氧胆酸对照品2.1.5 异辛烷-正丁醚-冰醋酸(8:5:5) 2.2.6 10%磷钼酸的乙醇溶液2.1.7 牛胆粉 2.1.8 甲苯-冰醋酸-水(7.5:10:0.3) 2.1.9 硅胶G薄层板 2.1.10 试管2.1.11 容量瓶(10ml) 2.1.12 微量进样器2.1.13 层析缸 2.1.14 电子天平（万分之一克）2.1.15 恒温干燥箱2.2 项目与步骤2.2.1 取本品适量，分为二份，一份加硫酸显污绿色；另一份加硝酸显红色为符合规定。
2.2.2 精密称取本品0.1g，置10ml的容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
另精密称取胆酸、去氧胆酸对照品各0.01g，置10ml容量瓶中，各加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
照薄层色谙法（SOP-QC-304-00）试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷-正丁醚-冰醋酸(8:5:5)为展开剂展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸的乙醇溶液，于105℃烘约5分钟使显色。
供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点为符合规定。
2.2.3 精密称取本品0.1g，置10ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
另精密称取牛胆粉对照品0.02g，置10ml容量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（SOP-QC-304-00）试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各8μl，分别点于同一硅胶板G薄层板上，以甲苯-冰醋酸-水(7.5：10：0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸的乙醇溶液，于105℃烘烤约15分钟。
硫黄检验操作规程（2020版）
【性状】本品呈不规则块状。
黄色或略呈绿黄色。
表面不平坦，呈脂肪光泽，常有多数小孔。
用手握紧置于耳旁，可闻轻微的爆裂声。
体轻，质松，易碎，断面常呈针状结晶形。
有特异的臭气，味淡。
【鉴别】本品燃烧时易熔融，火焰为蓝色，并有二氧化硫的刺激性臭气。
【含量测定】取本品细粉约0.2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入乙醇制氢氧化钾滴定液（0.5mol/L）50ml，加水10ml，置水浴中加热使溶解，并挥去乙醇（直至无气泡、无醇臭）。
加水40ml，于瓶颈插入一小漏斗，微沸10分钟，冷却，小心滴加过氧化氢试液50ml，摇匀，置沸水浴中加热10分钟，冷却至室温，用水冲洗漏斗及瓶内壁，加入甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。
每1ml乙醇制氢氧化钾滴定液（0.5mol/L）相当于8.015mg 的硫（S）。
本品含硫（S）不得少于98.5%。
非无菌产品微生物限度检查方法适用性试验文件文件名称人工牛黄甲硝唑胶囊微生物限度检查方法适用性试验（2015版）文件编号TS-VD-550-01重庆天致药业股份有限公司2018年人工牛黄甲硝唑胶囊微生物限度检查方法适用性试验方案试验报告的起草：日期：试验报告的审核：日期：试验报告的审核：日期：试验报告的批准：日期：1.概述通过试验以确认所采用的方法适合于该药品的需氧菌、霉菌和酵母菌的测定，确认所采用的方法适合于该药品的控制菌的检查，根据样品的特性制定检验方法和检验条件，按制定的方法进行试验，根据试验结果判断是否符合试验标准。
若符合，按试验的方法和条件进行药品的微生物限度检查；若不符合，重新建立制订检验方法和检验条件，再进行试验，直至试验结果符合设立的试验标准。
2.目的:确认所采用的方法适合该药品的需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌的测定。
照此检查法和检验条件进行供试品需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌检查能保证检验结果的准确、可靠。
3.职责3.1.QC：负责起草试验方案和报告，并负责本方案的实施。
3.2QC主管、质量部长：负责试验方案、试验报告的审核。
3.3.质量授权人：负责方案、偏差和报告的最后批准。
4.适用范围:适用于本公司生产的人工牛黄甲硝唑胶囊微生物限度检查：微生物计数法和控制菌检查法。
5.培训:在本方案实施前，已对方案实施过程中涉及人员进行培训，以保证方案顺利实施，并做好培训记录，培训记录见附表1。
6.试验条件6.1.供试品规格：批号：6.2.培养基及试剂培养基名称培养基批号生产厂家6.3.试验用菌株菌种名称菌种编号菌种来源6.4.检验仪器及相关设备仪器名称仪器型号仪器厂家7.计数方法适用性试验7.1.需氧菌总数及霉菌和酵母菌计数方法适用性试验7.1.1菌液制备7.1.1.1接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌的新鲜培养物至100ml胰酪大豆胨液体培养基中，置30～35℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，制成适宜浓度的菌悬液，备用。
