FLAG tag Peptide_多功能融合标签。_98849-88-8_Apexbio
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pCMV-N-Flag产品编号 产品名称 包装 D2722-1µg pCMV-N-Flag 1µg D2722-100µgpCMV-N-Flag100µg产品简介:pCMV-N-Flag 是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N 端和Flag tag (Flag 标签)融合的目的蛋白的表达质粒。
含有CMV 启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Flag 标签的序列,因此可以表达出含有Flag 标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Flag 的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。
质粒为卡那霉素抗性。
转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-Flag 质粒的主要信息如下:Feature Nucleotide Position CMV promoter 1–602 T3 promoter and T3 primer binding site 620–639 Flag tag 679–702 multiple cloning site 705–778 T7 promoter and T7 primer binding site 821–842 SV40 polyA signal 854–1237 f1 origin of ss-DNA replication 1375–1681 bla promoter 1706–1830 SV40 promoter 1850–2188 neomycin/kanamycin resistance ORF 2223–3014 HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3015–3473 pUC origin 3602–4269 pCMV-N-Flag 质粒的图谱如下:碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线: 400-1683301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询: *****************网址: 碧云天网站 微信公众号pCMV-N-Flag的多克隆位点的详细图谱如下:Flag tag __SacI M D Y K D D D D K651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCCATGGA TTACAAGGAT GACGACGATACTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGGTACCT AATGTTCCTA CTGCTGCTATXmaI PstISmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII701 AGAGCCCGGG CGGATCCAAG CTTCTGCAGG AATTCGATAT CGTCGACAGATCTCGGGCCC GCCTAGGTTC GAAGACGTCC TTAAGCTATA GCAGCTGTCTXhoI XbaI ApaI751 TCTCTCGAGT CTAGAACTAG TGGGCCCGGT ACCTTAATTA ATTAAGGTACAGAGAGCTCA GATCTTGATC ACCCGGGCCA TGGAATTAAT TAATTCCATGpCMV-N-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Flag)包括:Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I BstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca I Spl IpCMV-N-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Flag once)包括:Nde I CA`TA,TG 241 SnaB I TAC|GTA 347 Nhe I G`CTAG,C 598 Sac I G,AGCT`C 656 Sac II CC,GC`GG 663 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664 Not I GC`GGCC,GC 669 PspA I C`CCGG,G 706 Xma I C`CCGG,G 706 Srf I GCCC|GGGC 708 Sma I CCC|GGG 708 BamH I G`GATC,C 713 Hind III A`AGCT,T 719 Pst I C,TGCA`G 729 EcoR I G`AATT,C 731 EcoR V GAT|ATC 739 Sal I G`TCGA,C 743 Acc I GT`MK,AC 744 Bgl II A`GATC,T 749 PaeR7 I C`TCGA,G 755 Xho I C`TCGA,G 755 Xba I T`CTAG,A 761 Spe I A`CTAG,T 767 Bsp120 I G`GGCC,C 773 Apa I G,GGCC`C 777 Pvu I CG,AT`CG 855 Bcl I T`GATC,A 1009 Mun I C`AATT,G 1102 Hpa I GTT|AAC 1115 Mlu I A`CGCG,T 1238 Dra III CAC,NNN`GTG 1468 Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2127 BseR I GAGGAG 16/14 2170 Stu I AGG|CCT 2173 Cla I AT`CG,AT 2192 Kas I