下载文档原格式
临床医学检验：MHC与HLA检测及应用题库考点五1、判断题血清学分型法是最简单、最快速检测组织相容性的方法之一。
() 正确答案：对2、单选HLA基因复合体位于()A．第6对染色体的短短臂B．第15号染色体（江南博哥）C．第14号染色体D．第9号染色体E．第7号染色体正确答案：A3、单选细胞间相互作用受MHCI类分子限制的是()A．TcB．ThC．TsD．B细胞E．以上均不对正确答案：A4、填空题CDC试验的关键在于获得各种HLA的______________。
正确答案：标准抗血清5、单选HLA细胞学分型法用于检测()A．HLA-A、BB．HLA-DR、DQC．HLA-A、DPD．HLA-D、DPE．HLA-C、D正确答案：D6、填空题PCR-SSO分型法中标记的寡核苷酸称为______________。
正确答案：探针7、单选作HLA-Ⅱ类分子分型时，下列哪种方法是应用最广泛且最简便、快捷和精确的方法()A．SBTB．PCR-SSOC．PCR-SSPD．RFLPE．PCR-SSCP正确答案：B8、单选下列关于单向MLC的描述，错误的是()A．单向MLC以刺激指数作为判断淋巴细胞反应强度的指标B．阴性分型法的SI=标准分型细胞对待测细胞刺激的cpm/待测细胞自身刺激的cpmC．阳性分型法的SI=待测细胞对预致敏淋巴细胞刺激的cpm/预致敏淋巴细胞自身刺激的cpmD．HLA-D抗原可用阴性和阳性分型法检测E．HLA-DP抗原可用阴性和阳性分型法检测正确答案：E9、名词解释纯合子分型细胞(homozygous typing cell)正确答案：是指表面只有一种LD抗原的细胞，以此作为刺激细胞与待分型细胞进行单向MLC，以作HLA分型。
10、单选主要组织相容性复合体是()A．MHCB．MHAC．HLAD．H-2E．RLA正确答案：A11、单选HLA-A*03011写法中“03”代表()A．基因座次B．等位基因数C．等位基因组D．等位基因号E．以上均不对正确答案：C12、多选CDC试验作HLA血清学分型的方法学评价，下列说法正确的是() A．操作简便易行B．结果可靠，重复性好C．需花大量时间去筛选抗血清D．HLA-DQ、-DR抗原分型所用的抗血清须经血小板吸收以除去针对I类抗原的抗体E．待检细胞应为纯化的B细胞正确答案：A, B, C, D, E13、单选对人类来说，HLA抗原属于()A．异种抗原B．同种异体抗原C．独特型抗原D．肿瘤特异性抗原E．改变的自身抗原14、问答题简述HLA的生物学功能及其与临床的关系。
公卫执业医师考试辅导：HLA分型技术HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标，免疫遗传学研究的发展，很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。
60年代建立的并不断完善的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性；80年代起建立的DNA分型方法则侧重于基因的分型。
一、血清学分型技术（一)HLA-Ⅰ类抗原的检测HLA-A、B、C抗原型别鉴定均借助微量淋巴细胞毒试验（microlymphocytotoxicitytest)或称补体依赖的细胞毒试验（complement dependent cytotoxicitytest)。
原理为取已知HLA抗血清加入待测外周血淋巴细胞，作用后加入免补体，充分作用后加入染料，在倒置显微镜下判断结果，着染的细胞为死亡细胞，表示待检淋巴细胞表面具有已知抗血清所针对的抗原。
标准抗原清取自多次经产妇或计划免疫志愿者。
（二)HLA-DR、DQ抗原检测该二抗原分型方法同HLA-Ⅰ类抗原，但所用抗血清须经过血小板吸收以去除针对Ⅰ类抗原的抗体。
另外，待测细胞须是经纯化的B 细胞。
血清学分型是一项古老的技术，虽然近年来已建立许多新的分型技术，但血清学方法目前仍是HLA分型的基础。
公卫执业医师考试频道为大家推出【年公卫执业医师考试课程！】考生可点击以下入口进入免费试听页面！足不出户就可以边听课边学习，为大家的取证梦想助力!【电脑用户】→点击进入免费试听>>二、细胞学分型技术HLA-Dw特异性与HLA-DP特异性可分别通过纯合分型细胞（homozygote typing cell,HTC)及预致敏淋巴细胞试验（primed lymphocyte test,PLT)检测。
二种方法的基本原理均是判断淋巴细胞在识别非已HLA抗原决定簇后发生的增殖反应。
由于分型细胞来源困难以及操作手续繁琐，细胞学分型技术下正逐渐淘汰。
三、HLA的DNA分型技术上述传统的HLA分型方法有许多不足之处，近年来国内外已将HLA分型技术由抗原水平发展到基因水平。
中国常见及确认的HLA等位基因表(CWD)2.2版本中华骨髓库CWD表编撰组2016-02-15前言自1958年发现第一个人类白细胞抗原(HLA)A2抗原以来，各国科学家多年来通过协作和技术创新，极大推动了HLA领域的发展和应用，在HLA结构、功能、多态性、组织器官移植应用、人类群体遗传和进化分析等方面取得了重大成就。
目前HLA分型技术已广泛应用于多个领域，如造血干细胞捐献者建库、HLA群体遗传多态性、HLA生物学功能、实体器官和造血干细胞移植供受者组织相容性配型、与某些疾病的关联、人类遗传进化、药物个性化选择等方面。
HLA系统具有高度遗传多态性，现发现的HLA抗原共有165个，其中HLA-A位点有28个、HLA-B位点有62个、HLA-C位点有10个、HLA-DR位点有24个、HLA-DQ位点有9个、HLA-Dw位点有26个、HLA-DP位点有6个。