人工牛黄Rengong NiuhuangCALCULUS BOVIS ARTIFACTUS[鉴别]取本品粉末0.5g，加入三氯甲烷10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。
另取胆红素对照品适量，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5-10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-甲醇-甲酸（20:3:0.5:0.15）为展开剂，展开，取出，晾干，置日光和紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光斑点。
[检查] 炽灼残渣取本品1.0g,精密标定，依法测定（中国药典2010年版一部附录LX J），不得过15.0% 。
胭脂红、金胺O、金橙Ⅱ（1）取本品粉末0.5g，加甲醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液制成供试品溶液。
另取胭脂红、金胺O、金橙Ⅱ对照试剂适量，分别加甲醇制成每ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5-10µl ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1:3:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干。
供试品色谱中，在与胭脂红、金橙Ⅱ、金胺O对照品色谱相应的位置上，不得显相同红色、橙红色、黄色的斑点。
若供试品色谱中出现与对照品相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。
（2）照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.05mol/l醋酸铵为流动相B，按下表进行梯度洗脱：采用二极管陈列检测器；检测波长为508nm、484nm、432nm。
理论板数按胭脂红峰计算，应不低于2000。
对照试剂溶液的制备取胭脂红、金胺O、金橙Ⅱ对照试剂适量，分别加甲醇制成每1ml 含胭脂红0.1mg、金胺O 0.05mg 、金橙Ⅱ0.05mg的溶液，作为对照试剂溶液。
1.目的建立安宫牛黄丸检验操作规程。
2．范围本规程适用于安宫牛黄丸的全项检验。
3．责任 QC检验员、QC主管、QA主管。
4．标准《安宫牛黄丸质量标准》5．内容：5.1性状本品为黄橙色至红褐色的大蜜丸，或为包金的大蜜丸，除去金衣后显黄橙色至红褐色；气芳香浓郁，味微苦。
5.2 鉴别5.2.1 取本品，置显微镜下观察：不规则碎片灰白色或灰黄色，稍具光泽，表面有灰棕色色素颗粒，并有不规则纵长裂缝（水牛角浓缩粉）。
不规则碎块无色或淡绿色，半透明，有光泽有时可见细密波状纹理（珍珠）。
不规则细小颗粒暗红色,有光泽，边缘暗黑色（朱砂）。
不规则碎块金黄色或橙黄色，有光泽（雄黄）。
纤维束鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显；石细胞鲜黄色（黄连）。
韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细（黄芩）。
果皮含晶石细胞类圆形或多角形，直径17～31μm,壁厚，胞腔内含草酸钙方晶（栀子）。
糊化淀粉粒团块几乎无色（郁金）。
5.2.2取本品2g，剪碎，加乙醇20ml，加热回流1 小时，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。
另取胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以乙醚－三氯甲烷—冰醋酸(2:2:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照品谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5.2.3取盐酸小檗碱对照品和黄芩苷对照品，分别加乙醇制成每1ml 含盐酸小檗碱的溶液0.2mg和每1ml 含黄芩0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取[鉴别](2) 项下的试品溶液20μl及上述两种对照品溶液各10μl,分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶Ｇ薄层板上，使成条状，以乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水(10:7:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干。
分别在日光和紫外光灯(365nm )下检视，供试品色谱中，在与黄芩苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条斑；在与盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上，紫外光下显相同的黄色荧光条斑。
目的：制订人工牛黄质量标准及内控标准。
适用范围：人工牛黄质量标准及内控标准。
责任：检验室、生产车间、原辅料仓及供应部执行该标准，质管部负责监督该标准的执行。
标准：1.品名: 人工牛黄2.原料编号：Y073.法定规格标准:3.1标准依据：WS－132（Z－122）－9833.2内容：本品为贝斯素、胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇、无机盐等配制而成。