G`GCGC,C 2351 Nar I GG`CG,CC 2352 Ehe I GGC|GCC 2353 Bbe I G,GCGC`C 2355 Msc I TGG|CCA 2434 Tth111 I GACN`N,NGTC 2470 BsrD I GCAATG, 8 2585 Bsp1286 I G,DGCH`C 2655 Rsr II CG`GWC,CG 2868 BsiC I TT`CG,AA 3034 BstB I TT`CG,AA 3034 Bsa I GGTCTC 7/11 3341 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3681 ApaL I G`TGCA,C 3956pCMV-N-Flag质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:T3 primer (620–639): 5' AATTAACCCTCACTAAAGGG 3'T7 primer (821-842): 5' GTAATACGACTCACTATAGGGC 3'pCMV-N-Flag的全序列信息请参考碧云天网站上该质粒的信息。
FLAG标签(DYKDDDDK)融合蛋白纯化试剂盒Cat#:KAP0064(本品仅用于科学研究,不可用于诊断及治疗)1.背景信息Flag-Tag(DYKDDDDK),常用于真核蛋白质重组表达标记。
FLAG标签(DYKDDDDK)融合蛋白纯化试剂盒,主要成分是Anti-Flag亲和纯化凝胶(Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel),由高品质的Flag兔多克隆抗体与Sepharose 4B琼脂糖颗粒共价偶联制成,具有高载量(至少为1.2mg protein/ml凝胶),高特异性,性质稳定,可反复使用的特点,可用于Flag 标签融合蛋白的亲和纯化。
2.性能指标应用范围:可用于Met修饰的N端Flag融合蛋白(Met-Flag–Protein),N端Flag融合蛋白(Flag–Protein)和C端Flag融合蛋白(Protein-Flag)的亲和纯化。
载量:1ml Sepharose 4B琼脂糖颗粒,共价偶联800μg Anti-Flag 兔多克隆抗体,可纯化至少1.2mg Flag融合蛋白。
强度:重力柱纯化,可反复使用5次以上。
保存方法:在加入了50%甘油和0.2‰叠氮钠的PBS保存液后,预装纯化柱可于-20℃可保存1年。
3.试剂盒组成50 mM Tris HCl, pH 7.4, 150 mMNaCl, 1 mM EDTA, and 1%Triton X-100(说明见5.3)4.使用方法4.1细胞裂解液制备4.1.1悬浮细胞和半贴壁细胞从细胞培养瓶上吹下来后放入离心管中,1000rpm离心5分钟。
贴壁细胞用细胞刮子轻轻从瓶壁上刮下来,放入离心管中1000rpm离心5分钟。
4.1.2预冷的PBS工作液重悬细胞,1000rpm离心3min,弃上清。
重复一次。
4.1.3根据细胞的量加入相应体积的细胞裂解液,反复吹打后冰上放置10-20min,让细胞充分裂解。
4.1.4用超声破碎仪将细胞裂解液超声,直至细胞裂解液透明,不再粘稠。
flag peptide洗脱原理解析Flag peptide洗脱原理解析引言:Flag peptide洗脱是一种常用的方法,用于从融合蛋白中纯化目标蛋白。
本文将深入探讨Flag peptide洗脱的原理、应用和优缺点,并结合近年来的研究,分享我对这个技术的观点和理解。
第一部分:Flag peptide洗脱的基本原理Flag peptide洗脱是利用Flag序列(DYKDDDDK)作为标签,将其融合到目标蛋白N或C末端的融合蛋白上。
Flag peptide具有高度专一性和亲和力,可以被特定的抗Flag抗体识别和结合。
利用这一特性,可以通过抗Flag抗体或亲和树脂将目标蛋白与融合蛋白分离。
第二部分:Flag peptide洗脱的应用Flag peptide洗脱在生物医学研究中得到了广泛的应用。
首先,它可以用于在大规模蛋白表达与纯化中高效地快速纯化目标蛋白。
其次,Flag peptide标签还可以用于检测和定量目标蛋白的表达水平,并通过抗Flag抗体进行相关的实验研究。
此外,Flag peptide洗脱还可以用于研究蛋白复合物的组装和识别与交互的分子。
第三部分:Flag peptide洗脱的优缺点Flag peptide洗脱作为一种常见的蛋白纯化方法,具有其独特的优缺点。
优点之一是Flag peptide洗脱操作简便,能够在短时间内高效纯化目标蛋白。
其次,Flag peptide洗脱的特异性和亲和力较高,可靠地分离目标蛋白。
然而,Flag peptide洗脱也存在一些缺点。
首先,作为一个被广泛应用的方法,Flag peptide洗脱需要合适的抗Flag抗体或亲和树脂,而这些需要专门定制和购买。
此外,由于Flag序列的大小,融合蛋白的折叠和功能可能受到影响。
总结与回顾:通过对Flag peptide洗脱的探讨,我们可以看到这种蛋白纯化方法的重要性和广泛应用。
Flag peptide洗脱的基本原理是利用Flag标签和抗Flag抗体的特异性结合,实现目标蛋白的纯化。
flag磁珠说明书Anti-Flag磁珠,也称Anti-Flag免疫磁珠或Flag抗体磁珠,是由高品质的Flag 小鼠单克隆抗体与纳米级氨基磁珠共价偶联而成,可特异性地与动植物或微生物裂解液、血清、腹水等中含有Flag标签的蛋白结合,从而用于带有Flag标签的融合蛋白或其蛋白复合物的免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、免疫共沉淀(Co-IP)或纯化。
Flag标签(Flag-tag)、Myc标签(Myc-tag)、HA标签(HA-tag)、His标签(His-tag)和GST标签(GST-tag)等是表达载体上最常见的一些标签,通过与这些标签的融合表达可以非常方便地检测目的蛋白及与目的蛋白相互结合的蛋白,也可以非常方便地用于目的蛋白的纯化。
Flag-tag是8个氨基酸残基(DYKDDDDK)组成的多肽,常用的形式有Flag和3X Flag,通过基因重组技术把Flag-tag的核酸序列与目的基因的5’端或3’端连接,就可以最终表达形成Flag-tag的目的蛋白。