根据IMGT/HLA数据库 3.23版本（2016年1月19日发布），总共发现14232个HLA等位基因，其中HLA-A位点为3356个、HLA-B位点为4179个、HLA-C位点为2902个、HLA-DRB1位点为1860个、HLA-DQB1位点为900个。
一、HLA常见及确认等位基因表的提出HLA基因分型技术已得到广泛的应用，主要方法有PCR-SSP、PCR-SSO、Luminex技术、PCR-SBT等。
由于HLA基因高度多态性和检测技术的限制，在检测特定座位的分型中存在模棱两可的等位基因分型结果。
模棱两可的基因型结果是指在HLA基因分型过程中，标本指定结果中存在一种以上的HLA等位基因组合方式。
1、HLA分型检测存在模棱两可的等位基因分型结果随着HLA等位基因数量的增加，等位基因间碱基序列高度同源性也越来越高，同一位点不同等位基因之间碱基差异序列越来越少，造成检测区分难度相对增加；此外在测序过程中存在多种等位基因组合在测序区域内具有相同的杂合序列，可导致HLA基因分型时出现模棱两可的基因型结果。
排斥反应本质上是一种免疫反应，它是由组织表面的同种异型抗原诱导的。
这种代表个体特异性的同种抗原称为组织兼容性抗原（histocompatibility antigen）或移植抗原（transplantation antigen）。
机体内与排斥反应有关的抗原系统多达20种以上，其中能引起强而迅速排斥反应者称为主要组织兼容性抗原，其编码基因是一组紧密连锁的基因群，称为主要组织兼容性复合体（major histocompatibilitycomplex,MHC）。
控制机体免疫应答能力与调节功能的基因（immune uesponse gene,Ir gene ）也存在于MHC内。
因此，MHC不仅与移植排斥反应有关，也广泛参与免疫应答的诱导与调节。
人类的MH C称为人白细胞抗原系统（human leucocyte antigen,HLA）。
[返回]人类HLA基因复合体对人主要组织兼容性抗原系统及其基因复合体的认识比小鼠约晚10年，法国学者D ausset在1958年首先发现，肾移植后出现排斥反应的患者以及多次输血的患者血清中含有能与供者白细胞发生反应的抗体。
后者所针对的抗原即人类主要组织相溶性抗原。
由于该抗原首先在白细胞表面被发现且含量最高，而且白细胞抗原(human leucocyte anti gen,HAL)；人类MHC，即编码HLA的基因群自然数为HAL复合体。
HLA复合体定位及结构HLA复合体位于人第6号染色体的短臂上。
该区DNA片段长度约3.5～4.0×千个碱基对，占人体整个基因组的1/3000。
图5-2显示HLA复合体结构。
HLA复合体共有数十个座，传统上按其产物的结构、表达方式、组织分布与功能可将这些基因座分为三类。
图5-2 人类HLA复合体结构示意图1．HLA-Ⅰ类基因在Ⅰ基因区内存在多达31个有关的Ⅰ类基因座,其中HLA-A、HLA -B和HLA-C为经典的HLA-Ⅰ类基因,其它基因的产物分布有限,且其功能不明,另外还有许多伪基因.2.HLA-Ⅱ类基因HLA-Ⅱ类基因区包括近30个基因座,其中经典的Ⅱ类基因一般指DR、DP和DQ，它们编码的产物均为双肽链（α、β）分子。
1.免疫防御功能异常可导致（感染、免疫缺陷）疾病。
2.抗原抗体反应的特点有（特异性、比例性、可逆性、阶段性）3•抗原抗体反应的温度一般以（15〜40 C）为宜，最适温度为（37 C）4•影响抗原抗体反应的环境因素主要有（电解质、pH、温度）5•某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求，如冷凝集素在（4C）左右与红细胞结合最好，（20 C）以上反而解离。
6•抗原抗体的结合分子间的引力包括（静电引力、范德华引力、氢键引力和疏水作用力），其中作用最强的是（疏水作用力）1•间接凝集反应的类型包括（正向间接凝集、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应）四种类型。
2•参与凝集反应中的抗原称为（凝集原），抗体称为（凝集素），常用的直接凝集试验有（玻片法、试管法、玻片法）3•在间接凝集反应中正向凝集反应是用（抗原）致敏载体以检测标本中相应的（抗体），而反向间接凝集反应是用（抗体）致敏载体以检测标本中相应（抗原）4•间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的（不完全抗体）,可用于输血前的（交叉配血）试验。
1．免疫沉淀反应是（可溶性抗原）与（相应抗体）的特异性结合 2．棋盘格法（抗原）和（抗体）同时稀释，可一次完成（抗原）和（抗体）的滴定 3．单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量（抗体）的（凝胶）内自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成（沉淀环）。
4．Maneini 曲线适用于（大分子抗原）的测定，在一定范围内，沉淀环随时间延长而扩大，抗原浓度与（扩散环直径的平方）呈线性关系，常用（普通）坐标纸作图。
5．Fahey 曲线适用于（小分子抗原）的测定，在一定范围内，沉淀环随时间延长而扩大，沉淀环直径与（抗原浓度的对数）呈线性关系，常用（半对数）坐标纸作图。
6．双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析，沉淀线靠近抗原孔指示（抗体含量较高）；靠近抗体孔则指示（抗原含量较高）；不出现沉淀线则表明（无对应的抗原和抗体）。