[性状] 本品为黄色疏松的粉末，味苦，微甘。
[鉴别] （1）取本品适量，分为二份，置点滴板上，一份加硫酸，数分钟后，显污绿色，另一份加硝酸，即显红色。
（2）取本品约100mg置10ml量瓶中，适量溶液超声处理使充分提取后，静置使澄清，用甲醇稀释至刻度，取上清液。
作为供试品溶液。
另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照《薄层色谱法标准操作规程》(SOP-QC-082-00)试验，吸取上述供试品溶液4μl，对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷－正丁醚－冰醋酸（8：5：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸的乙醇溶液，于105℃烘约5分钟。
供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3）取[签别]（2）项下的供试品溶液，另取贝斯素对照品约30mg于10ml量瓶中，加甲醇适量超声处理使充分提取后，用甲醇稀释至刻度，静置使澄清，取上清液作为对照品溶液，照《薄层色谱法标准操作规程》(SOP-QC-082-00)试验，吸取上述供试品溶液8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以冰醋酸－甲苯－水（10：7.5：0.3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸的乙醇溶液，于105℃烘约5分钟。
供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（4）取本品约100mg于10ml量瓶中，加水5ml，超声处理使充分提取后，用甲醇稀释至刻度，静置使澄清，取上清液作为供试品溶液，另取贝斯素对照品约30mg置10ml量瓶中，同法处理，取上清液作为对照品溶液照《薄层色谱法标准操作规程》试验。
目的
明确人工牛黄检验方法，规范人工牛黄检验程序，确保检验结果准确。
范围
本规程适用于进厂原料人工牛黄的检验。
责任
质检处负责制订本规程；质检处原料组和仪器组化验员按本规程操作；质检处监督检查。
内容
1 品名：
1.1 中文名：人工牛黄
1.2 英文名：Bovis Calculus Artifactus
1.3 汉语拼音名：Renggong Nuhuang
2 引用标准
中国药典2010年版(ChP2010)。
3 执行质量标准：《人工牛黄质量标准》
4 性状
本品为黄色疏松粉末。
味苦，微甘。
6 鉴别
6.1 (1) 取胆红素（含量测定）项下溶液，照紫外-可见分光光度法（附录V A）测定，在453nm波长处有最大吸收。
6.2 薄层色谱法：胆酸、去氧胆酸的鉴别
6.2.1 供试品溶液的制备：取本品0.1g，置10ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理5分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液。
6.2.2 对照溶液的制备: 取胆酸、猪去氧胆酸对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg
的混合溶液，作为对照品溶液。
6.2.3 展开剂：正己烷－乙酸乙酯－醋酸-甲醇(20：25：2：3) 上层溶液为展开剂。
6.2.4 薄层板：硅胶G
6.2.5 测定方法: 吸取上述供试品溶液4μl, 对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上,置于展开剂中展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
6.2.6 标准规定：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.3 薄层色谱法：牛胆粉对照药材的鉴别
6.3.1 对照药材溶液的制备：牛胆粉对照药材10mg，加甲醇适量，超声处理使充分提取，再加甲醇至10ml，摇匀，静置，取上清液作为对照药材溶液。
6.3.2 供试品溶液的制备：鉴别（2）项下的供试品溶液。
6.3.3 展开剂：以甲苯一冰醋酸一水((
7.5：10：0.3)为展开剂
6.3.4 薄层板：硅胶G
6.3.5 测定方法：吸取供试品溶液及上述对照药材溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上展开，取出，晾千，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
6.3.6 标准规定：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.4 薄层色谱法：牛磺酸的鉴别
6.4.1 供试品溶液的制备：取本品50mg，加水5m1,超声处理5分钟，加甲醇至10m1,静置，取上清液作为供试品溶液。
6.4.2 对照品溶液的制备：取牛磺酸对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
6.4.3 薄层板：硅胶G薄层板。
6.4.4 展开剂：以正丁醇一乙醇一冰醋酸一水（4:1:2:1）为展开剂