Flag-tag具有以下优点:Flag-tag通常不会与目的蛋白相互作用,并且大多数情况下不会影响目的蛋白的功能;Flag-tag作为标签蛋白,后续通过Flag抗体(AF519)、Anti-Flag磁珠或Anti-Flag亲和凝胶(P2271)即可对目的基因的表达、定位及功能进行检测或对目的蛋白进行纯化、免疫沉淀或免疫共沉淀等;融合在N端的Flag标签,可被肠激酶(Enterokinase, EK)切除(DDDK),从而得到完美的没有标签的目的蛋白。
基于以上优点,Flag标签已被广泛应用于蛋白表达、纯化、鉴定、相互作用和功能等多方面的研究。
Anti-Flag Magnetic Beads (Anti-Flag磁珠),也被称为Anti-DYKDDDDK Magnetic Beads,可以特异性地结合Flag标签融合蛋白,并可以借助磁力架等磁分离设备非常便捷地应用于带有Flag标签的融合蛋白或其蛋白复合物的免疫沉淀或纯化等实验。
蛋白标签蛋白标签(proteintag)是指利用DNA体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展,研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前,这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
美国GeneCopoeia(复能基因)为客户提供50多种蛋白标签,可以满足客户的不同需求,包括各种最新型的标签,如:SNAP-Tag™、Halo Tag™、AviTag™、Sumo等;也提供齐全的各种常用标签,如eGFP、His、Flag等等标签。
TrxHISHis6是指六个组氨酸残基组成的融合标签,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点:•标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;•His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白的干扰,或进行金属螯和亲和层析复性;•His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究;•His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
•可应用于多种表达系统,纯化的条件温和;•可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK),同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点:•FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
标签抗体标签抗体(Tag Antibody)可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列,籍以分析检目的蛋白的表达含量及其功能。
其原理是抗原—抗体反应,这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。
亲和性标签亲和标签大都有特异性的配基,利用这些配基可以方便的用亲和层析的方法对融合蛋白进行分离和纯化。
共同特点:●纯化方便,一般通过一步纯化就可以获得纯度和质量比较好的融合蛋白;●标签对目的蛋白的三维结构或是生物学活性影响很小;●标签易于切除;●纯化过程中可以对目的蛋白进行简单而精确的测量;●适用于大量不同蛋白质的表达。
Flag标签Flag标签是由八个亲水氨基酸构成的一段寡肽,序列为Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可用于蛋白纯化及检测。
★推荐南京铭研生物Flag标签抗体(MY1906),可申领免费试用免疫宿主:小鼠应用范围:WB,IP应用说明:WB: 1:500 ~ 1:10000, IP: 1:200 ~ 1:2000Lane 1: Flag Tagged Protein (0.80 μg)Lane 2: Flag Tagged Protein (0.50 μg)Lane 3: Flag Tagged Protein (0.10 μg)M: Western Blot MarkerUsing Anti- Flag antibodyHis标签His-tag由人工合成的组氨酸首尾相连构成,通常由6个氨基酸(HHHHHH)组成,也有3个和8个的情况。
另外,也存在一种由19个组氨酸构成的天然多聚组氨酸标签(HAT-tag)。
★可推荐南京铭研生物的his抗体(MY1901),可申领免费试用,试用反馈后下单立减50!Lane 1: C-His融合蛋白Lane 2:N-His融合蛋白Lane 3:Internal-His融合蛋白稀释比例:1:3000HA标签HA融合蛋白也是一种小肽,由9个氨基酸组成( YPYDVPDYA),其来源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇。
常用的标签抗体丨myc、HA、Flag、His、GST等三大内参:beta Actin,肌动蛋白,细胞骨架蛋白。
它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。
beta Actin 作为内参是得到公认的,针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞质内,表达量非常丰富。
但是在一些少量特殊的情况下比如脂肪组织和细胞内,beta Actin 的表达量就很少。
GAPDH,甘油醛-3-磷酸脱氢酶,该酶是糖酵解反应中的一个酶,几乎在所有组织细胞中都高水平表达,在同种细胞或组织中的表达量一般是恒定的,且很少受外部诱导物的影响。
但比如缺氧和糖尿病等疾病存在下,会增加 GAPDH 在特定细胞和组织中的表达。
beta Tubulin,微管蛋白,细胞骨架蛋白。
β-Tubulin小鼠单克隆抗体(3G6) 作为内参抗体,beta Tubulin 表达通常不会发生改变,因此被广泛用于 Western Blot 内参,也常被用于免疫染色观察细胞的微管结构。
标签抗体:Flag抗体-抗Flag标签抗体融合标签,如Flag、GST等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。
常用的标签包括myc、HA、Flag、His、GST等。
其中Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白。
His抗体-抗His标签抗体融合标签根据其相对分子质量大小可以分为两大类:大的蛋白质分子和小的多肽片段。
融合标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。
GST抗体-抗GST标签抗体随着越来越多的新基因的发现,基因融合蛋白表达体系以其在新发现蛋白研究中的显著优势已得到广泛应用。
其中GST标签体系具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点。
蛋白标签蛋白标签(protei ntag)是指利用DN A体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展,研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前,这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
美国Gene Copoe ia(复能基因)为客户提供50多种蛋白标签,可以满足客户的不同需求,包括各种最新型的标签,如:SNAP-Tag™、HaloTag™、AviTag™、Sumo等;也提供齐全的各种常用标签,如eGFP、His、Flag等等标签。
∙标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;∙His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白的干扰,或进行金属螯和亲和层析复性;∙His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究;∙His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
∙可应用于多种表达系统,纯化的条件温和;∙可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDD DK),同时载体中构建的Koz ak序列使得带有FL AG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点:∙FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
3X FLAG Peptidesales@引用文章1.Carpenter, Brandon S., et al. "The heterotrimeric kinesin-2 complex interacts with and regulates GLI protein function." Journal of cell science 128.5 (2015): 1034-1050.PMID:25588831质量控制质量控制和MSDSView current batch:2Purity = 98.77%COA (Certificate Of Analysis)HPLCMS (Mass Spectrometry)MSDS (Material Safety Data Sheet)0.25mg/ml 3*flag peptide was used to elute flag-resin immunoprecipitated proteins expressed by 293T cells. Purified protein band was indicated by arrow.150ug/ml 3XFLAG peptide was used to elute FLAG tagged HSP90 protein. Elution was performed at 4 degrees and2化学性质CAS号SDF Download SDF别名H-Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-OH 化学名3X FLAG PeptideSMILES CCC(C)C(C(=O)NC(CC(=O)O)C(=O)NC(CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(CC(=O)O)C(=O)NC(CC(=O)O)C(=O)NC(CC(=O)O)C(=O )NC(CC(=O)O)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)O)NC(=O)C(CC(=O)O)NC(=O)C(CC2=CNC=N2)NC(=O)C(CC(=O)O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC3=CC =C(C=C3)O)NC(=O)C(CC(=O)O)NC(分子式C120H169N31O49S分子量2861.87溶解性Soluble in water or 1% acetic acid储存条件Desiccate at -20°C 一般建议为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。
蛋白标签蛋白标签(proteintag)是指利用DNA体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
随着技术的不断发展,研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。
目前,这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。
美国GeneCopoeia(复能基因)为客户提供50多种蛋白标签,可以满足客户的不同需求,包括各种最新型的标签,如:SNAP-Tag™、Halo Tag™、AviTag™、Sumo等;也提供齐全的各种常用标签,如eGFP、His、Flag等等标签。