6.4.5 测定方法：吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上展开，取出，晾于，在105℃加热10分钟，喷以1%茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
6.4.6 标准规定：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7 检查
7.1 水分
7.1.1 仪器与设备：烘箱、万分之一分析天平、称量瓶
7.1.2 操作方法
称取约2-5g样品，在100-105℃干燥5小时后，取出置于干燥器中放置30分钟，称量，再在上述温度下干燥1小时，取出置于干燥器中放置30分钟后称量，两次称量值不超过5mg。
7.1.3 计算公式：
干燥前称量瓶与样重-干燥后称量瓶与样重
干燥失重=───────────────────×100％
干燥前称量瓶与样重-空称量瓶重
7.2 含量测定
7.2.1 胆酸的测定
7.2.1.1 仪器与设备:紫外分光光度计,万分之一分析天平,容量瓶，冰水浴。
7.2.1.2 试药:60%冰醋酸,新制的糠醛溶液（1→100）, 硫酸溶液(取硫酸50m1与水65 ml混合)。
7.2.1.3 对照品溶液的制备：胆酸对照品12.5mg ,精密称定，置25ml量瓶中，加60%冰醋酸溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml 中含胆酸0.5mg )。
7.2.1.4 标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.2 ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml与1ml，分别置具塞试管中，各管加入60%冰醋酸溶液稀释成1.0 ml,再分别加新制的糠醛溶液（1→100）1.0 ml，摇匀，在冰浴中放置5分钟，精密加人硫酸溶液(取硫酸50m1与水65 ml混合)13ml,混匀，在70℃水浴中加热10分钟，迅速移至冰浴中，放置2分钟，以相应的试剂为空白，照紫外一可见分光光度法(附录V A)，在605nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
7.2.1.5 供试品溶液的制备：本品0.1g,精密称定，置50m1量瓶中，加60%冰醋酸溶液适量，超声处理5分钟，用60%冰醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液各1 m1，分别置甲、乙两个具塞试管中，于甲管中加新制的糠醛溶液1m1，乙管中加水1ml作空白，在冰浴中放置5分钟，精密加人硫酸溶液(取硫酸50m1与水65 ml 混合)13ml,混匀，在70℃水浴中加热10分钟，迅速移至冰浴中，放置2分钟。
7.2.1.6 测定方法：以相应的试剂为空白，照紫外一可见分光光度法(附录V A)，在605nm波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含胆酸的重量，计算，即得。
含量=
%100-1⨯⨯水份）
（表
M M
式中：M 表为从标准曲线中读取的胆酸含量；
M 为样品称样量。
7.2.1.8 标准规定：本品按干燥品计算，含胆酸（C 24H 40O 5）不得少于13.0%。
7.2.2 胆红素
7.2.2.1 仪器与设备:紫外分光光度计,万分之一分析天平,容量瓶，超声清洗机。
7.2.2.2 试药与试剂：三氧甲烷。
7.2.2.3 对照品溶液的制备：取胆红素对照品1Omg,精密称定，置100ml 棕色量瓶中，加三氯甲烷80ml,超声处理使充分溶解，加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀。
精密量取10ml, 置50ml 棕色量瓶中，用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml 中含胆红素20μg)。
7.2.2.4 标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液4m1、5m1、6m1、7ml 与8ml ，分别置25ml 棕色量瓶中，用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，照紫外一可见分光光度法(附录V A)，在453nm 处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
7.2.2.5 供试品溶液的制备：本品80mg,精密称定，置100ml 棕色量瓶中，加三氯甲烷80ml 超声处理使充分溶解，用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液做为供试品溶液。
7.2.2.6 测定方法：以相应的试剂为空白，在453nm 波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含胆红素的重量，计算，即得。
7.2.2.7 计算公式:
含量=
%100-1⨯⨯水份）
（表
M M
式中：M 表为从标准曲线中读取的胆红素含量；
M 为样品称样量。
7.2.2.8 标准规定: 本品按干燥品计算，含胆红素（C 33H 36N 4O 6）不得少于0.63% 。
8 复检规定
若检验结果与标准不符或异常，则上报质检处，按《化验室超标结果与非期望结果处理规程》处理。
9 取样办法
参见《原料取样规程》。
10 检验记录填写
检验要及时填写《人工牛黄检验原始记录》和相关仪器使用记录，并出具检验报告单，详见《检验记录管理规程》。
相关文件和记录
变更/修订记录：
(以下为空白)。