•标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;•His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白的干扰,或进行金属螯和亲和层析复性;•His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究;•His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体。
•可应用于多种表达系统,纯化的条件温和;•可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag标签蛋白Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK),同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点:•FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
•融合FLAG的目的蛋白,可以直接通过FLAG进行亲和层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性的融合蛋白,并且纯化效率高。
•FLAG作为标签蛋白,其可以被抗FLAG的抗体识别,这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。
产品名: FLAG tag Peptide 修订日期: 6/30/2016产品说明书
化学性质
产品名:
FLAG tag Peptide Cas No.:
98849-88-8 分子量:
1012.97 分子式:
C41H60N10O20 别名:
H-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-As p-Lys-OH 化学名:
FLAG Peptide SMILES: C1=CC(=CC=C1CC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(CC(=O)O)C(=O)NC(CC(=
O)O)C(=O)NC(CC(=O)O)C(=O)NC(CC(=O)O)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)O)
NC(=O)C(CC(=O)O)N)O
溶解性: >50.6mg/mL in DMSO
储存条件: Desiccate at -20°C
一般建议: For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37°C
and shake it in the ultrasonic bath for a while.Stock solution can be
stored below -20°C for several months.
运输条件:
Evaluation sample solution : ship with blue ice
All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
生物活性
靶点 :
Tag Peptides 信号通路:
产品描述:
FLAG 标签肽(FLAG tag Peptide )是一个含有肠激酶酶切位点的8肽
(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys ),专门用于免疫亲和层析。
FLAG 标签肽融合系统主要用于蛋白鉴定与纯化。
融合蛋白的洗脱主要通过两种方式:以钙离子依赖的方式,
通过抗体介
导的亲和层析(降低pH);用合成的多肽进行竞争性洗脱。
FLAG标签肽允许在非变性的条件下进行洗脱。
标签肽必须有以下特点:第一,标签部分不应该干扰与其连接的蛋白质的天然折叠构象。
第二,标签肽序列应该是水溶性的,应该最大程度的暴露于蛋白表面,以便其容易与配体相互作用。
它应该适于温和且便宜的亲和纯化过程。
最后,标签肽必须容易去除,从而获得天然产物。
由于标签肽的小尺寸,可以由单个合成的寡核苷酸进行编码。
在抗原抗体相互作用中,芳香族氨基酸起到重要的作用。
标签肽序列中第三位置的赖氨酸引导一个六肽序列,它确保该标签序列的最大亲水性。
该亲水序列显示了强抗原性,也采用了高暴露的蛋白三维构象。
FLAG的另一个优点是可以用肠激酶处理去除这个标签,得到含有真正N末端的融合蛋白。
FLAG标签可以与融合蛋白的N 端或C端进行融合。
然而,N端融合有几个优点。
抑制ELISA实验表明,当第一个氨基酸的α-氨基游离时,抗-Flag抗体M1可以结合3-4个Flag。
参考文献:
1. A. Einhauer, A. Jungbauer. The FLAG peptide, a versatile fusion tag for the purification of recombinant proteins. J. Biochem. Biophys. Methods 49 2001 455–465.
2. Hopp TP, Woods KR. Prediction of protein antigenic determinants from amino acid sequences. Proc Natl Acad Sci U S A 1981;78:3824–8.
3. Hopp TP. Protein surface analysis: methods for identifying antigenic determinants and other interaction sites. J Immunol Methods 1986;88:1–18.
4. Power BE, Ivancic N, Harley VR, Webster RG, Kortt AA, Irving RA, et al. High-level temperature-induced synthesis of an a
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不针对患者销售,望谅解。
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